专利名称：一种治疗白细胞减少症药物的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种用于治疗白细胞减少症的中药药物，特别是涉及该药物的质量控制方法。
背景技术：
芪精升白颗粒在临床上主要用于治疗肿瘤化疗所致的白细胞减少症(脾肾两虚证)，处方由黄芪、鹿角胶、西洋参、淫羊藿、当归、黄精等十味中药组成，功能健脾补肾，益气养血，经多年临床应用，证实药物组方合理，疗效确切。芪精升白颗粒为颗粒剂，目前已经明确了科学合理的工艺提取路线，并确定了工艺中的关键技术参数，工艺稳定，既保证了主要有效成分完全入药，又兼顾了生产的实际情况及药品的相对稳定性，成品质量符合质量标准，适合工业化大生产要求。芪精升白颗粒的具体制备工艺为:黄芪360g、鹿角胶60g、西洋参120g、淫羊藿180g、当归120g、黄精120g、墨旱莲180g、枸杞子120g、补骨脂120g、鸡血藤360g，取西洋参加80%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇使成清膏，药渣与除鹿角胶外的其余八味加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至60°C相对密度为1.15 1.18的清膏，加95%乙醇至含醇量为30%，搅拌均匀，静置24小时，滤过，滤液与上述西洋参醇提清膏合并，浓缩至60°C相对密度1.25 1.28的稠膏，干燥，干膏加鹿角胶粉碎成细粉；加入安赛蜜2g及适量麦芽糊精，混匀，加95%乙醇适量制成颗粒，干燥，制成lOOOg，即得。为进一步控制芪精升白颗粒的药物质量，需要提供科学合理的药物质量控制方法，以适应药物的工业化稳定生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种上述治疗白细胞减少症药物的质量控制方法，本发明的质量控制方法操作容易，重现性好，质量控制精确、稳定。本发明提供的治疗白细胞减少症药物的质量控制方法适合于由以下重量份数的原料药制备而成的药物:6份黄芪、I份鹿角胶、2份西洋参、3份淫羊藿、2份当归、2份黄精、3份墨旱莲、2份枸杞子、2份补骨脂、6份鸡血藤。质量控制方法包括鉴别方法和含量测定方法。其中，所述鉴别方法包括如下鉴别:
I)取所述药物8g，加甲醇30ml，加热回流I小时，滤过，滤液加在100 200目中性氧化铝柱上，用40%甲醇IOOml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨洗液，再用水洗涤2次，每次15ml，弃去水洗液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水=65:35:10混合溶液10°C以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100°c加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同的棕褐色斑点；
2)取所述药物Sg，加甲醇25ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和水20ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次10ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取西洋参对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷Rbl对照品、人参皂苷Re对照品，加甲醇制成每Iml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2 U 1、对照药材溶液和对照品溶液各I U L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇:水=15:40:22:10混合溶液5 10°C放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，分别置日光和365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
3)取所述药物15g，加乙酸乙酯40ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取补骨脂对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；再取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品，加乙酸乙酯制成每Iml各含2mg的混合溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 U 1、对照药材溶液和对照品溶液各I Ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷:乙酸乙酯=3:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
4)取所述药物6g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，通过DlOl型大孔树脂预处理柱，用50ml水洗脱，弃去洗脱液，继用50%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇溶液Iml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿对照药材Ig,同法制成对照药材溶液；再取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每Iml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 yl、对照药材溶液和对照品溶液各5 V- 1，分别点于同一娃胶H薄层板上，以三氯甲烧:甲醇:甲酸:水=14:6:0.5:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
5)取所述药物10g，加乙酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5 yl、对照药材溶液2 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30 60°C石油醚:甲酸乙酯:甲酸=20:20:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述含量测定方法包括黄芪甲苷含量和补骨脂素及异补骨脂素含量的测定。本发明具体以下述高效液相色谱法测定所述黄芪甲苷的含量:
1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相乙腈:水=38:62，蒸发光散射检测器，色谱柱理论板数按黄芪甲苷峰计算不低于4000 ；
2)对照品溶液的制备:取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，即得；
3)供试品溶液的制备:取所述药物研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，150W、40KHZ超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，滤过，滤液，回收溶剂并浓缩至干，残渣加正丁醇饱和的水IOml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
4)分别精密吸取对照品溶液5 iil、10 ii 1，供试品溶液各10 u 1，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。本发明同时以下述高效液相色谱法测定所述补骨脂素及异补骨脂素含量:
1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相甲醇:水=55:45，检测波长246nm，色谱柱理论板数按补骨脂素峰计算不低于3000 ；
2)对照品溶液的制备:称取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml各含20 y g的溶液，即得；
