专利名称：一种游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种能够准确、灵敏、快速、定量检测人血清样本中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的化学发光免疫检测方法，该方法使用的试剂盒以及试剂盒的制备方法。
背景技术：
三碘甲状腺原氨酸(3，5，3’-三碘甲状腺原氨酸，T3)是一种分子量为651的碘化酪氨酸，与甲状腺素(T4) 一样是一种重要的甲状腺激素。它用于维持甲状腺功能，参加糖、脂类和蛋白质3大营养物质的代谢生理作用。三碘甲状腺原氨酸是甲状腺功能亢进的首选指标之一，并可作为判断疗效的可靠指标。99. 7%三碘甲状腺原氨酸在人体内都以与蛋白结合的形式存在，而真正发挥生理效应的游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)含量非常低。T3、T4在循环中均有结合态和游离态两种形式，正常情况下两种形式之间保持着动态平衡，其中游离态仅占极少部分但却发挥着真正的生理作用，很多情况下直接测定游离态的甲状腺激素来确定甲状腺功能。总T3、T4的水平会因为TBG的浓度变化而发生改变，但游离Τ3、游离Τ4的水平不会受到影响，因而甲状腺激素的生理功能不会受到影响。它是评价甲状腺功能和研究下丘脑一垂体一甲状腺轴的主要指标之一，可用于原发性及继发性甲状腺疾病的辅助诊断及疗效评价。FT3是目前医院开展的常规免疫检测项目，对甲状腺疾病的诊断有无可替代的重要参考价值。目前我国已批准上市的FT3免疫检测试剂有进口和国产两大类，其中进口试剂有雅培等跨国定量检测公司的产品，采用的方法学多为化学发光，而国产试剂中采用的方法学多数为放免法，近两年开始出现化学发光类产品。放免分析法存在线性范围窄、不易实现全自动化等方法学限制因素。而化学发光免疫分析法具有灵敏度高、检测线性范围宽、操作简便，自动化程度高等优势。目前化学发光免疫分析技术因其有上述诸多优点得到了广泛的应用。然而，在实际的免疫检测中，由于待测样品中所含的杂质成分较多，一定程度上影响了检测灵敏度和准确性，所以从复杂的样品基质中快速分离、纯化出目的待测物，是临床检验工作者面临的难题之一。磁微粒免疫检测技术是利用高分子材料合成一定粒度大小的磁性固相微粒作载体，以物理吸附、化学偶联等方法包被上具有特异性亲和力的抗体或抗原等各种免疫活性物质，具有分离速度快、效率高、可重复性好、操作简单、不影响被分离细胞或其他生物材料的生物学性状和功能等特点，在外加磁场作用下可定向运动，使得某些特殊成分得以分离、浓集或纯化。中国发明专利公开CN101949942A公开了一种了游离三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒及其制备方法，其中，试剂盒包括包被有二碘甲状腺原氨酸-明胶的磁微粒混悬液、游离三碘甲状腺原氨酸系列校准品、辣根过氧化物酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗体、发光底物A液、发光底物B液及磷酸盐缓冲液。使用该专利公开的试剂盒成功利用了磁微粒免疫检测技术实现了对进行游离三碘甲状腺原氨酸的准确检测。然而，该试剂盒的制备成本和使用成本高，原因是，一方面，在进行包被有二碘甲状腺原氨酸-明胶的磁微粒混悬液的制备时，不仅过程复杂，而且直接将二碘甲状腺原氨酸-明胶包被于磁微粒上的包被率较低，导致较高的成本；另一方面，其采取辣根过氧化物酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗体，该抗体的制备也是非常繁琐，且标记率低，限制其检测效果和导致成本增加。此外，试剂盒在制备工艺上所存在的不易控和稳定性较差的因素，除了导致如前所述的成本增加的问题夕卜，还使得检测的批间差大，限制了检测方法的精密度。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种改进的游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定方法，该方法不仅准确性好、灵敏度高，且精密度特别是分析间精密度高，此外该方法成本低。本发明同时还要提供一种游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定所用的试剂盒，其能够以较低的成本制备得到，且能够实现游离三碘甲状腺原氨酸准确和高精确地定量测定。此外，本发明还提供一种游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定所用的试剂盒的简便和低成本的制备方法。为解决以上技术问题，本发明采取的一种技术方案是一种用于游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的纳米磁微粒化学发光测定的试剂盒，该试剂盒包括用于化学发光免疫检测的免疫反应步骤的免疫反应试剂，特别是，所述的免疫反应试剂包括第一试剂、第二试剂和磁分离试剂，其中
