专利名称：：一种水中痕量a-萘乙酸的测定方法
技术领域：
：本发明属于分析
技术领域：
，具体涉及一种水中痕量a-萘乙酸的测定方法。
背景技术：
：萘乙酸是一类新型的植物生长调节齐U，英文通用名为naphthaleneaceticacid(NAA)，化学名称为2-(l-萘基)乙酸(IUPAC)、1_萘乙酸、萘乙酸等。萘乙酸的分子式为C^^。02，分子量为186.21。萘乙酸有a型|3型两种，其中以a型的活力较强作用较广。它的纯品为白色无臭无味针状晶体，熔点为130度，易溶于甲醇、乙腈、三氯甲烷、乙醚、丙酮等有机溶剂，几乎不溶于冷水(24度时水中溶解度为0.24g/L)，易溶于热水。当萘乙酸遇碱时能够生成盐；其钾盐、钠盐均可溶于水，且活力保持不变。萘乙酸亦属对人、畜具有低毒的植物生长调节剂。它对皮肤或黏膜有剌激作用；也能经过食道等引起中毒，急性中毒可见肝、肾损害。萘乙酸的毒性为大鼠急性经口LDs。约1.05.9g/kg，兔急性经暮LD5。大于5.Og/kg，长时间接触对兔皮肤有中等剌激，对兔眼睛有强烈剌激。另外，H.AlsonMoye(1979)等人对萘乙酸在菠萝、柑橘中残留量做动态观察，发现萘乙酸在开花期喷洒需要14-30天后无法检出，而在采前喷洒则需要125-156天后无法检出。而且，外皮中残留量的消减时间远远短于果实内部。目前对a_萘乙酸的分析方法有化学法、气相色谱法和高效液相色谱法、伏安分析法等。化学法不易排除杂质的干扰，而使测定结果出现较大误差；气相色谱法和液相色谱法灵敏度和准确度虽高，但仪器价格昂贵，且需多次萃�。换仁中僮鞣彼觯槐憧焖俜治�。
发明内容本发明要解决的技术问题是现有对a-萘乙酸的分析方法存在误差较大或操作繁琐、不便分析等技术问题，提供一种灵敏度高，再现性好，准确度高，取样量少，操作简便，方便快速的分析方法。为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下本发明的水中痕量a-萘乙酸的测定方法，该方法是在羧甲基纤维素钠胶体存在的条件下，用荧光分光光度法测定水中痕量a-萘乙酸的浓度。本发明的水中痕量a-萘乙酸的测定方法包括以下步骤(1)标准溶液的制作准确称取a-萘乙酸，709(TC水浴溶解后定容中，配成1.0X10—5mol/L的a-萘乙酸标准溶液，准确称取羧甲基纤维素钠，8(TC水浴溶解后定容配制成摩尔浓度为1.OX10—3mol/L的羧甲基纤维素钠标准溶液；取至少5个容量瓶，分别加入02.0mLa-萘乙酸标准溶液，5个容量瓶中a-萘乙酸标准溶液的添加量呈梯度变化，分别向上述容量瓶中加入3.OmL摩尔浓度为1.OX10—3mol/L的羧甲基纤维素钠标准溶液和3.5mL乙醇，调节pH为7.5，以水稀释至刻度，摇匀，反应15min;(2)标准溶液吸光度的测定及标准曲线的制作在固定激发波长223nm和发射波长335nm下，分别测定步骤(1)得到的反应液的相对荧光强度，以a-萘乙酸溶液的浓度为横坐标，以荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线；(3)水样中a-萘乙酸的测定方法将水样用0.400.50iim孔径的滤膜过滤以除去水样中的悬浮的微粒，取10mL容量瓶三个，加入15mL处理过的水样，分别加入1.OX10—5mol/L的a_萘乙酸标准溶液标液0.5mL，1.OmL，1.5mL，再加入羧甲基纤维素钠标准溶液3mL，乙醇3.5mL，用0.02mol/LNaOH调节pH=7.5，反应15min，激发波长223nm和发射波长335nm下，测量体系的荧光强度，用标准曲线法测定a-萘乙酸含量。本发明利用羧甲基纤维素钠能够增强a-萘乙酸荧光强度的性质，建立了一种利用胶束增敏荧光分光光度法测定水体系中a-萘乙酸含量的方法，该方法灵敏度高，再现性好，准确度高，取样量少，操作简便，方便快速分析。具体实施方式下面通过实施例对本发明作详细说明，但并不以任何方式限制本发明。实施例11仪器及主要试剂970CRT荧光分光光度计(上海分析仪器总厂)；SYZ-A型石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏省金坛县医用石英玻璃仪器厂)；SHB-3循环水多用真空泵(郑州杜甫仪器厂)；电热恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司)。a-萘乙酸(NAA，Sanland-chemInternationalInc);羧甲基纤维素钠(CMC，天津市福晨化学试剂厂)；甲醇(天津市彪仕奇科技发展有限公司)；乙醇(烟台市双双化工有限公司)；异丙醇(郑州市化学试剂工厂)；所有试剂均为分析纯，经检测无荧光杂质。2标准溶液的配制1.OX10—5mol/LNAA溶液准确称取NAAO.Q190g，80。