专利名称：唾液的采集及回收器具的制作方法
技术领域：
本发明涉及以在将来自腮腺、下颌下腺、舌下腺等各种唾液腺的唾液作为检测样品的唾液检测中的使用为目的，在唾液的采集及回收中都可以实施的一次性简易器具以及使用它们的唾液的采集及回收方法。
背景技术：
以前本发明人等设计了用于唾液中葡萄糖的定量的口腔内分泌液的采集方法及薄膜型采集兼回收器具(例如WO02/086453(2002))，阐明了抑制由细菌造成的葡萄糖的分解的口腔内细菌的杀菌效果(WO02/31105(2002))，并阐明了唾液的简便的采集及回收方法，以及作为诊断材料的唾液的有用性。
现在，在唾液检测(Annals of the New York Academy of Sciences，Vol.694，p.216(1993))中，使用唾液采集器具「OraSure」(Epitope，Inc.制)(例如WO97/24979(1997)，WO96/04850(1996)，WO95/27205(1995))、唾液采集兼检测器具「OraQuick」(Epitope，Inc.制)(例如WO99/50656(1999))、唾液采集器具「Omnisal(Saliva·Sampler)」(Saliva Diagnostic Systems，Inc.制)(例如WO95/02996(1995)，U.S.Patent No.5，260，031(1993))、唾液采集器具「Salivette」(Sarstedt制)(例如U.S.Patent No.4,774,962(1988))或唾液采集器具「ORALscreen collector」(Avitar，Inc.制)(例如U.S.Patent No.6,200,275(2001))，进行以HIV为代表的肝炎病毒、梅毒、风疹、麻疹等各种筛查或对茶碱、苯妥英等治疗剂及尼古丁、可卡因等药品的药物监测检查(日本临床检查自动化学会志，Vol.19，p.265(1994))。
这里关于上述的唾液采集器具，唾液吸收垫的体积全都在数百mm3以上，唾液采集时间也需要好几分钟。而且，在采集时不进行唾液的分泌促进的操作。另外，虽然有在唾液采集后，为了防止存在于检测样品中的口腔内细菌的繁殖，而浸渍在混合了叠氮化钠的保存液中的设计(唾液采集器具「Omnisal(Saliva·Sampler)」)，但是全部的器具在采集前及采集中并未进行任何杀菌操作。而且在检测项目中，也没有葡萄糖的定量。
此外，关于山口等的唾液中葡萄糖检测，虽然记载有关于使用了清洗液的口腔内的清洗和用于其除去(例如特开平9-72900号公报(1997))的唾液采集前的清洗液的散布及其除去的方法或例子，但是并未见到关于唾液分泌促进方法及口腔内杀菌方法的记述。另外，虽然也可以举出唾液采集部一体化传感器或比色板(例如特开平12-9728号公报(2000))，记述有作为唾液分泌促进使清洗液带有香味，在唾液采集部涂布刺激性溶液的内容，还记述有各种采集器具形状和唾液腺的清洗，但是没有看到任何关于杀菌的记述。
此外，虽然各种含有杀菌剂的漱口液被作为液体牙膏(例如WO91/18585(1991))开发、销售，但是其是为了防止龋齿的目的，有味物质及香料并不是以促进唾液分泌为目的。
近年来，作为非侵入检测的唾液检测逐渐扩大并且开发出各种利用生物传感器等的POCT(point-of-care testing)机器，对于检测样品的采集及回收方法，强烈需要在简便而迅速的采集之后可以立即回收的简易的器具。
以上讨论中，还未看到提出在采集唾液时，至少在对唾液中的葡萄糖进行定量时，实施口腔内细菌的杀菌处理的方法的方案。另外，也没有任何一边促进唾液的分泌一边在杀除口腔内细菌的同时进行采集的方法及在采集后可以进行到回收的小型简易器具的提案。特别是，还没有看到任何在POCT用途的极短时间中实现微量采集，并在将唾液内在性的测定阻碍物质特异性地分解的同时能够立即回收的简易器具。
