专利名称：有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法
技术领域：
本发明属于氯霉素滴眼液的检测方法，特别属于含有叔丁基氢醌(TBHQ) 的氯霉素滴眼液的检测方法。
技术背景氯霉素滴眼液是一种眼部常用的药品，曾经作为OTC甲类药品在市场上流 通使用，其主要成份为氯霉素、缓冲液、抑菌剂、水，也有在氯霉素滴眼液中 加入玻璃酸钠、甘油以增强粘度，改善在眼部的保留时间。《中国药典》2005年 版二部中第778页公开了氯霉素滴眼液的检测方法，检测项目包括性状项、鉴 别项、检査项、含量测定项、类别项、规格项、贮藏项，在检查项中包括PH值 项、有关物质项、其它项的检测，在鉴别项中所提供的两种鉴别方法均为主药 氯霉素的鉴别方法，方法l为颜色反应，方法2为高效液相色谱法。药品通常的有效期或保质期为2年，而氯霉素滴眼液的有效期只能达到8 一12个月，这是由于氯霉素滴眼液中氯霉素容易分解成氯霉素二醇物、对硝基 苯甲醛，氯霉素二醇物及对硝基苯甲醛对眼睛有较强的剌激性，影响患者的使 用。通过研究发现，通过对氯霉素滴眼液中物质成份进行调整，可以使氯霉素 滴眼液的有效期提高至2年以上，这些物质成份直接影响氯霉素滴眼液的有效 期，对氯霉素滴眼液的质量起着重要作用，有些物质成份还有一定的辅助治疗 作用，但目前中国药典所记载的氯霉素滴眼液的检测方法中对这些物质没有进 行鉴别或者含量测定，存在着一定的缺陷。 发明内容本发明所要解决的技术问题是提供完整的有效期长的氯霉素滴眼液检测方法。
本发明解决技术问题的技术方案为有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法， 包括中国药典中氯霉素滴眼液所有检测项目，在鉴别项中，增加了叔丁基氢醌 的鉴别方法。
所述的叔丁基氢醌的鉴别方法为取氯霉素滴眼液l一5毫升，加入l一5 滴重量浓度为25—30%的二甲胺水溶液，溶液由淡红色变成红色。
由于叔丁基氢醌在氯霉素滴眼液中的重量浓度为0. 03%左右，为了更好的对 氯霉素滴眼液中叔丁基氢醌的用量进行控制，还可利用高效液相法、气相色谱 法测定叔丁基氢醌的含量。
所述的高效液相法为取氯霉素滴眼液适量，用无水甲醇稀释成每毫升溶液 中约含有叔丁基氢醌20 wg的溶液，注入高效液相色仪，记录色谱图，色谱条 件为以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相为体积比为1: l一 1.5的乙腈、重量浓度为1%乙酸溶液，检测波长280mn;
另取叔丁基氢醌对照品适量，同法测量，以外标法计算氯霉素滴眼液中叔 丁基氢醌的含量。
当采用高效液相色谱法测定叔丁基氢醌的含量后，还可在氯霉素滴眼液检 测方法的鉴别项中增加高效液相色谱鉴别方法，具体为在含量测定项下的叔 丁基氢醌的测定中，氯霉素滴眼液中的叔丁基氢醌峰保留时间应与叔丁基氢醌 对照品的保留时间一致。
所述的气相色谱法为，取氯霉素滴眼液适量，用乙醇稀释成每毫升溶液中 约含有叔丁基氢醌20ug的溶液，注入气相色谱仪，记录色谱图，色谱条件为 以OV-IOI为填充剂的弹性石英毛细管柱；检测器为氢火焰离子化检测器，以流 速为30 — 50/秒的氢气为载气，柱温为22(TC，进样品26(TC，检测器260°C。分流化为10: 1。
另取叔丁基氢醌对照品适量，同法测量，以外标法计算氯霉素滴眼液中叔 丁基氢醌的含量。
为了避免叔丁基氢醌检测过程中主药氯霉素的干扰，可以在检测方法中增 加预处理步骤，所述的预处理步骤为取氯霉素滴眼液，加入混合菌种，在30 一35'C保温搅拌不小于30分钟，过滤沉淀，即可，氯霉素滴眼液与混合菌种体 积比为100: 0.5-5。
混合菌种可以选择性针对氯霉素滴眼液中氯霉素产生黄色沉淀，而不影响 氯霉素滴眼液中其它的物质成份。
所述的混合菌种为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CGMCC 1.794、 粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens) CGMCC 1.203、大肠埃希氏菌(Escherichia coli) CGMCC 1.1453、其扩大培养液混合的体积比为6-10: 1-10: 2-8。
