专利名称：胶塞中挥发性物质的检测方法
技术领域：
本发明涉及药包材成分的检测方法，具体地说，涉及胶塞中挥发性物质的检测方法。
背景技术：
胶塞中的挥发性物质是指为了改善胶塞的使用性能和胶塞本身的耐用性而在胶塞的生产过程中添加的一些成分。上述挥发性物质(如BHT、聚乙烯脂、硬脂酸、硅油等) 会在胶塞的使用过程中挥发出来，特别是药用胶塞中的挥发性物质会污染药品。如果药品中所含的上述挥发性物质水平高于安全值时，就会影响药品的质量并对人体产生�：Α６越喝谢臃⑿晕镏式锌刂频哪训阍谟冢嗤分值慕喝械幕臃⑿晕镏示哂胁蝗范ㄐ浴Ｕ馐怯捎诓煌纳笠悼梢圆捎貌煌呐浞胶蜕ひ丈嗤分值慕喝医喝纳ひ找苍诓欢媳浠慕沟媒喝械幕臃⑿晕镏什欢媳浠虼私⑷婵焖俚募觳庀低呈墙喝臃⑿晕镏什舛ǖ那魇�。目前，国内尚无针对胶塞挥发性物质的检测方法，药典常用气相色谱法(GC)对药品中的残留溶剂进行检测(残留溶剂也是挥发性的，但是不同于胶塞中的挥发性物质)，如 《中国药典》2010版推荐的检测方法为顶空毛细管气相色谱法。气相色谱法中的定性分析主要是依据保留时间，这需要和已知的标准物质的保留时间进行比对，但是对于未知峰，则很难进行定性分析。此外，用常规气相色谱法检测胶塞中含有的挥发性物质时，由于胶塞中的挥发性物质种类较多，不同挥发性物质在一根色谱柱上的保留时间可能相同或相近，这给挥发性物质的定性及定量分析都带来了困难。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高效、准确的检测胶塞中挥发性物质的方法。为了实现上述目的，本发明的胶塞中挥发性物质的检测方法，其包括如下步骤1)数据库的建立a、用极性相反的两个色谱柱对建库样品中的挥发性物质进行气相色谱分析，然后以2，6_ 二叔丁基对甲酚(BHT)为参比物质，分别计算各色谱峰的相对保留时间；b、然后再用所述极性相反的两个色谱柱对所述建库样品中的挥发性物质进行气质联用分析，分别对所述建库样品中的挥发性物质进行定性分析，确定其所属种类；C、在所述建库样品中加入内标物，重复步骤a、b，然后将气相色谱检测器上的经由所述极性相反的两个色谱柱得到的色谱峰，分别与质谱检测器上得到的峰进行相似度匹配；d、根据步骤c的相似度匹配结果，建立所述极性相反的两个色谱柱的色谱峰之间的对应关系，及其与质谱图之间的对应关系，并根据质谱进行归类，从而建立数据库；2)待测胶塞中挥发性物质的测定
e、用所述极性相反的两个色谱柱对待测胶塞中的挥发性物质进行气相色谱分析， 并根据步骤a方法计算两个色谱柱的各色谱峰的相对保留时间；f、将步骤e得到的相对保留时间与步骤1)的数据库相比较，从而确定待测胶塞中含有的挥发性物质的种类。其中，所述建库样品包括丁基胶塞、溴化丁基胶塞及氯化丁基胶塞等已知的各种胶塞；还可以包括聚乙烯脂，酚醛树脂、硬脂酸、溴化丁基胶塞原胶，氯化丁基胶塞原胶及俄罗斯胶等现有胶塞的各种原辅料。所述内标物为苯、甲苯、乙酸丁酯、四氢化萘、正丁醇、正戊醇或BHT等。所述极性相反的两个色谱柱是指在气相色谱中并联的两个极性相反的色谱柱，优选为非极性色谱柱和极性色谱柱。其中，所述非极性色谱柱包括固定相为聚氧硅烷或聚二甲基硅烷的色谱柱，如Supelco公司生产的SPB-I型非极性色谱柱；所述极性色谱柱包括固定相为聚乙二醇-硝基对苯二甲酸修饰的色谱柱，如安捷伦公司生产的HP-FFAP型极性色谱柱。步骤a中气相色谱的色谱条件为程序升温40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；进样口温度:200°C;恒定流速2. OmL/min ；载气氦气；分流比5 1 ；检测器温度250°C;顶空温度:150°C ；顶空时间:30min。步骤b中气质联用色谱条件为程序升温40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；进样口温度200°C ；恒定流速1. OmL/min ；不分流；检测器温度250°C ；顶空温度150°C ；顶空时间:30min。本发明所述的相似度匹配是使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统Q004A版， 国家药典委员会)进行相似度分析，相似度在800以上可以认为是相匹配的峰，所述相似度分析的计算原理为夹角余弦。此外，为了验证本发明方法的重复性，还可以在建立数据库后增加确定每种挥发性物质的时间窗的步骤。本发明方法在气相色谱的进样系统后增加了一个双通道或三通道的分流管，每个通道有独立的开关控制其流通量，分流管后至少并列连接两个极性相反的色谱柱，从而实现了并联使用两个极性相反的色谱柱的目的，其能够在保证进样样品和进样条件一致性的同时，使得在一根色谱柱上保留时间相同或相近的挥发性物质在极性相反的色谱柱上有相差较大的保留时间。