专利名称：一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，属于烟用辅料 的理化检验技术领域。
背景技术：
环己基氨基磺酸钠俗称甜蜜素，是目前我国使用最多的甜味剂，用于调配清凉饮 料，如加味水及果汁汽水等，也用于罐头、酱菜、饼干、蜜饯凉果等类型的食品中。环己基氨基磺酸钠的使用存在一定的副作用，其对肝脏及神经系统有影响，对代 谢排毒能力较弱的老人、孕妇、小孩的�：υ蚋飨裕壳拔夜３鱿质称诽鹈鬯厥褂霉� 量的情况，出口食品也曾因甜蜜素超标被退回。国家对于食品中甜蜜素的检测有专门的规 定，其中GB/T5009. 97-2003“食品中环己基氨基磺酸钠的测定”中给出了食品中环己基氨基 磺酸钠的三种测定方法，包括适用于饮料、凉果等食品中环己基氨基磺酸钠的测定的气相 色谱法和比色法，以及适用于饮料、果汁、果酱、糕点中环己基氨基磺酸钠的测定的薄层层 析法。SN/T1948-2007“进出口食品中环己基氨基磺酸钠的检测方法液相色谱-质谱/质谱 法”中规定了食品中环己基氨基磺酸钠检验的制样和液相色谱_质谱/质谱法，采用外标法 定量，其适用于水果罐头、浓缩山葡萄汁、白酒、糕点、糖果、甜面酱、酱菜等食品。论文“EOT 气相色谱或气质联用仪分析食品中环己基氨基磺酸钠的含量”中公开了使用气质联用仪检 测环己基氨基磺酸钠的含量的方法，但是其检测结果显示该方法的检测限为1.0mg/kg，回 收率范围为70%-130%，因此该方法还有进一步优化和改进的余地。环己基氨基磺酸钠作为一种甜味剂，一般会通过添加烟用添加剂和料液而添加到 卷烟中，而上述方法均是检测食品中环己基氨基磺酸钠的方法，因此，有必要建立烟用添加 剂中环己基氨基磺酸钠的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，用 于检测烟中环己基氨基磺酸钠的含量。本发明的技术方案如下
一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，包括以下步骤
(1)标准溶液的配制；
(2)样品溶液的制备使用氢氧化钠和硫酸铜处理待分析样品，然后以正己烷为萃取
3剂，按照常规方法制备样品溶液；
(3)气相色谱质谱分析利用气相色谱质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分
析；
(4)烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的计算。所述标准提取液的配制是吸取标准溶液依次用亚硝酸钠和硫酸以及正己烷和氯 化钠进行处理，获得标准提取液；所述的标准溶液中环己基氨基磺酸钠的浓度为2. 662g/ L。所述标准提取液的配制方法可以采用以下方法进行分别吸取浓度为2. 662g/L的环己 基氨基磺酸钠标准溶液0. 001ml, 0. 05ml, 0. lml, 0. 2ml, 0. 5ml, 1. 0ml，加水至25ml，置于冰 浴中；分别加入50g/L亚硝酸钠溶液5 - 10mL, 100g/L硫酸溶液5 — 10mL，摇勻后，在冰浴 中静置30min，并每隔5min用力振摇10s ；然后准确加入正己烷10 — 15mL,氯化钠5g，振摇 100次，静置分层后，吸取正己烷层即为标准提取液，以此6个不同浓度级别的标准提取液 采用相同的进样量进行色谱质谱分析。也可以采用配制一个浓度的标准提取液，然后以不 同的进样量进行色谱质谱分析。所述样品溶液的制备方法具体包括称取3. 00 - 5. 00g添加剂样品于比色管中，加 入5 — 8ml超纯水摇勻，加入5 - 8ml40g/L氢氧化钠溶液，然后滴加5 — 8ml20% CuS04溶 液，加超纯水至25ml，用力振�。恋硗耆谷肜胄墓苤杏趌OOOr/min离心3min，取上清 夜10ml移入比色管中，加水至25ml，置于冰浴中，加入50g/L亚硝酸钠溶液5 — 10mL, 100g/ L硫酸溶液5 — 10mL，摇勻后，在冰浴中静置30min，并每隔5min用力振摇10s ；然后准确加 入正己烷10 - 15mL，氯化钠5g，振摇100次，静置分层后，吸取正己烷层作为样品溶液。所述的色谱分析条件为色谱柱采用HP-V0C熔融石英毛细管柱，进样口温度为 150°C，进样量为1PL，载气为惰性气体，采用不分流模式进样，流速为l.Oml/min;采用恒 温模式，即在150°C下保持lOmin。所述的色谱柱的规格为60mX0. 32mmi. d. X1.8u md. f.。所述的质谱分析条件为传输线温度为280°C ；电离(E1)能量为70eV ；离子源温度 为230°C ；溶剂延迟时间6min，选择离子模式(SIM)扫描，环己基氨基磺酸钠的选择离子为 81(111八)，98(111八)，128(111八)，其中81(111八)为定量离子，98(m/z)和128 (m/z)为定性离子。环己基氨基磺酸钠含量的计算时，首先以标准溶液所检测出的目标物的色谱峰面 积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线；然后将样品溶液检出的目标物的色谱峰面 积，代入标准曲线，即得到样品中的环己基氨基磺酸钠质量，由此即可计算出烟用添加剂中 环己基氨基磺酸钠的含量。本发明的检测方法对样品的处理方法和色谱质谱条件进行了改进和优化，达到了 以下效果
