专利名称：一种用于治疗乳腺炎、乳腺增生的药物的检测方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种用于治疗乳腺炎、乳腺增生的药物的检测方法，特别是涉及一种用于治疗乳腺炎、乳腺增生的胶囊剂，例如乳癖舒胶囊的检测方法。
背景技术：
乳癖舒胶囊由瓜萎皮、蒲公英、丹参、赤芍、土贝母、柴胡、延胡索七味中药材组成，具有协同作用，符合中药组方原则，能够达到标本兼治的目的。该制剂结合中西医对乳腺炎、乳腺增生发病机理的认识，吸收了经典古方之精华，具有舒肝解郁，化痰散结之功效，用于治疗肝气郁结，毒瘀互阻所致的乳腺炎、乳腺增生。在全国各地医院临床应用过程中，证明其具有显著的临床疗效，深得广大医务工作者和患者的信任。在现有的乳癖舒胶囊的检测方法中，对丹参、赤芍、土贝母进行了薄层色谱(TLC)鉴别，而未制定成份延胡索的薄层色谱(TLC)鉴别方法。为进一步控制该产品的质量，需要对该产品的质量控制方法进行完善，从而更进一步保证该产品的质量和疗效。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种用于治疗乳腺炎、乳腺增生的药物的检测方法，该检测方法能够有效控制药物的质量，从而更好地满足医疗需要。本发明的目的是采用如下技术方案来实现的。一种用于治疗乳腺炎、乳腺增生的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索，其中，所述薄层色谱的条件包括采用硅胶G薄层板和体积比为6 12 I 5，优选为9 2的A、B混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自苯、甲苯、二氯甲苯、氯仿和乙醚，优选为甲苯；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、乙醇和甲醇，优选为丙酮。上述检测方法中，所述展开剂为体积比为6 12 I 5，优选为9 2的甲苯-丙酮。上述检测方法中，采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括如下步骤(I)取所述药物加入甲醇，超声，滤过，滤液过氧化铝柱，残渣加水溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；(2)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成对照品溶液；(3)吸取上述溶液各2 5iU，分别点于同一薄层色谱板上，体积比为6 12 I 5，优选为9 2的甲苯-丙酮作为展开剂，展开，取出，晾干，检视。优选地，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的延胡索包括如下步骤(I)取药物内容物3g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液过内径为1.5cm，柱高为5cm的氧化铝柱，流出液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；
(2)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；(3)吸取上述溶液各2 5iU，分别点于同一用I %w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比为9 2的甲苯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置于碘缸中3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视。上述检测方法中，采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括如下步骤(I)取所述药物加入甲醇，超声，滤过，滤液过氧化铝柱，残渣加水溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提�。舾桑性蛹状既芙猓魑┦云啡芤海�(2)取延胡索对照药材，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；(3)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成对照品溶液；(4)吸取上述溶液各2 5iU，分别点于同一薄层色谱板上，体积比为6 12 I 5，优选为9 2的甲苯-丙酮作为展开剂，展开，取出，晾干，检视。优选地，采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括如下步骤(I)取药物内容物3g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液过内径为1.5cm，柱高为5cm的氧化铝柱，流出液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；(2)取延胡索对照药材lg，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；(3)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；(4)吸取上述溶液各2 5iU，分别点于同一用I %w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比为9 2的甲苯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置于碘缸中3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视。上述检测方法中，所述药物可以是乳癖舒胶囊，该胶囊由瓜萎皮、蒲公英、丹参、赤芍、土贝母、柴胡、延胡索组成，其配比如下瓜萎皮400-500重量份、蒲公英400-500重量份、丹参200-250重量份、赤芍200-250重量份、土贝母100-180重量份、柴胡100-150重量份、延胡索100-150重量份；优选的配比如下瓜萎皮450重量份、蒲公英450重量份、丹参225重量份、赤苟225重量份、土贝母150重量份、柴胡135重量份、延胡索135重量份。乳癖舒胶囊一个处方量(即制1000粒)的配比如下瓜萎皮450g、蒲公英450g、丹参225g、赤芍225g、土贝母150g、柴胡135g、延胡索135g。上述乳癖舒胶囊的制备方法如下以上七味，取延胡索粉碎成细粉；丹参、赤芍加95%乙醇回流提取二次，每次2小时，合并乙醇提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成相对密度为1.36(60°C)的稠膏，瓜萎皮等其余五味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1. 5小时，第三次I小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩成相对密度为1.36(60°C)的稠膏，合并上述稠膏，加入延胡索细粉，搅拌均匀，真空干燥，粉碎成细粉，装入胶囊，即得。在一个具体实施方案中，本发明提供一种治疗乳腺炎、乳腺增生药物，例如上述乳癖舒胶囊的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的延胡索，其中，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的延胡索包括如下步骤取药物内容物3g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液过氧化铝柱(内径1. 