第一试剂为含有荧光素(FITC)标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体、pH为7、的缓冲液，所述荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的浓度为O. 5"! μ g/mL ；第二试剂为含有碱性磷酸酶(ALP)标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原、pH为扩10的缓冲液，所述碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原的浓度为O. 02、.1 μ g/mL ；磁分离试剂为包被有抗荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。根据本发明，所述碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原可以采用常规的标记方法来进行连接。在本发明中，优选的标记方法是将二者用交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯来连接。申请人发现，采取辛二酸二琥珀酰亚胺酯(DSS)作为交联剂进行碱性磷酸酶和游离三碘甲状腺原氨酸抗原的偶联时，具有和其它交联剂相比更高的偶联效率，在降低制备成本的同时，有利于提高检测效果。因此，本发明的碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原优选由碱性磷酸酶与游离三碘甲状腺原氨酸抗原通过交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯连接构成。根据本发明，所述的第一试剂中的含有荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体是能够通过成熟和稳定的工艺容易地制备的。根据本发明，所述包被有抗荧光素抗体的磁微粒的制备也是较为容易的，且现有技术已有成熟的制备工艺可以参照。例如可以通过常规的物理吸附或化学偶联包被方式制备，没有特别限制。作为本发明的一种优选实施方案该包被有抗荧光素抗体的磁微粒中，抗荧光素抗体与磁微粒之间相化学偶联。本领域技术人员应知晓，本发明的试剂盒还可以进一步包括有其它检测所需的试齐U，例如底物溶液。但是诸如底物溶液等其它试剂可以另行购买或配制，因此，虽然试剂盒中可以包括这些试剂，但它们对于本发明试剂盒来说并非必不可少。本发明采取的又一技术方案是一种上述的用于游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定的试剂盒的制备方法，其包括分别制备所述第一试剂、所述第二试剂以及所述磁分离试剂的步骤，其中所述第二试剂的制备过程如下①使游离三碘甲状腺原氨酸抗原与交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯在二甲基亚砜溶剂中，在室温下反应，使生成三碘甲状腺原氨酸抗原与辛二酸二琥珀酰亚胺酯的连接物，于2 8°C下保存备用；②将含有碱性磷酸酶的缓冲液与步骤①所得溶液按照碱性磷酸酶与三碘甲状腺原氨酸抗原与辛二酸二琥珀酰亚胺酯的连接物的摩尔比为1:1.广1. 3混合，在室温下反应，使生成所述碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原，反应结束，将反应液通过G-25凝胶柱除盐，选择适当的pH缓冲液调整浓度和pH值即得所述第二试剂。进一步地，所述的游离三碘甲状腺原氨酸抗原、所述碱性磷酸酶的纯度最好均大于等于95wt%，且所述碱性磷酸酶的比活性超过lOOOu/mg，所述碱性磷酸酶的缓冲液的浓度优选为O. 5 1. 5mg/mL。 根据一个具体方面，第一试剂的制备方法如下配制含有荧光素的pH为扩10的缓冲液，然后按照荧光素与抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的分子比为2(Γ200:1的比例，将所述含有荧光素的PH为9 10的缓冲液与抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的pH为9 10的缓冲液混合，混匀后，室温静置反应，然后将反应液通过G-25凝胶柱进行分离，除去游离的荧光素，得到含有荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的溶液，接着用具有适当PH值的缓冲液调整浓度和PH，即得所述第一试剂。根据又一具体方面，所述的磁分离试剂的制备方法如下使含有羧基活性基团的磁微粒与抗荧光素抗体在偶联剂的存在下，室温反应2 18小时，反应结束，磁分离，去上清，用具有适当PH值的缓冲液调整pH和浓度，即得所述磁分离试剂。优选地，所述的磁微粒具有超顺磁性，其直径为O. 5^2 μ m,每克磁微粒上所带的羧基活性基团的含量不低于O. 4mmol ;所述的抗荧光素抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，纯度大于等于90wt%，稀释效价大于1:100万；所述的偶联剂为碳二亚胺。