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专利名称：一种中药乌头饮片的原位质量检测方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，具体涉及一种中药乌头饮片的原位质量检测方法。
背景技术：
乌头具有祛风除湿，温经止痛的作用，在治疗疑难杂症方面一直发挥着独特的作用。因其毒性较大，从古至今人们都很重视对它的炮制、配伍。通过炮制、配伍降低其毒性，而存其药效活性。但由于目前缺乏快捷、灵敏的对炮制、配伍过程的质量控制与评价的方法，导致炮制品及相关配伍中药的质量无法保证，直接影响到该类药物临床应用的安全性和有效性，每年都有大量乌头中毒的病例发生。据报道，人口服乌头碱0. 2mg^l. Omg即可引起中毒，口服2mg 3mg或肌肉注射0. 2mg^0. 3mg即可引起死亡。故必须严格控制乌头类中·药的质量与用药剂量，使药物既达到治疗目的，又不致发生中毒。但目前，中药质量检测方法无法满足临床医学对中药乌头饮片质量检测的要求。

发明内容
本发明为了解决现有中药质量检测方法无法满足临床医学对中药乌头饮片质量检测要求的问题，而提供了一种中药乌头饮片的原位质量检测方法。该方法实现了对中药乌头饮片的原位快速鉴别，保证了质量检测的准确性，进而也保证了中医临床用药的安全性。为了解决上述问题，本发明提供的一种中药乌头饮片的原位质量检测方法，其具体的技术方案如下一种中药乌头饮片的原位质量检测方法，该方法的步骤和条件如下步骤(I):供试样品的制备以生川乌为原料，用炮制法制备制川乌饮片，得到供试样品；步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱供试样品的质谱指纹图谱通过如下步骤得到取步骤(I)中制备的供试样品做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为3-6kV，格栅电压为+250-+400V，调节工作气体压力0. 1-0. 8kPa，气体温度为150-500°c ;在正离子模式下，设定毛细管温度150-300°C，毛细管电压10-50V，透镜电压50-150V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa，在m/z300 1000扫描范围内，存在 m/z330、m/z358、m/z408、m/z454、m/z556、m/z572、m/z586、m/z590、m/z604、m/z616 离子。在上述技术方案中，所述步骤(2)中的工作气体为高纯氮气、高纯氦气或高纯氩气。所述的高纯气体是指利用现代提纯技术能达到的某个等级纯度的气体，例如对于氮，氩，氦而言，通常指纯度等于或高于99. 999%的为高纯气体。
在上述技术方案中，所述步骤(2)中的格栅电压为+25(T+350V。在上述技术方案中，所述步骤(2)中的气体压力为0. 5^0. SkPa0在上述技术方案中，所述步骤(2)中的气体温度为35(T500°C。本发明提供的中药乌头饮片的原位质量检测方法的有益效果是(I)本方法对中药乌头饮片做质谱分析，根据得到的质谱指纹图谱中的特征指纹峰及其相对强度，对中药乌头饮片的质量进行初步评价；(2)本方法通过对不同的影响离子化效率的离子源参数进行优化，从而获得了中药乌头饮片最优的质谱响应信号，实现了中药乌头饮片的原位快速鉴别，保证了质量检测方法的准确性和质量检测标准的先进性；(3)本方法整个过程在大气压条件下进行，对样品进行低损耗定性分析且无需任何样品前处理过程，大大缩短了分析时间，可实现原位、快速、准确且高通量的检测；(4)附图2是实施例3制备的供试样品3的质谱指纹图谱，该图说明了此制川乌饮片已经过了充分的炮制，有毒成分双酯型乌头碱(m/z 616)种类和含量都有了大幅减少，可安全使用，为合格的制川乌；即使用本发明的方法可以对中药乌头饮片的质量进行快速、准确的评价，以满足临床医学对中药乌头饮片质量检测要求；(5)附图4是实施例6制备的供试样品6的质谱指纹图谱，该图说明了此制川乌饮片未经过充分炮制，可以观察多种有毒的双酯型乌头碱(m/z616、m/z632、m/z646和m/z662)，含量也均剩余较多，尚有一定的毒性，应谨慎使用，为不合格的制川乌；这就需要在用炮制方法制备中药乌头饮片必须充分的炮制，降低其毒性，而存其药效活性。


图I是实施例2制备的供试样品2的质谱指纹图谱；图2是实施例3制备的供试样品3的质谱指纹图谱；图3是实施例5制备的供试样品5的质谱指纹图谱；图4是实施例6制备的供试样品6的质谱指纹图谱。
