专利名称：一种抗真菌乳膏的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种乳膏制剂的质量检测方法，具体涉及一种抗真菌乳膏的质量检测方法。
背景技术：
由于皮肤感染多为真菌感染，�：喜⑾妇腥綶1]，单用一种抗真菌药物难以达到治疗效果。根据这一特点目前对于皮肤的感染常选用抗真菌药硝酸益康唑和氨基苷类抗生素、硫酸庆大霉素，以及激素地塞米松磷酸钠配伍的肤宁乳膏，用于神经性皮炎、皮肤搔痒等症。肤宁乳膏处方为硝酸益康唑10g，硫酸庆大霉素10g，地塞米松磷酸钠O. 6g，甲液(硬脂酸60g,司盘6016g,十八醇60g,液状石腊90g,白凡士林60g),乙液(聚山梨脂8044g, 甘油100g，山梨酸2g,加蒸馏水至IOOOg.)，将甲、乙两液分别水浴加热至80°C左右，在搅拌下将乙液缓缓加入甲液，边加边搅拌，混抅后取出，继续搅拌冷却至约50°C左右，按比例将硝酸益康唑，硫酸庆大霉素，地塞米松磷酸钠等加入其中，继续搅拌至冷凝，即得。有多个厂家生产肤宁乳膏，但肤宁乳膏作为一种运用于临床的抗真菌药物，需制定确实可行的质量控制方法以保证产品质量和临床疗效。利用光谱学的原理和实验方法以确定物质的结构和化学成分的分析方法称为光谱分析法。各种结构的物质都具有自己的特征光谱，光谱分析法就是利用特征光谱研究物质结构或测定化学成分的方法。紫外可见吸收光谱法是研究分子吸收190-750nm波长范围内的吸收光谱。紫外可见吸收光谱主要产生于分子中价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法，通过测定分子对紫外可见光的吸收，可以鉴定和测定大量的无机化合物和有机化合物。物质吸收波长范围在200 760nm区间的电磁辐射能而产生的分子吸收光谱称为该物质的紫外一可见吸收光谱，利用紫外一可见吸收光谱进行物质的定性、定量分析的方法称为紫外——可见分光光度法。导数分光光度法是将通常的吸收光谱进行微分处理，每隔一个波长小间隔Λ λ ( 一般为I 2nm)逐点计算出Λ A/Λ λ的值，绘制ΛΑ/Λ λ λ曲线，得到的图形就是一阶导数光谱。依次可求出高一阶的导数光谱。随着导数阶数的增高，峰数增加，峰宽度变窄，分辨能力提高，有利于重叠谱带及肩峰的分离和鉴别。利用导数分光光度法可消除共存组分的干扰吸收，还可提高测定的灵敏度。目前，利用带有微处理机的分光光度计可以自动计算并直接描绘出一阶、二阶、三阶、四阶等导数光谱。目前药物质量控制多用高效液相HPLC，但是HPLC价格昂贵，维修保养困难，相对于HPLC来说，紫外光谱仪价格便宜，操作简单。目前，尚无在乳膏中检测硝酸益康唑等复杂药物成分的非HPLC方法。
发明内容
本发明目的在于提供一种抗真菌药物肤宁乳膏的质量检测方法，该方法操作简便、成本低，可有效保证肤宁乳膏的质量及其抗真菌的临床疗效。
本发明目的是通过如下技术措施实现的—种肤宁乳膏的质量检测方法，包括对抗真菌有效成分硝酸益康唑的鉴别及其含量的测定，其特征在于对所述硝酸益康唑的鉴别采用薄层色谱鉴别法，具体是取待测肤宁乳膏2g，甲醇20ml，水浴80°C加热搅拌，冰浴冷却，过滤，滤液蒸干，加2ml甲醇溶解作为供试液，精密称取20mg硝酸益康唑样品，2ml甲醇溶解作为对照液，分取5ul点于硅胶板，乙醚展开，碘蒸气显色，进行比较；所述对硝酸益康唑含量的测定是采用三阶倒数光谱法，首先分离提取肤宁乳膏中的硝酸益康唑，精密称取待测肤宁乳膏约lg，加入15ml溶剂，所述溶剂由O. lmol/L的HCL与甲醇以体积比I :9混合而成，水浴80°C加热搅拌至澄清，置冰箱中冷却至低于室温滤过、洗涤三次、每次用IOml所述溶剂，合并滤液至50ml容量瓶中，加所述溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取所述稀释液2. 