专利名称：带有一体的贮槽的显微镜滑片盖的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于一基片的一盖子，以及在一形式中与一显微镜滑片(microscope slide)一起使用的一盖子。
背景技术：
通常使用显微镜滑片在显微镜下观察材料的样品。该样品可以包含人的细胞组织，可以要求例如着色的处理，以便能鉴别样品的性能。在滑片上可以包括例如DNA、RNA或蛋白质的其它材料。
通常在滑片上的样品上要经历若干反应。一旦发生反应就可以在显微镜下观察滑片。由于细胞组织样品要求仔细的备制和某些反应要求严格控制的环境，因此在滑片上执行反应可能难以自动化。
本发明概要按照本发明，提供了用于一基片的一盖子，它包括一形成一空腔的本体，用于放在基片上以形成一反应腔室；以及一从本体延伸的突出部分，以形成一流体贮槽，当盖子装于基片时该流体贮槽与空腔流体连通。
较佳地，空腔延伸至在基片上的样本存放区的整个宽度。
较佳地，伸出部分从突出部分延伸，用于帮助进入贮槽的吸液效应(wickingfluid)。
较佳地，在从基片分开的突出部分和位于盖子的侧边处的腿部之间形成贮槽。
在一形式中，从两个部分形成突出部分，第一部分相对于空腔至少大体60°倾斜和第二部分至少大体15°倾斜。
在一形式中，盖子还包括在盖子的相反端部的一第二贮槽。
较佳地，壁部分位于盖子的边缘在两侧或多侧上包围空腔。
在一形式中，腿部沿着空腔的侧部延伸，以形成壁部分。
在一较佳形式中，盖子包括用于控制和定位盖子的一定位器器，该定位器器被设置在盖子的、与突出部分相对的端部处。
在一形式中，空腔延伸至盖子的、靠近定位器的端边。
在一形式中，盖子通过壁部分被支持在基片上。
较佳地，盖子由聚合物材料制成。
在一形式中，空腔包括具有比聚合物材料低的表面粗糙度的一涂层。
在另一形式中，空腔包括一具有较小空隙率的涂层。
在另一形式中，空腔具有一层或多层涂层。
较佳地，一第一涂层是具有与滑片的材料相似性能的材料。
较佳地，第一涂层是二氧化硅。
较佳地，设置一第二涂层使其紧接于一第一涂层，用以提供在盖子和第一涂层之间的改进的接触性能。
较佳地，盖子带有翼结构，它允许盖子相对于基片被接合和枢转，以便打开反应腔室和允许滑片清除液体。
在另一方面，提供基片和如上所述的盖子的组合，其中将盖子的空腔设置成面对基片，以便形成反应腔室。
在又一方面，提供处理在一基片的一样品存放区上的一样品的方法，它包括将如上所述的盖子放在基片上，以致盖子的空腔面对基片，用于在样品存放区上形成反应腔室，以及将液体分配进入液体贮槽，用于按需要允许将液体引入反应腔室。
较佳地，该方法还包括相对于基片滑动盖子，用于改变在盖子和样品存放区之间的重叠程度，其结果是带来反应腔室容积方面的相应变化。
较佳地，该方法还包括相对于基片滑动盖子，直至与盖子关联的翼结构相对于基片被接合和提升，以枢转盖子进入一打开状态，以及允许液体从反应腔室排出。
附图简述现参照附图将仅以非限制性例子的方式叙述本发明，在附图中
图1示出了显微镜滑片的例子；图2(a)-(c)示出了用于滑片的盖子的一第一例子的俯视、侧视和仰视图；图3示出了图2的盖子的立体图4(a)-(c)示出了位于图1的滑片上的图2的盖子的进一步的视图；图5是示出了具有盖子的、被切去部分的图4的盖子和滑片结构的立体图；图6是图5的盖子和滑片的示意剖视图；图7示出了适合于放置许多盖子和滑片的底板的立体图；图8(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视图和侧剖视图；图9(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视和侧剖视图；图10(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视和侧剖视图；图11(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视和侧剖视图；图12(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视和侧剖视图；图13(