一种氟喹诺酮类抗生素的检测方法及检测试剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种氟喹诺酮类抗生素的检测方法及检测试剂。该方法包括以下步骤：(1)向待测样品中加入二价重金属离子溶液，反应获得抗生素-重金属配合物溶液；(2)选择玻碳基体电极作为工作电极，采用伏安法在-0.9V～0.6V电位范围对其进行测试，获得电流响应曲线，确定氧化峰响应值或还原峰响应值；(3)根据步骤(2)中获得的氧化峰响应值或还原峰响应值以及测定的标准曲线，标定待测样品中氟喹诺酮类抗生素的浓度。所述检测试剂为含二价重金属离子的缓冲溶液，其pH值在3.6至5.6之间。本发明提供的方法可用于样品中微量氟喹诺酮类抗生素药物的检测，检测准确，速度快，灵敏度高。
【专利说明】一种氟喹诺酮类抗生素的检测方法及检测试剂
【技术领域】
[0001] 本发明属于抗生素分析检测领域，更具体地，涉及一种氟喹诺酮类抗生素的检测 方法。
【背景技术】
[0002] 近年来，抗生素残留已经成为公众关注的环境问题。仅以氟喹诺酮类抗生素为例， 由于机体的不完全吸收，以原位或代谢形式排放到水体和土壤介质中的药物含量约占总 使用量的80%。这些未分解的抗生素通过废水或畜禽粪便进入环境，会造成水源和土壤的 污染，最终都会对人体造成伤害。
[0003] 抗生素，尤其是广谱氟喹诺酮类抗生素如氧氟沙星和环丙沙星，杀菌效果好，因此 在畜牧业中得到了广泛应用，而其在畜牧业产品中的残留及生态环境问题，备受关注。目前 检测抗生素残留的方法有高效液相色谱-质谱联用、高效液相色谱-紫外检测方法、高效液 相色谱-荧光检测方法和电化学分析方法。其中电化学检测方法具有操作简便，测定时间 短、检测成本低等优势，也被广泛用于包括环氧氟沙星和环丙沙星在内的各种抗生素的检 测研究。
[0004] 但目前抗生素的电化学检测方法，都是基于抗生素分子基团在电极上的氧化还原 反应，但抗生素在传统的电极上的氧化还原电化学响应较弱、检测灵敏度较低，近年来通过 对电极进行各种修饰来提高检测灵敏度；尽管许多方法在电极修饰材料方面制备复杂，仍 存在检测灵敏度不高的局限，难以用于动物制品残留及环境中微量抗生素的检测。因此开 发一种电极材料制备工艺简单、操作简便、灵敏度高的抗生素电化学检测方法具有十分重 要的经济和社会价值。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种氟喹诺酮类抗生素的检 测方法及检测试剂，其目的在于通过电化学方法，对溶液中低浓度氟喹诺酮类药物进行简 单快速的检测，由此解决现有检测方法中耗时、电极制备过程复杂或灵敏度低等技术问题。
[0006] 为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种氟喹诺酮类抗生素的检测 方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0007] (1)向待测样品中加入二价重金属离子溶液，均匀混合，反应3至10分钟，调节 pH值在3. 6至5. 6之间，获得抗生素-重金属配合物溶液，其中二价重金属离子的浓度在 5 X 10 5mol/L 至 1 X 10 3mol/L 之间；
[0008] (2)选择玻碳基体电极作为工作电极，采用伏安法在-0. 9V?0. 6V电位范围对步 骤（1)中获得的抗生素-重金属配合物溶液进行测试，获得电流响应曲线，确定氧化峰响应 值或还原峰响应值；
[0009] (3)根据步骤（2)中获得的氧化峰响应值或还原峰响应值以及测定的标准曲线， 标定待测样品中氟喹诺酮类抗生素的浓度。
[0010] 优选地，所述氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其二价重金属离子为铜离子或镉离 子。
[0011] 优选地，所述氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其所述二价重金属离子溶液为二价 重金属离子醋酸缓冲液溶液。
[0012] 优选地，所述氟喹诺酮类抗生素的检测方法，所述抗生素-重金属配合物溶液，其 二价重金属离子浓度为l(T 4mol/L。
[0013] 优选地，所述氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其所述抗生素-重金属配合物溶液 pH值为3. 6。
[0014] 优选地，所述氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其所述玻碳基体电极为玻碳电极或 纳米材料修饰的玻碳电极。