5ml于25ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀；其次，采用紫外可 见分光光度计、在231nm处用三阶导数法测定硝酸益康唑含量。上述肤宁乳膏的质量检测方法还包括对抗细菌有效成分硫酸庆大霉素进行鉴别，具体是取待测肤宁乳膏O. 5g (含硫酸庆大霉素5mg)加水IOml溶解，沸水浴破乳，趁热加入
O.Iwt% (质量百分比浓度)茚三酮的水饱和正丁醇溶液Iml与吡啶O. 5ml, 100°C水浴加热5min,进行显色。上述肤宁乳膏的质量检测方法还包括对地塞米松磷酸钠进行鉴别，具体是取待测肤宁乳膏IOg(含地塞米松磷酸钠6mg)，加入IOml甲醇，80°C水浴溶解，趁热过滤，滤液冷却后用旋转蒸发仪蒸干，残渣加入Iml硫酸中进行显色。具体地说，一种肤宁乳膏的质量检测方法，是对抗真菌有效成分硝酸益康唑的鉴别及其含量的测定，对抗细菌有效成分硫酸庆大霉素进行鉴别，以及对地塞米松磷酸钠成分进行鉴别；其特征在于对所述硝酸益康唑的鉴别采用薄层色谱鉴别法，具体是取待测肤宁乳膏2g，甲醇20ml，水浴80°C加热搅拌，冰浴冷却，过滤，滤液蒸干，加2ml甲醇溶解作为供试液，精密称取20mg硝酸益康唑样品，2ml甲醇溶解作为对照液，分取5ul点于硅胶板，乙醚展开，碘蒸气显色，进行比较；所述对硝酸益康唑含量的测定是采用三阶倒数光谱法，首先分离提取肤宁乳膏中的硝酸益康唑，精密称取待测肤宁乳膏约lg，加入15ml溶齐U，所述溶剂由O. lmol/L的HCL与甲醇以体积比I :9混合而成，水浴80°C加热搅拌至澄清，置冰箱中冷却至低于室温滤过、洗涤三次、每次用IOml所述溶剂，合并滤液至50ml容量瓶中，加所述溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取所述稀释液2. 5ml于25ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀；其次，采用紫外可见分光光度计、在231nm处用三阶导数法测定硝酸益康唑含量;对硫酸庆大霉素进行鉴别，具体是取待测肤宁乳膏O. 5g (含硫酸庆大霉素5mg)加水IOml溶解，沸水浴破乳，趁热加入O. Iwt% (质量百分比浓度)茚三酮的水饱和正丁醇溶液Iml与吡啶O. 5ml, 100°C水浴加热5min，进行显色；地塞米松磷酸钠进行鉴别，具体是取待测肤宁乳膏IOg (含地塞米松磷酸钠6mg)，加入IOml甲醇，80°C水浴溶解，趁热过滤，滤液冷却后用旋转蒸发仪蒸干，残渣加入Iml硫酸中进行显色。本发明具有如下的有益效果本发明抗真菌肤宁乳膏制剂的质量检测方法操作方便、成本低，其简便、快捷地鉴别出了制剂中的抗真菌有效成分硝酸益康唑及其含量，特别在硝酸益康唑测定中采用了甲醇作为提取溶剂、充分减少了待测液中杂质的干扰，在乙醚中展开、效果非�：茫拊又拾叩愠鱿�。在硝酸益康唑含量测定中采用特定的溶剂既可破乳又可提取出硝酸益康唑。本发明检测方法回收率高，每次都在在百分之九十九以上，平均回收率为100.3%，重现性好；同时精确度高、本发明方法r=0. 9999近似1，与HPLC法相比精确度相当。总之，本发明检测方法准确，专属性、重复性好，操作方便，成本低，本发明为许多不具有条件的学校、医院和小型实验室提供了一种简便的替代方法。