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视和侧剖视图；图14(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视和仰视立体图；图15示出了盖子的凸部的示意侧视图；图16(a)和(b)分别示出了盖子的又一实施例的示意俯视和侧剖视图；图17示出了盖子的凸部的又一例子的示意侧视图；图18示出了安装于图7的底板的图2的盖子；图19(a)-(c)示出了在图1的滑片上的不同位置中的图2的盖子；以及图20(a)和(b)分别示出了一改进的盖子的仰视立体图和局部的放大立体图。
详细说明图1示出了显微镜滑片1，它包括含有样品3的一上表面2。由独特的条形码4识别滑片1。例如很薄切出的细胞组织剖面的样品3位于滑片1上的样品存放区5内，为随后应用试验液体等，该区域需要用例如图2所示的盖子复盖。
图2(a)-(c)和图3示出了具有一本体12、一液体接受区14、一定位器16和在一底侧表面19上的一空腔18。在两侧围绕空腔18的是一壁部分20。在盖子10的一端处，壁部分20与腿部21相连，该腿部向上延伸和离开表面19。由突出部分13将两腿部21分开，在突出部分的下侧和诸腿部21之间形成液体贮槽17。
在图4和5中示出了装配于滑片1的盖子10。在图4(c)中最清楚地示出了贮槽17，其中示出了横越盖子10和滑片1截取的剖面“A-A”的部分的详细视图。突出部分13与在其两端的相对于滑片1升起的腿部21形成了能够将保持的液体分布在滑片1上的一容积。以这方式，液体贮槽17能将液体分布在被保持的滑片1上直至所要求的时间，而不会溢出滑片的边缘。突出部分13还有助于横越空腔18的整个宽度扩展液体。
空腔18和滑片1的重叠形成一可被称为的反应腔室，如图6所示。该腔室可以按照使用情况改变，通常从20至200微米。壁部分20适合于将盖子支持在滑片1上。当将盖子10至少部分地重叠在样品存放区5上时，凹入的表面22、壁部分20和滑片1的样品存放区5形成一反应腔室24。
液体贮槽17的尺寸通常被确定为大于反应腔室24的容积，例如为反应腔室的容积的150％。这提供了用于完全注满反应腔室的足够量的液体，同时使有某些过量液体冲洗该腔室，并能保持在液体贮槽内的液体量提供贮槽用于蒸发。
一旦将盖子装在滑片上还可以施加夹紧力，这些力被设计成在壁部分10和滑片1的上表面之间提供密封。这也限制了从盖子的侧面泄漏液体。在一例子(未示出)中，壁部可以具有帮助壁部与滑片1的上表面2的密封的附加部分。这附加部分可以是柔软的聚合物或橡胶材料。
盖子10还包括呈诸翼部26形状的诸接合表面。诸翼部26适合于图7中所示的底板21的接合斜面28，从而提升盖子离开滑片1的表面。图18最清楚地示出了自由提升盖子的翼部的例子。用移动定位器16的臂可以控制盖子10。可以将盖子10放在滑片上方许多位置处，例如图19中所示的相对于滑片的盖子的诸位置。在图19(a)中，盖子10处于相对滑片1的打开位置，此时样品被露出和敞开。图19(b)示出了盖子处于部分关闭的位置，以及图19(c)示出了盖子处于完全关闭的位置，其中样品完全被盖子复盖和因此完全被包含在反应腔室24内。如图5所示，由盖子和空腔18形成的反应腔室延伸在滑片1的大部分上。但是，样品也可以更多地朝向远离条形码4的滑片的端部放置，因此仅要求较小的反应腔室24。缩小反应腔室24的尺寸减小了注满该腔室的所要求的液体量，这在使用昂贵或稀有的液体的场合可能是很重要的。通过用盖子10仅复盖滑片的一部分，可以用盖子10形成较小的反应腔室。图18(b)中示出了这位置。
图8-17示意地示出了盖子结构的变化型式。在图8-17中，仅示出了盖子的前段，为了清晰起见省略了定位器，用相同的标号表示相同的部分。
在图8(a)中，示出了具有一本体12、诸突出的腿部21、一突出部分13和一凹部30。本体12两侧的诸突出的腿部21形成一液体接纳区域14。当滑片被放上时液体可以分布进入液体接纳区，此时它以圆形扩散，以接触突出部分13。与如果突出部分13的前边是直的(如图9所示)情况相比，凹部30允许液体接触于突出部分13的更宽的部分。一旦液体与凸出部分13接触，它的“吸液”效应横越于空腔18的宽度。如果在空腔的后部施加抽吸，或者沿着滑片从打开位置至几乎关闭位置移动盖子，那么液体开始注入空腔18。当空腔18越过样品3移动时，随着液体可以与样品起反应它形成了反应腔室24。
