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专利名称：一种紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法
技术领域：
本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素 色素的方法。
背景技术：
天然紫甘薯花青素色素具有许多优点无毒、无副作用、安全性高；色调比较 自然，接近于天然物质；原料来源便捷，价格低廉；工艺简单，提取成本低；易溶于 水，在饮料中的稳定性好，且抗脂氧化性强；具有多种营养、药理和保健功能。因此紫 甘薯花青素色素在食品、化工、化妆品以及医药行业均有广泛的利用价值。目前研究紫 甘薯花青素色素提取、纯化和功能性质的较多，但是对检测方法的研究却较少，其检测 的方法一般是延用其他色素的检测方法，没有统一的国标来规范。由于不同色素性质迥 异，套用其它色素的检测方法会对紫甘薯花青素色素的生产带来诸多偏差和不便。
现行色素检测分析方法有高效液相色谱法和薄层色谱法前者灵敏度及准确度 高，但仪器贵昂不能普及；后者灵敏度低，准确度差。对于色素含量的测定，国内外常 用的做法是以合成苋菜红为基准物来计算其绝对含量。此法可以较准确地反映色素总含 量，但它需要标准样品，不适合基层工厂使用。因此，为了适应紫甘薯花青素色素生产 的需要，如何制定出一种专门针对紫甘薯花青素色素的检测方法成为人们迫切的需求。发明内容
本发明的目的在于提供一种专门针对紫甘薯花青素色素的检测方法，为紫甘薯 花青素色素生产企业提供经济、直观、快速的定性和定量测定。
本发明的目的是通过以下方案来实现的一种紫外-分光光度法检测紫甘薯花 青素色素的方法，其特征在于该方法包括以下步骤
a、制备紫甘薯花青素色素提取液；
b、将紫甘薯花青素色素提取液调节为酸性；
C、在甘薯花青素色素的最大吸收波长下，对待测花青素色素溶液进行吸光度检 测。
所述紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法还包括所述b步骤溶液中甘 薯花青素色素的最大吸收波长的测定。该步骤是为了确定出最大吸收波长，同时还能进 行定性判断。
所述紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法还包括绘制标准曲线，确 定吸光度的线性范围。该步骤的作用在于如果发现待测液的吸光度太小或太大不在线性 范围之中时，应该提高或降低浓度，将吸光度调节到该线性范围之内，确保测量精确。
所述绘制标准曲线，确定吸光度的线性范围为分别配制不同质量浓度的紫甘薯 花青素色素溶液于烧杯中，调节该紫甘薯花青素色素溶液得PH值，该紫甘薯花青素色素 溶液得pH值与所述b步骤中溶液的pH值相等，然后转移至容量瓶中并定容；分别从上述容量瓶取等量的样品，加入足量的亚硫酸钠，静置，使色素完全漂白，分别作为相应 浓度紫甘薯花青素色素溶液的空白样，在步骤C中测得的最大吸收波长下对甘薯花青素色 素提取液进行定点检测，绘制标准曲线，确定吸光度的线性范围。
所述b步骤中将紫甘薯花青素色素提取液的pH值调节为1-3。
所述b步骤中将紫甘薯花青素色素提取液的pH值调节为3。
在所述e步骤中，所述花青素色素溶液的吸光度检测在10-60°C下进行。
本发明的优点在于由于物质对光的吸收具有选择性，所以不同的食用色素具 有不同的吸收谱图。利用这一原理，应用紫外-可见分光光度计对紫甘薯花青素色素进 行吸收光谱扫描，并与标准谱图对照，即可直观、快速的定性。并在紫甘薯花青素色素 最大吸收峰波长下测定定量样品的吸光度，可求得色价，从而确定样品中色素的含量， 灵敏度和准确度均较高。本发明的检测方法操作简单、计算简便、结果明显，所用仪器 价格便宜、检测成本低廉，并且适合生产一线使用。是一种专门针对紫甘薯花青素色素 的检测方法，为紫甘薯花青素色素生产企业提供经济、直观、快速的定性和定量测定。


图1为本发明紫甘薯花青素色素溶液在pH = 3时紫外吸收光谱图2为本发明紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法紫甘薯色素浓度对 线性关系的影响。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步说明。
如图1所示，一种紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，该方法包括 以下步骤a、制备紫甘薯花青素色素提取液，将紫甘薯粉末进行溶解，精密称取待测色 素样品5g，用pH值=6的水溶解并定容至50ml，作储备液；b、调节pH值，取IOml储 备液，用0.1mol/L的HCl和O.lmol/L的NaOH调节pH至3，然后转移至IOOmL的容量 瓶中，用pH为3的磷酸氢二钠-柠檬酸的缓冲溶液定容至100ml，待平衡2小时后作为 待测提取液；C、在甘薯花青素色素的最大吸收波长下，对待测花青素色素溶液进行吸光 度检测。
紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法还包括b步骤溶液中甘薯花青素 色素的最大吸收波长的测定。在不知道紫甘薯花青素色素在某一pH值下的最大吸收波长 时，通过该步骤进行测定。
紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法还包括绘制标准曲线，确定吸 光度的线性范围，该步骤具体为分别配制不同质量浓度的紫甘薯花青素色素溶液于烧杯 中，调节该紫甘薯花青素色素溶液得pH值，该紫甘薯花青素色素溶液得pH值与所述b步 骤中溶液的pH值相等，然后转移至容量瓶中并定容；分别从上述容量瓶取等量的样品， 加入足量的亚硫酸钠，静置，使色素完全漂白，分别作为相应浓度紫甘薯花青素色素溶 液的空白样，在步骤c中测得的最大吸收波长下对甘薯花青素色素提取液进行定点检测， 绘制标准曲线，确定吸光度的线性范围。
实验实施例1 :分别取IOml紫甘薯花青素色素提取液于6个烧杯中，用O.lmol/L的HCl和0.1mol/L的NaOH调节pH至1、2、3、4、5、6，然后转移至IOOmL的容量瓶中，分别用pH为1、2、3、4、5、6的磷酸氢二钠-柠檬酸的缓冲溶液定容至100ml。 待其平衡Zh，以蒸馏水为空白样进行检测。在400-600nm的波长范围内进行扫描，得到 不同pH值下的最大吸收波长和最大吸收值。相同浓度的紫甘薯花青素色素在不同pH值 下的吸收情况见表1。
表IpH值对紫甘薯花青素色素吸光度和最大吸收波长的影响
权利要求
1.一种紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，其特征在于该方法包括 以下步骤a、制备紫甘薯花青素色素提取液；b、将紫甘薯花青素色素提取液调节为酸性；c、在甘薯花青素色素的最大吸收波长下，对待测花青素色素溶液进行吸光度检测。
2.按照权利要求1所述的紫外_分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，其特征在 于所述紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法还包括所述b步骤溶液中甘薯花 青素色素的最大吸收波长的测定。
3.按照权利要求1或2所述的紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，其特 征在于所述紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法还包括绘制标准曲线，确 定吸光度的线性范围。
4.按照权利要求3中任意一项权利要求所述的紫外_分光光度法检测紫甘薯花青素色 素的方法，其特征在于所述绘制标准曲线，确定吸光度的线性范围为分别配制不同质 量浓度的紫甘薯花青素色素溶液于烧杯中，调节该紫甘薯花青素色素溶液得pH值，该紫 甘薯花青素色素溶液得pH值与所述b步骤中溶液的pH值相等，然后转移至容量瓶中并定 容；分别从上述容量瓶取等量的样品，加入足量的亚硫酸钠，静置，使色素完全漂白， 分别作为相应浓度紫甘薯花青素色素溶液的空白样，在步骤c中测得的最大吸收波长下对 甘薯花青素色素提取液进行定点检测，绘制标准曲线，确定吸光度的线性范围。
5.按照权利要求1所述的紫外_分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，其特征在 于所述b步骤中将紫甘薯花青素色素提取液的pH值调节为1-3。
6.按照权利要求5所述的紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，其特征在 于所述b步骤中将紫甘薯花青素色素提取液的pH值调节为3。
7.按照权利要求1所述的紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，其特征在 于在所述e步骤中，所述花青素色素溶液的吸光度检测在10-60°C下进行。
全文摘要
本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种紫外-分光光度法检测紫甘薯花青素色素的方法，该方法包括以下步骤a、制备紫甘薯花青素色素提取液；b、将紫甘薯花青素色素提取液调节为酸性；c、在甘薯花青素色素的最大吸收波长下，对待测花青素色素溶液进行吸光度检测。本发明的检测方法操作简单、计算简便、结果明显，所用仪器价格便宜、检测成本低廉，并且适合生产一线使用，同时本发明是一种专门针对紫甘薯花青素色素的检测方法，为紫甘薯花青素色素生产企业提供经济、直观、快速的定性和定量测定。
文档编号G01N21/33GK102023136SQ20101017914
公开日2011年4月20日 申请日期2010年5月21日 优先权日2010年5月21日
发明者周树勇 申请人:湖北紫鑫生物科技有限公司