专利名称：红景天注射液的指纹图谱检查方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的质量检查方法，具体是红景天注射液的指纹图谱检查方法。
背景技术：
在已有技术中，红景天注射液是通化玉圣药业股份有限公司独家生产的专利产品，国药准字Z20060361。成分大株红景天。功能扶正补气，活血化瘀，通脉止痛。主治用于冠心病心绞痛证属心血瘀阻型胸痹心痛。症见胸部刺痛或绞痛，时作时止，痛有定处，入夜更甚，或心悸不宁，气短乏力，舌质紫暗，或有瘀斑；脉沉涩等。一般的中药注射液的质量和疗效主要通过药液中可测成分的含量和符合国家注射液标准就可以，但是存在不同药材含有同一有效成分的情况，因此很有可能用不同的药材替代另一种药材来提高含量，这样可能引进了新的杂质和不可确定因素，给药品临床带来很大的风险。由于不同的药材都有不同的含量成分和特性，就象人的指纹一样，所以不同的药材提取物配制成的注射液的指纹图谱就不同，并且具有专属性，如果该注射液中添加了其他药材提取物，指纹图谱峰的数量和峰面积等都会发生变化，所以制定单一药材制成注射液的指纹图谱是十分必要，可以检查出该注射液在原药材中是否添加了其他药材。
发明内容
本发明的目的是提供一种检测方法更为可靠的检查红景天注射液的指纹图谱检查方法。
本发明的技术解决方案是红景天注射液的指纹图谱检查方法，包括如下步骤 (1)建立红景天注射液标准指纹图谱 a、供试品溶液的制备 精密量取红景天注射液2ml，置10ml量瓶中，加入注射用水稀释至刻度，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次5ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加注射用水溶解，转移至5ml量瓶中，用注射用水稀释至刻度，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得； b、标准品溶液的制备 精密称取红景天苷对照品适量，加注射用水溶解，制成每1ml含0.05mg红景天苷的溶液； c、色谱条件 采用菲罗门Phenomenex色谱分析柱，流动相为0.07％磷酸溶液、乙腈—甲醇(体积比11)；检测波长278nm；柱温30℃，进行梯度洗脱； d、测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，制定出红景天注射液标准指纹图谱； 所述的红景天注射液标准指纹图谱是对10批红景天注射液进行指纹图谱检测，确定18个重现性和相对保留时间较好的峰为共有峰，供试品指纹图谱中与对照品色谱峰相应的峰为S峰，18个共有峰与S峰的相对保留时间依次是0.15±10％，0.20±10％，0.97±10％，1.18±10％，1.31±10％，1.42±10％，1.51±10％，1.61±10％，1.85±10％，2.01±10％，2.12±10％，2.33±10％，2.44±10％，2.62±10％，2.82±10％，2.91±10％，2.99±10％，3.07±10％；非共有峰面积之和不得超过总峰面积的15％； (2)以步骤(1)相同的方法建立待测红景天注射液样品的指纹图谱； (3)将步骤(2)得到的红景天注射液样品指纹图谱与红景天注射液标准指纹图谱进行对比，筛选符合红景天注射液标准指纹图谱要求的样品。
本发明的优点是1、以红景天注射液建立起来的HPCL指纹图谱代表着红景天大部分活性成分，定性的确定红景天注射液的主要成分，建立该注射液中有效成分和非有效成分的比例关系，以确�：炀疤熳⑸湟旱囊┢分柿亢土菩В苡行�、可靠表征红景天注射液的产品质量，为完整、准确评价红景天注射液质量提供了新的对照标准。2、可以检查出该红景天注射液在原药材中是否添加了其它药材，有利于产品真伪的鉴别。3、本方法具有简便、稳定、重现性好的特点，有利于提高检验效率。
下面将结合实施例对本发明作进一步详细描述。
图1是红景天注射液标准指纹图谱； 图2是红景天注射液第一批样品指纹图谱； 图3是红景天注射液第二批样品指纹图谱； 图4是红景天注射液第三批样品指纹图谱。
具体实施例方式 实施例1红景天注射液的标准指纹图谱 红景天注射液的标准指纹图谱建立包括如下步骤 a、供试品溶液的制备 精密量取红景天注射液2ml，置10ml量瓶中，加入注射用水稀释至刻度，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次5ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加注射用水溶解，转移至5ml量瓶中，用注射用水稀释至刻度，微孔滤膜(0.45μm)过滤，取续滤液，即得。
b、标准品溶液的制备 精密称取红景天苷对照品适量，加注射用水溶解，制成每1ml含0.05mg红景天苷的溶液 c、色谱条件 色谱柱菲罗门Phenomenex碳十八C18(2)(4.60×150mm5μ)色谱分析柱；流动相为A0.07％磷酸溶液，B乙腈—甲醇(5050)；检测波长278nm；柱温30℃；检测仪器岛津SPD—10Avp，LC—10Avp。
