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专利名称：一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法
技术领域：
本发明涉及一种植物油料真伪鉴别方法，特别是一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法。
背景技术：
油荼油(Camellia Oil)是一种从山茶科植物油茶(Camellia oleifera Abel)的 成熟种子通过压榨法或有机溶剂提取而得到的植物脂肪油。油茶籽油中不饱和脂肪酸高达 90%以上，油酸达到80-83%，亚油酸达到7-13%，并且富含蛋白质和维生素A、B、D、E等， 尤其是它所含的丰富的亚麻酸是人体必需而又不能合成的，除了上述丰富合理的脂肪酸组 成和营养成分外，油荼籽油还含有其它植物油脂所没有的特定生理活性物质诸如茶多酚、 山茶甙和角鲨烯等。角鲨烯有很好的富氧能力，可抗缺氧和抗疲劳，并具有提高人体免疫力 及增进胃肠道的功能。鉴于油茶籽油对人体健康具有食疗双重功能和油茶籽资源紧张的问 题，产品供不应求，价格不断上扬。目前，市场上出现了假冒的油茶油产品，损害了广大消费 者的利益。因此，开发简便、快速的油茶籽油鉴别方法具有重要意义。目前，在我国油茶籽 原油和成品油的国家质量标准中只有色泽、气味、滋味、透明度、酸值、过氧化值、溶剂残留 量等指标要求，而没有鉴别真假油茶籽油的检验方法，因此，无法对市场上的油茶籽油产品 质量进行有效监管。近年来人们根据油茶籽油脂肪酸组成特性，运用毛细管色谱法测定了 纯山茶油的油脂肪酸组成，然后采用加权向量夹角余弦法计算掺伪油茶籽油脂肪酸组成与 纯品油茶籽油脂肪酸组成相似度的方法，得出了各自的加权相似度_掺伪量关系拟合曲线 图，以及各自的真伪油定量鉴定判断回归公式，依此来甄别山荼籽油。浙江省常山县质量技 术监督局和浙江省果品质量检验中心研究了通过脂肪酸组成的变化来确定山茶油是否掺 假的方法。他们自行配制了纯山茶油中掺入不同比例的菜油、豆油、棕榈油的样品，运用气 相色谱法对其进行测定，通过脂肪酸组成的变化来确定山茶油是否掺假，并制定出《掺假山 茶油定性鉴别_气相色谱法》标准。2009年3月23日，由浙江省质监局作为浙江省推荐性 地方标准发布，同年4月1日起实施。但是，上述通过脂肪酸组成的变化来确定山荼油是否 掺假的方法存在如下几方面不足(1)利用色谱法通过测定通过脂肪酸组成的变化来确定 山茶油是否掺假的方法需要气相色谱仪等复杂设备，操作繁琐；(2)对于针对山茶油脂肪 酸组成而设计的调和油产品，无法甄别其真伪；(3)气相色谱法检测费时、需要专门技术人 员、无法进行现场检测，且成本较高。

发明内容
本发明的目的在于提供一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法。本发明的技术方案如下一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法，它通过特定显色剂 与油茶籽油特征组分三萜皂甙元反应呈现特征颜色来甄别真假油茶籽油，该显色剂与含甾 体成分的植物油可出现红_紫-蓝_绿色反应，5分钟后反应液呈现墨绿色或蓝绿色；显色 剂与含三萜皂甙元成分的油茶籽油能呈红-紫-黄，5分钟后反应液呈现黄色或黄棕色；所述显色剂为由乙酸酐和浓硫酸按体积比为19 1的比例在室温条件下混合制得，其特征在 于它包括薄层色谱鉴定和比色管比色鉴定1)薄层色谱鉴定，取0. 5mL样品，置于IOmL的 试管中，用己烷或三氯甲烷稀释至IOmL刻度即得样品溶液，用点样毛细管吸取纯油茶籽油 溶液和待检验样品溶液5 10 μ L分别点样在硅胶薄层色谱板上，展层吹干后，在显色剂中 显色反应5min后，出现黄色的为真油茶籽油，所述展层剂为石油醚乙酸乙酯=9 1,V/ V;2)比色管比色法取10 20μ L样品，置于IOmL的比色管中，加入2. 5mL特定显色剂， 使样品溶解，45°C水浴保温lOmin，出现黄色的为真油茶籽油。本发明与已有气相色谱法(GC)相比具有以下优点和突出效果1、显色试剂Liebermann-Burchard试剂的配制简单、价格低廉；2、灵敏度高，可以直接用肉眼观察，也可以紫外可见分光光度法测定；3、操作简便，检测时间短，可以用于现场检测。
