专利名称：用于诊断白血病的试剂盒和系统的制作方法
技术领域：
本发明属于医药领域，具体而言涉及一种用于诊断白血病的试剂盒。
背景技术：
白血病是造血系统的恶性肿瘤，又叫“血癌”，在儿科恶性肿瘤的发病率中居第一位，它的死亡率在导致儿童及35岁以下成年人死亡的恶性肿瘤中排首位，是威胁儿童和青壮年生命健康最常见的恶性肿瘤。目前我国白血病的发病率，在各种肿瘤发病率中位居6-8 位。白血病的病源是由于细胞内DNA的变异形成的骨髓中造血组织的不正常工作。骨髓中的干细胞每天可以制造约5 40万个/I立方毫米的红血球和7400个/I立方毫米白血球，而白血病病人过分生产白血球且多数的白细胞是不成熟的，为幼稚细胞，其存活期比正常情况下长。尽管这种白细胞数量很大，然而却不能像正常白细胞那样抗感染。体内这种白细胞的增多，会直接影响一些重要器官的功能，影响正常健康血细胞的产量。由于肿瘤细胞恶性增生，抑制红细胞和血小板止血的产生，甚至没有足够的正常白细胞抗感染，很容易受擦伤、出血、感染。而且过多的白细胞也妨害骨髓的其他工作，这使得骨髓生产其它血细胞的功能降低。白血病可以扩散到淋巴结、脾、肝、中枢神经系统和其它器官，产生不同症状。这些症状，主要跟骨髓内造血功能的破坏有关，如持续发烧，感染经久不愈，贫血，点状出血等； 还有血癌细胞穿渗组织引起的症状，如淋巴结肿大，骨痛或关节痛，牙龈肿胀，肝脾肿大等。白血病的诊断非常困难，一般需要结合临床表现、体格检查和实验室化验三方面综合判断才能最终确诊。白细胞计数可以在一定程度上反映骨髓造血功能异常的风险，但单单此项检查远远不能达到确诊的需要。通常而言，要确诊白血�。庵苎旌凸撬璐┐倘⊙觳舛际潜匦氲摹５牵捎诠撬璐┐滩⒉灰孜Ｈ怂邮埽虼四壳傲俅参薹ㄌ峁┮恢职籽》缦赵ぞ氖侄危币泊蟠笞璋税籽〉脑缙诜⑾旨敖槿胫瘟啤５辈∪瞬炀醯绞保丫肓税籽》⒉〉闹泻笃�。此外，血液中癌细胞的微小残留是预后的一个重要指标，对于微小残留病的准确检测，对指导医生的下一步治疗有重要意义。然而目前临床常用的分子生物学检测方法(PCR)所能达到的灵敏度仅为每IO4个血细胞含有一个癌细胞，限制了对微小残留病的检测水平。菁染料是一种常用染料，具有独特的光敏感性质，几个世纪以来，伴随其独特理化、光学性质被发现，逐渐被用做显影剂，光敏剂，非线性光学材料等。
发明内容
本发明的一个方面提供一种用于诊断白血病的试剂盒。根据本发明的试剂盒包括试剂I和试剂II，其中试剂I为pH值为6 8的缓冲液，试剂II为菁染料，所述菁染料具体为下式I所示的化合物
权利要求
1.一种用于诊断白血病的试剂盒，包括试剂I、试剂II和试剂III，其中所述试剂I为pH值为6 8的缓冲液，所述试剂II为式I的化合物，所述试剂III为极性大于4. O的有机溶剂 其中=R1为C1-C6的烷基、苯基、烷基取代的苯基；R2、R3、R4和R5独立地选自H或C1-C6的烧基，或者R2和R3与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构,或者R4和R5与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构；R6和R7独立地选自C1-C6的烷基；Y为卤素；X1; X2独立选自C、O、S、Se、Te。
2.如权利要求I所述的试剂盒，其中所述缓冲液为含有一价金属离子的缓冲液。
3.如权利要求I或2所述的试剂盒，所述缓冲液选自磷酸钠-磷酸氢钠缓冲液、磷酸钾-磷酸氢钾缓冲液、巴比妥钠-盐酸缓冲液或柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
4.如权利要求I所述的试剂盒，其中R1选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戍基、异戍基、正己基、异己基、苯基、甲基苯基或_■甲基苯基。
5.如权利要求I所述的试剂盒，其中R2、R3>R4和R5独立地选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基或异己基。
6.如权利要求I所述的试剂盒，其中在R2和R3与它们所连接的碳原子形成环结构的情况下，所述环结构为饱和环或不饱和环，含有或不含有N或S原子。
7.如权利要求I所述的试剂盒，其中在R4和R5与它们所连接的碳原子形成环结构的情况下，所述环结构为饱和环或不饱和环，含有或不含有N或S原子。
8.如权利要求I所述的试剂盒，其中Y为氟、氯、溴或碘。
9.如权利要求I所述的试剂盒，其中所述试剂III选自甲基异丁酮、四氢呋喃、乙酸乙酯、异丙醇、氯仿、甲基乙基酮、二恶烷、吡唆、丙酮、硝基甲烷、乙腈、二甲基甲酰胺、甲醇、乙二醇、二甲亚砜或它们的混合物。
10.一种用于诊断白血病的系统，包括权利要求1-9中任一项所述的试剂盒以及荧光光谱仪或紫外-可见光吸收光谱仪。
全文摘要
本发明提供一种用于诊断白血病的试剂盒和系统，其以受试者的外周血为检测对象，不需进行骨髓穿刺即可得到准确的诊断结果，不仅对患者创伤�。伊槊舳雀撸匾煨郧浚鲂枰徊饺旧�、无洗涤，操作简单，检测时间短，便于大规模筛查与追踪治疗。
文档编号G01N21/64GK102706842SQ201210164310
公开日2012年10月3日 申请日期2012年5月24日 优先权日2012年5月24日
发明者向俊锋, 唐亚林, 姜薇, 孙红霞, 尚倩, 杨千帆, 盖伟 申请人:中国科学院化学研究所
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