具体实施例方式实施例I步骤(I):供试样品的制备市售制早乌，称为供试样品I ;步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱取步骤(I)中制备的供试样品I做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为3kV，格栅电压为+300V，工作气体为高纯氮气，调节气体压力0. IkPa,气体温度为500°C ;在正离子模式下，设定毛细管温度200°C，毛细管电压35V，透镜电压50V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa，在m/z300 1000扫描范围内，存在m/z422，m/z 438，m/z 454，m/z 486，m/z 556，m/z 572，m/z 590，m/z 604，m/z 616，m/z 632离子，只能观察到少数的有毒双酯型乌头碱(m/z 616, m/z 632)，为合格的制草乌。实施例2步骤(I):供试样品的制备
以生川乌为原料，川乌，大小个分开，用水浸泡至内无干心，取出，加水煮沸4h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供试样品2 ；步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱取步骤(I)中制备的供试样品2做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为6kV，格栅电压为+250V，工作气体为高纯氦气，调节气体的压力为0. 5kPa，气体温度为350°C ;在正离子模式下，设定毛细管温度150°C，毛细管电压50V，透镜电压150V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa。图I为实施例2制备的供试样品2的质谱指纹图谱。图中，m/z 422，m/z 438，m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616 分别代表查曼宁,尼奥灵,附子灵，中乌头胺，次乌头碱碎片[M-60]+，中乌头碱碎片[M-60]+，苯甲酰中乌头原碱，苯甲酰乌头原碱，次乌头碱。该图说明了此制川乌饮片已经过了充分的炮制，有毒成分双酯型乌头碱(m/z 616)种类和含量都有了大幅减少，可安全使用，为合格的制川乌。·实施例3步骤(I):供试样品的制备以生川乌为原料,川乌，大小个分开，用水浸泡至内无干心，取出，蒸制6h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供试样品3 ；步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱取步骤(I)中制备的供试样品3做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为3kV，格栅电压为+400V，工作气体为高纯氩气，调节气体的压力为0. 7kPa，气体温度为350°C ;在正离子模式下，设定毛细管温度250°C，毛细管电压35V，透镜电压110V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa。图2是实施例3制备的供试样品3的质谱指纹图谱。图中，m/z 422，m/z 438，m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616 分别代表查曼宁,尼奥灵,附子灵，中乌头胺，次乌头碱碎片[M-60]+，中乌头碱碎片[M-60]+，苯甲酰中乌头原碱，次乌头碱。该图说明了此制川乌饮片已经过了充分的炮制，有毒成分双酯型乌头碱(m/z 616)种类和含量都有了大幅减少，可安全使用，为合格的制川乌。实施例4步骤(I):供试样品的制备以生川乌为原料，川乌，大小个分开，用水浸泡至内无干心，取出，加水煮沸5h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供试样品4 ；步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱取步骤(I)中制备的供试样品4做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为6kV，格栅电压为+350V，工作气体为高纯氮气，调节气体的压力为0. 8kPa，气体温度为150°C ;在正离子模式下，设定毛细管温度200°C，毛细管电压30V，透镜电压150V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa，在m/z300 1000扫描范围内存在 m/z 422, m/z 438, m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616离子，只能观察到少数的有毒双酯型乌头碱(m/z 616)，为合格的制川乌。实施例5步骤(I):供试样品的制备
