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ͼ5ÊÇÃÀ¹úMedyl¹«Ë¾¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30½ºÌå½ðÃâÒß²ãÎö¼ì²âÊÔ¼ÁÌõÁéÃô¶ÈºÍÌØÒìÐԵIJâÊÔ½á¹û¡£
ͼ6ÊǶԱ£´æ²»Í¬ÄêÏÞ(·Ö±ðΪ1985Äê¡¢1995ÄêºÍ1998ÄêµÄÈ˾«°ß£¬·Ö±ð±àºÅΪһ¡¢¶þ¡¢ÈýºÅ)µÄ³Â¾ÉÈ˾«°ß½øÐмìÑ飬Óñ¾·¢Ã÷ʵʩÀý2ÖÆµÃµÄ²úÆ·(A)£¬Í¬Ê±Óë¼ÓÄôóIND¹«Ë¾(B)¡¢ÃÀ¹úAcon(ÔÚº¼Öݼӹ¤ÖÆ×÷)(C)¡¢Medyl(D)¡¢PanProbe(E)¹«Ë¾µÄ¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30½ºÌå½ðÊÔ¼ÁÌõ½øÐвⶨµÄ¼ìÑé½á¹û¡£
ͼ7ÊÇ´ÓÈËѪºÛ¡¢³£¼ûÊ®ÖÖ¶¯Îï(Öí¡¢Ñò¡¢Å£¡¢Âí¡¢Â¿¡¢¹·¡¢Íᢼ¦¡¢Ñ¼¡¢¶ì)ѪºÛ¼°Æä»ìºÏѪºÛ¡¢¿Õ°×¼ì²Ä¡¢È˾«°ß¡¢ÈËÍÙÒº°ß¡¢È˳õÈé°ß¡¢ÒõµÀ·ÖÃÚÎïÒÔ¼°À´×Ô°¸¼þµÄÈËѪºÛµÈ¹²32·ÝÖÐËæ»ú³éÈ¡20·Ý£¬Óñ¾·¢Ã÷ʵʩÀý2ÖÆµÃµÄ²úÆ·A¼ì²âµÄ½á¹û¡£
ͼ8ÊDZ¾·¢Ã÷¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30½ºÌå½ðÃâÒß²ãÎö¼ì²âÊÔ¼ÁÌõµÄ×î¼ÑʾÒâͼ¡£
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ʵʩÀý1 ²úÉú¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30µ¥¿Ë¡¿¹ÌåµÄCGMCC 0971ÔÓ½»Áöϸ°ûÖêA7ºÍCGMCC 0972ÔÓ½»Áöϸ°ûÖêH3F3µÄÖÆ±¸°´ÕÅçù¡¢ÑϺ졢ÍõÏã¾Õ¡¶Öйú·¨Ò½Ñ§ÔÓÖ¾¡·1990£»5(2)72-76Ò³¡°·ÖÃÚ¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30µ¥¿Ë¡¿¹ÌåÔÓ½»Áöϸ°ûϵµÄ½¨Á¢ºÍ³õ²½Ó¦Óá±Ò»ÎĽøÐС£¾¼ì²â£¬ÖƱ¸³öÁËÖ»ÓëÈ˾«Òº¡¢´¿»¯ÈËP30ÒººÍÈËǰÁÐÏÙÒºÆð·´Ó¦µÄ¶à¸öÔÓ½»Áöϸ°ûÖ꣬ÆäÖаüÀ¨CGMCC 0971ÔÓ½»Áöϸ°ûÖêA7ºÍCGMCC 0972ÔÓ½»Áöϸ°ûÖêH3F3¡£²úÉú¿¹Ìå¾ùÊÇСÊóIgG1ÑÇÀ࣬Ч¼Û·Ö±ðÊÇ£¬H3F3ÅàÑøÉÏÇå320±¶£¬¸¹Ë®1.28¡Á105±¶£»A7ÅàÑøÉÏÇå32±¶£¬¸¹Ë®1.0¡Á104±¶¡£