发明内容
这里，本发明人的目的在于，提供与以往提供的薄膜型采集兼回收器具(例如WO02/086453(2002))相比，能够在更短时间中实现微量采集和迅速回收及阻碍物质的分解的方法及新形状的器具。
本发明为了解决上述的问题，提供以在以唾液中的葡萄糖的定量为代表的唾液检测中的使用为目的，将存在于口腔内的细菌杀除，促进唾液的分泌的同时迅速地微量采集，另外在进行唾液中的内在性阻碍物质的分解的同时除去粘性成分而可以实施至浆液性唾液的回收的一次性小型简易器具及使用了该器具的浆液性唾液的回收方法。
本发明的特征在于，第一，在唾液中的葡萄糖定量之时，通过对在口腔内多种、大量存在的以葡萄糖为营养源的细菌实施口腔内杀菌清洗及口腔内杀菌除水的处理，将口腔内细菌杀除。此时，进行使用了含有杀菌成分及唾液分泌促进成分的漱口液和、由含有杀菌成分及唾液分泌促进成分的无纺布制成的舌下剩余水分吸收体的双者或仅为后者的前处理。
第二，作为唾液分泌促进方法，使用用于刺激味觉及嗅觉的甜味料、酸味料及香料，同时实施杀菌及唾液分泌促进。
第三，提供用于实现迅速操作的能够缩短唾液采集时间的小型化的唾液吸收体，具体来说，提供使用了含有杀菌成分及唾液分泌促进成分的微量采集器具和能够以简便操作进行至阻碍物质的分解以及唾液浆液成分的回收的廉价的构件的注射器型简易器具，由于利用了杀菌、唾液分泌促进的采集，因而就会极为迅速而简便地实现从阻碍物质的分解到除去了粘性成分的回收。
而且，由于从葡萄糖的随时间的变化，发现季铵盐类杀菌成分对存在于口腔内的作为龋齿细菌的链球菌突变异种(Streptococcusmutans)群等的杀菌效果(例如WO02/31105(2002))，因此提供除了上述杀菌成分以外，还组合了抗菌成分，附加了杀菌及抑制残存细菌的繁殖的抗菌功能的前处理器具及唾液采集器具。
这里，提供为了促进唾液分泌，除了上述杀菌成分以外，含有对以葡萄糖定量为代表的唾液检测不会造成阻碍的适当的甜味料、酸味料及香料的成分的前处理用的漱口液及器具、唾液采集器具。
本发明的唾液的采集及回收器具由棉签型采集器具和注射器型回收器具构成。在相当于活塞的棉签型采集器具的一端，具有微量采集用的圆锥形的唾液吸收体，在圆锥底边部配置垫圈，在另一端设置了插入注射器型回收器具时和进行压榨时的推压用垫。
注射器型回收器具在一端设置了一个宽的开口部，以便容易插入唾液吸收体，并使得在推压操作时容易放置手指，在另一端设置了唾液吸收体压榨部并在其前端设置了回收唾液浆液成分的回收孔。而且，在回收孔内面配置了与唾液吸收体相同成分的微量片，作为过滤层。
而且，作为对唾液检测造成阻碍的唾液内在性阻碍物质的分解方法，通过使分解用的适当的酶或试剂成分固定或含在不直接在口腔内使用的注射器型回收器具的内部壁面及、或过滤层上，使得在回收唾液浆液成分时即完成分解。
这里，通过将唾液吸收体以及注射器型回收器具的压榨部设为圆锥状，就可以使推压时的死空间与圆柱等其他形状相比极大地缩�。佣迪至嗣挥欣朔训幕厥�。
另外，为了实现迅速及微量采集，最好将唾液吸收体的体积设为150mm3以下。
而且，对于其他的注射器型唾液采集器具(例如U.S.PatentNo.5,830,410(1998))，该唾液吸收垫具有大约3,000mm3的体积，不是微量采集用途。另外，虽然在上述垫中，作为抗菌用途含有3.5wt％氯化钠，作为唾液分泌促进用途含有0.3wt％柠檬酸，但是无法获得我们所要求的杀菌效果及唾液分泌促进效果。在以往方法的检测项目中，没有葡萄糖的定量。
以上讨论中，本发明的唾液的采集及回收用的含有杀菌成分及唾液分泌促进成分的注射器型简易器具实现了直至分解了阻碍物质的唾液浆液成分回收的简便的操作性。
图1是表示本发明的实施例1的唾液的采集器具及唾液浆液成分回收器具的图。
图1(a)是唾液采集器具的纵剖面图。
图1(b)是唾液浆液成分回收器具的纵剖面图。
图1(c)是在唾液浆液成分回收器具中插入了唾液采集器具的纵剖面图。