具体地说，本发明方法中使用的气相色谱，当使用双通道的分流管时，与之并列连接的是两根极性相反的色谱柱；当使用三通道的分流管时，与之并列连接的除了上述极性相反的色谱柱外，还有质谱分析系统，使质谱分析系统与气相色谱构成并列运作的分析系统。所述分流管可以是玻璃管、不锈钢管等现有色谱仪器中可以使用的材质制备的分流管，对其形状、大小等没有特别限制，可以根据不同型号的仪器进行选择。所述分流管可以以可拆卸的方式应用于气相色谱中；也可以将其固定在气相色谱仪或气质联用仪器中， 此时通过控制每个通道的开关来选择不同的检测系统，例如为单色谱柱、双色谱柱、或气相和质谱并用检测系统。本发明的检测方法，针对现有技术的不足，将极性相反的两个色谱柱并联使用，在保证进样样品和进样条件一致性的同时，使得在一根色谱柱上保留时间相同或相近的挥发性物质在极性相反的色谱柱上有相差较大的保留时间。通过将两根色谱柱测定后的保留时间与数据库进行比较，结果可以在没有标准品的情况下进行定性分析，初步确定药用胶塞中挥发性物质的种类，从而避免了对未知峰进行盲目筛选。当测量过程中出现未知色谱峰需要进一步确定时，可以使用与色谱柱系统并联的质谱分析系统同时检测，综合所得结果进行确定。此外，由于同一种挥发性物质在极性不同的色谱柱上的保留时间不同，相对保留时间也不同，因此通过联用质谱来确定同一挥发性物质在两种色谱柱上的保留时间，并把这两个保留时间联系起来，形成互为佐证的一个系统，并通过质谱的NIST数据库提供的结构式，并用有机化合物命名法命名，从而对挥发性物质进行归类，从而建立胶塞挥发性物质的数据库。本发明的优点在于，本发明方法能够使同一样品在一次实验中同时得到两组数据，大大节省了定性筛选的试验时间，并可以有效排除共出峰的干扰；通过建立胶塞挥发性物质的数据库，可以快速全面地对胶塞挥发性物质进行筛�。痪窒抻诰咛迤分郑峭ㄓ眯褪菘猓涣硗猓痉⒚鞣椒ㄒ子谕乒�。
图1为双通道并联色谱柱系统模式图；图2为胶塞挥发性物质极性色谱系统拟合图谱；图3为胶塞挥发性物质非极性色谱系统拟合图谱。
具体实施例方式以下通过具体实施例进一步说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例1胶塞挥发性物质数据库的建立仪器和软件1 (气相)Trace GC Ultra (热电公司)；顶空系统(热电公司)；数据分析软件为)(calibur 数据处理系统(热电公司)；色谱柱SPB-I型非极性色谱柱(30mX0.32mmXlum， supelco)，HP-FFAP型极性色谱柱(30mX0. 32mmX0. 52um,安捷伦公司)，各部件连接示意图如图1所示。色谱条件1 (气相)程序升温40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；进样口温度:200°C;恒定流速2. OmL/min ；载气氦气；分流比5 1 ；检测器温度250°C;顶空温度:150°C ；顶空时间:30min。仪器和软件2 (气质联用)Trace GC Ultra-Polaris Q(热电公司)；顶空系统(热电公司)；数据分析软件为kalibur数据处理系统(热电公司)；色谱柱SPB-I型非极性色谱柱 (30mX0. 25mmX 0. 25um, supelco)，HP-FFAP 型极性色谱柱(30mX 0. 25mmX 0. 25um，安捷伦公司)。色谱条件2 (气质联用)程序升温40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；进样口温度200°C ；恒定流速1. Oml/min ；不分流；检测器温度250°C ；顶空温度150°C ；顶空时间:30min。BHT参比物质的配置精密称取5mgBHT，与50g分析纯氯化钠在研钵中混合并研制均勻，制成浓度0. 1 μ g/mg的参比物。建库样品氯化丁基橡胶塞(江阴兰陵、山东药玻)、溴化丁基橡胶塞(江苏博生医用材料股份有限公司、安徽华峰、成都南环)、丁基橡胶塞(重庆三海兰陵公司)。内标物苯、甲苯、乙酸丁酯、四氢化萘、正丁醇、正戊醇及2，6_ 二叔丁基对甲酚。