图9(a)和(b)示出了在某些情况下可以使用的盖子10的更简单的结构。该盖子10的操作与图8(a)和(b)中的盖子10的操作相同。
图10(a)和(b)示出了具有带诸突出腿部21的一本体12的一盖子10。突出部分13和一杆部31包围用于接受液体的一液体接纳区14。液体可以分布在突出部分13上，此时它向下流动和流在滑片表面2上。突起部分13和杆部31引起液体横越空腔18的宽度伸展，使空腔被液体注满。
图11、12的盖子10以与上述相同的方式工作。
关于所有上述盖子，应该理解盖子通常25毫米宽，空腔18通常仅20-200微米高。由此，整个液体分布容积可以是20-300微升左右。
图13(a)示出了具有一本体12、诸腿部21和将液体102分布在滑片1上的一液体分布件100的另一盖子10。在图13(a)中，液体102已被分布，形成在液体贮槽17内。该示意图示出了当它接触盖子1时由液体形成的典型的吸液效应图形。在图13(b)中，液体恰好正被分布在突出部分13上。在所分布的容积中，液体形成了一相对于某些盖子结构特征为可比尺寸的储集区。液体不仅在盖子的前方流动，如图13(a)所示，而且它还在盖子之下流动，以致至少部分地注入空腔18。如以上所述，通过盖子在滑片上移动或者对空腔18的后部施加抽吸，液体可以进一步被引入空腔。
图14(a)和(b)示出了盖子10的又一实施例，其中再次用相同的标号表示相同的部分。盖子具有一液体贮槽17、一突出部分13和一尖端形的伸出部分15。液体可以直接分布在尖端部分15上，以致液体如需要那样在突出部分13上滚动进入贮槽14，以及到达空腔18。如果液体离盖子的头部太远，可以在“吸液”效应越过空腔18的宽度之前引起流体到达滑片的边缘。已经发现由于盖片和液体的可靠吸引，使用突出部分13引起分布的液体接触于盖片(covertile)和沿着空腔13的整个宽度延伸。在空腔中的毛细作用力引起液体扩展，贮槽保持足够的液体，以保证分布在滑片上的液体至少注满空腔18。如果不放置吸管以准确地将液体分布在滑片上，尖端部分15是有用的，例如在突出部分的前方失去几毫米，尖端部分15同样将接触液体，液体将被引导至伸出部分和进入贮槽。这有助于减少在空腔内气泡或空隙的形成。尖端部分15可以从突出部分13延伸约1-5毫米。
图17示出了当液体被置于盖子50的前方时液体如何分布横越滑片的一例子。可以使用突出部分15的下侧轮廓的变化形状。
在使用中，将盖子10放在滑片上，如图4、5和6中所示，用于复盖样品3。如图7所示，滑片1通常处于底板21中，例如所述底板21能够保持所示例子的10组滑片和盖子。然后可以将底板21放入生物反应设备内，例如在由相同申请人于2002年6月20日递交的、名称为“用于提供反应腔室的方法和设备”的澳大利亚临时专利申请号PS3114/02和于2003年6月20日递交的它的相关的国际专利申请中所揭示的设备，这些专利内容已被结合在此供参考。
当底板21被装入设备(未示出)内时，滑片1被保持在适当位置中，通常如图13(b)、15或17示意地所示的相对于水平线5°角度处。然后用啮合定位器的一个臂(未示出)移动盖子10。通常，在称为“敞开注满”的程序期间，沿着滑片1的表面纵向移动盖子10，直至样品3被露出。然后用例如连接于泵的附件的分布结构使液体分布在液体接纳区13(如图13(b)中所示)。所分布的液体量通常足以填满反应腔室24。用这注入机理或方法使用盖子10允许少量液体越过反应腔室24而均匀分布。均匀地和没有气泡或空气间隙地将液体越过反应腔室分布允许使在样品3上一致地发生反应。并且，将液体分布进入其中反应腔室已经含有液体的空的接受区引起腔室内的液体被接受区中的液体置换，最少程度地混和了反应腔室内的液体和所分配的液体。反应腔室的尺寸提供了来自反应腔室的液体的平稳流动，从而只有极少量混和流体。因为它允许以前的液体被精确地置换，同时留下污染后来的液体或反应作用的最少量的原来的液体，这是很优越的。这减少了清洗反应腔室24的冲洗量。
