专利名称：一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，属于制药技术领域。
背景技术：
在我们的日常生活中眼底出血是一种发病率非常高的疾病，在我国有很多人都非常容易患发眼底出血这种疾病，研究显示，导致眼底出血的原因很多，主要有视网膜中央动脉阻塞，高血压性视网膜病变，视网膜中央静脉阻塞，视网膜静脉周围炎，视网膜动脉周围炎，肾病性视网膜病变，糖尿病性视网膜病变，柯茨病(coats)，视网膜血管瘤，脉络膜血管瘤等，还有一些眼外伤所致的脉络膜破裂、视网膜震荡、黄斑穿孔等挫伤性脉络膜出血，中医一般认为是热伤经络，血热则妄行，例如糖尿病中医诊断为阴虚燥热引起的，其眼底出血为其并发症。现检索到2007年9月5日公开的公开号为CN101028487A的专利即提供了一种治疗眼底出血中药制剂和血明目的质量检测方法，该发明所述的和血明目制剂未确定处方组成中各药材的用量，故每个剂量单位的重量无法确定，本领域技术人员采用该发明记载的方法无法实现此质量检测方法，即该发明不具有实用性，其创造性是不存在的，即使采用本发明所述的中药制剂作为检测对象，其检测结果亦不显著、可靠性差。本发明依据中医凉血止血、滋阴化瘀、养肝明目的治病理论，采用由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂
3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成药剂学上任一种中药制剂，提供了一种该中药制剂的质量检测方法，该质量检测方法简单方便且稳定可靠，有效确保产品质量。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该质量检测方法简单方便且稳定可靠，有效确保产品质量。为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案:
本发明所述的中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花
5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草
5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归
3.57%、川芎1.19%制成，该中药制剂可以是药剂学上所述的任一种剂型，其质量检测方法可以是显微鉴别方法、薄层鉴别方法或含量测定方法中的一种或几种。1.显微鉴别方法:
取本品，置显微镜下观察:花粉粒类圆形或椭圆形，直径约17 29 μ m，表面有网状雕纹(蒲黄)。韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细(黄岑)。种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁�。⒉ㄗ矗Ｗ飨馇蹲磁帕�(车前子)。花粉粒类圆形，直径24 34 μ m，外壁有刺，刺长3 5μηι,具3个萌发孔(菊花)。
2.薄层鉴别方法1:
(I)黄芩苷鉴别方法:
取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一以4%醋酸钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水4 8:1 4:0.5 2:0.5 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)大黄酚鉴别方法:
取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加 盐酸1ml，水浴加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取3次，每次15ml，合并乙醚液，低温挥干乙醚，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄酚对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μ1、对照品溶液 μ ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸10 20:3 7:0.5 2的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑
3.薄层鉴别方法2:
(I)芍药苷鉴别方法:
取相当于生药材16.Sg的本品，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，拌入中性氧化铝3g，水浴干燥，加在100 200目、内径为1cm、重量为2g的中性氧化铝柱上，以甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取芍药苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸30 40:3 5:5 10:0.1 0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。( 2 )香蒲新苷鉴别方法:
取香蒲新苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液各 μ ，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以丙酮-水I 3:2 5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，放置，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)龙胆鉴别方法:
取芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液，加甲醇2ml稀释后作为供试品溶液，另取龙胆对照药材0.5g,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干，残洛加甲醇Iml使溶解,作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水20 30:5 10:1 3下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点。(4)菊花鉴别方法:
取相当于生药材8.4g的本品，研细，加乙酸乙酯30ml，加热回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取菊花对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C石油醚-乙酸乙酯10 15: I 3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点。4.含量测定方法:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.5%醋酸6 8:90 92为流动相；检测波长为281nm，理论板数按丹参素钠峰计算应不低于1500 ；对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，加50%甲醇制成每Iml含丹参素钠25Pg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取相当于生药材16.8g的本品，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理10分钟，功率为250W、频率为40 kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。5.由显微鉴别方法、薄层鉴别方法和含量测定方法构成的检测方法:
显微鉴别:
取本品，置显微镜下观察:花粉粒类圆形或椭圆形，直径约17 29 μ m，表面有网状雕纹(蒲黄)。韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细(黄岑)。种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁�。⒉ㄗ矗Ｗ飨馇蹲磁帕�(车前子)。花粉粒类圆形，直径24 34 μ m，外壁有刺，刺长3 5μηι,具3个萌发孔(菊花)。薄层鉴别:
(I)取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一以4%醋酸钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水4 8:1 4:0.5 2:0.5 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加盐酸1ml，水浴加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取3次，每次15ml，合并乙醚液，低温挥干乙醚，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄酚对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μ1、对照品溶液 μ ,分 别点于同一娃胶G薄层板上，以60 90°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸10 20:3 7:0.5 2的上层溶液为展开剂,展开,取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3)取相当于生药材16.Sg的本品，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，拌入中性氧化铝3g，水浴干燥，加在100 200目、内径为lcm、重量为2g的中性氧化铝柱上，以甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取芍药苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸30 40:3 5:5 10:0.1 0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4)取香蒲新苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液各 μ ，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以丙酮-水I 3:2 5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，放置，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(5)取芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液，加甲醇2ml稀释后作为供试品溶液，另取龙胆对照药材0.5g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水20 30:5 10:1 3下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点。(6)取相当于生药材8.4g的本品，研细，加乙酸乙酯30ml，加热回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取菊花对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C石油醚-乙酸乙酯10 15: I 3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点。含量测定方法:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.5%醋酸6 8:90 92为流动相；检测波长为281nm，理论板数按丹参素钠峰计算应不低于1500。对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，加50%甲醇制成每Iml含丹参素钠25Pg的溶液，即得。供试品溶液的制备取相当于生药材16.8g的本品，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理10分钟，功率为250W、频率为40 kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明提供了一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼
5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成药剂学上任一种剂型，通过凉血止血、滋阴化瘀、养肝明目达到治疗阴虚肝旺，热伤络脉所引起的眼底出血。本发明在现有技术的基础上，给定了各组份之间量的关系，通过大量的实验研究、对比，确定了一种可操作性强、准确度高的质量检测方法，在现有技术的基础上删除了黄芩药材对照、决明子药材对照、大黄素对照、墨旱莲药材对照、原儿茶醛对照等鉴别方法不显著、重现性差的薄层鉴别，新增加了芍药苷、香蒲新苷、龙胆药材、菊花药材等一系列对照方法显著、重现性及稳定性可靠的薄层鉴别方法，同时提供了显微鉴别和含量测定方法，多方面、多角度的确保了产品质量，能够更有效的检测产品是否合格、质量是否优劣，保证了患者用药的安全性、有效性。现就本发明的重要研究方法介绍如下:
一、实验药品
实验药品处方:
权利要求
1.一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法为显微鉴别方法、薄层鉴别方法或含量测定方法中的一种或几种。
2.根据权利要求1所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法为显微鉴别方法。
3.根据权利要求2所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，其特征在于:取本品，置显微镜下观察:(I)蒲黄鉴别:花粉粒类圆形或椭圆形，直径约17 29μπι，表面有网状雕纹；(2)黄芩鉴别:韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；(3)车前子鉴别:种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁�。⒉ㄗ矗Ｗ飨馇蹲磁帕校�(4)菊花鉴别:花粉粒类圆形，直径24 34 μ m,外壁有刺，刺长3 5 μ m，具3个萌发孔。
4.根据权利要求1所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法为薄层鉴别方法。
5.根据权利要求4所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，其特征在于鉴别该中药制剂中的黄芩苷、大黄酚、芍药苷、香蒲新苷、龙胆或者菊花中的两种或几种。
6.根据权利要求5所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，其特征在于鉴别该中药制剂中的黄芩苷和大黄酚； 黄芩苷鉴别方法: 取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一以4%醋酸钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水4 8:1 4:0.5 2:0.5 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 大黄酚鉴别方法: 取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加盐酸1ml，水浴加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取3次，每次15ml，合并乙醚液，低温挥干乙醚，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄酚对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μ1、对照品溶液 μ ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸10 20:3 7:0.5 2的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