5cm,柱高5cm),流出液蒸干,残洛加水IOml使溶解,加浓氨溶液调至碱性,用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2 5 yl，分别点于同一用1% w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。上述检测方法中，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。上述鉴定方法阴性无干扰，样品重性形良好，可以作为鉴别乳癖舒胶囊中延胡索的依据。本发明确定了延胡索薄层鉴别的检测方法，且经过方法学考察证明本方法灵敏度高，重复性好，且阴性对照无干扰，整个试验过程可操作性强，可以作为控制本品内在质量的指标之一。与现有技术相比，本发明了增加了延胡索的薄层色谱鉴定，此方法阴性无干扰，样品重现性良好，可以作为鉴别乳癖舒胶囊中延胡索的依据。本发明通过对治疗乳腺炎、乳腺增生药物，例如乳癖舒胶囊中多种成分进行检测，能够有效控制乳癖舒胶囊的质量，使乳癖舒胶囊质量达到稳定可控，从而更好地满足医疗的需要。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图1是乳癖舒胶囊中延胡索的薄层色谱鉴定图，其中，I表示延胡索阴性样品；2_4表示三批供试品；5表示延胡索对照药材；6表示延胡索乙素对照品；图2是乳癖舒胶囊中延胡索的薄层色谱鉴定图，其中，I表示延胡索阴性样品；2_4表示三批供试品；5表示延胡索对照药材；6表示延胡索乙素对照品。
具体实施例方式下面通过实施例详细说明本发明，应当理解，下述实施例仅用于说明本发明，而不以任何方式限制本发明的范围。实施例1乳癖舒胶囊的处方及制备方法处方瓜萎皮450g、蒲公英450g、丹参225g、赤苟225g、土贝母150g、柴胡135g、延胡索135g。上述乳癖舒胶囊的制备方法如下以上七味，取延胡索粉碎成细粉；丹参、赤芍加95%乙醇回流提取二次，每次2小时，合并乙醇提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成相对密度为1.36(60°C)的稠膏，瓜萎皮等其余五味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1. 5小时，第三次I小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩成相对密度为1.36(60°C )的稠膏，合并上述稠膏，加入延胡索细粉，搅拌均匀，真空干燥，粉碎成细粉，装入胶囊，即得。实施例2乳癖舒胶囊中延胡索的薄层色谱鉴定
1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取20110513、20110514、20110615三种不同批次乳癖舒胶囊(购自
西安千禾药业有限责任公司，其组成、配比和制备方法如实施例1所示)内容物3g，加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液过氧化招柱(内径1. 5cm,柱高5cm),流出液蒸干,残洛加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。再取按乳癖舒胶囊处方比例和工艺制备的不含延胡索的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各2 5μ1，分别点于同一用氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视，结果如图1所示。结果显示，三批供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。而阴性样品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，未显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。说明方中其它药味不影响延胡索的检出，因此，可以作为鉴别乳癖舒胶囊中延胡索的依据。实施例3乳癖舒胶囊中延胡索的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取乳癖舒胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物3g，加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液过氧化招柱(内径1. 5cm,柱高5cm),流出液蒸干,残渣加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。再取按乳癖舒胶囊处方比例和工艺制备的不含延胡索的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各2 μ 1，分别点于同一用l%w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(6 :1)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。
结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。而阴性样品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，未显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。说明方中其它药味不影响延胡索的检出，因此，可以作为鉴别乳癖舒胶囊中延胡索的依据。实施例4乳癖舒胶囊中延胡索的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取乳癖舒胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物3g，加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液过氧化招柱(内径1. 5cm,柱高5cm),流出液蒸干,残渣加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。再取按乳癖舒胶囊处方比例和工艺制备的不含延胡索的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一用l%w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(12 5)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。结果显示，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。而阴性样品色谱中，在与对照品色谱 相应位置上，未显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。说明方中其它药味不影响延胡索的检出，因此，可以作为鉴别乳癖舒胶囊中延胡索的依据。实施例5乳癖舒胶囊中延胡索的薄层色谱鉴定(对照试验)1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取乳癖舒胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物3g，加甲醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液过氧化招柱(内径1. 5cm,柱高5cm),流出液蒸干,残渣加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作为对照品溶液。再取按乳癖舒胶囊处方比例和工艺制备的不含延胡索的阴性样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一用I %w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(15 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视，结果如图2所示。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材及对照品溶液色谱相应的位置上，未显相同颜色的荧光斑点，且不具有实验特征，与我们设计的思想差异明显。因此，不能作为展开剂使用。
