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专利名称：一种快速鉴别灵芝孢子粉真伪的方法
技术领域：
本发明涉及一种快速鉴别灵芝孢子粉真伪的方法。
背景技术：
灵芝为多孔菌科植物灵芝Ganoderma lucidum(Leyss. Ex. Fr)Karst的干燥子实体，是一种药用真菌。它是中医药学宝库中的珍品，含有多种化学成分，可用于防治慢性支气管炎、神经衰弱、高血脂症、冠心病、肝炎、白细胞减少症和肿瘤等多种疾病。因此如何科学地研究灵芝，合理的应用和正确的评价灵芝是国内外瞩目的重要研究课题。目前对灵芝孢子粉的检测主要针对功效成分腺苷、甘露醇两种指标进行含量测定，但是此两项含量指标只能说明灵芝孢子粉的品质，不能以此作为判定真伪的依据，因此灵芝孢子粉作为粉状样品无法有效进行真伪优劣鉴别。红外光谱技术以及有关技术可以作为中药物质鉴定(别)与质量监控的更为快速、有效的方法。它的根本依据是分子光谱具有指纹性。对于一个混合物体系，分子光谱中峰位、峰形、峰强度则代表着体系中所含相应各种基团的谱峰的叠加，混合物组成的变化，将导致分子光谱整体谱图的变化，因此便构成谱图的宏观指纹性。利用这种宏观指纹性，可以直接地或者稍作数学处理进行物质的鉴定(别)与质量控制。这正是分子光谱宏观指纹法的基础。显然，这是一种既重视微观指纹性又强调宏观指纹性的方法。它充分地利用分子光谱的各种技术以及与化学计量学、计算数学方法及计算机技术相结合来达到目的。分子光谱宏观指纹法的特点是I被测试样的状态无苛求，气态、液态与固态皆可。因此对于中药的各种形态和制剂的测量可以做到不失原本性，无损性。2、简便、快捷，对试样只作物理粉碎压片等简单的处理，无需作十分繁琐的浸取分离过程即可直接测试。3、所用仪器较为通用，测量操作简便，易于推广应用。4、对物质进行的是全组分整体测定，获得的是含有微观指纹性的全貌指纹信息。目前尚无用红外光谱技术对灵芝孢子粉真伪的技术的报道。

发明内容
本发明的目的是提供一种快速鉴别灵芝孢子粉真伪的方法。本发明的技术方案概述如下一种快速鉴别灵芝孢子粉真伪的方法，包括如下步骤(I)样品处理取待鉴别的灵芝孢子粉药材10g，粉碎，过80目筛备用；(2)仪器傅里叶红外光谱仪；(3)空白扫描①压片精密称取干燥的溴化钾细粉200mg置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13_的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒；②扫描将压好的空白片放入扫描室中扫描，保存谱图；(4)标准品扫描①压片将精密称取的3mg灵芝孢子粉标准品和精密称取的200mg干燥的溴化钾细粉，置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，置于直径13_的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成标准品片，目视检查应均匀，无明显颗粒；②扫描将压好的标准品片放入扫描室中扫描，保存谱图；(5)样品扫描①压片将精密称取的3mg步骤(I)获得的样品和精密称取的200mg干燥的溴化钾细粉，置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒；②扫描将压好的样品片放入扫描室中扫描，保存谱图；(6)相似度比较:①将样品谱图与标准品谱图进行相似度比较；②判定标准样品谱图与标准品谱图的相似度应大于O. 95。本发明的优点1、检测快速，样品压片进行红外扫描，进行数据分析，整过过程只需几分钟；2、样品无损样品量只需要3毫克，使用量极少；3、信息全面样品进行全波红外光谱扫描，样品信息完成。


图1为FTIR光谱仪的结构框图。图2为待测灵芝孢子粉红外光谱图与标准品的比较。图2中样品和对照灵芝孢子粉的红外谱图峰形较相似，标准品(图a)与样品(图b)在3543CHT1和3487CHT1的吸收峰强度基本相同。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。灵芝孢子粉标准品购于(中国生物药品检定所2008-1102)实施例1一种快速鉴别灵芝孢子粉真伪的方法，包括如下步骤(I)样品处理取待鉴别的灵芝孢子粉药材10g，粉碎，过80目筛备用；(2)仪器傅里叶红外光谱仪(FTIR)是由光学测量系统，计算机数据处理系统，计算机接口及电子线路系统几个主要部分组成。光学测量系统用来测量收集数据，计算机用来处理数据和控制仪器运行。图1是傅里叶红外光谱仪的结构框图；(3)空白扫描①压片精密称取干燥的溴化钾细粉200mg置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13_的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒；