[0015] 按照本发明的另一方面，提供了一种用于所述检测方法的检测试剂，所述试剂为 含二价重金属离子的缓冲溶液，其pH值在3. 6至5. 6之间。
[0016] 优选地，所述检测试剂，其二价重金属离子为铜离子或镉离子。
[0017] 优选地，所述检测试剂，其缓冲溶液为醋酸缓冲溶液。
[0018] 优选地，所述检测试剂，其pH值为3. 6。
[0019] 优选地，所述检测试剂，其二价重金属离子浓度在5X l(T3mol/L至IX K^mol/L之 间。
[0020] 总体而言，通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比，具有工作电极准 备过程简单，仅需打磨或简单修饰、测试方法简便快捷，可快速检测出水溶液中氧氟沙星和 环丙沙星药物的含量、便于操作、灵敏度高等特点，能够取得对低浓度氟喹诺酮类药物进行 快速有效检测的有益效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0021] 图1(A)是实施例1中不同氧氟沙星与铜离子反应后微分脉冲伏安响应曲线，其中 1到8对应的氧氟沙星的浓度分别为1 X 1(Γ4、5Χ 10'3Χ 1(Γ5、1 X 10'5Χ 10'1 X l(T6mol/ L、1 X 10_7m〇l/L、0m〇l/L ;图1 (B)为实施例1中氧氟沙星浓度和还原峰响应值线性拟合得到 的标准曲线；
[0022] 图2(A)是实施例2中不同浓度环丙沙星与镉离子反应后线性扫描伏安响应曲 线，其中1到8对应的环丙沙星的浓度分别为lXKT 5mol/L、7Xl(T6mol/L、4Xl(r6mol/L、 2X10_ 6mol/L、lX10_6mol/L、5X10_7mol/L、lX10_ 7mol/L、0mol/L 环丙沙星；图 2(B)为实施 例2中环丙沙星浓度和氧化峰响应值线性拟合得到的标准曲线；
[0023] 图3(A)是实施例3中不同浓度环丙沙星与镉离子反应后线性扫描伏安响应曲 线，其中1到5对应的环丙沙星的浓度分别为5XKT 5mol/L、lXl(T5mol/L、5Xl(r6mol/L、 1 X l(T6mol/L、0mol/L环丙沙星；图2 (B)为实施例3中环丙沙星浓度和氧化峰响应值线性 拟合得到的标准曲线；
[0024] 图4(A)是实施例4中不同氧氟沙星与铜离子反应后微分脉冲伏安响应曲线， 其中1到5对应的氧氟沙星的浓度分别为lXKT 3mol/L、5Xl(T4mol/L、lXl(r4mol/L、 1 X l(T5mol/L、0mol/L ;图4⑶为实施例4中氧氟沙星浓度和还原峰响应值线性拟合得到的 标准曲线；
[0025] 图5(A)为实施例5中不同pH条件下氧氟沙星和铜离子反应前后得到响应曲线， 其中a为反应前铜离子响应曲线，b为反应后铜离子响应曲线；图5(B)为实施例5不同pH 条件对R%值的影响；
[0026] 图6(A)为实施例6中不同pH值对环丙沙星和镉离子反应前后得到的响应曲线， 其中a为反应前镉离子响应曲线，b为反应后镉离子响应曲线；图6(B)为实施例6不同pH 条件对R%值的影响。
【具体实施方式】
[0027] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对 本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并 不用于限定本发明。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要 彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
[0028] 本发明提供的氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0029] (1)向待测样品中加入二价重金属离子溶液，均匀混合，反应3至10分钟，调节pH 值在3. 6至5. 6之间，优选pH值为3. 6,获得抗生素-重金属配合物溶液，其中二价重金属 离子的浓度在5Xl(T5mol/L至lXl(T 3mol/L之间，优选l(T4mol/L ;所述二价重金属离子优 选为铜离子或镉离子，所述二价重金属离子溶液为二价重金属离子醋酸缓冲液溶液，浓度 为 0· lmol/L。
[0030] (2)选择玻碳基体电极作为工作电极，采用伏安法在-0. 9V?0. 6V电位范围对步 骤（1)中获得的抗生素-重金属配合物溶液进行测试，获得电流响应曲线，确定氧化峰响应 值或者还原峰响应值；所述玻碳基体电极为玻碳电极或纳米材料修饰的玻碳电极，如原位 剥离石墨烯修饰的玻碳电极。当采用的金属离子为铜离子时，采用还原峰响应值；采用镉离 子时，采用氧化峰