申请人认为叔丁基氢醌作为抗氧化剂，具有很强的清除溶液中自由基的作 用，通过对氯霉素滴眼液中自由基的消除，能够使氯霉素滴眼液有效期达到2 年以上，同时还有一定的保健治疗作用，因此在中国药典的鉴别项中增加叔丁 基氢醌的鉴别方法，能够更加有效的提高中国药典中氯霉素滴眼液检测的完整 性。
由于在氯霉素滴眼液中增加了叔丁基氢醌能够提高氯霉素滴眼液的稳定 性，故可以将中国药典中氯霉素的标示量规定为85 — 115%，而不是现行规定的 标示量大于85%即为合格产品，从而避免部分生产厂家采用多加主药氯霉素的形 式使氯霉素滴眼液在8 — 12个月的有效期内标示量达标，但导致氯霉素滴眼液 的副作用加大。
由于药品的有效期目前采取备案制度，不同厂家的相同产品的有效期经常 不一致，从而使消费者产生困惑，为此，在中国药典的氯霉素滴眼液的检测项中增加有效期项，并将有效期定为2年。
本发明与现有技术相比，将氯霉素滴眼液中对有效期有影响的叔丁基氢醌 检测出来，从而使氯霉素滴眼液的有效期能够达到2年以上，有利于氯霉素滴 眼液的检测标准统一，便于厂家的生产、销售，以及消费者使用。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明做详细的说明。
所述的氯霉素滴眼液的样品通过以下方法进行制备。
取氯霉素2.5克，硼酸1.5克，硼砂0.5克，氯化钠6.5克，叔丁基氢醌
0. 3克，用水加到1000毫升即可。
所述的叔丁基氢醌对照品从中检所购买。 实施例1:
取氯霉素滴眼液1毫升，加入1滴重量浓度为25%的二甲胺水溶液，溶液由
淡红色变成红色。 实施例2:
取氯霉素滴眼液2毫升，用无水甲醇稀释成每毫升溶液中约含有叔丁基氢 醌20ug的溶液，注入高效液相色仪，记录色谱图，色谱条件为以十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相为体积比为l: l的乙腈、重量浓度为 1%乙酸溶液，检测波长280nm;
另取叔丁基氢醌对照品适量，同法测量，以外标法计算氯霉素滴眼液中叔 丁基氢醌的含量。
实施例3:
a)混合菌种的制备 、 取多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa) CGMCC 1.794、粘质沙雷氏菌
(Serratiamarcescens) CGMCC 1.203、大肠埃希氏菌(Escherichiacoli) CGMCC
1. 1453、其扩大培养液混合的体积比为6: 1: 2。(每毫升液体中含有2X107个活性菌体以上)。
b)将混合菌种按照体积比1: 50用水稀释，将稀释好的混合菌种按照氯霉
素滴眼液样品体积的W(V/V)加入，在30—35'C保温搅拌30分钟，过滤黄色沉 淀，取滤清液lml，作为氯霉素滴眼液样品，按实施例1的方法进行检测。
a) 混合菌种的制备为
取多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa) CGMCC 1.794、粘质沙雷氏菌 (Serratiamarcescens) CGMCC 1.203、大肠埃希氏菌(Escherichiacoli) CGMCC 1.1453、其扩大培养液混合的体积比为5: 5.: 4。(每毫升液体中含有2X107个 活性菌体以上)，
b) 将混合菌种按照体积比1: 50用水稀释，将稀释好的混合菌种按照氯霉 素滴眼液样品体积的2Q/。(V/V)加入，在30—35'C保温搅拌30分钟，过滤黄色沉 淀，取滤清液，取滤清液2mL，按实施例2的方法进行检验。
实施例3与实施例1相比，显色更加明显。
实施例4与实施例2相比，由于没有原料氯霉素的影响，叔丁基氢醌(TBHQ) 的峰更容易分辨。
上面结合实施例对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受 上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质 性的改进，或未经改进将本发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均 在本发明的保护范围之内。