7.根据权利要求5所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，其特征在于鉴别该中药制剂中的芍药苷、香蒲新苷、龙胆和菊花； 芍药苷鉴别方法: 取相当于生药材16.Sg的本品，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，拌入中性氧化铝3g，水浴干燥，加在100 200目、内径为1cm、重量为2g的中性氧化铝柱上，以甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取芍药苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸30 40:3 5:5 10:0.1 0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 香蒲新苷鉴别方法: 取香蒲新苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液各 μ ，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以丙酮-水I 3:2 5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，放置，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 龙胆鉴别方法: 取芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液，加甲醇2ml稀释后作为供试品溶液，另取龙胆对照药材0.5g,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干，残洛加甲醇Iml使溶解,作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇 -水20 30:5 10:1 3下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点； 菊花鉴别方法: 取相当于生药材8.4g的本品，研细，加乙酸乙酯30ml，加热回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取菊花对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C石油醚-乙酸乙酯10 15: I 3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点。
8.根据权利要求1所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法为含量测定方法。
9.根据权利要求8所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，其特征在于:色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.5%醋酸6 8:90 92为流动相；检测波长为281nm，理论板数按丹参素钠峰计算应不低于1500 ； 对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，加50%甲醇制成每Iml含丹参素钠25Pg的溶液，即得； 供试品溶液的制备取相当于生药材16.8g的本品，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理10分钟，功率为250W、频率为40 kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。
10.根据权利要求1所述的一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法由显微鉴别方法、薄层鉴别方法和含量测定方法组成； 显微鉴别: 取本品，置显微镜下观察:(I)蒲黄鉴别:花粉粒类圆形或椭圆形，直径约17 29μπι，表面有网状雕纹；(2)黄芩鉴别:韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；(3)车前子鉴别:种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁�。⒉ㄗ矗Ｗ飨馇蹲磁帕校�(4)菊花鉴别:花粉粒类圆形，直径24 34 μ m,外壁有刺，刺长3 5 μ m，具3个萌发孔； 薄层鉴别: (1)取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一以4%醋酸钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水4 8:1 4:0.5 2:0.5 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (2)取相当于生药材8.4g的本品，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加盐酸Iml，水浴加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取3次，每次15ml，合并乙醚液，低温挥干乙醚，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄酚对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μ1、对照品溶液 μ ,分别点于同一娃胶G薄层板上，以60 90°c石油醚-甲酸乙酯-甲酸10 20:3 7:0.5 2的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (3)取相当于生药材16.Sg的本品，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残洛加甲醇2ml使溶解, 拌入中性氧化招3g,水浴干燥,加在100 200目、内径为1cm、重量为2g的中性氧化铝柱上，以甲醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取芍药苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸30 40:3 5:5 10:0.1 0.2为展开剂,展开,取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)取香蒲新苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液各 μ ，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以丙酮-水I 3:2 5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，放置，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (5)取芍药苷鉴别方法项下的供试品溶液，加甲醇2ml稀释后作为供试品溶液，另取龙胆对照药材0.5g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水20 30:5 10:1 3下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点； (6)取相当于生药材8.4g的本品，研细，加乙酸乙酯30ml，加热回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取菊花对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60 90°C石油醚-乙酸乙酯10 15: I 3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点； 含量测定方法: 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.5%醋酸6 8:90 92为流动相；检测波长为28`1nm，理论板数按丹参素钠峰计算应不低于1500 ； 对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，加50%甲醇制成每Iml含丹参素钠25Pg的溶液，即得； 供试品溶液的制备取相当于生药材16.8g的本品，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理10分钟，功率为250W、频率为40 kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
本发明涉及一种治疗眼底出血症的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由蒲黄8.93%、丹参8.93%、地黄7.14%、墨旱莲7.14%、菊花5.95%、黄芩炭5.36%、决明子5.36%、车前子5.36%、茺蔚子5.36%、女贞子5.36%、夏枯草5.36%、龙胆5.36%、郁金3.57%、木贼5.36%、赤芍3.57%、牡丹皮3.57%、山楂3.57%、当归3.57%、川芎1.19%制成药剂学上任一种剂型，通过凉血止血、滋阴化瘀、养肝明目达到治疗阴虚肝旺，热伤络脉所引起的眼底出血。本发明提供的质量检测方法可操作性强、准确度高，能够更有效的检测产品是否合格、质量是否优劣，保证了患者用药的安全性、有效性。
文档编号G01N30/90GK103207181SQ201310163688
公开日2013年7月17日 申请日期2013年5月7日 优先权日2013年5月7日
发明者黄小华, 付彬, 张 浩, 耿小秀, 王海亮 申请人:西安碑林药业股份有限公司
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