权利要求
1.一种用于治疗乳腺炎、乳腺增生的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的延胡索，其中，所述薄层色谱的条件包括采用硅胶G薄层板和体积比为6 12 I 5，优选为9 2的A、B混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自苯、甲苯、二氯甲苯、氯仿和乙醚，优选为甲苯；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、乙醇和甲醇，优选为丙酮。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述展开剂为体积比为6 12 I 5，优选为9 2的甲苯-丙酮。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括如下步骤(1)取所述药物加入甲醇，超声，滤过，滤液过氧化铝柱，残渣加水溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提�。舾桑性蛹状既芙猓魑┦云啡芤海�(2)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成对照品溶液；(3)吸取上述溶液各2 5μ1，分别点于同一薄层色谱板上，体积比为6 12 I 5，优选为9 2的甲苯-丙酮作为展开剂，展开，取出，晾干，检视。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括如下步骤(1)取药物内容物3g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液过内径为1.5cm，柱高为5cm的氧化铝柱，流出液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；(2)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含O.5mg的溶液，作为对照品溶液；(3)吸取上述溶液各2 5μ 1，分别点于同一用I % w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比为9 2的甲苯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置于碘缸中3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括如下步骤(1)取所述药物加入甲醇，超声，滤过，滤液过氧化铝柱，残渣加水溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提�。舾桑性蛹状既芙猓魑┦云啡芤海�(2)取延胡索对照药材，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；(3)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成对照品溶液；(4)吸取上述溶液各2 5μI,分别点于同一薄层色谱板上,体积比为6 12 I 5，优选为9 2的甲苯-丙酮作为展开剂，展开，取出，晾干，检视。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的延胡索包括如下步骤(1)取药物内容物3g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液过内径为1.5cm，柱高为5cm的氧化铝柱，流出液蒸干，残渣加水IOml使溶解，加浓氨溶液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；(2)取延胡索对照药材lg，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；(3)取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每Iml含O.5mg的溶液，作为对照品溶液；(4)吸取上述溶液各2 5μ1，分别点于同一用I % w/v氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比为9 2的甲苯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置于碘缸中3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置365nm的紫外光灯下检视。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物由瓜萎皮、蒲公英、丹参、赤芍、土贝母、柴胡、延胡索组成，其配比如下 瓜萎皮400-500重量份、蒲公英400-500重量份、丹参200-250重量份、赤芍200-250重量份、土贝母100-180重量份、柴胡100-150重量份、延胡索100-150重量份； 优选的配比如下瓜萎皮450重量份、蒲公英450重量份、丹参225重量份、赤苟225重量份、土贝母150重量份、柴胡135重量份、延胡索135重量份。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下 以上七味，取延胡索粉碎成细粉；丹参、赤芍加95% v/v乙醇回流提取二次，每次2小时，合并乙醇提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成60°C下相对密度为1. 36的稠膏，瓜萎皮等其余五味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1. 5小时，第三次I小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩成60°C下相对密度为1.36的稠膏，合并上述稠膏，加入延胡索细粉，搅拌均匀，真空干燥，粉碎成细粉，装入胶囊，即得。
全文摘要
本发明提供一种用于治疗乳腺炎、乳腺增生的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的延胡索，其中，所述薄层色谱的条件包括采用硅胶G薄层板和体积比为6～12∶1～5，优选为9∶2的A、B混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自苯、甲苯、二氯甲苯、氯仿和乙醚，优选为甲苯；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、乙醇和甲醇，优选为丙酮。本发明能够有效控制所述药物的质量，使所述药物质量达到稳定、可控、高效及安全，是对产品的投料要求及原料的质量控制严格，克服现有技术的不足，提高产品的质量、疗效、生物利用度，更好的满足医疗的需要。
文档编号G01N30/90GK103033585SQ20111030356
公开日2013年4月10日 申请日期2011年9月30日 优先权日2011年9月30日
发明者胡小虎, 王锁刚, 张琼 申请人:西安千禾药业有限责任公司
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