C水浴溶解后定容于100mL容量瓶中，配成1.0X10—^Ql/L的NAA储备液。取NAA储备液10mL，定容于100mL容量瓶中配成1.0X10—4mol/L的溶液，再从中移取10mL，定容于100mL容量瓶中，配成1.0X10—5mol/L的标准溶液。1.OX10—3mol/LCMC溶液准确称取CMCl.6950g，80。C水浴溶解后定容于100mL容量瓶中。0.02mol/LNaOH溶液准确称取NaOH0.2000g，溶解后定容于250mL容量瓶中。三酸混合缓冲液①准确称取磷酸0.2306g，溶解后定容于50mL容量瓶中，配成0.04mol/L磷酸溶液；4②准确称取硼酸0.1237g，溶解后定容于50mL容量瓶中，配成0.04mol/L硼酸溶液；③准确称取乙酸0.3336g，溶解后定容于50mL容量瓶中，配成0.04mol/L乙酸溶液；将上述溶液①②③混合均匀，配成三酸混合缓冲溶液，转移到试剂瓶中储存备用。配制上述溶液用水均为二次石英亚沸蒸馏水。3.检出限的测定与工作曲线的绘制检测下限简称检出限，是指能以适当的置信度被检出的组分的最低浓度或最小质量(或最小物质的量)。CL=3S0/m式中m为灵敏度即分析标准曲线在低浓度范围内的斜率；S。为空白标准偏差，空白指与待测样品组成完全一致但不含待测组分的样品。根据国际应用于纯粹化学联合会(IUPAC)的规定，灵敏度的定义是指在浓度线性范围内校正曲线的斜率，各种方法的灵敏度可以通过测量一系列的标准溶液来求得。取10mL容量瓶10个，分别加入CMC3mL，乙醇3.5mL，调节pH=7.5，以水稀释至刻度，摇匀，反应15min，分别固定激发波长223nm和发射波长335nm，测定体系的荧光强度，结果见表l。表1标准溶液的荧光强度<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>空白标准偏差S。=1.23，相对标准偏差为0.025。分别移取0，0.3，0.6，0.9，1.2，1.5，1.8mLNAA溶液于10mL容量瓶中，加入3.OmLCMC标液，3.5mL乙醇，调节pH为7.5，以水稀释至刻度，摇匀，反应15min。固定激发波长223nm和发射波长335nm测量体系的荧光强度并做标准曲线如附图。根据标准曲线求得的斜率即灵敏度m二1.05X108。可得该法对NAA的检出限C^二3.51X10—8mol/L。4西流湖水样样品分析经过检测，水样中a-萘乙酸含量均为10—9mol/L以下数量级，低于本法检出限，故采用加标回收实验考察方法的可靠性。将所取水样用0.45iim孔径的滤膜过滤以除去水样中的悬浮的微粒。取10mL容量瓶三个，加入2mL处理过的水样，分别加入1.OX10—5mol/L的NAA标液O.5mL，1.OmL，1.5mL，再加入CMC标液3mL，乙醇3.5mL，用0.02mol/LNaOH调节pH=7.5，使体系处于最佳测定条件下，反应15min。使用970CRT荧光分光光度计，1.Ocm石英比色皿，设置狭缝宽5nm/5nm，波长测量精度0.6nm，分别固定激发波长223nm和发射波长335nm，测量体系的荧光强度，用标准曲线法测定a-萘乙酸含量。测得的结果如表2所示。实施例21仪器及主要试剂所用仪器及试剂同实施例1。2标准溶液的配制1.OX10—5mol/LNAA溶液准确称取NAAO.0190g，70。C水浴溶解后定容于100mL容量瓶中，配成1.0X10—^Ql/L的NAA储备液。取NAA储备液10mL，定容于100mL容量瓶中配成1.0X10—4mol/L的溶液，再从中移取10mL，定容于lOOmL容量瓶中，配成1.0X10—5mol/L的标准溶液。1.OX10—3mol/LCMC溶液准确称取CMCl.6950g，70。C水浴溶解后定容于100mL容量瓶中。0.02mol/LNaOH溶液准确称取NaOH0.2000g，溶解后定容于250mL容量瓶中。三酸混合缓冲液①准确称取磷酸0.2306g，溶解后定容于50mL容量瓶中，配成0.04mol/L磷酸溶液；②准确称取硼酸0.1237g，溶解后定容于50mL容量瓶中，配成0.04mol/L硼酸溶液；③准确称取乙酸0.3336g，溶解后定容于50mL容量瓶中，配成0.04mol/L乙酸溶液；将上述溶液①②③混合均匀，配成三酸混合缓冲溶液，转移到试剂瓶中储存备用。配制上述溶液用水均为二次石英亚沸蒸馏水。3.检出限的测定与工作曲线的绘制方法同实施例l。4熊耳河水样样品分析经过检测，水样中a-萘乙酸含量均为10—9mol/L以下数量级，低于本法检出限，故采用加标回收实验考察方法的可靠性。将所取水样用0.40m孔径的滤膜过滤以除去水样中的悬浮的微粒。