在反应腔室24内的液体容积可以是例如150微升或以下，不过该容积可以应用情况和反应腔室尺寸而变化。
由于液体的表面张力，反应腔室24能够保持液体，除非将附加的液体添加至液体接纳区，或者在与液体接纳区相对的滑片的端部施加抽吸作用(通常通过下降的空气压力)。因为通过使盖子10沿着滑片1的表面移动、复盖样品存放区52形成反应腔室，因此可以注满反应腔室。或者，由于分布进入反应腔室的液体的毛细吸液效应的作用过程，可以注满反应腔室而不要使盖子相对滑片移动。
在本例子中，当不处于运动中或从最初注入被移回时，可以将盖子夹持于滑片。夹持机构(未示出)将力施加于例如盖子10的边缘周围、靠近壁部分20处，以在反应期间将盖子10相对于滑片1放置。
当从滑片1移出盖子10的期间，有时最好消除盖子与滑片的接触。为了完成这工作，翼部26接合于斜面以提升盖子离开滑片。这引起盖子10提升脱离滑片1，防止在滑片1和盖10之间的液体接触。以这方式，最终能够使滑片清除全部液体。
与通常是塑料的盖子本体12的材料性质相比较，盖子孤许多部分可以具有不同的材料性质。在一个例子(未示出)中，空腔可以具有不同的材料性质，以便提供带有某材料性质的反应腔室24。已发现透明的塑性材料适合于盖子10的本体12，以提供适当的机构性能，例如合理的强度和刚度。盖子需要足够地坚强，以便被移动，同时对盖子施加夹紧力，这是因为夹紧力有助于提供在盖子10的壁20和滑片1的上表面之间的密封表面。可以移动盖子以放空或注满腔室，或者还促使液体在反应腔室内运动，以有助于产生反应。
盖子应该理想地具有某些柔性，这是因为在施加夹子时空腔表面应该有些偏转。已发现这有助于运动在反应腔室内的液动和因此提高了样品对液体的暴露。
盖子10的其它性能包括能够限制离开滑片1的表面的热损失。通常将滑片装在被加热的块体上，以及将盖子放在滑片上的样品上方。加热滑片使样品和反应腔室内的液体加热。如果从盖子10有较多的热损失，就难以通过加热滑片1控制液体的温度。并且，可能存在越过反应腔室的过大的温度梯度，这是所不希望有的。
如图2所示，空腔表面19相对于盖子10的其余部分可以具有不同的表面性能。已经发现希望具有滑片2的上表面和空腔18的类似的材料性能。在一个例子中，可以用例如二氧化硅的材料涂复空腔的表面。这涂层可以为约110纳米厚。该涂层提供了带有类似于玻璃滑片的材料性能的表面。还已经发现在施加二氧化硅涂层之前对空腔施加氧化铬(Cr2O3)的薄层(例如0.5-6纳米)具有其优越性。在二氧化硅和塑料之间施加中间层提供了较好的粘附性和空腔的较好的热扩散性能。通�？梢允褂猛坎愀纳剖仪坏钠秸�(这减小了核化面积(nucleation site)和因此减少了在高温下形成气泡)。可以使用涂层改进在反应腔室内液体的毛细流动特性，在反应腔室内在盖子和液体之间产生气体或液体的不可渗透的屏障，或提供化学惰性表面。
在另一例子中，可以用盖子10的塑料本体所支持的玻璃插入件代替空腔表面19。还可以用等离子发射改变塑料的表面性能。
可以在接近摄氏100°、尤其在用于现场混成反应时使用在诸例子中所示的盖子。在较高温度下，液体蒸发和产生气泡。该加热还可以引起盖子弯曲——空腔表面比盖子的顶部更热和膨胀更大，引起空腔表面朝滑片“凹下”。由于液体要比气泡占据较小的空间，所以这有助于去除气泡。气泡聚集在空腔的端部，故必须使气泡逸出。
试验表明在空腔的端部处腔室可靠地使气泡逸出至大气环境。如图20所示，可以再设计现有的贮槽17，其中示出了类似于图14所示的一修改的盖子60，它带有有助于释放气泡的一腔室61，而不会影响通过空腔18的均匀的液体流动。该腔室在相对于空腔和滑片表面约60°处形成一第一倾斜部分62。
但是，液体的蒸发速率直接关系到暴露于大气的液体的表面积——较大的表面积将更快的蒸发，以及要求更频繁的补给。如果气泡逸出角度是陡的，将提高蒸发速率。
通过使用两个角度——比方说在空腔和腔室之间15°处的浅的倾斜部分，以使蒸发最小，引导至进入用于气泡释放的较陡的角度，这也用于增加贮槽的容积。
盖子60还在其相对端设置一第二凹形贮槽63。还能够利用第二贮槽63在加热期间再添满在空腔中的液体。因此第二贮槽63便于在反应腔室内的液体状态的附加控制。