步骤(1)在上述给定的色谱条件1下，以甲烷测定死时间，分别测定建库样品中的挥发性物质在极性与非极性色谱柱(两个色谱系统)上的保留时间；以BHT的调整保留时间作为参比，计算每种挥发性物质的调整相对保留时间，结果见表1，其中Tk(min)为保留时间， RART为调整相对保留时间；(2)在上述给定的色谱条件2下，用质谱检测器对上述标准样品中的挥发性物质进行检测，结果见表2;(3)在标准样品中加入多种不同的内标物，重复步骤(1)、O)，然后分别对并联的极性和非极性色谱柱系统在FID检测器上得到的挥发性物质的峰与在质谱检测器上得到的挥发性物质的峰进行匹配，结果见表3 4 ；所述匹配是用中药色谱指纹图谱相似度评价系统O004A版，国家药典委员会)进行相似度分析，相似度在800以上可以认为是相匹配的峰；(4)然后根据匹配结果，建立标准样品的挥发性物质在极性相反的两个色谱柱的峰之间的对应关系(如表5所示)，及其与质谱图之间的对应关系，并根据质谱对挥发性物质进行归类，从而建立胶塞中挥发性物质数据库，结果如表6所示；(5)确定每种挥发性物质时间窗，以验证本发明方法的重复性，结果见表7。表1气相中胶塞挥发性物质的的保留时间和相对保留时间
权利要求
1.胶塞中挥发性物质的检测方法，其包括如下步骤1)数据库的建立a、用极性相反的两个色谱柱对建库样品中的挥发性物质进行气相色谱分析，然后以2， 6-二叔丁基对甲酚为参比物质，分别计算各色谱峰的相对保留时间；b、然后再用所述极性相反的两个色谱柱对所述建库样品中的挥发性物质进行气质联用分析，分别对所述建库样品中的挥发性物质进行定性分析，确定其所属种类；C、在所述建库样品中加入内标物，重复步骤a、b，然后将气相色谱检测器上的经由所述极性相反的两个色谱柱得到的色谱峰，分别与质谱检测器上得到的峰进行相似度匹配；d、根据步骤c的相似度匹配结果，建立所述极性相反的两个色谱柱的色谱峰之间的对应关系，及其与质谱图之间的对应关系，并根据质谱结果进行归类，从而建立数据库；2)待测胶塞中挥发性物质的测定e、用所述极性相反的两个色谱柱对待测胶塞中的挥发性物质进行气相色谱分析，并根据步骤a方法计算两个色谱柱的各色谱峰的相对保留时间；f、将步骤e得到的相对保留时间与步骤1)的数据库相比较，从而确定待测胶塞中含有的挥发性物质的种类。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述建库样品包括丁基胶塞、溴化丁基胶塞及氯化丁基胶塞。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述建库样品还包括聚乙烯脂， 酚醛树脂、硬脂酸、溴化丁基胶塞原胶，氯化丁基胶塞原胶及俄罗斯胶。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述内标物为苯、甲苯、乙酸丁酯、 四氢化萘、正丁醇、正戊醇或2，6_ 二叔丁基对甲酚。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述极性相反的两个色谱柱是指在气相色谱中并联的两个极性相反的色谱柱。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述极性相反的两个色谱柱为非极性色谱柱和极性色谱柱。
7.根据权利要求1任意一项所述的检测方法，其特征在于，步骤a中所述气相色谱的色谱条件为程序升温40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；进样口温度:200°C;恒定流速2. OmL/min ；载气氦气；分流比5 1 ；检测器温度250°C;顶空温度:150°C ；顶空时间:30min。
8.根据权利要求1任意一项所述的制备方法，其特征在于，步骤b中所述气质联用的色谱条件为程序升温40°C保持lOmin，然后以10°C /min的速度升至170°C并保持IOmin ；进样口温度200°C ；恒定流速1. OmL/min ；不分流；检测器温度250°C ；顶空温度150°C ；顶空时间30min。
全文摘要
本发明提供了一种胶塞中挥发性物质的检测方法，其包括如下步骤1)建立胶塞中挥发性物质数据库；2)测定待测胶塞中挥发性物质。本发明的优点在于，本发明方法能够使同一样品在一次实验中同时得到两组数据，大大节省了定性筛选的试验时间，并可以有效排除共出峰的干扰；通过建立胶塞挥发性物质的数据库，可以快速全面地对胶塞挥发性物质进行筛�。痪窒抻诰咛迤分郑峭ㄓ眯褪菘猓涣硗猓痉⒚鞣椒ㄒ子谕乒�。
文档编号G01N30/88GK102375043SQ20101026361
公开日2012年3月14日 申请日期2010年8月25日 优先权日2010年8月25日
发明者崇小萌, 张宇, 胡昌勤 申请人:中国药品生物制品检定所
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