[0031] (3)根据步骤⑵中获得的电流响应峰值以及测定的标准曲线，按照电流响应峰 值越小，氟喹诺酮类抗生素浓度越高的原则，标定待测样品中氟喹诺酮类抗生素的浓度。
[0032] 所述标准曲线的制作方法如下：
[0033] A、配制不同浓度的抗生素样品η种，浓度范围在ΚΓ4至KTmol/L之间，η在4至 10之间；
[0034] Β、按照与待测样品完全相同的操作步骤，测定电流响应峰值；
[0035] C、以抗生素浓度为横坐标，以电流相应峰值为纵坐标，进行直线拟合即得到所述 标准曲线。
[0036] 本发明提供的氟喹诺酮类抗生素检测试剂，为含二价重金属离子在5Xl(T3m 〇l/L 至1 X KTmol/L之间的缓冲溶液，优选为醋酸缓冲溶液；其pH值为3. 6至5. 6之间，优选为 3. 6 ;所述二价重金属离子为铜离子或镉离子。
[0037] 以下为具体实施例：
[0038] 实施例1
[0039] -种氟喹诺酮类抗生素检测试剂，为含二价重金属离子l(T2m〇l/L的醋酸缓冲溶 液；其pH值为3. 6 ;所述二价重金属离子为铜离子。
[0040] 用所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，检测氧氟沙星，步骤如下：
[0041] (1)向待测样品中加入所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，均匀混合，反应10分 钟，调节pH值为3. 6,获得抗生素-重金属配合物溶液，其中二价重金属离子的浓度为 l(T4m〇l/L。待测样品为加标回收法得到的鸡饲料样品，其中加入氧氟沙星标准品的浓度为 5 X10 6mol/L。
[0042] (2)选择玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极作为辅助电极， 采用电化学工作站控制微分脉冲伏安法在〇. 6V?-0. 4V电位范围对步骤（1)中获得的抗 生素-重金属配合物溶液进行测试，获得电流响应曲线，确定还原峰响应值；
[0043] (3)根据步骤⑵中获得的电流响应峰值以及测定的标准曲线，如图1所示，按照 电流响应峰值越�。低嗫股嘏ǘ仍礁叩脑颍甓ù庋分蟹低嗫股� 素的浓度。
[0044] 所述标准曲线的制作方法如下：
[0045] A、配制不同浓度的抗生素样品7种，浓度范围分别为1Χ1(Γ4、5Χ1(Γ5、3Χ1(Γ 5、 lXKT5、5Xl(T6、lXl(r6mol/I^PlXl(r 7mol/L;
[0046] B、按照与待测样品完全相同的操作步骤，测定电流响应峰值；
[0047] C、以抗生素浓度为横坐标，以电流相应峰值为纵坐标，进行直线拟合即得到所述 标准曲线。
[0048] 测得加标鸡饲料样品中氧氟沙星浓度为4. 85X l(T6mol/L，回收率为97%，说明所 述检测方法对于实际样品中微量氧氟沙星的测定具有很高的可靠性与准确度。
[0049] 实施例2
[0050] -种氟喹诺酮类抗生素检测试剂，为含二价重金属离子l(T2m〇l/L的醋酸缓冲溶 液；其pH值为3. 6 ;所述二价重金属离子为镉离子。
[0051] 用所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，检测环丙沙星，步骤如下：
[0052] (1)向待测样品中加入所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，均匀混合，反应3分钟， 调节pH值为3. 6,获得抗生素-重金属配合物溶液，其中二价重金属离子的浓度为ΙΟΛιοΙ/ L。待测样品为盐酸环丙沙星片，规格为250mg/片。
[0053] (2)选择纳米材料修饰的玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极 作为辅助电极，采用线性扫描伏安法在-0.9V?-0.4V电位范围对步骤（1)中获得的抗生 素-重金属配合物溶液进行测试，获得电流响应曲线，确定氧化峰响应值；
[0054] 所述纳米材料修饰的玻碳电极，为原位剥离石墨烯修饰的玻碳电极。其制备方法 如下：将直径为3mm的棒状玻碳电极在麂皮上加氧化铝粉末对电极表面进行打磨，之后先 用无水乙醇清洗5?lOmin,再用二次水超声清洗5?lOmin,然后用二次水淋洗一遍，用氮 气吹干后备用。取6 μ 原位剥离石墨烯分散液滴涂在处理洁净的玻碳电极表面，置于 红外灯下烘干后待用。
[0055] (3)根据步骤⑵中获得的电流响应峰值以及测定的标准曲线，如图2所示，按照 电流响应峰值越小，氟喹诺酮类抗生素浓度越高的原则，标定待测样品中氟喹诺酮类抗生 素的浓度。
[0056] 所述标准曲线的制作方法如下：