3)供试品溶液的制备:取所述药物4g，研细，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取I小时，放冷，转移至IOOml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
4)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOyl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本发明建立了治疗白细胞减少症药物的质量控制方法，所建立的方法中，药材的鉴别方法成熟可行，专属性强，阴性无干扰，含量测定方法操作容易，精密度高，重现性好，使用本发明的质量控制方法能够精确、稳定地控制芪精升白颗粒的药物质量，以适应药物的工业化稳定生产。
具体实施例方式实施例1。处方:黄芪360g、鹿角胶60g、西洋参120g、淫羊藿180g、当归120g、黄精120g、墨旱莲180g、枸杞子120g、补骨脂120g、鸡血藤360g。制法:以上十味，取西洋参加80%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇使成清膏，备用；药渣与其余黄芪(除鹿角胶外)等八味加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.15 1.18 (60°C)的清膏，加95%乙醇至含醇量为30%，搅拌均匀，静置24小时，滤过，滤液与上述西洋参醇提清膏合并，浓缩至相对密度1.25 1.28 (60°C)的稠膏，干燥，干膏加鹿角胶粉碎成细粉。加入安赛蜜2g及适量的麦芽糊精，混匀，加95%乙醇适量制成颗粒，干燥，制成lOOOg，即得。性状:本品为掠色颗粒；味甜，微古。功能与主治:健脾补肾，益气养血。用于肿瘤放化疗所致的白细胞减少症(脾肾两虚证)。症见身疲乏力，心悸失眠,头晕目眩、腰膝酸软等,并伴有外周血液白细胞计数减少。用法与用量:开水冲服。一次I袋，一日2次。规格:每袋装6g。贮藏:密封。实施例2:黄芪的薄层鉴别。取实施例1药物8g，加甲醇30ml，加热回流I小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100 200目，5g,内径10 15mm)上,用40%甲醇IOOml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残洛加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次,每次20ml，弃去氨洗液，再用水洗涤2次，每次15ml，弃去水洗液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(65:35:10) 10°C以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同的棕褐色斑点；紫外光灯(365nm)下显相同颜色的荧光斑点，方法简便、快速、重现性好，阴性不干扰。实施例3:西洋参的薄层鉴别。取实施例1药物Sg，加甲醇25ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和水20ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次10ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取西洋参对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rbl对照品、人参皂苷Re对照品，加甲醇制成每Iml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液2 u 1、对照药材溶液和对照品溶液各I U L，分别点于同一娃胶G薄层板上，以三氯甲烧-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10) 5 10°C放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。薄层结果理想，简便快速，斑点清晰，且缺西洋参的阴性样品未见干扰。实施例4:补骨脂的薄层鉴别。取实施例1药物15g，加乙酸乙酯40ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品，加乙酸乙酯制成每Iml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10 yl、对照药材溶液和对照品溶液各I yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。获理想薄层结果，方法简便，斑点清晰，且缺补骨脂的阴性样品未见干扰。实施例5:淫羊藿的薄层鉴别。取实施例1药物6g,加甲醇30ml,超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干,残洛加水20ml使溶解，通过DlOl型大孔树脂预处理柱(内径10 15mm，12cm)，用50ml水洗脱，弃去洗脱液，继用50%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干,残渣加乙醇溶液Iml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每Iml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10iU、对照药材溶液和对照品溶液各5iU，分别点于同一硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸-水(14:6:0.5:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。薄层结果理想，重复性好，方法简便。阴性样品无干扰。实施例6:枸杞子的薄层鉴别。取实施例1药物10g，加乙酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液5 u 1、对照药材溶液2 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30 60°C )-甲酸乙酯-甲酸(20:20:1)，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。薄层结果理想，且阴性无干扰。实施例7:黄芪甲苷含量的测定。实施例1药物中的君药为黄芪，故首选其所含有效成分进行含量测定。采用HPLC法对其有效成分黄芪甲苷进行含量测定，快速简便、稳定可靠。1、仪器与试药。Agilent HP1100高效液相色谱仪(包括Alltech-ELSD蒸发光散射检测器、Agilent 1100色谱工作站；电子天平(德国赛多利斯BP211D) ;Millipore纯水器；Sartorius电子天平；KQ_300DA超声仪。乙腈为色谱纯；水为重蒸水；其它化学试剂均为分析纯。黄芪甲苷对照品(供含测用，批号:0737-200111)由中国药品生物制品检定所提供。芪精升白颗粒(批号:20100801、20101201、20101202、20101203)由山西振东制药有限
公司生产。2、色谱条件。色谱柱:Acclaim120 C18 (250mmX4.6mm, 5 u m);流动相为乙腈-水(38:62);流速1.0mL/min ;柱温25°C ；ELSD参数:漂移管温度105°C，氮气流速2.5L/min ;进样量:对照品溶液5 ill与10 ii 1、供试品溶液10 ill。理论板数按黄芪甲苷峰计算不低于4000。3、对照品溶液的制备。取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，即得。4、供试品溶液的制备。 取实施例1药物，研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(150W，40KHZ) 30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，滤过，滤液，回收溶剂并浓缩至干，残洛加正丁醇饱和的水IOml使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。5、黄芪甲苷含量的测定。分别精密吸取对照品溶液5 ill、10 ill，供试品溶液各10 ill，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。6、空白试验。按处方自制不含黄芪的阴性制剂，按供试品溶液制备方法进行提取、测定。结果在黄芪甲苷相应的保留时间无干扰。
