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专利名称：一种快速区别两种相似药材的判断方法
技术领域：
本发明涉及一种药材判断方法，尤其涉及一种快速区别两种相似药材的判断方法。
背景技术：
川西猜芽菜(5keiiiia mussotii /7TaflcA)为龙胆科猜芽菜属植物,为藏药特有药材，收载于中华人民共和国卫生部《药品标准藏药第一部》(1992年版第六页)，其性味为甘、苦、凉、糙。功能主治为清肝利胆、退诸热。用于黄疸型肝炎，病毒性肝炎，血病。青海药品标准(1992年版，第17页)的藏茵陈中收载了川西獐芽菜和抱茎獐芽菜Franchetiana其性味为苦、寒。功能主治为清热消炎，舒肝利胆。用于急性或慢性肝炎、黄疸型肝炎。而中国藏药中记载的藏药药材一猜芽菜(藏语蒂达)其正品为川西猜芽菜和当药diluta (Turcz. )Benth et Hook. f. (S. chinensis Franch. ) ) 单方与组方药物入药，主要用于肝、胆系统疾病的治疗。我国卫生部部颁的藏药标准成方制剂中，收载的治疗肝胆系统疾病及抗病毒药品中所用的獐芽菜应为川西獐芽菜，主产青海玉树和川西北。但由于川西獐芽菜和抱茎獐芽菜两种药材的生物学特征极为相近，尤其是干燥药材，其形态几乎无法分辨，其药品标准不能有效鉴定和区别两种药材的差异，尤其是缺乏对干燥原料药材形态区别，造成入药药材的混淆。由于两种药材的功能和性味有一定差异，因此造成药品疗效不稳定，民间用药不对症的情况。因此，本发明的目的旨在建立一种快速、专属的识别两种药材的方法。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种保证用药正确性的快速区别两种相似药材的判断方法。 为解决上述问题，本发明所述的一种快速区别两种相似药材的判断方法，包括以下步骤
⑴精密吸取O. 232mg/ml的獐牙菜苦苷标准品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、20. 0μ 1，然后分别进样，采用高效液相色谱仪以甲醇-O. 02%磷酸溶液为流动相，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，在检测波长24(T260nm，理论塔板数按獐牙菜苦苷峰计算不低于3000的条件下进行分析，并测定积分峰面积，最后以峰面积积分值为纵坐标，獐牙菜苦苷含量为横坐标，绘制标准曲线，并计算得到獐牙菜苦苷的回归方程Y=96470. 4χ +226293. 15，r=0. 9998 ；
⑵精密吸取O. 61mg/ml的龙胆苦苷标准品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、20. O μ 1，然后分别进样，采用高效液相色谱仪以甲醇-O. 02%磷酸溶液为流动相，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，在检测波长24(T260nm，理论塔板数按龙胆苦苷峰计算不低于3000的条件下进行分析，并测定积分峰面积，最后以峰面积积分值为纵坐标，龙胆苦苷含量为横坐标，绘制标准曲线，并分别计算得到龙胆苦苷的回归方程Y= —294961. 8x + 2003098. 5，r=0. 9992 ；
(3)按常规方法分别对獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的回归方程依次进行精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验以验证该回归方程的可行性；
⑷采集獐牙菜样品将采集或收购的已阴干干燥、拣选除杂后的獐牙菜经粉碎过四号筛后，取疒3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 ml，密塞，称定重量，在55 75°C温度下加热回流30min，室温下冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过
O.45 μ m滤膜除去杂质，精密量取10 μ I进样即得；
(5)对所述獐牙菜样品采用高效液相色谱仪以甲醇-O.02%磷酸溶液为流动相，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，在检测波长24(T260nm，理论塔板数按獐牙菜苦苷峰、龙胆苦苷峰计算不低于3000的条件下进行测试，并利用所述獐牙菜苦苷的回归方程、龙胆苦苷的回归方程分别得到所述獐牙菜样品中的獐牙菜苦苷含量和龙胆苦苷含量；
(6)当獐牙菜苦苷含量均低于1%且龙胆苦苷含量均高于1%时，则该獐牙菜样品为川西獐牙菜；当獐牙菜苦苷含量均高于2%且龙胆苦 苷含量均低于1%时，则该獐牙菜样品为抱茎獐牙菜。本发明与现有技术相比具有以下优点1、本发明利用高效液相色谱仪进行两种相似药材的化学成分分析，根据化合物成分的不同分布，建立了两种药材快速、准确的区分方法，从而保证了用药的正确性。2、通过实际验证，川西獐牙菜和抱茎獐牙菜同属龙胆科獐芽菜属植物，但其药效成分獐牙菜苦苷、龙胆苦苷测定结果表明川西獐牙菜中药效成分龙胆苦苷含量分布均高于1%，獐牙菜苦苷则低于1%，抱茎獐牙菜中药效成分獐牙菜苦苷含量分布为29Γ16%，而龙胆苦苷则低于1%。换言之，根据两种药效成分的含量高低，可以判断两种獐牙菜的归宿，川西獐牙菜中龙胆苦苷含量高，则獐牙菜苦苷含量低。抱茎獐牙菜中獐牙菜苦苷含量高，则龙胆苦苷含量低。该结果为两种药材的快速区别提供了可靠的鉴别依据，解决了两种植物外观形态相似，药材混淆的根本问题。3、本发明方法简便、快捷、准确。