图I为紫外零阶光谱图，a硝酸益康唑b肤宁乳膏c空白基质；横坐标单位波数(nm)，分别为 200. 0,220. 0,240. 0,260. 0,280. 0,300. O,纵坐标为振幅，分别为-O. 025、I. 000、2· 000、2· 500。图2为硝酸益康唑三阶导数光谱图，a硝酸益康唑b肤宁乳膏c空白基质；横坐标单位波数(nm)，分别为200. 0,220. 0,240. 0,260. 0,280. 0,300. O,纵坐标为振幅的导数，分 别为-O. 025、-O. 020、-O. 010,0. 000,0. 010,0. 020,0. 025。
具体实施例方式下面通过实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术人员可以根据上述本发明内容对本发明作出一些非本质的改进和调整。实施例I一种肤宁乳膏的质量检测方法，按以下步骤进行(I)薄层色谱鉴别硝酸益康唑取肤宁乳膏样品2g，甲醇20ml，水浴80°C加热搅拌，冰浴冷却，过滤，滤液蒸干，加2ml甲醇溶解作为供试，精密称取20mg硝酸益康唑样品，2ml甲醇溶解作为对照液，分取5ul点于硅胶g板，乙醚展开，碘蒸气显色，对照液与供试液主斑点在同一位置；(2)鉴别硫酸庆大霉素取肤宁乳膏样品O. 5g(相当于硫酸庆大霉素5mg)加水IOml溶解，沸水浴破乳，趁热加入O. Iwt %茚三酮的水饱和正丁醇溶液Iml与吡啶O. 5ml,100°C水浴加热5min，溶液显蓝紫色；(3)鉴别地塞米松磷酸钠取样品IOg(相当于地塞米松磷酸钠6mg),加入IOml甲醇，80°C水浴溶解，趁热过滤，滤液冷却后用旋转蒸发仪蒸干，残渣加入Iml硫酸显棕红色。(4)三阶倒数光谱法测硝酸益康唑含量I.溶液的制备供试品溶液的制备精密称取样品约lg，加入15ml溶剂(O. lmol/L HCL-甲醇I :9，以体积比计)，水浴80°C加热搅拌至澄清，置冰箱中冷却至低于室温滤过、洗涤三次，每次IOml溶剂，合并滤液至50ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀，精密量取稀释液2. 5ml于25ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀。空白对照液的制备按上述供试品溶液的制备方法制备不含硝酸益康唑的空白样品溶液。对照品溶液的制备精密称取硝酸益康唑10. 2mg,用O. lmol/L HCL-甲醇I :9(体积比)的溶液依法溶解并稀释至于50ml容量瓶，精密量取2. 5ml稀释液至25ml容量瓶中。2.光谱条件与系统适用性实验仪器与试剂UV_2501PC(日本岛津)，分析纯甲醇、正丁醇、盐酸。肤宁乳膏(新桥医院药剂科生产)。硝酸益康唑(批号030208，徐州恩华集团).3.含量测定3. I实验条件的选择
供试液的制备精密称取样品约lg，加入15ml溶剂(O. lmol/L HCL-甲醇I :9)，水浴80°C加热搅拌至澄清，置冰箱中冷却至低于室温滤过、洗涤三次，每次IOml溶剂，合并滤液至50ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀，精密量取稀释液2. 5ml于25ml容量瓶中，力口溶剂至刻度，摇匀。对照液的制备精密称取硝酸益康唑10. 2mg,用O. lmol/L HCL-甲醇I :9的溶液依法溶解并稀释至于50ml容量瓶，精密量取2. 