图14和20的实施例被认为代表了目前相信它们是执行本发明的盖子方面的最好的已知方法。
权利要求
1.一种用于一基片的盖子包括一形成空腔的本体，它定位在基片上形成一反应腔室；以及一从本体延伸的突出部分，以形成一液体贮槽，在将盖子装于基片时该液体贮槽与空腔液体连通。
2.如权利要求1所要求的盖子，其特征在于空腔延伸到基片的样品存放区的整个宽度。
3.如权利要求1或2所要求的盖子，其特征在于一伸出部分从突出部分延伸，用于帮助进入贮槽的吸液效应。
4.如权利要求3所要求的盖子，其特征在于由相对于空腔至少大体60°倾斜的一第一部分形成贮槽，与第一部分比较位于空腔和第一部分之间的一第二部分被定向在相对于空腔较小角度的方位。
5.如权利要求4所要求的盖子，其特征在于第二部分倾斜至少大体15°。
6.如权利要求1至5的任一项所要求的盖子，其特征在于盖子由聚合物材料制成。
7.如权利要求1至6的任一项所要求的盖子，其特征在于空腔包括比聚合物材料较低表面粗糙度的涂层。
8.如权利要求7所要求的盖子，其特征在于空腔包括较低孔隙率的涂层。
9.如权利要求7或8所要求的盖子，其特征在于空腔具有一层或多层涂层。
10.如权利要求9所要求的盖子，其特征在于一第一涂层是具有与滑片材料相似性能的材料。
11.如权利要求10所要求的盖子，其特征在于第一涂层是二氧化硅。
12.如权利要求11所要求的盖子，其特征在于在第一涂层和盖子之间放置一第二涂层，用于提供在盖子和第一涂层之间的改进的接触性能。
13.如上述权利要求的任一项所要求的盖子，其特征在于盖子的空腔的宽度不大于显微镜滑片的宽度。
14.如权利要求1至13的任一项所要求的盖子，其特征在于空腔基本上是平面的。
15.如权利要求1至14的任一项所要求的盖子，其特征在于还包括用于控制和定位盖子的一定位器，将该定位器设置在盖子的与突出部分相反的端部处。
16.如权利要求1至15的任一项所要求的盖子，其特征在于还包括在盖子的相对端处的一第二贮槽。
17.如以上权利要求的任一项所要求的盖子，其特征在于壁部分位于盖子的边缘处，在两或多侧包围空腔。
18.如权利要求17所要求的盖子，其特征在于在突出部分和位于盖子的两侧上的诸腿部之间形成贮槽。
19.如权利要求18所要求的盖子，其特征在于诸腿部沿着空腔的诸侧部延伸，以形成诸壁部分。
20.按照权利要求18的盖子，其特征在于盖子在诸壁部分上被支持在基片上。
21.按照权利要求15的盖子，其特征在于空腔延伸至盖子的、靠近定位器的端边。
22.如权利要求1至21的任一项所要求的盖子，其特征在于盖子带有诸翼结构，它们允许盖子相对于基片被接合和枢转，以便打开反应腔室和允许滑片清除液体。
23.如权利要求1至22的任一项所要求的盖子的组合物，其特征在于将盖子的空腔设置成面对基片，以便形成一反应腔室。
24.一种处理在一基片的一样品存放区上的一样品的方法，它包括将如权利要求1至22的任一项所要求的盖子放置在基片上，使盖子的空腔面对基片，以在样品存放区上形成一反应腔室，以及将液体分配进入液体贮槽，用于允许按要求将液体引入该反应腔室。
25.如权利要求24所要求的方法，其特征在于还包括相对于基片滑动盖子，用于改变在盖子和样品存放区之间重叠的程度，其结果使反应腔室容积方面产生相应的变化。
26.如权利要求24或25所要求的方法，其特征在于还包括相对于基片滑动盖子，直至与盖子关联的诸翼结构相对于基片被接合和提升，以使盖子枢转进入一打开状态，以及允许液体从反应腔室排出。
全文摘要
一种用于一基片(未示出)的盖子(10)包括一形成一空腔(18)的本体(12)，用于定位在基片(未示出)上形成反应腔室(18)；以及，一从本体(12)延伸的突出部分(13)，用于形成液体贮槽(14)，当将盖子(10)装配于基片(未示出)时液体贮槽(14)与空腔(18)液体连通。
文档编号G01N1/31GK1672030SQ03817572
公开日2005年9月21日 申请日期2003年6月20日 优先权日2002年6月20日
发明者A·麦克莱兰, G·高里斯, C·亨德森, J·麦克金雷 申请人:视觉生物体系有限公司
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
