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专利名称：一种含有提高胱抑素c胶乳包被抗体的稳定性的组合物、稳定剂及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属生物技术领域，涉及了一种增强抗体稳定性的组合物，具体涉及一种含有提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性的组合物、稳定剂及其制备方法和用途。
背景技术：
1983年Anastasi等首次在鸡蛋清中分离纯化得到高纯度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine proteinase inhibitor, CPI)后被命名为胱抑素C,是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，也被称为Y-微量蛋白及Y-后球蛋白。胱抑素C广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中，是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质，分子量为13.3KD，由122个氨基酸残基组成，可由机体所有有核细胞产生，产生率恒定。循环中的胱抑素C，仅经肾小球滤过而被清除，是一种反映肾小球滤过率变化的内源性标志物，并在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代谢分解，不返回血液。因此，其血中浓度由肾小球滤过决定，而不依赖任何外来因素，如性别、年龄、饮食的影响，是一种反映肾小球滤过率变化的理想同源性标志物。现有的胱抑素C胶乳包被抗体在常规冷藏储存条件下，保持期一般为12个月。

发明内容
胱抑素C试剂盒由两个试剂组成，分别是试剂I和试剂2，试剂I的配方见后面的具体实施方式
；试剂2由胱抑素胶乳包被抗体及其稳定试剂组成。本发明的目的在于，提供一种含有胱抑素C胶乳包被抗体的稳定剂及其制备方法和用途，以克服现有技术所存在的上述缺点和不足，本发明用于试剂2的制备方法，可提高胱抑素C的生化检测试剂的稳定性。本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现:
作为本发明的第一方面，一种含有提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性的组合物，其特征在于:其配方包括以下物质:
(1)甘油含量4.8_5.2g/l，
(2)缓冲液18-22mmol/l，
(3)表面活性剂0.3g/广l.0g/1，
(4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及
(5)pH值调整剂。进一步，所述缓冲液为甘氨酸缓冲液或甘氨酸盐缓冲液，所述甘氨酸或甘氨酸盐的含量为18-22mmol/l。进一步，所述表面活性剂为非离子表面活性剂聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量为0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量为0.2g/l 0.5g/l。
优选聚氧乙烯月桂醚含量为0.8g/l，三乙醇胺含量为0.3g/l。进一步，胱抑素C胶乳包被抗体在组合物中的含量为10ml/l。
作为本发明的第二方面，一种含有所述的提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性的组合物的稳定剂，其配方包括以下物质:
(1)甘油含量4.8-5.2g/l，
(2)缓冲液18-22mmol/l，
(3)表面活性剂0.3g/广l.0g/1，
(4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及
(5)pH值调整剂。进一步，所述缓冲液为甘氨酸缓冲液或甘氨酸盐缓冲液，所述甘氨酸或甘氨酸盐的含量为18-22mmol/l。进一步，所述表面活性剂为非离子表面活性剂聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量为0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量为0.2g/l 0.5g/l。优选聚氧乙烯月桂醚含量为0.8g/l，三乙醇胺含量为0.3g/l。进一步，所述稳定剂的剂型为液体剂型。进一步，胱抑素C胶乳包被抗体在组合物中的含量为10ml/l。进一步，所述pH值为5.8-6.2。
作为本发明的第三方面，一种胱抑素C胶乳包被抗体的稳定剂的制备方法，其特征在
于:
(一)原料的准备，按照配方称取原料:
(1)甘油含量4.8-5.2g/l，
(2)缓冲液18-22mmol/l，
(3)表面活性剂0.3g/广l.0g/1，
(4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及
(5)pH值调整剂；
(二)混合,原料的添加顺序为:甘油、缓冲液、表面活性剂、牛血清白蛋白，每种原料溶解后再添加另外一种物质；
(三)待上述原料溶解后，然后使用pH值调整剂调节pH；
(四)最后加入胱抑素C胶乳包被抗体。进一步，胱抑素C胶乳包被抗体在稳定剂中的含量为10ml/l。进一步，所述pH值调整剂为lmol/1氢氧化钠或lmol/1 HCl。
作为本发明的第四方面，一种含有提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性的组合物的用途，其特征在于:用于增加胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性。
作为本发明的第五方面，一种胱抑素C胶乳包被抗体的稳定剂的用途，其特征在于:用于制备胱抑素C检测试剂盒。所述稳定剂用于配制胱抑素C生化检测试剂。本发明的有益效果:
未采用本稳定剂时，在相同储存条件下保持期仅为为12个月。本发明通过将甘油、缓冲液、表面活性剂、牛血清白蛋白和PH值调整剂应用于提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性，显著提高了胱抑素生化试剂的稳定性，在常规冷藏储存条件下保持期可达到20个月。
本发明的表面活性剂选用聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，它们同属于非离子表面活性剂，溶于水时不发生解离，其分子中的亲油基团与离子型表面活性剂的非离子表面活性剂基团大致相同，其亲水基团主要是由具有一定数量的含氧基团(如羟基和聚氧乙烯链)构成，所以能进一步增加稳定性。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本发明作进步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。