5ml稀释液至25ml容量瓶中。空白液的制备精密称取不含硝酸益康唑的乳膏约lg，加入15ml溶剂(O. lmol/LHCL-甲醇I :9)，水浴80°C加热搅拌与冰箱中冷却到低于室温，滤过，洗涤三次，每次IOml溶剂，室温定容于50ml容量瓶，精密量取2. 5ml稀释液于25ml容量瓶定容，摇匀。3. 2测定波长的选择供试液、对照液、空白液分别以O. lmol/L盐酸-甲醇为空白，在30(T200nm波长范围内扫描，得零阶，三阶光谱图，见图1，图2。由图I可见，在零阶紫外光谱图中，空白基质对硝酸益康唑的吸收干扰较大。三阶导数光谱图在231nm处硝酸益康唑有最大振幅，空白基质几乎无振幅值，可以排除空白基质的影响，因此选定在231nm处用三阶导数法测硝酸益康唑含量。3. 3标准曲线的绘制精称称取干燥至恒重的硝酸益康唑10. 2mg，0. lmol/L盐酸-甲醇(1:9)溶液溶解，定容于50ml容量瓶，分别精密量取稀释液I. 5ml, 2ml, 2. 5ml, 3ml, 3. 5ml,定容到25ml 容量瓶，制得浓度为 12. 24ug/ml，16. 32ug/ml，20. 4ug/m, 24. 48ug/ml，28. 56ug/ml 的溶液，在231nm处测定三阶导数光谱振幅值，浓度与三阶导数值有非�：玫南咝喂叵礐=(D-0. 00010) /0. 000221 r=0. 9999 近似 I。3. 4回收率的测定精密称取几份不同浓度硝酸益康唑，加入到精密称取不含硝酸益康唑的空白乳膏Ig中，加热混匀冷却后，冷却至乳膏成型，加入15ml溶剂(0. lmol/L HCL-甲醇I :9)，水浴80°C加热搅拌至澄清，取出置冰箱中冷却至室温滤过，洗涤三次(每次挑出滤过后的基质再加溶剂破乳过滤)，每次IOml溶剂，合并滤液，室温定容于50ml容量瓶，精密量取2. 5ml稀释液于25ml容量瓶加溶剂至刻度，摇匀，依法测定三阶导数光谱231nm处振幅值，代入标准曲线计算含量，结果见表I:表I硝酸益康唑回收率测定结果(n=3)
权利要求
1.一种肤宁乳膏的质量检测方法，包括对抗真菌有效成分硝酸益康唑的鉴别及其含量的测定，其特征在于对所述硝酸益康唑的鉴别采用薄层色谱鉴别法，具体是取待测肤宁乳膏2g，甲醇20ml，水浴80°C加热搅拌，冰浴冷却，过滤，滤液蒸干，加2ml甲醇溶解作为供试液，精密称取20mg硝酸益康唑样品，2ml甲醇溶解作为对照液，分取5ul点于硅胶板，乙醚展开，碘蒸气显色，进行比较； 所述对硝酸益康唑含量的测定是采用三阶 倒数光谱法，首先分离提取肤宁乳膏中的硝酸益康唑，精密称取待测肤宁乳膏约lg，加入15ml溶剂，所述溶剂由0. lmol/L的HCL与甲醇以体积比I :9混合而成，水浴80°C加热搅拌至澄清，置冰箱中冷却至低于室温滤过、洗涤三次、每次用IOml所述溶剂，合并滤液至50ml容量瓶中，加所述溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取所述稀释液2. 5ml于25ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀；其次，采用紫外可见分光光度计、在231nm处用三阶导数法测定硝酸益康唑含量。
2.如权利要求I所述肤宁乳膏的质量检测方法，其特征在于所述质量检测方法还包括对抗细菌有效成分硫酸庆大霉素的鉴别，具体是取待测肤宁乳膏0. 5g加水IOml溶解，沸水浴破乳，趁热加入0. Iwt% (质量百分比浓度)茚三酮的水饱和正丁醇溶液Iml与吡啶0.5ml, 100°C水浴加热5min,进行显色。