本发明以上所述的缓冲液可以是本领域常用的那些，例如碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、TRIS缓冲液。实际实施过程中，可选择最适合的缓冲液。例如，在第一试剂、第二试剂以及磁分离试剂的制备的最后阶段，通常采取含O. 5%牛血清蛋白(BSA)、pH8.0的O. lmol/L 的 TRIS 缓冲液。本发明所述的荧光素可以是已知的各种荧光素，常用的有例如异硫氰酸荧光素，四乙基罗丹明，四甲基异硫氰酸罗丹明等。本发明采取的又一技术方案是一种游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定方法，该方法是基于磁微粒分离技术的化学发光免疫检测法，所述检测方法包括依次进行的免疫反应步骤、使用磁分离及洗涤设备对免疫反应的反应液进行洗涤的步骤以及向洗涤后的反应液内加入底物溶液并利用化学发光检测仪检测发光强度的步骤，其中，所述的免疫反应步骤采用本发明上述的试剂盒，且具体实施如下在检测样管中加入待测样本原液或稀释液，然后依次加入第一试剂和第二试剂，混匀，在25 4(TC下进行第一次温育，然后加入磁分离试剂，混匀，在25 4(TC下进行第二次温育；所述的底物溶液为碱性磷酸酶化学发光底物溶液。进一步地，所述第一次温育的时间可以为l(T20min，通常为15min ;第二次温育的时间可以为3 15min,通常为5min。优选地，碱性磷酸酶化学发光底物溶液为含一定浓度二氧杂环乙烷类化合物的Tris缓冲液，例如二氧杂环乙烷类化合物浓度O. 6mmol/L, pH9. 35的Tris缓冲液。上述的使用磁分离及洗涤设备对免疫反应的反应液进行洗涤的步骤以及向洗涤后的反应液内加入底物溶液并利用化学发光检测仪检测发光强度的步骤均可参照常规方法实施，所用的设备以及装置也是常规的。其中，碱性磷酸酶化学发光底物溶液对于本领域人员来说也是已知的，可商购获得。由于以上技术方案的实施，本发明与现有技术相比具有如下优点1、采用本发明的试剂盒以及结合传统的化学发光免疫检测方法和设备就可以实现游离三碘甲状腺原氨酸准确，精密的检测；2、本发明的试剂盒中的第一试剂、第三试剂均可以通过成熟、稳定的制备工艺制备得到，生产成本低，且由于制备工艺的稳定性，试剂盒分析批间差�。觳獾姆治黾渚芏忍岣撸�3、本发明的试剂盒中的第二试剂的制备方法，能够有效将游离三碘甲状腺原氨酸抗原与碱性磷酸酶偶联，偶联效率高，进一步降低试剂盒的成本低和确保试剂盒的检测效果O4、本发明的检测方法检测的准确度好，精密度高，灵敏度高，检测范围宽，样品无序预稀释，操作简单省时。与采用进口试剂盒进行检测的方法相比，本发明的检测方法在成本上具有显著的优势。
图1为测试校准品标准曲线；图2为灵敏度评价拟合曲线；图3为血清样本检测结果相关性(其中横坐标X为实施例4制备得的试剂盒样本测值，浓度单位为pg/mL，纵坐标y为雅培公司试剂盒样本测值，浓度单位为pg/mL)。
具体实施例方式实施例1第一试剂的制备(I)材料与仪器以磷酸盐缓冲液保存的抗FT3单克隆抗体(纯度超过95wt%，浓度为2mg/mL);异硫氰酸荧光素(FITC)，碳酸氢钠等试剂应达到化学纯；G_25凝胶纯化柱采购自GE公司。(2)制备步骤①用O. Γ0. 2mol/L pH9. (TlO. O的碳酸盐缓冲液配制O. 5mg/mL的FITC溶液；
②按照FT3抗体与FITC分子比为1:20的比例在抗体溶液中加入步骤①所配FITC溶液，混合均匀，室温静置12h小时，反应生成FT3抗体-FITC连接物；
③将经过步骤②的反应液通过G-25凝胶柱进行分离，除去未反应的FITC，得到含有FT3抗体-FITC连接物(即FITC标记的FT3抗体)的溶液；④将步骤③所得含有FT3抗体-FITC连接物的溶液用含O. 5%牛血清白蛋白(BSA)PH8. O的O. lmol/L的TRIS缓冲液稀释到FT3抗体-FITC连接物浓度为O. 5^1 μ g/mL, pH为
即为第一试剂。实施例2第二试剂的制备(I)材料与仪器FT3抗原(固体粉末，纯度超过95%);以磷酸缓冲液保存的碱性磷酸酶(ALP溶液，ALP纯度为约99%，比活性为约1500U/mg，浓度为10mg/mL);偶联剂DSS购自THERMO公司，TRIS等化学试剂应达到化学纯；G_25凝胶纯化柱为GE公司产品。(2)制备步骤①取Img FT3抗原，加入DMSO溶解该抗原至浓度为2(T50mg/mL，加入DSSO. 5mg，室温反应2小时，用DMSO将反应液1:10稀释，2-8°C保存备用；②取Img的ALP溶液，用O.1M pH9. 5的NaHCO3缓冲液将ALP溶液稀释到lmg/mL，稀释后的ALP缓冲液中加入步骤①制备的FT3-DMS0溶液进行连接反应，加入FT3-DMS0溶液体积为ALP缓冲液体积的1/20，室温静置反应30min，用G-25凝胶柱除盐，2_8°C保存备用； ③将步骤②的溶液用含O. 5%牛血清白蛋白(BSA)pH8. O的O. lmol/L的TRIS缓冲液稀释到O. 02 O.1 μ g/mL和pH7 9，即为第二试剂。