图2是表示唾液的采集及唾液浆液成分回收方法的概略图。
上述图中的符号如下说明。
1唾液采集器具，2唾液吸收体，3活塞棒，4垫圈，5推压垫，6唾液浆液成分回收器具，7回收孔，8唾液吸收体压榨部，9唾液吸收体插入接收口兼挂手指部件，10含有唾液分泌成分的杀菌漱口液，11含有杀菌成分及、或唾液分泌促进成分的舌下剩余水分吸收体，12唾液浆液成分具体实施方式
作为本发明中所使用的杀菌成分、抗菌成分，只要对人体没有影响，可以在口腔内使用，能够将分解葡萄糖的口腔内细菌杀除，在以葡萄糖定量为代表的唾液检测时不造成阻碍，则没有特别限制。例如，作为杀菌成分，如果是季铵盐，则可以举出氯化十六烷基吡啶鎓、氯化苄烷铵(benzalkonium chloride)、氯化苄乙氧铵(benzethoniumchloride)等，作为抗菌成分，可以举出壳质/壳聚糖，可以使用上述的单一成分或多种成分。
作为唾液分泌促进成分，只要是食品添加剂，在以葡萄糖定量为代表的唾液检测时不造成阻碍，则没有特别限制。例如，作为甜味料，除了葡萄糖以外，还可以举出阿斯巴甜·L-苯基丙氨酸化合物、木糖醇、山梨醇，作为酸味料，可以举出柠檬酸、葡萄糖酸、醋酸、乳酸、苹果酸，作为香料，可以举出1-薄荷醇、果香成分，可以使用上述各添加剂的单一成分或多种成分。
作为水溶性高分子，只要是食品添加剂，在以葡萄糖定量为代表的唾液检测时不造成阻碍，则没有特别限制。例如，可以使用羧甲基纤维素、微粒二氧化硅的单一成分或多种成分。
关于棉签型唾液采集器具将叙述如下。
唾液吸收体只要对人体没有影响，可以在口腔内使用，另外能够含有杀菌成分及抗菌成分、唾液分泌促进成分，没有与所采集的唾液的非特异性的非计划中的吸附或对唾液的污染，另外是吸收唾液的材质，具备在使用中不会破损的机械强度，就没有特别限制。例如，可以使用棉、纤维素、聚氨酯、聚酯、人造丝、无纺布、上述混合纤维等。
活塞棒、垫圈、推压垫只要对人体没有影响，可以在口腔内使用，另外可以将杀菌成分及抗菌成分、唾液分泌促进成分混入或覆盖等，没有与所采集的口腔内分泌液的非特异性的非计划中的吸附或对口腔内分泌液的污染，另外具有柔软性及耐水性，加工性也良好，具备在使用中不会破损的机械强度，就没有特别限制。例如可以举出纸、硅、尼龙、聚酯、聚乙烯、聚对苯二甲酸乙二酯、聚苯乙烯、聚丙烯等。通过将活塞棒制成纸轴，将垫圈制成硅管，将推压用垫设为聚丙烯，或将三者都设为纸制，就可以廉价地制造，另外由于与唾液吸收体的密合性和加工性的良好，而可以合适地使用。
唾液浆液成分回收器具只要对人体没有影响，另外可以将杀菌成分及抗菌成分混入或覆盖等，没有与所采集的口腔内分泌液的非特异性的非计划中的吸附，另外具有柔软性及耐热性，加工性也良好，具备在使用中不会破损的机械强度，就没有特别限制。例如可以举出硅、尼龙、聚酯、聚乙烯、聚对苯二甲酸乙二酯、聚苯乙烯、聚丙烯等。
位于唾液浆液成分回收器具的前端的回收孔只要是与唾液吸收体压榨部相连，在孔途中作为过滤层具有与唾液吸收体相同成分的微量片，通过向回收孔推压而实现从回收孔中回收唾液浆液成分的构造及功能，可以有效地实施回收检测样品的点样等的形状，就没有特别限制。
唾液吸收体插入接收口兼触指突起只要具有能够容易地导引唾液吸收体的插入的形状，在为了压榨唾液吸收体而进行推压时，具备可以放置手指的形状和没有破损及变形的机械强度，就没有特别限制。
唾液内在性阻碍物质的分解只要可以通过使唾液浆液成分回收器具的内部壁面及、或过滤层中固定、含有分解物质，在回收唾液浆液成分时分解结束的功能，就没有特别限制。例如，作为抗坏血酸的分解物质，可以举出抗坏血酸氧化酶，作为尿酸的分解物质，可以举出尿酸酶等，可以根据唾液的检测项目使用各种分解物质。需说明的是，当唾液检测项目为尿酸时，不能使用尿酸酶。
实施例下面将对本发明的实施例进行具体说明，但是本发明并不受它们限定。