按下表梯度洗脱(表1) d、测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定。
e、制定红景天注射液标准指纹图谱 按上述测定方法，对10批红景天注射液进行指纹图谱检测。10批图谱中确定18个重现性和相对保留时间较好的峰为共有峰，供试品指纹图谱中与对照品色谱峰相应的峰为S峰，18个共有峰与S峰的相对保留时间(表2)，非共有峰面积与总封面积比值(表3)。
红景天注射液指纹图谱18个共有峰相对保留时间表(表2) 非共有峰面积与总封面积比值(表3)。
根据上述数据统计表制定出红景天注射液的标准指纹图谱(参见图1) 红景天注射液标准指纹图谱应符合下列要求 供试品指纹图谱与标准指纹图谱相似；指纹图谱应有18个共有峰；相对保留时间0.15±10％(1)，0.20±10％(2)，0.97±10％(3)，1.18±10％(4)，1.31±10％(5)，1.42±10％(6)，1.51±10％(7)，1.61±10％(8)，1.85±10％(9)，2.01±10％(10)，2.12±10％(11)，2.33±10％(12)，2.44±10％(13)，2.62±10％(14)，2.82±10％(15)，2.91±10％(16)，2.99±10％(17)，3.07±10％(18)。非共有峰面积之和不得过总峰面积的15％。
实施例2红景天注射液指纹图谱的应用 对批量生产的3批样品进行检查。按标准指纹图谱建立方法建立样品指纹图谱，得图2、3、4指纹图谱。评价和测定法对三批红景天注射液指纹图谱与标准红景天注射液指纹图谱进行比较，供试品指纹图谱与标准指纹图谱相似，三批样品的18个共有峰的相对保留时间和非共有峰面积与总峰面积比值进行统计，均符合红景天注射液标准指纹图谱要求。红景天注射液标准指纹图谱可以用来检查批量生产的红景天注射液，并具有专属性。
权利要求
权利要求1一种红景天注射液的指纹图谱检查方法，其特征在于包括如下步骤(1)建立红景天注射液标准指纹图谱；
a、供试品溶液的制备
精密量取红景天注射液2ml，置10ml量瓶中，加入注射用水稀释至刻度，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次5ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加注射用水溶解，转移至5ml量瓶中，用注射用水稀释至刻度，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；
b、标准品溶液的制备
精密称取红景天苷对照品适量，加注射用水溶解，制成每1ml含0.05mg红景天苷的溶液；
c、色谱条件
采用菲罗门Phenomenex色谱分析柱，流动相为0.07％磷酸溶液、乙腈—甲醇体积比11；检测波长278nm；柱温30℃，进行梯度洗脱；
d、测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，制定出红景天注射液标准指纹图谱；
所述的红景天注射液标准指纹图谱是对10批红景天注射液进行指纹图谱检测，确定18个重现性和相对保留时间较好的峰为共有峰，供试品指纹图谱中与对照品色谱峰相应的峰为S峰，18个共有峰与S峰的相对保留时间依次是0.15±10％，0.20±10％，0.97±10％，1.18±10％，1.31±10％，1.42±10％，1.51±10％，1.61±10％，1.85±10％，2.01±10％，2.12±10％，2.33±10％，2.44±10％，2.62±10％，2.82±10％，2.91±10％，2.99±10％，3.07±10％；非共有峰面积之和不得超过总峰面积的15％；
(2)以步骤(1)相同的方法建立待测红景天注射液样品的指纹图谱；
(3)将步骤(2)得到的红景天注射液样品指纹图谱与红景天注射液标准指纹图谱进行对比，筛选符合红景天注射液标准指纹图谱要求的样品。
全文摘要
本发明涉及一种中药制剂的质量检查方法，具体是红景天注射液的指纹图谱检查方法。其步骤是(1)建立红景天注射液标准指纹图谱；(2)建立待测红景天注射液样品的指纹图谱；(3)红景天注射液样品指纹图谱与红景天注射液标准指纹图谱进行对比，筛选符合红景天注射液标准指纹图谱要求的样品。可定性的确定红景天注射液的主要成分，建立该注射液中有效成分和非有效成分的比例关系，以确�：炀疤熳⑸湟旱囊┢分柿亢土菩В苡行�、可靠表征红景天注射液的产品质量，为完整、准确评价红景天注射液质量提供了新的对照标准。
文档编号G01N33/86GK101361781SQ200810300150
公开日2009年2月11日 申请日期2008年1月18日 优先权日2008年1月18日
发明者曹明光 申请人:通化玉圣药业股份有限公司
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