具体实施例方式实施例1、本发明为运用Liebermarm-Burchard显色剂对油茶籽油进行鉴别的方 法所用Liebermarm-Burchard显色剂是以乙酸酐和浓硫酸配合而成的脱水和乙酰化试 剂。配制方法为在19份乙酸酐中缓慢滴加1份浓硫酸待冷却后得到显色试剂，即乙酸 酐浓硫酸=19 1(V/V)，密封保存。本发明的油茶籽油鉴别方法有两种形式(1)薄 层色谱鉴定法取0. ImL样品，置于20mL的试管中，用己烷或三氯甲烷稀释至20mL刻度 即得样品溶液。用点样毛细管吸取纯油茶籽油溶液和待检验样品溶液5 IOyL分别 点样在硅胶薄层色谱板上，展层(展层剂为石油醚乙酸乙酯=9 1，V/V)，吹干后，在 Liebermann-Burchard试剂中显色反应5min，出现黄色的为油茶籽油；(2)比色管比色法 取10 20 μ L样品，置于IOmL的比色管中，加入2. 5mL Liebermarm-Burchard显色剂，使 样品溶解，45°C水浴保温30min，出现黄色的为油茶籽油；鉴别方法对油茶籽油与其它植物 油区分在上述颜色反映上，出现红_紫-蓝_绿色，最后褪色的为含留体皂甙的其它植物 油；能呈现黄-红-紫颜色的为含三萜皂甙元油茶籽油。实施例2、油茶籽油鉴别方法的灵敏性，利用浓度为5mg/L油茶油和菜籽油样品， 在正己烷溶液中的显色图上，可以看出Liebermarm-Burchard显色剂在有机溶剂正己烷中 对三萜皂甙元的显色反应非常灵敏；利用浓度为2. 5mg/L油荼油“金龙鱼”牌调和油样品， 在三氯甲烷溶液中的显色图上，可以看出，Liebermarm-Burchard显色剂对2. 5mg/L油茶油 中三萜皂甙元的显色清晰，反应灵敏，对纯油茶油和调和油的分辨效果也较好。实施例3、油茶籽油鉴别新方法的选择性，采用在纯油荼籽油中加入菜籽油、花生 油、芝麻油和动物油脂的办法，检验新方法的抗干扰性能。实验结果表明，在纯油茶籽油中 掺入其它油脂的量少于50%时，均可以观察到三萜皂甙元的显色反应，说明油脂中其它成 分的存在或体系组成改变对实验结果基本不产生干扰。实施例4、油茶籽油鉴别方法的重现性，我们分别选择6个冷榨法提炼的油茶籽油 和6个油茶粕饼中溶剂提取的茶油产品进行重复性实验。结果表明，只要是油茶油都有黄 色阳性反应，油茶籽油鉴别方法的重现性良好。实施例5、本发明的油茶籽油鉴别方法的用途，本发明的油茶籽油鉴别方法，可以 应用于油茶籽油、以及一些油茶籽油调和油等含有三萜皂甙元特征物质的鉴别。
本发明所用试剂名称、规格、产地如表1所示表1本发明用的试剂名称、规格、产地
权利要求
一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法，它通过特定显色剂与油茶籽油特征组分三萜皂甙元反应呈现特征颜色来甄别真假油茶籽油，该显色剂与含甾体成分的植物油可出现红 紫 蓝 绿色反应，5分钟后反应液呈现墨绿色或蓝绿色；显色剂与含三萜皂甙元成分的油茶籽油能呈红 紫 黄，5分钟后反应液呈现黄色或黄棕色；所述显色剂为由乙酸酐和浓硫酸按体积比为19∶1的比例在室温条件下混合制得，其特征在于它包括薄层色谱鉴定和比色管比色鉴定1)薄层色谱鉴定，取0.5mL样品，置于10mL的试管中，用己烷或三氯甲烷稀释至10mL刻度即得样品溶液，用点样毛细管吸取纯油茶籽油溶液和待检验样品溶液5～10μL分别点样在硅胶薄层色谱板上，展层吹干后，在显色剂中显色反应5min后，出现黄色的为真油茶籽油，所述展层剂为石油醚∶乙酸乙酯＝9∶1，V/V；2)比色管比色法取10～20μL样品，置于10mL的比色管中，加入2.5mL特定显色剂，使样品溶解，45℃水浴保温10min，出现黄色的为真油茶籽油。
2.如权利要求1所述的一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法，其特征在于所述显色剂为 由乙酸酐和浓硫酸按体积比为19 1的比例在室温条件下混合制得。
3.如权利要求1所述的一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法，其特征在于所述展层剂 为石油醚乙酸乙酯=9 1，V/V的混合液。
全文摘要
一种鉴别油茶籽油真伪的简捷方法，是根据油茶籽油中含有三萜类皂甙元特征成分而设计的，它利用油茶籽油三萜类皂甙元的特征化学反应，通过薄层色谱鉴定和比色管比色鉴定呈现颜色变化来鉴别油茶籽油的真伪。该方法具有灵敏、简单、快速和成本低等特点，将在茶籽油和油茶籽油调和油的鉴别方面具有良好的应用前景。
文档编号G01N21/29GK101893553SQ20101021738
公开日2010年11月24日 申请日期2010年6月30日 优先权日2010年6月30日
发明者周芳检, 张卫军, 李治章, 王小勇, 龚福春 申请人:湖南科技学院