3.如权利要求I或2所述肤宁乳膏的质量检测方法，其特征在于所述质量检测方法还包括对地塞米松磷酸钠进行鉴别，具体是取待测肤宁乳膏IOg (含地塞米松磷酸钠6mg)，加入IOml甲醇，80°C水浴溶解，趁热过滤，滤液冷却后用旋转蒸发仪蒸干，残渣加入Iml硫酸中进行显色。
4.一种肤宁乳膏的质量检测方法，是对抗真菌有效成分硝酸益康唑的鉴别及其含量的测定，对抗细菌有效成分硫酸庆大霉素进行鉴别，以及对地塞米松磷酸钠成分进行鉴别；其特征在于对所述硝酸益康唑的鉴别采用薄层色谱鉴别法，具体是取待测肤宁乳膏2g，甲醇20ml，水浴80°C加热搅拌，冰浴冷却，过滤，滤液蒸干，加2ml甲醇溶解作为供试液，精密称取20mg硝酸益康唑样品，2ml甲醇溶解作为对照液，分取5ul点于硅胶板，乙醚展开，碘蒸气显色，进行比较；所述对硝酸益康唑含量的测定是采用三阶倒数光谱法，首先分离提取肤宁乳膏中的硝酸益康唑，精密称取待测肤宁乳膏约lg，加入15ml溶剂，所述溶剂由0. lmol/L的HCL与甲醇以体积比I :9混合而成，水浴80°C加热搅拌至澄清，置冰箱中冷却至低于室温滤过、洗涤三次、每次用IOml所述溶剂，合并滤液至50ml容量瓶中，加所述溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取所述稀释液2. 5ml于25ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀；其次，采用紫外可见分光光度计、在231nm处用三阶导数法测定硝酸益康唑含量； 对硫酸庆大霉素进行鉴别，具体是取待测肤宁乳膏0. 5g(含硫酸庆大霉素5mg)加水IOml溶解，沸水浴破乳，趁热加入0. Iwt% (质量百分比浓度)茚三酮的水饱和正丁醇溶液Iml与吡啶0. 5ml, 100°C水浴加热5min，进行显色； 地塞米松磷酸钠进行鉴别，具体是取待测肤宁乳膏IOg (含地塞米松磷酸钠6mg)，加入IOml甲醇，80°C水浴溶解，趁热过滤，滤液冷却后用旋转蒸发仪蒸干，残渣加入Iml硫酸中进行显色。
全文摘要
一种肤宁乳膏的质量检测方法，包括对抗真菌有效成分硝酸益康唑的鉴别及其含量的测定，所述对硝酸益康唑含量的测定是采用三阶倒数光谱法，首先分离提取肤宁乳膏中的硝酸益康唑，精密称取待测肤宁乳膏约1g,加入15ml溶剂，所述溶剂由0.1mol/L的HCL与甲醇以体积比19混合而成，水浴80℃加热搅拌至澄清,置冰箱中冷却至低于室温滤过、洗涤三次、每次用10ml所述溶剂，合并滤液至50ml容量瓶中,加所述溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取所述稀释液2.5ml于25ml容量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀；其次，采用紫外可见分光光度计、在231nm处用三阶导数法测定硝酸益康唑含量。本发明检测方法准确，专属性、重复性好，操作方便，成本低。
文档编号G01N30/90GK102735791SQ20121024949
公开日2012年10月17日 申请日期2012年7月18日 优先权日2012年7月18日
发明者冯华, 张倩, 胡荣 申请人:中国人民解放军第三军医大学第一附属医院
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