实施例3磁分离试剂的制备(I)材料与仪器磁微粒的悬浮液磁微�：�5wt%，磁微�：然�(COOH)活性集团，每克(g)磁微粒(干重)羧基含量不低于O. 4毫摩尔(mmol )，具有超顺磁性，直径在0. 5-2 μ m之间；抗FITC抗体可以是多克隆抗体，也可以是单克隆抗体，纯度为90wt%以上，稀释效价超过1:100万；2-吗啉乙磺酸(MES)、碳二亚胺(EDC)、TRIS和其他试剂应达到化学纯。(2)制备步骤①取IOOmg磁微粒的悬浮液，磁分离去上清，用0. 05mol/L, pH4. 5 5MES缓冲液IOmL重悬；②加入2 4mg的抗FITC抗体，室温混悬3(T60min ；③加入0. 5 ImL新鲜配制的10mg/mL的EDC水溶液，室温混悬2 12h ；④磁分离，去上清，用含0.5%牛血清白蛋白(BSA)pH8.0的0. lmol/L的TRIS缓冲液重悬到lmg/mL, pH8. O,即为磁分离试剂。实施例4用于游离三碘甲状腺原氨酸纳米磁微粒化学发光测定的试剂盒该试剂盒包括按照实施例1方法制备的第一试剂(浓度为0. 75 μ g/mL), 5OmL ；按照实施例2方法制备的第二试剂(浓度为0. 05 μ g/mL), 50mL ；按照实施例3方法制备的磁力分离试剂50mL。实施例5用于游离三碘甲状腺原氨酸定量检测的试剂盒该试剂盒包括
按照实施例1方法制备的第一试剂(浓度为O. 5 μ g/mL), 5mL ；按照对比例2方法制备的第二试剂(浓度为O. 02 μ g/mL), 5mL ；按照实施例3方法制备的磁力分离试剂5mL。实施例6采取实施例4的试剂盒进行游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定(I)检测步骤①免疫反应在检测管中加入30 μ I待测样本(血清或血衆)原液，然后加入50 μ I第一试剂，5(^1第二试剂，混匀，37±11条件下温育151^11 ;加入50 μ I磁分离试剂，混匀，37±1°C条件下温育5min ；②洗涤使磁微粒在磁场中沉降，去除上清，加入600 μ I的清洗液，去除磁�。鸬词勾盼⒘３浞只煨缓蟠欧掷耄コ锨�。此步骤重复3次；③加底物溶液检测发光强度在检测管中加入150 μ I碱性磷酸酶化学发光底物溶液(北京阿匹斯生物技术有限公司APCL-1，，含0.6mmol/L 二氧杂环乙烷类化合物的Tris缓冲液，pH9. 35)震荡使磁微粒充分混悬，检测单位时间内发光强度。(2)绘制校准品标准曲线校准品标准曲线参见图1。(3)灵敏度评价检测“O”浓度样 本，重复检测20次，计算相对发光强度(RLU)的平均值(M)和标准差(SD)，并计算M-2SD值，根据零浓度校准品和相邻校准品之间的浓度-RLU进行两点回归拟合得出一次方程，将M-2SD值带入上述方程中，求出对应的浓度值，即为最低检测限。本方法的灵敏度不大于lpg/mL。其中A点发光值分别参见表1:表I
权利要求
1.一种用于游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定的试剂盒，所述试剂盒包括用于化学发光免疫检测的免疫反应步骤的免疫反应试剂，其特征在于所述的免疫反应试剂包括第一试剂、第二试剂和磁分离试剂，其中 所述第一试剂为含有荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体、pH为7、的缓冲液，所述荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的浓度为O. 5"! μ g/mL ； 所述第二试剂为含有碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原、pH为7、的缓冲液，所述碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原的浓度为O. 02、.1 μ g/mL ； 所述磁分离试剂为包被有抗突光素抗体的磁微粒的悬浮液。
2.根据权利要求1所述的用于游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定的试剂盒，其特征在于所述碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原由碱性磷酸酶与游离三碘甲状腺原氨酸抗原通过交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯连接构成。
3.根据权利要求1所述的用于游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定的试剂盒，其特征在于所述包被有抗荧光素抗体的磁微粒中，抗荧光素抗体与磁微粒之间相化学偶联。