ʵʩÀý2 ¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30½ºÌå½ðÃâÒß²ãÎö¼ì²âÊÔ¼ÁÌõµÄÖÆ±¸¢Ù¸¹Ë®µ¥¿¹ÖƱ¸´ÓÒºµªÖÐÈ¡³öA7ºÍH3F3ϸ°ûÖ꣬³£¹æ·½·¨¸´ËÕ²¢ÅàÑø¡£·Ö±ð½«ÅàÑøºÃµÄÊʵ±ÊýÁ¿µÄA7ºÍH3F3ÅàÑøÏ¸°û×¢ÈëСÊó¸¹Ç»ÄÚ£¬7¡«10Ììºó»ò¹Û²ì¿ÉÒÔÔ×ɱʱ´¦ËÀСÊó¡¢·Ö±ðÊÕ¼¯Ð¡Êó¸¹Ë®¡£
¢Ú·ÖÀë´¿»¯µÄ¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30¿¹ÌåÒÔ³£¹æÕýÐÁËá¼ÓÁòËáï§·¨»òÕßÇ׺ͲãÎö·¨½øÐУ¬ºóÕß¾ßÌåÊÇСÊó¸¹Ë®ÖмÓÈë1/10Ìå»ýµÄ1.0mol/L Tris-HCI£¬pH 8.0»º³åÒº£¬¶øºóÔÙ¼ÓÈë±¥ºÍÁòËáï§ÈÜÒº»ò¹ÌÌåÁòËáï§ÖÁ50£¥±¥ºÍ¶È£¬·ÅÖÃ2hrºó£¬ÀëÐÄ£¬³ÁµíÒÔÉúÀíPBS(20mmol/LÁ×ËáÇâ¶þÄÆºÍÁ×Ëá¶þÇâÄÆ£¬0.1mol/L NaCI£¬pH7.4)»º³åÒºÖØÈܲ¢¶Ô¸Ã»º³åÒº³ä·Ö͸Îö¡£ÒÔ͸Îö»º³åҺƽºâHiTrapTMProtein GHPÖù£¬Í¸Îöºóµ°°×ÈÜÒºÉÏÖù£¬¶øºóÏÈÒÔÆ½ºâÖùµÄ»º³åҺϴÍÑδ½áºÏµÄÔÓµ°°×£¬ÔÙÒÔ0.1mol/L¸Ê°±Ëá-HCI£¬pH2.7»º³åҺϴÍѽáºÏµÄµ°°×£¬²âA280Öµ£¬ºÏ²¢¸ÃÖµÔÚ0.1ÒÔÉϵÄ×é·Ý£¬´Ë¼´Îª´¿»¯µÄCGMCC 0971ÔÓ½»Áöϸ°ûÖêA7ºÍCGMCC0972ÔÓ½»Áöϸ°ûÖêH3F3²úÉúµÄ¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30µ¥¿Ë¡¿¹Ì壬SDS-PAGE(¼´SDS¾Û±ûÏ©õ£°·Äý½º±äÐÔµçÓ¾)²â´¿¶È£¬¶Ô5mMNaCIÈÜҺ͸Îö£¬Å¨ËõÖÁÊÊÒ˵ÄŨ¶È£¬´ýÓá£
¢Û½ºÌå½ðÖÆ±¸³ÆÈ¡Sigma¹«Ë¾²úÂȽðËá(»õºÅG-4022)²¢Åä³É1£¥Å¨¶È£¬È¡ÊÊÁ¿¼ÓÈ볬´¿Ë®ÖУ¬¼ÓÈÈÖó·Ð£¬¿ìËÙ¼ÓÈë1£¥µÄÄûÃÊËáÄÆÈÜÒº£¬ÖóÖÁÈÜÒº±äΪ×ϺìÉ«¡£ÀäÈ´£¬ÒÔ0.2mol/L K2CO3µ÷pHÖÁ8.0¡«8.2£¬0.45¦Ìm¹ýÂË¡£È¡ÊÊÁ¿Ï¡ÊÍ1±¶£¬²âA530ֵΪ1.915¡£
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ʵÑé½á¹û³ÉÆ·ÊÔ¼ÁÌõµÄ¼ì²âʵÑé1 ÁéÃô¶È²â¶¨ÒÔ6È˷ݶ³´æ»ìºÏÈ˾«Òº£¬SIGMA¹«Ë¾²úÈËPSA(ProstateSpecificAntigenǰÁÐÏÙÌØÒ쿹Ô)(»õºÅP-3338)´¿»¯µ°°×Ϊ¿¹Ô£¬Óñ¾·¢Ã÷ʵʩÀý2ÖÆµÃµÄ¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30½ºÌå½ð¼ì²âÊÔ¼ÁÌõ(A)£¬Í¬Ê±Óë¼ÓÄôóIND¹«Ë¾(B)¡¢ÃÀ¹úAcon(ÔÚº¼Öݼӹ¤ÖÆ×÷)(C)¡¢Medyl(D)¡¢PanProbe(E)¹«Ë¾µÄ¿¹È˾«Òºµ°°×P30½ºÌå½ð¼ì²â£¬½á¹û¼ûͼ1µ½Í¼5£¬¼°±í1¡£
