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专利名称：一种高稳定性酶促化学发光方法及其底物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种高稳定性酶促化学发光方法及其底物。底物由特定比例的luminol、增强剂对碘苯酚、氧化剂过氧化脲，分别配制成的A液和B液组成。等量的A液和B液与免疫反应后的催化剂(如辣根过氧化物酶)标记物接触，通过化学反应生成一种激发态的产物，它在回到基态的过程中，释放出的能量转变成光子从而产生发光现象。其优点是具有发光灵敏度高、稳定性好、结果准确、使用方便和成本低等。适用于全自动、半自动和手工分析。可广泛用于临床检验，生物学研究，法医鉴定，农牧业及环境科学中对核酸及抗原抗体等生物大分子的检测。
化学发光免疫分析方法因对环境无污染、对人体无毒无害等综合优势和潜力，成为目前体外诊断试剂检测方法中的佼佼者。
本发明的目的是进一步提高化学发光免疫分析底物的稳定性，为产品的工业化生产和使用带来更大的方便性和灵活性。
本发明的内容要点1、底物液制备0.2mol/L pH 8.6的Tris-HCl缓冲液分别配制A液和B液A液含5mg/ml的luminol，0.33mg/ml的增强剂对碘苯酚；B液含0.9g/ml的过氧化脲；2、储存稳定性高。A液和B液分别储存。2～8℃保存有效期2年。
3、反应稳定性高。在HRP标记的免疫反应后样品管(孔)中加入等量混合的A液和B液，即刻～3小时(不包括即刻)内各时间点测定同一样品孔发光值稳定(

图1)；即刻～3小时(包括即刻)内各时间点同一样品孔被测物浓度值基本一致(图2)。
权利要求
1.一种高稳定性酶促化学发光方法及其底物，其特征是所说的高稳定性酶促化学发光方法及其底物包括以下步骤(1)化学发光底物A液和B液的制备；(2)化学发光底物的储存稳定性；(3)化学发光底物的反应稳定性。
2.按照权利要求1所述的高稳定性酶促化学发光方法及其底物，其特征是(1)用Tris-HCl缓冲液分别配制A液和B液A液含luminol和增强剂对碘苯酚；B液含氧化剂过氧化脲；(2)A液和B液分别储存，前者需要避光；(3)临用前A液和B液等量混合，在HRP标记的免疫反应后加入样品管(孔)中。
3.按照权利要求1所述的高稳定性酶促化学发光方法及其底物，其特征是(1)储存稳定性，A液和B液分别储存，2～8℃保存有效期2年。(2)反应稳定性3小时，包括在HRP标记的免疫反应后样品管(孔)中加入等量混合的A液和B液其发光值的稳定性和被测物浓度值的稳定性。
全文摘要
本发明涉及一种高稳定性酶促化学发光方法及其底物，该方法按照特定比例使用了化学发光底物A液和B液，并且在HRP标记的免疫反应后被加入混匀。其中A液中含有luminol(5′－氨基－2，3－二氢－1，4－酞嗪二酮)和增强剂对碘苯酚，B液中含过氧化脲。其优点是具有发光灵敏度高、稳定性好、结果准确、使用方便和成本低的特点，其2～8℃的储存稳定性可达到2年，反应稳定性可达到加底物后3小时内各时间点测定发光值(不包括即刻)和浓度值(包括即刻)基本一致。适用于全自动、半自动和手工分析。可广泛用于临床检验，生物学研究，法医鉴定，农牧业及环境科学中对核酸及抗原抗体等生物大分子的检测。
文档编号G01N33/50GK1661370SQ20041000575
公开日2005年8月31日 申请日期2004年2月23日 优先权日2004年2月23日
发明者段夏安 申请人:西安君达生物科技有限公司