7、线性关系的考察。精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成0.256mg/ml的溶液。分别吸取l、2、5、10、15、25iU进样，依法测定，结果见表1。以黄芪甲苷含量的对数与峰面积积分值对数计算得回归方程:Y=1.2446X+3.3271，y =.0.9991。
_表1线性关系考察数据_
权利要求
1.一种治疗白细胞减少症药物的质量控制方法，所述治疗白细胞减少症药物是由以下重量份数的原料药制备而成的药物:6份黄芪、I份鹿角胶、2份西洋参、3份淫羊藿、2份当归、2份黄精、3份墨旱莲、2份枸杞子、2份补骨脂、6份鸡血藤，其特征在于所述质量控制方法中的鉴别方法包括如下鉴别: 1)取所述药物8g，加甲醇30ml，加热回流I小时，滤过，滤液加在100 200目中性氧化铝柱上，用40%甲醇IOOml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨洗液，再用水洗涤2次，每次15ml，弃去水洗液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水=65:35:10混合溶液10°C以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同的棕褐色斑点； 2)取所述药物Sg，加甲醇25ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正丁醇饱和水20ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次10ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取西洋参对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷Rbl对照品、人参皂苷Re对照品，加甲醇制成每Iml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2U 1、对照药材溶液和对照品溶液各I U L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇:水=15:40:22:10混合溶液5 10°C放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，分别置日光和365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 3)取所述药物15g，加乙酸乙酯40ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作 为 供 试品溶液；另取补骨脂对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；再取补骨脂素对照品、异 补骨脂素对照品，加乙酸乙酯制成每Iml各含2mg的混合溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 U 1、对照药材溶液和对照品溶液各I Ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷:乙酸乙酯=3:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 4)取所述药物6g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，通过DlOl型大孔树脂预处理柱，用50ml水洗脱，弃去洗脱液，继用50%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇溶液Iml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿对照药材Ig,同法制成对照药材溶液；再取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每Iml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 yl、对照药材溶液和对照品溶液各5V- 1，分别点于同一娃胶H薄层板上，以三氯甲烧:甲醇:甲酸:水=14:6:0.5:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 5)取所述药物10g，加乙酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5 yl、对照药材溶液2 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30 60°C石油醚:甲酸乙酯:甲酸=20:20:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的治疗白细胞减少症药物的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法中的含量测定方法包括黄芪甲苷含量和补骨脂素及异补骨脂素含量的测定。
3.根据权利要求2所述的治疗白细胞减少症药物的质量控制方法，其特征在于以下述高效液相色谱法测定所述黄芪甲苷的含量: 1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相乙腈:水=38:62，蒸发光散射检测器，色谱柱理论板数按黄芪甲苷峰计算不低于4000 ； 2)对照品溶液的制备:取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，即得； 3)供试品溶液的制备:取所述药物研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，150W、40KHZ超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，滤过，滤液，回收溶剂并浓缩至干，残渣加正丁醇饱和的水IOml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 4)分别精密吸取对照品溶液5iil、10ia，供试品溶液各10iil，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。
4.根据权利要求2所述的治疗白细胞减少症药物的质量控制方法，其特征在于以下述高效液相色谱法测定所述补骨 脂素及异补骨脂素含量: 1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相甲醇:水=55:45，检测波长246nm，色谱柱理论板数按补骨脂素峰计算不低于3000 ； 2)对照品溶液的制备:称取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml各含20 y g的溶液，即得； 3)供试品溶液的制备:取所述药物4g，研细，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取I小时，放冷，转移至IOOml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 4)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
本发明公开了一种白细胞减少症药物的质量控制方法，分别以薄层色谱法鉴别药物中的黄芪、西洋参、补骨脂、淫羊藿和枸杞子，以液相色谱法测定药物中的黄芪甲苷含量和补骨脂素及异补骨脂素含量。本发明建立的质量控制方法中，药材鉴别方法成熟可行，专属性强，阴性无干扰，含量测定方法操作容易，精密度高，重现性好，使用本发明的质量控制方法能够精确、稳定地控制药物的质量，以适应药物的工业化稳定生产。
文档编号G01N30/02GK103115984SQ201310057730
公开日2013年5月22日 申请日期2013年2月25日 优先权日2013年2月25日
发明者李安平, 李明花, 乔玉峰, 王红宇, 陈强, 王永宏 申请人:山西振东制药股份有限公司
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