(1)检测时间短采用本发明测定烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠周期仅需要10分钟
左右；
(2)本发明具有操作准确、灵敏度高、回收率高及重复性好的优点本发明方法的色谱 条件使环己基氨基磺酸钠的衍生产物色谱峰与杂质色谱峰分离较好，并且具有较好的相关 性，检测限为0. 3ii g/g，平均加标回收率为98. 99%，平均相对偏差小于2. 5%。
图1为本发明的测定方法的流程图； 图2为标准提取液的色谱图3为样品溶液的色谱图； 图4为标准曲线散点图。
具体实施例方式实施例1
本实施例对烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的检测方法如下(所述检测方法的流程图如图1所示)
(1)标准提取液的配制
分别吸取 2. 662g/L 甜蜜素标准溶液 0. OOlml,0. 05ml,0. 1ml,0. 2ml,0. 5ml, 1. Oml (分 别相当于 2. 662 μ g、133. 1口8、266.2“8、532.4“8、1331“8、2662“8甜蜜素)于 50ml 具 塞比色管，加水至25ml，置于冰浴中；分别加入50g/L亚硝酸钠溶液5ml，100g/L硫酸溶液 5ml，摇勻，在冰浴中放置30min，并每隔5min用力振摇IOs ；然后准确加入正己烷10ml，氯 化钠5g，振摇100次，静置分层后，用吸管取上层正己烷提取液作为标准提取液；
(2)样品溶液的制备
称取3. OOg添加剂样品于50ml比色管中，加入5ml超纯水摇勻，加入5ml40g/L氢氧化 钠溶液，然后滴加5ml20% CuS04溶液，加超纯水至25ml，用力振�。恋硗耆谷肜胄� 管中于1000r/min离心3min，取上清夜IOml移入50ml比色管中，加水至25ml，置于冰浴中， 加入50g/L亚硝酸钠溶液5mL，100g/L硫酸溶液5mL，摇勻后，在冰浴中静置30min，并每隔 5min用力振摇IOs ；然后准确加入正己烷10mL，氯化钠5g，振摇100次，静置分层后，吸取正 己烷层作为样品溶液；
(3)色谱质谱分析分别取6个不同浓度的标准提取液和样品溶液各1μ L进行气相 色谱质谱分析；其色谱分析条件色谱柱采用HP-VOC熔融石英毛细管柱(60mX0. 32mmi. d. Xl.Symd. f.)，进样口温度为150°C，进样量为1 μ L，载气为He，采用不分流模式进样， 流速为1. 0ml/min ；采用恒温模式，即在150°C下保持IOmin ；
质谱分析条件传输线温度为280°C;电离(El)能量为70eV ；离子源温度为230°C ；溶剂 延迟时间6min，选择离子模式(SIM)扫描，环己基氨基磺酸钠的选择离子为81 (m/z)，98 (m/ z)，128(m/z)，其中81 (m/z)为定量离子，98 (m/z)和128 (m/z)为定性离子；标准提取液的 色谱分析结果如图2所示；样品溶液的色谱分析结果如图3所示；
(4)烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的计算
首先以标准提取液所检测出的目标物的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到 标准曲线(标准曲线散点图如图4所示);与标准曲线相对应的回归方程、相关系数等数据如 表1所示。由表2可以看出，在3个加标水平上，利用此方法检测烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠 的平均回收率为98. 99%，样品测试结果的平均相对偏差小于2. 5%，说明本法的回收率较
高，重复性较好。
本实施例样品溶液的制备等过程仅以数值范围中的一个数值点为例进行说明，其 他数值范围的效果与上述实施例的效果相同，在此不再一一列举。所举实施例只是为了更 好的理解本发明方法，并不具有任何限制作用，即上述方法或者等同于上述情况的的方法 均包含在本发明的技术方案的保护范围中。
CN 101799461 A说明书4/4 页 然后将样品测得的检出目标物的色谱峰面积，代入标准曲线，即得到样品中的环 己基氨基磺酸钠质量，由此计算烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠的含量，计算公式如下
式中
m—每克添加剂中环己基氨基磺酸钠的含量，单位为微克每克(？ g/g)； A—样品中环己基氨基磺酸钠的质量(？ g)； n—称取样品的质量(g);
由表1可知，所采用的色谱条件使环己基氨基磺酸钠的衍生产物色谱峰与杂质色谱峰 分离较好，并且具有较好的相关性，检测限在0. g/g。本实施例样品的环己基氨基磺酸钠 的含量为260. 3 g/g。
实施例2