4.一种如权利要求广3中任一项权利要求所述的用于游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定的试剂盒的制备方法，其包括分别制备所述第一试剂、所述第二试剂以及所述磁分离试剂的步骤，其特征在于所述第二试剂的制备过程如下 ①使游离三碘甲状腺原氨酸抗原与交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯在二甲基亚砜溶剂中，在室温下反应，使生成三碘甲状腺原氨酸抗原与辛二酸二琥珀酰亚胺酯的连接物，于21°C下保存备用； ②将含有碱性磷酸酶的缓冲液与步骤①所得溶液按照碱性磷酸酶与三碘甲状腺原氨酸抗原与辛二酸二琥珀酰亚胺酯的连接物的摩尔比为1:1.广1. 3混合，在室温下反应，使生成所述碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原，反应结束，将反应液通过G-25凝胶柱除盐，选择适当的PH缓冲液调整浓度和pH值即得所述第二试剂。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的游离三碘甲状腺原氨酸抗原、所述碱性磷酸酶的纯度均大于等于95wt%，且所述碱性磷酸酶的比活性超过lOOOu/mg，所述碱性磷酸酶的缓冲液的浓度为O. 5^1. 5mg/mL。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的第一试剂的制备方法如下配制含有荧光素的pH为9 10的缓冲液,然后按照荧光素与抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的分子比为2(Γ200:1的比例,将所述含有荧光素的pH为9 10的缓冲液与抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的PH为CIO的缓冲液混合，混匀后，室温静置反应，然后将反应液通过G-25凝胶柱进行分离，除去游离的荧光素，得到含有荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的溶液，接着用具有适当PH值的缓冲液调整浓度和pH，即得所述第一试剂。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的磁分离试剂的制备方法如下使含有羧基活性基团的磁微粒与抗荧光素抗体在偶联剂的存在下，室温反应2 18小时，反应结束，磁分离，去上清，用具有适当pH值的缓冲液调整pH和浓度，即得所述磁分离试剂。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于所述的磁微粒具有超顺磁性，其直径为O. 5^2 μ m,每克磁微粒上所带的羧基活性基团的含量不低于O. 4mmol ;所述的抗荧光素抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，纯度大于等于90wt%，稀释效价大于1:100万；所述的偶联剂为碳二亚胺。
9.一种游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定方法，该方法是基于磁微粒分离技术的化学发光免疫检测法，所述检测方法包括依次进行的免疫反应步骤、使用磁分离及洗涤设备对免疫反应的反应液进行洗涤的步骤以及向洗涤后的反应液内加入底物溶液并利用化学发光检测仪检测发光强度的步骤，其特征在于所述的免疫反应步骤采用权利要求广3中任一项权利要求所述的试剂盒，且具体实施如下在检测样管中加入待测样本原液或稀释液，然后依次加入第一试剂和第二试剂，混匀，在25 4(TC下进行第一次温育，然后加入磁分离试剂，混匀，在25 4(TC下进行第二次温育； 所述的底物溶液为碱性磷酸酶化学发光底物溶液。
10.根据权利要求9所述的游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定方法，其特征在于所述第一次温育的时间为l(T20min ;第二次温育的时间为3 15min。
全文摘要
本发明涉及一种游离三碘甲状腺原氨酸的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法，试剂盒包括第一试剂、第二试剂和磁分离试剂，其中第一试剂为含有荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体、pH为7~9的缓冲液，荧光素标记的抗游离三碘甲状腺原氨酸抗体的浓度为0.5~1μg/mL；第二试剂为含有碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原、pH为7~9的缓冲液，碱性磷酸酶标记的游离三碘甲状腺原氨酸抗原的浓度为0.02~0.1μg/mL；磁分离试剂为包被有抗荧光素抗体的磁微粒的悬浮液。本发明使得能够以更低成本和更高准确度和精密度对游离三碘甲状腺原氨酸进行定量检测。
文档编号G01N21/76GK103063851SQ20121057130
公开日2013年4月24日 申请日期2012年12月25日 优先权日2012年12月25日
发明者于大为, 程晓蕾, 李冬冬 申请人:苏州浩欧博生物医药有限公司
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