权利要求
1、有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，包括中国药典中氯霉素滴眼液所有检测项目，其特征在于在鉴别项中，增加了叔丁基氢醌的鉴别方法。
2、 根据权利要求1所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在 于所述的叔丁基氢醌的鉴别方法为取氯霉素滴眼液l一5毫升，加入l一5滴重量浓度为25 — 30%的二甲胺水溶液，溶液由淡红色变成红色。
3、 根据权利要求1所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在于在含量测定项中，增加叔丁基氢醌含量的测定方法。
4、 根据权利要求3所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在于所述的叔丁基氢醌含量的测定方法为高效液相法、气相色谱法。
5、 根据权利要求4所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在 于所述的高效液相法为取氯霉素滴眼液适量，用无水甲醇稀释成每毫升溶液 中含有叔丁基氢醌18-22"g的溶液，注入高效液相色仪，记录色谱图，色谱条 件为以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相为体积比为1: l一 1.5的乙腈、重量浓度为1%乙酸溶液，检测波长280nm;另取叔丁基氢醌对照品适量，同法测量，以外标法计算氯霉素滴眼液中叔 丁基氢醌的含量。
6、 根据权利要求5所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在 于在氯霉素滴眼液检测方法的鉴别项中增加高效液相色谱鉴别方法，具体为-在含量测定项下的叔丁基氢醌的测定中，氯霉素滴眼液中的叔丁基氢醌峰保留 时间应与叔丁基氢醌对照品的保留时间一致。
7、 根据权利要求1所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在 于在检测方法中增加预处理步骤，所述的预处理步骤为取氯霉素滴眼液， 加入混合菌种，在30—35'C保温搅拌不小于30分钟，过滤沉淀，即可，氯霉素滴眼液与混合菌种体积比为100: 0.5-5。
8、 根据权利要求7所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在 于所述的混合菌种为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa) CGMCC 1.794、 粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens) CGMCC 1.203、大肠埃希氏菌(Escherichia coli) CGMCC 1.1453、其扩大培养液混合的体积比为6-10: 1-10: 2-8。
9、 根据权利要求1所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在 于所述的氯霉素的标示量为85 — 115%。
10、 根据权利要求1所述的有效期长的氯霉素滴眼液的检测方法，其特征在于在中国药典的氯霉素滴眼液的检测项目中增加有效期项，并将有效期定为2年。
全文摘要
本发明公开了有效期长氯霉素滴眼液的检测方法，包括中国药典中氯霉素滴眼液所有检测项目，在鉴别项中，增加了叔丁基氢醌的鉴别方法。本发明与现有技术相比，将氯霉素滴眼液中对有效期有影响的叔丁基氢醌检测出来，从而使氯霉素滴眼液的有效期能够达到2年以上，有利于氯霉素滴眼液的检测标准统一，便于厂家的生产、销售，以及消费者使用。
文档编号G01N33/15GK101216475SQ20081001919
公开日2008年7月9日 申请日期2008年1月16日 优先权日2008年1月16日
发明者南 方 申请人:南 方
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