本实施例对本发明方法的重复性和加标回收率的检测方法如下 采用样品加标回收率试验，分别在样品中加入2. 662 g/g，266. 2 g/g，2662 g/g三 个不同浓度的标准溶液进行加标回收率试验，每个样品分别测定6次，色谱质谱分析的条 件同实施例1，根据分析结果计算本方法烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠的加标回收率及 加标后测定值的相对标准偏差，结果如表2所示；
权利要求
一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，其特征在于所述的测定方法包括以下步骤(1)标准提取液的配制；(2)样品溶液的制备使用氢氧化钠和硫酸铜处理待分析样品，然后以正己烷为萃取剂，按照常规方法制备样品溶液；(3)气相色谱质谱分析利用气相色谱质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析；(4)烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的计算。
2.根据权利要求1所述的一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，其特 征在于所述标准提取液的配制是吸取标准溶液依次用亚硝酸钠和硫酸以及正己烷和氯化 钠进行处理，获得标准提取液；所述的标准溶液中环己基氨基磺酸钠的浓度为2. 662g/L。
3.根据权利要求1或2所述的一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法， 其特征在于所述标准提取液的配制方法具体包括分别吸取浓度为2. 662g/L的环己基氨 基磺酸钠标准溶液0. 001ml,0. 05ml,0. lml,0. 2ml,0. 5ml, 1. 0ml,加水至25ml，置于冰浴 中；分别加入50g/L亚硝酸钠溶液5ml，100g/L硫酸溶液5ml，摇勻，在冰浴中放置30min，并 每隔5min用力振摇10s，然后准确加入正己烷10ml，氯化钠5g，振摇100次，静置分层后，所 得上层正己烷提取液即为标准提取液。
4.根据权利要求1所述的一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，其特 征在于所述样品溶液的制备方法具体包括称取3. 00 - 5. 00g添加剂样品于比色管中，加 入5 — 8ml超纯水摇勻，加入5 - 8ml40g/L氢氧化钠溶液，然后滴加5 — 8ml20% CuS04溶 液，加超纯水至25ml，用力振摇，待沉淀完全，倒入离心管中于lOOOr/min离心3min，取上清 夜10ml移入比色管中，加水至25ml，置于冰浴中，加入50g/L亚硝酸钠溶液5 — 10mL, 100g/ L硫酸溶液5 — 10mL，摇勻后，在冰浴中静置30min，并每隔5min用力振摇10s ；然后准确加 入正己烷10 - 15mL，氯化钠5g，振摇100次，静置分层后，吸取正己烷层作为样品溶液。
5.根据权利要求1所述的一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，其 特征在于所述的色谱分析条件为色谱柱采用HP-V0C熔融石英毛细管柱，进样口温度为 150°C，进样量为1PL，载气为惰性气体，采用不分流模式进样，流速为l.Oml/min;采用恒 温模式，即在150°C下保持lOmin。
6.根据权利要求5所述的一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，其特 征在于所述的色谱柱的规格为60mX0. 32mmi. d. XL 8u md. f.。
7.根据权利要求1所述的一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，其特 征在于所述的质谱分析条件为传输线温度为280°C ；电离(E1)能量为70eV ；离子源温度 为230°C ；溶剂延迟时间6min，选择离子模式(SIM)扫描，环己基氨基磺酸钠的选择离子为 81(111八)，98(111八)，128(111八)，其中81(111八)为定量离子，98(m/z)和128 (m/z)为定性离子。
全文摘要
本发明涉及一种烟用添加剂中环己基氨基磺酸钠含量的测定方法，包括标准提取液和样品溶液的制备，气相色谱质谱分析及测定结果的计算等步骤。经改进和优化之后的检测方法具有检测时间短、操作准确、灵敏度高、回收率高及重复性好等优点，本发明方法的色谱条件使环己基氨基磺酸钠的衍生产物色谱峰与杂质色谱峰分离较好，并且具有较好的相关性，检测限为0.3μg/g，平均加标回收率为98.99％，平均相对偏差小于2.5%。
文档编号G01N30/60GK101799461SQ20101015895
公开日2010年8月11日 申请日期2010年4月27日 优先权日2010年4月27日
发明者侯宏卫, 刘彤, 刘楠, 唐纲岭, 姜兴益, 张洪非, 李中皓, 李雪, 胡清源, 边照阳, 陈再根, 陈欢 申请人:中国烟草总公司郑州烟草研究院
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