本发明可用于胱抑素C试剂盒中试剂2的配制方法，与试剂I共同组成一个完整的试剂盒。其中，本发明涉及的胱抑素C试剂盒试剂I的配方为:PEG含量为3%，PIPES含量为 SOmmoI / I, proclin 300 2g/l,pH=7.9。
试剂2中存在的甘油为市售产品，分析纯。
甘氨酸，市售产品，分析纯。
表面活性剂:聚氧乙烯月桂醚、三乙醇胺，均为市售产品，化学纯。
聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，它们同属于非离子表面活性剂，溶于水时不发生解离，其分子中的亲油基团与离子型表面活性剂的非离子表面活性剂基团大致相同，其亲水基团主要是由具有一定数量的含氧基团(如羟基和聚氧乙烯链)构成。
牛血清白蛋白，市售产品，蛋白含量不低于95%。
实施例1在胱抑素C试剂盒中的应用 1、胱抑素C胶乳包被抗体的稳定剂的制备: (I)准确称量甘油lg，甘氨酸1.5g，聚氧乙烯月桂醚0.Sg，三乙醇胺0.3 g，牛血清白蛋白I g。
(2)然后按照以上称量顺序进行溶解，不可用力搅拌。
(3)然后使用lmol/1盐酸或氢氧化钠将其pH调至6.0。
(4)再加入IOml已经制备好的胱抑素C胶乳包被抗体(胱抑素C抗体和胶乳通过化学交联反应制得)，使用前使用超声波分散均匀。
2、保持期的检测 在2 8°C保存，隔3个月检测一次，采用透射比浊法在生化分析仪上进行测试。检测结果与新制备的试剂，偏差在10%之内，保持期可达到二十个月。
实施例2在胱抑素C试剂盒中的应用 1、胱抑素C胶乳包被抗体的稳定剂的制备: (I)准确称量甘油lg，甘油lg，甘氨酸1.5g，聚氧乙烯月桂醚0.5g，三乙醇胺0.2 g，牛血清白蛋白I g。
(2)然后按照以上称量顺序进行溶解，不可用力搅拌。
(3)然后使用lmol/1盐酸或氢氧化钠将其pH调至6.0。
(4)再加入IOml已经制备好的胱抑素C胶乳包被抗体(使用胱抑素C胶乳包被抗体前超声波分散均匀)。
2保存期的检测其余同实施例1。
对比例I 通过对比试验，未加本发明制备的稳定剂的乳酸脱氢酶试剂盒在相同条件下仅可保持十二个月。
上述制备的胱抑素C试剂2可以和试剂I组成胱抑素C测定试剂盒，本试剂在2 8°C保持期，从未加稳定剂的胱抑素C试剂盒的十二个月提高到到20个月。
本发明制备的试剂盒的其他指标也能够达到同类产品要求。如检测误差能够达到10%以内。稳定期能够保持到20个月。
以上对本发明的具体实施方式
进行了说明，但本发明并不以此为限，只要不脱离本发明的宗旨，本发明还可以有各种变化。
权利要求
1.一种含有提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性的组合物，其特征在于:其配方包括以下物质: (1)甘油含量4.8-5.2g/l， (2)缓冲液18-22mmol/l， (3)表面活性剂0.3g/广l.0g/1， (4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及 (5)pH值调整剂。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于:所述缓冲液为甘氨酸缓冲液或甘氨酸盐缓冲液，所述甘氨酸或甘氨酸盐的含量为18-22mmol/l。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于:所述表面活性剂为非离子表面活性剂聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量为0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量为 0.2g/l 0.5g/l。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于:胱抑素C胶乳包被抗体在组合物中的含量为10ml/l。
5.一种含有如权利要求f 4任一项所述的提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性的组合物的稳定剂，其配方包括以下物质: (1)甘油含量4.8-5.2g/l， (2)缓冲液18-22mmol/l， (3)表面活性剂0.3g/广l.0g/1， (4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及 (5)pH值调整剂。
6.根据权利要求5所述的稳定剂，其特征在于:所述表面活性剂为非离子表面活性剂聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量为0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量为 0.2g/l 0.5g/l。
7.—种如权利要求5所述的胱抑素C胶乳包被抗体的稳定剂的制备方法，其特征在于: (一)原料的准备，按照配方称取原料: (1)甘油含量4.8-5.2g/l， (2)缓冲液18-22mmol/l， (3)表面活性剂0.3g/广l.0g/1， (4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及 (5)pH值调整剂； (二)混合,原料的添加顺序为:甘油、缓冲液、表面活性剂、牛血清白蛋白，每种原料溶解后再添加另外一种物质； (三)待上述原料溶解后，然后使用pH值调整剂调节pH； (四)最后加入胱抑素C胶乳包被抗体。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于:胱抑素C胶乳包被抗体在稳定剂中的含量为10ml/l。
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于:所述pH值调整剂为lmol/1氢氧化钠或 lmol/1 HCl。
10.一种如 权利要求5所述的胱抑素C胶乳包被抗体的稳定剂的用途，其特征在于:用于制备胱抑素C检测试剂盒。
全文摘要
本发明提供了一种含有提高胱抑素C胶乳包被抗体的稳定性的组合物、稳定剂。本发明通过使用包括牛血清白蛋白、甘油、缓冲液、表面活性剂的稳定剂而提高胱抑素C胶乳包被抗体稳定性。本发明还公开了其制备方法和用途，本发明可用于制备胱抑素C检测试剂盒。采用本发明在常规冷藏储存条件下保持期可达到20个月。
文档编号G01N33/531GK103217525SQ201310092160
公开日2013年7月24日 申请日期2013年3月21日 优先权日2013年3月21日
发明者王军峰, 王会, 常萍 申请人:上海执诚生物科技股份有限公司