[0057] A、配制不同浓度的抗生素样品7种，浓度范围分别为1Χ1(Γ5、7Χ1(Γ6、4Χ1(Γ 6、 2XKT6、lXl(T6、5Xl(r7mol/L 和 lXl(T7mol/L ;
[0058] B、按照与待测样品完全相同的操作步骤，测定电流响应峰值；
[0059] C、以抗生素浓度为横坐标，以电流相应峰值为纵坐标，进行直线拟合即得到所述 标准曲线。
[0060] 测得对应的药物浓度，并换算成所取药片中环丙沙星的总量，为252. 6mg，与药片 规格及高效液相色谱所得数据做比较，结果表明两种方法测定结果的基本一致，相对偏差 仅为1. 044%，说明本检测方法能够作为一种有效的测定手段实现药物分子环丙沙星的高 灵敏检测。
[0061] 实施例3
[0062] 一种氟喹诺酮类抗生素检测试剂，为含二价重金属离子5 X l(T3m〇l/L的醋酸缓冲 溶液；其pH值为5. 6 ;所述二价重金属离子为镉离子。
[0063] 用所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，检测环丙沙星，步骤如下：
[0064] (1)向待测样品中加入所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，均匀混合，反应5分 钟，调节pH值为5. 6,获得抗生素-重金属配合物溶液，其中二价重金属离子的浓度为 5X10_5mol/L。待测样品为盐酸环丙沙星片，规格为250mg/片。
[0065] (2)选择玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极作为辅助电极， 采用线性扫描伏安法在-〇. 9V?-0. 4V电位范围对步骤（1)中获得的抗生素-重金属配合 物溶液进行测试，获得电流响应曲线，确定氧化峰响应值；
[0066] (3)根据步骤⑵中获得的电流响应峰值以及测定的标准曲线，如图3所示，按照 电流响应峰值越�。低嗫股嘏ǘ仍礁叩脑颍甓ù庋分蟹低嗫股� 素的浓度。
[0067] 所述标准曲线的制作方法如下：
[0068] A、配制不同浓度的抗生素样品4种，浓度范围分别为5Χ1(Γ5、1Χ1(Γ5、5Χ1(Γ 6、 1X10 6mol/L ；
[0069] B、按照与待测样品完全相同的操作步骤，测定电流响应峰值；
[0070] C、以抗生素浓度为横坐标，以电流相应峰值为纵坐标，进行直线拟合即得到所述 标准曲线。
[0071] 测得对应的药物浓度，并换算成所取药片中环丙沙星的总量，为254. 45mg，与药片 规格及高效液相色谱所得数据做比较，结果表明两种方法测定结果的基本一致，相对偏差 仅为1. 78%，说明本检测方法能够作为一种有效的测定手段实现药物分子环丙沙星的高灵 敏检测。
[0072] 实施例4
[0073] -种氟喹诺酮类抗生素检测试剂，为含二价重金属离子1 X KTmol/L的醋酸缓冲 溶液；其pH值为4. 4 ;所述二价重金属离子为铜离子。
[0074] 用所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，检测氧氟沙星，步骤如下：
[0075] (1)向待测样品中加入所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，均匀混合，反应5分 钟，调节pH值为4. 4,获得抗生素-重金属配合物溶液，其中二价重金属离子的浓度为 IX l(T3m〇l/L。待测样品为加标回收法得到的鸡饲料样品，其中加入氧氟沙星标准品的浓度 为 1X10 4mol/L。
[0076] (2)选择玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极作为辅助电极， 采用电化学工作站控制微分脉冲伏安法在0. 6V?-o. 4V电位范围对步骤（1)中获得的抗 生素-重金属配合物溶液进行测试，获得电流响应曲线，确定还原峰响应值；
[0077] (3)根据步骤⑵中获得的电流响应峰值以及测定的标准曲线，如图4所示，按照 电流响应峰值越�。低嗫股嘏ǘ仍礁叩脑颍甓ù庋分蟹低嗫股� 素的浓度。
[0078] 所述标准曲线的制作方法如下：
[0079] A、配制不同浓度的抗生素样品4种，浓度范围分别为1Χ1(Γ3、5Χ1(Γ4、1Χ1(Γ 4、 1X10 5mol/L ；
[0080] B、按照与待测样品完全相同的操作步骤，测定电流响应峰值；
[0081] C、以抗生素浓度为横坐标，以电流相应峰值为纵坐标，进行直线拟合即得到所述 标准曲线。
[0082] 测得加标鸡饲料样品中氧氟沙星浓度为1. 022X l(T4mol/L的回收率为102. 2%， 说明所述检测方法对于实际样品中微量氧氟沙星的测定具有很高的可靠性与准确度。
[0083] 实施例5