实施例1唾液采集器具及唾液浆液成分回收器具本实施例的唾液的采集器具及唾液浆液成分回收器具的一个例子被表示在图1中。
棉签型唾液采集器具1形成了在表面具有抗菌成分壳质/壳聚糖的棉花制成的唾液吸收体2、与作为纸轴的活塞棒3同样地由纸构成的垫圈4及推压垫5。而且，唾液吸收体在这里按照达到65mm3的体积的方式制成了圆锥状。
注射器型唾液浆液回收器具6由聚乙烯成形，将压榨部8的内部体积设为20mm3的圆锥状，在从压榨部8到回收孔7的途中配置1mm3的上述棉花，作为过滤层。而且，将回收孔径设为1mm以下，防止唾液浆液成分回收时的棉花的脱落。另外，唾液吸收体插入接收口兼触指突起设为半径5mm的喇叭裤状。
实施例2唾液的采集及回收试剂盒本实施例的唾液的采集及回收试剂盒及使用方法的一个例子被表示在图2中。
将作为杀菌成分的0.05wt％氯化十六烷基吡啶(武田药品工业(株)制)、作为唾液分泌促进成分的甜味料、酸味料及香料(POLAFOODS(株)制)调和，形成带有甜酸口味的溶液，设为含有唾液分泌成分的杀菌漱口液10。
向在上述调和溶液中又添加了羧甲基纤维素(第一工业制药(株)制)的溶液中，喷雾含有作为抗菌成分的壳质/壳聚糖的无纺布(80g/m2)(OMIKENSHI(株)制)，使之干燥，作为舌下剩余水分吸收体11。
将向唾液吸收体2喷雾上述调和液并使之干燥后的器具作为唾液采集器具1。
由以上3件构成的试剂盒的使用方法为，首先将含有唾液分泌成分的杀菌漱口液10特别是以舌下为中心地喷雾。漱口没有特别限定，可以是含漱、滴下等。然后，将舌下剩余水分吸收体11配置在舌下及口腔底之间，结果含有成分再溶解而显现出味道，舌下的水分被吸收、除去。
在上述的前处理后，快速地将唾液采集器具1配置在了舌下及口腔底之间，结果确认利用味道及香味有良好的唾液分泌。其后，通过利用唾液浆液成分回收器具6压榨膨胀了的唾液吸收体2，从回收孔7中得到了除去了被认为是粘蛋白的粘性物质的浆液成分唾液12。
这里，在未观察到口腔干燥症等疾患的被检测者中，在唾液采集器具1配置30秒后，进行压榨，结果得到了25毫升浆液成分唾液12。
另外，作为唾液内在性阻碍物质的分解，以抗坏血酸为对象，将抗坏血酸氧化酶(东洋纺织(株))溶液向配置于唾液浆液成分回收器具6的内部壁面及回收孔7的内面上的过滤器喷雾，使之干燥。然后，使添加了抗坏血酸的唾液润湿唾液吸收体2，利用唾液浆液成分回收器具6进行压榨，回收浆液成分唾液12。其结果是，确认了由被再溶解了的抗坏血酸氧化酶导致的抗坏血酸的分解。同样，以尿酸为对象，使用了尿酸酶(东洋纺织(株))的结果是，也确认了尿酸的分解。
而且，除了利用上述的3件构成的试剂盒以外，也提供由上述舌下剩余水分吸收体11及唾液采集器具1、唾液浆液成分回收器具6的2件构成的工具或除去了前处理件的仅由唾液采集器具1、唾液浆液成分回收器具6构成的试剂盒。
上述实施例中，虽然关于唾液的采集及回收用简易器具，图示了特定的形状，但是本发明并不限于此。
另外，关于同时使用的含有唾液分泌成分的杀菌漱口液10及舌下剩余水分吸收体11，也不受上述实施例限定。
权利要求
1.一种唾液采集及唾液浆液成分回收器具，是主要采集由舌下腺及下颌下腺分泌的唾液、除去唾液中的粘性成分而用于回收浆液性的唾液的唾液采集及唾液浆液成分回收器具，其特征是，由棉签型采集器具及注射器型回收器具构成，在该棉签型采集器具的一端，具有至少含有杀菌成分及、或抗菌成分和、唾液分泌促进成分的双方或前者的圆锥形或半球形的柔软的唾液吸收体，在该圆锥或该半球的底边部分具有与注射器型回收器具的内径一致的垫圈，该注射器型回收器具的一端为了容易插入唾液吸收体而具有宽开口的接收口，在注射器型回收器具的另一端，设有具有过滤器功能的唾液的回收孔以及与唾液吸收体相比内部体积小一圈的圆锥或半球形状的吸收体压榨部，在注射器型回收器具的内面具有分解唾液内在性阻碍物质的物质。