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ʵÑé2 ׼ȷÐÔ¡¢ÌØÒìÐԲⶨÒÔÈËÒõµÀ·ÖÃÚÎï°ß¡¢»ìºÏÈËѪÇå¡¢ÍÙÒººÍ³õÈéΪ¿¹Ô£¬Óñ¾·¢Ã÷ʵʩÀý2ÖÆµÃµÄ¿¹È˾«Òºµ°°×P30½ºÌå½ð¼ì²âÊÔ¼ÁÌõ(A)£¬Í¬Ê±Óë¼ÓÄôóIND¹«Ë¾(B)¡¢ÃÀ¹úAcon(ÔÚº¼Öݼӹ¤ÖÆ×÷)(C)¡¢Medyl(D)¡¢Pan Probe(E)¹«Ë¾µÄ¿¹È˾«Òºµ°°×P30½ºÌå½ð¼ì²â£¬½á¹û¼ûͼ1µ½Í¼5£¬¼°±í2¡£
±í2׼ȷÐÔ¡¢ÌØÒìÐÔ¡¢¹úÍâͬÀà²úÆ·±È½Ï¿¹Ô¼°A B C D EÏ¡Êͱ¶Êý 10301030103010301030Òõ 20- - - - - - - ¡À + +µÀ·Ö 100 - -- - - - - - + +ÃÚÎï 1000 - -- - - - - - ¡À¡ÀÈË 20- -- - - - + + ¡À¡ÀѪ 100 - -- - - - + + ¡À¡ÀÇå 1000 - -- - ¡À + - - - -ÈË 20- -- - - - - - - -ÍÙ 100 - -- - - - - - - -Òº 1000 - -- - - - - - - -ÈË 20- -- - + + - - - -³õ 100 - -- - + + - - - -Èé 1000 - -- - ¡À ¡À - - - -ÉúÀíÑÎË® - -- - - - - - - -×¢±íÖС°+¡±´ú±íÑôÐÔ£»¡°-¡±´ú±íÒõÐÔ£»¡°¡À¡±ËÆÒõËÆÑô£»10ºÍ30µ¥Î»Îª·ÖÖÓ£¬±íʾ¹Û²ìʱ¼ä¡£
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7.ÈçȨÀûÒªÇó6ËùÊöµÄ¼ì²âÊÔ¼ÁÌõ£¬ÆäÌØÕ÷ÊǼÓÑùÇø°ü¸½½ºÌå½ðµÄȨÀûÒªÇó4ËùÊö¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30µ¥¿Ë¡¿¹Ìå¼ÓÔØÔÚ²£Á§ÏËάÖУ¬¼ÓÑùÇøµÄ¿Õ°×¶èÐÔ²ÄÁÏÇøÊDz£Á§ÏËά¡£
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10.ÈçȨÀûÒªÇó9ËùÊöµÄ¼ì²âÊÔ¼ÁÌõ£¬ÆäÌØÕ÷ÊÇ·´Ó¦ÇøµÄ¼ì²âÏßÅçÍ¿µÄÊǺ¬ÓÐ0.2-1£¥ÕáÌǵÄȨÀûÒªÇó3ËùÊöµÄ¿¹È˾«ÒºÌØÒìµ°°×P30µ¥¿Ë¡¿¹Ìå¡£
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