[0084] 一种pH值对氟喹诺酮类抗生素检测效果影响的试剂，为含二价重金属离子 l(T2m〇l/L的醋酸缓冲溶液；其pH值为3. 6,4. 0, 4. 4, 4. 8, 5. 6 ;所述二价重金属离子为铜离 子。
[0085] 用所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，检测不同pH条件下氧氟沙星与金属离子反 应效果，步骤如下：
[0086] (1)分别配制五份所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，调节pH值为3.6， 4. 0,4. 4,4. 8, 5. 6,获得未加抗生素的重金属空白溶液，其中二价重金属离子的浓度为 10 4mol/L〇
[0087] (2)分别向五份相同的待测样品中加入所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，均匀混 合，反应10分钟，分别调节pH值为3. 6,4. 0, 4. 4, 4. 8, 5. 6,获得抗生素-重金属配合物溶 液，其中二价重金属离子的浓度为l(T4mol/L。
[0088] (3)选择玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极作为辅助电极， 采用电化学工作站控制微分脉冲伏安法在〇. 6V?-0. 4V电位范围对分别对步骤（1)中获 得的五份未加抗生素的重金属空白溶液进行测试，获得不同pH条件下的空白电流响应峰 值；
[0089] (4)选择玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极作为辅助电极， 采用电化学工作站控制微分脉冲伏安法在〇. 6V?-0. 4V电位范围对分别对步骤（2)中获 得的五份抗生素-重金属配合物溶液进行测试，获得不同pH条件下抗生素-重金属反应后 的电流响应峰值；
[0090] (5)将不同pH条件下获得的未加抗生素的空白电流响应值与抗生素-重金属反应 后的电流响应值进行对比，可得到不同pH条件下抗生素-重金属的反应程度，如图5 (A)，并 将加入抗生素后的电流下降比例定义为R%，如图5(B)所示。
[0091] 所述R%定义如下：
[0092] R%= [(IpQ-Ip)/Ip(l]X100%。其中IpQ为未加入抗生素的空白峰电流响应值；I p 为抗生素-重金属反应后峰电流响应值。R%越大代表该pH条件越有利于抗生素-重金属 络合反应的进行。
[0093] 由图5(A)可知，在pH值为3. 6的情况下，反应前铜离子伏安响应曲线a和反应后 铜离子伏安响应曲线b的峰值差异最大，由图5 (B)可知，pH值为3. 6的情况下，电流下降 比例最高，检测灵敏度最高。因此3. 6为最适检测pH值。
[0094] 实施例6
[0095] 一种氟喹诺酮类抗生素检测效果试剂，为含二价重金属离子l(T4m〇l/L的醋酸缓 冲溶液；其pH值为3. 6, 4. 0, 4. 4, 4. 8, 5. 6 ;所述二价重金属离子为镉离子。
[0096] 用所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，检测不同pH条件下环丙沙星与金属离子反 应效果，步骤如下：
[0097] (1)分别配制五份所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，调节pH值为3.6， 4. 0,4. 4,4. 8, 5. 6,获得未加抗生素的重金属空白溶液，其中二价重金属离子的浓度为 10 4mol/L〇
[0098] (2)分别向五份相同的待测样品中加入所述氟喹诺酮类抗生素检测试剂，均匀混 合，反应3分钟，分别调节pH值为3. 6,4. 0, 4. 4, 4. 8, 5. 6,获得抗生素-重金属配合物溶液， 其中二价重金属离子的浓度为10_4mol/L。
[0099] (3)选择纳米材料修饰的玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极 作为辅助电极，采用电化学工作站控制微分脉冲伏安法在〇. 6V?-0. 4V电位范围对分别对 步骤（1)中获得的五份未加抗生素的重金属空白溶液进行测试，获得不同pH条件下的空白 电流响应峰值。
[0100] 所述纳米材料修饰的玻碳电极，为原位剥离石墨烯修饰的玻碳电极。其制备方法 如下：将直径为3mm的棒状玻碳电极在麂皮上加氧化铝粉末对电极表面进行打磨，之后先 用无水乙醇清洗5?lOmin,再用二次水超声清洗5?lOmin,然后用二次水淋洗一遍，用氮 气吹干后备用。取6 μ 原位剥离石墨烯分散液滴涂在处理洁净的玻碳电极表面，置于 红外灯下烘干后待用。