取10mL容量瓶三个，加入2mL处理过的水样，分别加入1.OX10—5mol/L的NAA标液O.5mL，1.OmL，1.5mL，再加入CMC标液3mL，乙醇3.5mL，用0.02mol/LNaOH调节pH=7.5，使体系处于最佳测定条件下，反应15min。使用970CRT荧光分光光度计，1.Ocm石英比色皿，设置狭缝宽5nm/5nm，波长测量精度0.6nm，分别固定激发波长223nm和发射波长335nm，测量体系的荧光强度，用标准曲线法测定a-萘乙酸含量。测得的结果如表2所示。实施例31仪器及主要试剂所用仪器及试剂同实施例1。2标准溶液的配制1.OX10—5mol/LNAA溶液准确称取NAAO.0190g，90。C水浴溶解后定容于100mL容量瓶中，配成1.0X10—^Ql/L的NAA储备液。取NAA储备液10mL，定容于100mL容量瓶中配成1.0X10—W/L的溶液，再从中移取10mL，定容于100mL容量瓶中，配成1.0X10—5mol/L的标准溶液。1.0X10—3mol/LCMC溶液准确称取CMCl.6950g，90。C水浴溶解后定容于100mL容量瓶中。0.02mol/LNaOH溶液准确称取NaOH0.2000g，溶解后定容于250mL容量瓶中。三酸混合缓冲液方法同实施例l。3.检出限的测定与工作曲线的绘制方法同实施例l。4金水河水样样品分析经过检测，水样中a-萘乙酸含量均为10—9mol/L以下数量级，低于本法检出限，故采用加标回收实验考察方法的可靠性。将所取水样用0.50m孔径的滤膜过滤以除去水样中的悬浮的微粒。取10mL容量瓶三个，加入2mL处理过的水样，分别加入1.OX10—5mol/L的NAA标液O.5mL，1.OmL，1.5mL，再加入CMC标液3mL，乙醇3.5mL，用0.02mol/LNaOH调节pH=7.5，使体系处于最佳测定条件下，反应15min。使用970CRT荧光分光光度计，1.Ocm石英比色皿，设置狭缝宽3nm/5nm，波长测量精度0.6nm，分别固定激发波长223nm和发射波长335nm，测量体系的荧光强度，用标准曲线法测定a-萘乙酸含量。测得的结果如表2所示。实施例4采用与实施例l相同的检测方法，测定八里沟水样中a-萘乙酸含量，测得的结果如表2所示。实施例5采用与实施例l相同的检测方法，测定东风渠水样中a-萘乙酸含量，测得的结果如表2所示。表2样品分析结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>权利要求一种水中痕量a-萘乙酸的测定方法，其特征在于该方法是在羧甲基纤维素钠胶体存在的条件下，用荧光分光光度法测定水中痕量a-萘乙酸的浓度。2.根据权利要求l所述的水中痕量a-萘乙酸的测定方法，其特征在于该方法包括以下步骤(1)标准样品的制作称取a-萘乙酸，709(TC水浴溶解后定容，配成1.OX10—5mol/L的a_萘乙酸标准溶液，称取羧甲基纤维素钠，709(TC水浴溶解后定容配制成摩尔浓度为1.OX10—3mol/L的羧甲基纤维素钠标准溶液；取至少5个容量瓶，分别加入02.OmLa-萘乙酸标准溶液，5个容量瓶中a_萘乙酸标准溶液的添加量呈梯度变化，分别向上述容量瓶中加入3.OmL摩尔浓度为1.OX10—3mol/L的羧甲基纤维素钠标准溶液和3.5mL乙醇，调节pH为7.5，以水稀释至刻度，摇匀，反应15minj(2)标准样品吸光度的测定及标准曲线的制作在固定激发波长223nm和发射波长335nm下，分别测定步骤(1)得到的反应液的相对荧光强度，以a-萘乙酸溶液的浓度为横坐标，以荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线；(3)水样中a-萘乙酸的测定方法将水样用0.400.50iim孔径的滤膜过滤以除去水样中的悬浮的微粒，取10mL容量瓶三个，加入15mL处理过的水样，分别加入1.OX10—5mol/L的a_萘乙酸标准溶液标液0.5mL，1.OmL，1.5mL，再加入羧甲基纤维素钠标准溶液3mL，乙醇3.5mL，用0.02mol/LNaOH调节pH=7.5，反应15min，激发波长223nm和发射波长335nm下，测量体系的荧光强度，用标准曲线法测定a-萘乙酸含量。全文摘要一种水中痕量a-萘乙酸的测定方法，属于分析
技术领域：
。该方法是在羧甲基纤维素钠胶体存在的条件下，用荧光分光光度法测定水中痕量a-萘乙酸的浓度。该方法灵敏度高，再现性好，准确度高，取样量少，操作简便，方便快速分析。文档编号G01N21/25GK101750283SQ20081023108公开日2010年6月23日申请日期2008年11月27日优先权日2008年11月27日发明者张海燕,胡雨娇,范天祥,范彩玲申请人:河南农业大学
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