下面结合附图对本发明的具体实施方式
作进一步详细的说明。图1为本发明中獐牙菜苦苷标准品溶液的标准曲线。图2为本发明中龙胆苦苷标准品溶液的标准曲线。
具体实施例方式一种快速区别两种相似药材的判断方法，包括以下步骤
⑴精密吸取O. 232mg/ml的獐牙菜苦苷标准品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、20. 0μ 1，然后分别进样，采用高效液相色谱仪以甲醇-O. 02%磷酸溶液为流动相，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，在检测波长24(T260nm，理论塔板数按獐牙菜苦苷峰计算不低于3000的条件下进行分析，并测定积分峰面积，最后以峰面积积分值为纵坐标，獐牙菜苦苷含量为横坐标，绘制标准曲线(参见图1)，并计算得到獐牙菜苦苷的回归方程Y=96470. 4x + 226293. 15，r=0. 9998，表示獐牙菜苦苷在O. 93 μ g 4. 64 μ g范围内有良好的线性关系(表I)。表 I 獐牙菜苦苷线性关系试验
权利要求
1.一种快速区别两种相似药材的判断方法，包括以下步骤⑴精密吸取O. 232mg/ml的獐牙菜苦苷标准品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、 20. 0μ 1，然后分别进样，采用高效液相色谱仪以甲醇-O. 02%磷酸溶液为流动相，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，在检测波长24(T260nm，理论塔板数按獐牙菜苦苷峰计算不低于3000的条件下进行分析，并测定积分峰面积，最后以峰面积积分值为纵坐标，獐牙菜苦苷含量为横坐标，绘制标准曲线，并计算得到獐牙菜苦苷的回归方程Y=96470. 4χ + 226293. 15，r=0. 9998 ；⑵精密吸取O. 61mg/ml的龙胆苦苷标准品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、.20.O μ 1，然后分别进样，采用高效液相色谱仪以甲醇-O. 02%磷酸溶液为流动相，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，在检测波长24(T260nm，理论塔板数按龙胆苦苷峰计算不低于3000的条件下进行分析，并测定积分峰面积，最后以峰面积积分值为纵坐标，龙胆苦苷含量为横坐标，绘制标准曲线，并分别计算得到龙胆苦苷的回归方程Y= — 294961. 8x + 2003098. 5，r=0. 9992 ；(3)按常规方法分别对獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的回归方程依次进行精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验以验证该回归方程的可行性；⑷采集獐牙菜样品将采集或收购的已阴干干燥、拣选除杂后的獐牙菜经粉碎过四号筛后，取疒3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇.50 ml，密塞，称定重量，在 55 75°C温度下加热回流30min，室温下冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过O.45 μ m滤膜除去杂质，精密量取10 μ I进样即得；(5)对所述獐牙菜样品采用高效液相色谱仪以甲醇-O.02%磷酸溶液为流动相，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，在检测波长24(T260nm，理论塔板数按獐牙菜苦苷峰、龙胆苦苷峰计算不低于3000的条件下进行测试，并利用所述獐牙菜苦苷的回归方程、 龙胆苦苷的回归方程分别得到所述獐牙菜样品中的獐牙菜苦苷含量和龙胆苦苷含量；(6)当獐牙菜苦苷含量均低于1%且龙胆苦苷含量均高于1%时，则该獐牙菜样品为川西獐牙菜；当獐牙菜苦苷含量均高于2%且龙胆苦苷含量均低于1%时，则该獐牙菜样品为抱茎獐牙菜。
全文摘要
本发明涉及一种快速区别两种相似药材的判断方法，该方法包括以下步骤⑴精密吸取不同体积的獐牙菜苦苷标准品溶液，采用高效液相色谱仪进行分析、绘制标准曲线、计算回归方程；⑵精密吸取不同体积的龙胆苦苷标准品溶液，采用高效液相色谱仪进行分析、绘制标准曲线、计算回归方程；⑶分别对獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的回归方程进行验证；⑷采集獐牙菜样品；⑸对獐牙菜样品进行测试，分别得到獐牙菜样品中的獐牙菜苦苷含量和龙胆苦苷含量；⑹当獐牙菜苦苷含量均低于1%且龙胆苦苷含量均高于1%时，则该獐牙菜样品为川西獐牙菜；当獐牙菜苦苷含量均高于2%且龙胆苦苷含量均低于1%时，则该獐牙菜样品为抱茎獐牙菜。本发明简便、快捷、可保证用药正确性。
文档编号G01N30/88GK103033584SQ20121055107
公开日2013年4月10日 申请日期2012年12月18日 优先权日2012年12月18日
发明者纪兰菊, 孙洪发, 张小龙, 张海涛, 冯丽娟 申请人:中国科学院西北高原生物研究所