2.根据权利要求1上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具，其特征是，上述杀菌成分及抗菌成分至少具有杀除及抵抗分解葡萄糖的口腔内细菌的功能，由单一或多种成分构成，杀菌成分为氯化十六烷基吡啶鎓、氯化苄烷铵或氯化苄乙氧铵，抗菌成分为壳质/壳聚糖。
3.根据权利要求1或2上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具，其特征是，上述唾液分泌促进成分为不阻碍回收唾液的测定的甜味料、酸味料、香料这至少3种。
4.根据权利要求1至3中任意一项上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具，其特征是，上述唾液吸收体由棉花、纤维素、尼龙、聚氨酯、聚酯、人造丝的单一或多种成分构成，具有将唾液快速吸收并进而在该吸收体的纤维间捕捉唾液中粘性成分的功能。
5.根据权利要求1至4中任意一项上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具，其特征是，上述回收孔至少由单一或多个孔构成，通过在朝向该回收孔的出口逐渐变细的孔的途中微量配置单一或多种成分的上述唾液吸收体，而具有过滤器功能。
6.根据权利要求1至5中任意一项上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具，其特征是，上述唾液内在性阻碍物质的分解物质固定化、含有在上述注射器型回收器具的内部壁面及、或上述过滤器，具有在回收唾液浆液成分时将阻碍测定的唾液内在性物质特异性地分解的功能。
7.根据权利要求1至6中任意一项上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具，其特征是，上述唾液吸收体的体积在150mm3以下。
8.一种唾液采集及唾液浆液成分回收试剂盒，其特征是，含有权利要求1至7中任意一项上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具、至少含有上述杀菌成分及上述唾液分泌促进成分的漱口液、及为至少含有唾液分泌促进成分及水溶性高分子的无纺布的舌下的剩余水分吸收体。
9.一种唾液采集及唾液浆液成分回收试剂盒，其特征是，由为至少含有上述杀菌成分、上述唾液分泌促进成分及水溶性高分子的无纺布的舌下剩余水分吸收体及权利要求1至7中任意一项上述的唾液采集及唾液浆液成分回收器具构成。
10.根据权利要求8或9上述的唾液采集及唾液浆液成分回收试剂盒，其特征是，上述水溶性高分子具有提高含有物质向剩余水分吸收体中的再溶解性，使柔软的无纺布具有适度的强度的功能。
11.一种在进行杀菌及唾液分泌促进的同时进行的唾液采集及唾液浆液成分回收方法，其特征是，实施使用了上述权利要求1至10中任意一项上述的器具或试剂盒的、利用上述漱口液进行的漱口、利用上述剩余水分吸收体进行的舌下的除水、唾液的采集及唾液浆液成分的回收这3阶段的操作，或实施利用上述剩余水分吸收体进行的舌下的除水、唾液的采集及唾液的浆液成分的回收这2阶段的操作，或实施唾液的采集及唾液浆液成分的回收这1阶段的操作。
全文摘要
本发明提供唾液的采集及回收用注射器型器具以及使用了该器具的唾液采集及唾液浆液成分回收方法。其特征是，是在进行以唾液中的葡萄糖定量为代表的唾液检测为目的的唾液的采集时，同时实施口腔内的杀菌、唾液分泌促进、微量采集的方法，另外使用了将唾液中的粘性成分除去而回收唾液浆液成分的廉价的构件。
文档编号G01N33/487GK1720437SQ02830119
公开日2006年1月11日 申请日期2002年11月21日 优先权日2002年11月21日
发明者横山彻, 筱塚直树 申请人:札幌免疫诊断研究所
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