市售制草乌,称为供试样品5 ；步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱取步骤(I)中制备的供试样品5做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为6kV，格栅电压为+250V，工作气体为高纯氦气，调节气体压力0. 6kPa，气体温度为350°C ;在正离子模式下，设定毛细管温度300°C，毛细管电压35V，透镜电压110V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa。附图3实施例5制备的供试样品5的质谱指纹图谱。图中，m/z 422，m/z 438，m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616 分别代表查曼宁,尼奥灵,附子灵，中乌头胺，次乌头碱碎片[M-60]+，中乌头碱碎片[M-60]+，苯甲酰中乌头原碱，次乌头碱。说明了此制草乌饮片已经过了充分的炮制，有毒成分双酯型乌头碱(m/z 616)种类
和含量都有了大幅减少，可安全使用，为合格的制草乌。实施例6步骤(I):供试样品的制备以生川乌为原料，大小个分开，用水浸泡至内无干心，取出，加水煮沸2h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供试样品6 ；步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱取步骤(I)中制备的供试样品6做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为3kV，格栅电压为+250V，工作气体为高纯氩气，调节气体压力0. 5kPa，气体温度为350°C;在正离子模式下，设定毛细管温度250°C，毛细管电压10V，透镜电压100V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa。图4是实施例6制备的供试样品6的质谱指纹图谱。图中，m/z 422,m/z 438,m/z454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 616、m/z 632、m/z 646 和 m/z 662 分别代表查曼宁，尼奥灵，附子灵，中乌头胺，次乌头碱碎片[M-60]+，中乌头碱碎片[M-60]+，苯甲酰中乌头原碱，次乌头碱，中乌头碱，乌头碱，10-0H-乌头碱。该图说明了此制川乌饮片未经过充分炮制，可以观察多种有毒的双酯型乌头碱(m/z 616>m/z 632、m/z 646和m/z 662),含量也均剩余较多，尚有一定的毒性，应谨慎使用，为不合格的制川乌。
权利要求
1.一种中药乌头饮片的原位质量检测方法，其特征在于，该方法的步骤和条件如下 步骤(I):供试样品的制备 以生川乌为原料，用炮制法制备制川乌饮片，得到供试样品； 步骤(2):供试样品的质谱指纹图谱 供试样品的质谱指纹图谱通过如下步骤得到 取步骤(I)中制备的供试样品做质谱分析；质谱实验条件如下正离子电离方式，设定离子源的放电针电压为3-6kV，格栅电压为+250-+400V，调节工作气体压力O. 1-0. 8kPa，气体温度为150-500°C ;在正离子模式下，设定毛细管温度150-300°C，毛细管电压10-50V，透镜电压50-150V，扫描范围m/z质荷比为300 lOOODa，在m/z300 1000扫描范围内，存在m/z330、m/z358、m/z408、m/z454、m/z556、m/z572、m/z586、m/z590、m/z604、m/z616 离子。
2.如权利要求I所述的原位质量检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中的工作气体为高纯氮气、高纯氦气或高纯氩气。
3.如权利要求I所述的原位质量检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中的格栅电压为+250 +350V。
4.如权利要求I所述的原位质量检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中的气体压力为O. 5^0. 8kPa。
5.如权利要求I所述的原位质量检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中的气体温度为350^500 0C ο
全文摘要
本发明提供了一种中药乌头饮片的原位质量检测方法。解决现有中药质量检测方法无法满足临床医学对中药乌头饮片质量检测要求的问题。该中药乌头饮片的原位质量检测方法以生川乌为原料，用炮制法制备制川乌饮片样品；样品不经任何处理，对样品进行质谱分析得到质谱指纹图谱，根据得到的质谱指纹图谱中的特征指纹峰及其相对强度，对中药乌头饮片的质量进行初步评价，实现了中药乌头饮片的原位快速鉴别，保证了质量检测方法的准确性和质量检测标准的先进性。
文档编号G01N27/68GK102788835SQ20121027707
公开日2012年11月21日 申请日期2012年8月6日 优先权日2012年8月6日
发明者刘志强, 刘淑莹, 刘舒, 宋凤瑞, 朱洪彬, 王春艳 申请人:中国科学院长春应用化学研究所