[0101] ⑷选择纳米材料修饰的玻碳电极作为工作电极，甘汞电极作为参比电极，钼电极 作为辅助电极，采用线性扫描伏安法在-0.9V?-0.4V电位范围内分别对步骤（2)中获得 的五份抗生素-重金属配合物溶液进行测试，获得不同pH条件下抗生素-重金属反应后的 电流响应峰值。
[0102] 所述纳米材料修饰的玻碳电极，为原位剥离石墨烯修饰的玻碳电极。其制备方法 如下：将直径为3mm的棒状玻碳电极在麂皮上加氧化铝粉末对电极表面进行打磨，之后先 用无水乙醇清洗5?lOmin,再用二次水超声清洗5?lOmin,然后用二次水淋洗一遍，用氮 气吹干后备用。取6 μ 原位剥离石墨烯分散液滴涂在处理洁净的玻碳电极表面，置于 红外灯下烘干后待用。
[0103] (5)将不同pH条件下获得的未加抗生素的空白电流响应值与抗生素-重金属反应 后的电流响应值进行对比，可得到不同pH条件下抗生素-重金属的反应程度，如图6 (A)所 示，并将加入抗生素后的电流下降比例定义为R%，如图6(B)所示。
[0104] 所述R%定义如下：
[0105] R%= [(IpQ-Ip)/IpQ]X100%。其中IpQ为未加入抗生素的空白峰电流响应值；I p 为抗生素-重金属反应后峰电流响应值。R%越大代表该pH条件越有利于抗生素-重金属 络合反应的进行。
[0106] 由图6(A)可知，在pH值为3. 6的情况下，反应前铜离子伏安响应曲线a和反应后 铜离子伏安响应曲线b的峰值差异最大，由图6 (B)可知，pH值为3. 6的情况下，电流下降 比例最高，检测灵敏度最高。因此3. 6为最适检测pH值。
[0107] 本领域的技术人员容易理解，以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以 限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含 在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1. 一种氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 向待测样品中加入二价重金属离子溶液，均匀混合，反应3至10分钟，调节pH 值在3. 6至5. 6之间，获得抗生素-重金属配合物溶液，其中二价重金属离子的浓度在 5 X 10 5mol/L 至 1 X 10 3mol/L 之间； (2) 选择玻碳基体电极作为工作电极，采用伏安法在-0. 9V?0. 6V电位范围对步骤 (1)中获得的抗生素-重金属配合物溶液进行测试，获得电流响应曲线，确定氧化峰响应值 或还原峰响应值； (3) 根据步骤（2)中获得的氧化峰响应值或还原峰响应值以及测定的标准曲线，标定 待测样品中氟喹诺酮类抗生素的浓度。
2. 如权利要求1所述的氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其特征在于，所述二价重金属 离子为铜离子或镉离子。
3. 如权利要求1所述的氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其特征在于，所述二价重金属 离子溶液为二价重金属离子醋酸缓冲液溶液。
4. 如权利要求1所述的氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其特征在于，所述抗生素-重金 属配合物溶液，其二价重金属离子浓度为l(T 4mol/L。
5. 如权利要求1所述的氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其特征在于，所述抗生素-重金 属配合物溶液pH值为3.6。
6. 如权利要求1所述的氟喹诺酮类抗生素的检测方法，其特征在于，所述玻碳基体电 极为玻碳电极或纳米材料修饰的玻碳电极。
7. -种用于如权利要求1至6所述检测方法的检测试剂，其特征在于，所述试剂为含二 价重金属离子的缓冲溶液，其pH值在3. 6至5. 6之间。
8. 如权利要求7所述的检测试剂，其特征在于，所述二价重金属离子为铜离子或镉离 子。
9. 如权利要求7所述的检测试剂，其特征在于，所述缓冲溶液为醋酸缓冲溶液。
10. 如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述试剂的pH值为3. 6。
【文档编号】G01N27/48GK104122318SQ201410301226
【公开日】2014年10月29日 申请日期:2014年6月26日 优先权日:2014年6月26日
【发明者】张敬东, 单君, 吕松松 申请人:华中科技大学
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