②扫描将压好的空白片放入扫描室中扫描，保存谱图；(4)标准品扫描①压片将精密称取的3mg灵芝孢子粉标准品和精密称取的200mg干燥的溴化钾细粉，置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，置于直径13_的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成标准品片，目视检查应均匀，无明显颗粒；②扫描将压好的标准品片放入扫描室中扫描，保存谱图；(5)样品扫描①压片将精密称取的3mg步骤(I)获得的样品和精密称取的200mg干燥的溴化钾细粉，置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒；·②扫描将压好的样品片放入扫描室中扫描，保存谱图；(6)相似度比较:①将样品谱图与标准品谱图进行相似度比较；②判定标准样品谱图与标准品谱图的相似度应大于O. 95。见图2。(7)结果表明，待鉴别的灵芝孢子粉药材样品谱图与标准品谱图的相似度应大于O. 95,为真品。分析步骤( I)光谱坐标的变换(透过率O吸光度)红外谱图纵坐标有二种常用表示法，即透射率T与吸光度A。应用软件可以方便地使透射谱与吸收谱之间互相变换。(2)基线校正FTIR光谱仪所取的光谱是数字化了的光谱，它由一系列数据点的吸光度值组成。因此一个谱图可看成是由许多间距很小的直线连接而成，其间距由进行FT时的数据点决定。基线可通过一些数学方法进行校正，根据下述方程可以校正每个波数处的基线Y1(V) = Υ(ν)-(T + Cxv)式中r(P)是原图中波数[处的纵坐标(吸光度)值，F(P)是相应的校正后的纵坐标值。T是与基线漂移有关的数值，C是与该处基线倾斜有关的数值。如果整个光谱只需做水平校正，则C = O、T为常数；如果只做斜度校正，则T = O、C为常数；如果同时做水平与倾斜校正，则T与C均不为O ;如果这部分光谱呈弯曲状，则可通过逐步改变T、C数值而达到校正的目的。通过实验测得的红外谱图的基线有时会发生漂移、倾斜或弯曲，尤其在固体制样的谱图中常会遇到这种情况。基线校正程序首先确定需进行校正的波数范围，在显示屏上显示出O基线位置，再由用户根据显示的谱图基线用键盘调整参数进行校正，直至获得满意的结果为止。(3)归一化在选定某个波数位置后，以谱图中该波数位置吸收最强的吸光度为准，将其它谱图进行拉伸，从而使所有的谱图在该位置吸光度一致。(4)相关系数比较通过使用大量的数学过滤器，不同的谱图特征就得到了强化或者削弱。除了报告相关系数(correlaiton coefficient)以外,还有一个系数(factor)是表示比较的谱图的平均吸收强度同参比谱图的比例的。可以用很多谱图同参比谱图进行相关系数比较，从而得出同参比谱图最相似的谱图。光谱解析1.特征吸收只能与参比光谱图(标准品光谱图)一起使用，他们显示了灵芝孢子粉及其制品有关的主要吸收光谱。例如某些峰的特征，它们与邻近峰的关系，或光谱的其他区
域等等。2.样品吸收光谱应从峰形、峰位置、峰强度三方面与参比光谱进行比对，以确定相应的特征吸收关系，借以判断样品的真实性。3.相似度分析(I)相似度分析工具可以对测试样品谱图与参比谱图(标准品光谱图)相似度关系提供一个明确数指表征；借以辅助判断样品与参比的差异性(2)根据标准定制期所含样品范围得到数据统计分析结果与常规经验性分析，测试灵芝孢子粉与参比标准样品的相似度；如结果发生较大偏低，应考虑样品的真实性。
权利要求
1.一种快速鉴别灵芝孢子粉真伪的方法，其特征是包括如下步骤 (1)样品处理取待鉴别的灵芝孢子粉药材10g，粉碎，过80目筛备用； (2)仪器傅里叶红外光谱仪； (3)空白扫描 ①压片精密称取干燥的溴化钾细粉200mg置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒； ②扫描将压好的空白片放入扫描室中扫描，保存谱图； (4)标准品扫描 ①压片将精密称取的3mg灵芝孢子粉标准品和精密称取的200mg干燥的溴化钾细粉，置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成标准品片，目视检查应均匀，无明显颗粒； ②扫描将压好的标准品片放入扫描室中扫描，保存谱图； (5)样品扫描 ①压片将精密称取的3mg步骤(I)获得的样品和精密称取的200mg干燥的溴化钾细粉，置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，置于直径13_的压膜中，铺布均匀，加压至O. 8Mpa，保持lmin，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒； ②扫描将压好的样品片放入扫描室中扫描，保存谱图； (6)相似度比较 ①将样品谱图与标准品谱图进行相似度比较； ②判定标准样品谱图与标准品谱图的相似度应大于O.95。
全文摘要
本发明公开了一种快速鉴别灵芝孢子粉真伪的方法，包括如下步骤(1)样品处理取待鉴别的灵芝孢子粉药材10g，粉碎，过80目筛备用；(2)仪器傅里叶红外光谱仪；(3)空白扫描；(4)标准品扫描；(5)样品扫描；(6)相似度比较；本发明的优点检测快速，样品压片进行红外扫描，进行数据分析，整过过程只需几分钟；样品无损样品量只需要3毫克，使用量极少；信息全面样品进行全波红外光谱扫描，样品信息完成。
文档编号G01N21/35GK102998279SQ20121056207
公开日2013年3月27日 申请日期2012年12月21日 优先权日2012年12月21日
发明者李星芝, 王俊全, 李凡 申请人:天津优标技术检测服务有限公司