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专利名称：一种胃癌荧光诊断试剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种采用荧光分光光度法在激发波长为250-350纳米，发射波长为300-600纳米时测定胃液中特异性蛋白质的含量，配合胃镜和生理切片诊断胃癌的试剂，尤其是涉及一种胃癌荧光诊断试剂。
为了实现发明目的，本发明通过如下方式实现一种胃癌荧光诊断试剂，其特征是该试剂由醋酸、柠檬酸、磷酸、硼酸、酒石酸中的任意一种或几种，醋酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、四硼酸钠、酒石酸钾、柠檬酸钾中的任意一种或几种，荧胺、吡-3-磺酸盐、NBD-氯、荧光素钠、苯胺基萘磺酸盐、二钾胺基萘磺酰氯中的任意一种或几种混合而成；各成分在使用中的重量份数为醋酸 0.1-5醋酸钠 0.1-15荧胺 0.001-5柠檬酸 0.1-9磷酸氢二钠 0.1-50吡-3-磺酸盐0.01-2磷酸 0.1-8磷酸二氢钾 0.2-20NBD-氯 0.01-5硼酸 0.1-10 四硼酸钠 0.2-30荧光素钠 0.001-6酒石酸 0.1-25 酒石酸钾 0.1-15苯胺基萘磺酸盐 0.05-9柠檬酸钾 0.2-10 二钾胺基萘磺酰氯 0.01-2；所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为磷酸 0.1-5磷酸氢二钠 0.1-20荧胺 0.1-0.5硼酸 1-5 四硼酸钠 2-30 苯胺基萘磺酸盐 0.05-0.1酒石酸 0.3-2.5 二钾胺基萘磺酰氯 0.01-0.3 荧光素钠 0.2-0.8；
所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为磷酸 0.1-5 柠檬酸钾 0.5-9 荧胺 0.01-0.8磷酸二氢钾 0.2-20 荧光素钠 0.001-0.9 苯胺基萘磺酸盐 0.05-0.1；所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为硼酸 0.1-8四硼酸钠 0.2-15 磷酸氢二钠 0.1-0.5荧胺 0.1-0.5 荧光素钠 0.001-1.8 二钾胺基萘磺酰氯 0.005-0.5；所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为醋酸 0.1-5醋酸钠 0.1-15 荧胺 0.001-5柠檬酸 0.1-9磷酸氢二钠 0.1-50 吡-3-磺酸盐0.01-2磷酸 0.1-8磷酸二氢钾 0.2-20 NBD-氯 0.01-5硼酸 0.1-10 四硼酸钠 0.2-30 荧光素钠 0.001-6酒石酸 0.1-25 酒石酸钾 0.1-15 苯胺基萘磺酸盐 0.05-9柠檬酸钾 0.2-10 钾胺基萘磺酰氯 0.01-2；所述试剂用蒸馏水或双蒸馏水配成液体。
本发明提供的试剂，能减少病人不必要的痛苦，通过检测病人胃液中的特异蛋白质的含量，判断病人患胃癌的可能性，给出病人患胃癌的危险因子从而为进一步确诊和防治胃癌提供建设性意见。
本发明与胃镜检查结合，能快速检查病人胃液中特异性蛋白质的含量，提高胃癌的诊断速度，简化胃癌的诊断程序，为高危人群的快速普查提供方法。
本发明提出，由于患胃癌的胃组织和患一般胃病的胃组织存在差异性，其中一个表现为胃液中一种或几种特异性蛋白质的含量不同，一般情况下胃癌病人胃液中的特异性蛋白质的含量高于普通胃病患者胃液中特异性蛋白质的含量，因此本发明提出将这种特异性蛋白质用荧光物质标定后，定量测定胃病患者胃液中特异性蛋白质的含量并与正常胃液中胃病患者胃液中特异性蛋白质的含量进行对比，从而判断患者患胃癌的可能性。
实施例二将1克的磷酸、0.1克的磷酸氢二钠、4克的硼酸、30克四硼酸钠、2.5克酒石酸、0.5克荧胺、0.1克苯胺基萘磺酸盐、0.3克二钾胺基萘磺酰氯、0.8克荧光素钠混合。
实施例三将5克的磷酸、10克的磷酸氢二钠、2克的硼酸、10克四硼酸钠、1克酒石酸、0.3克荧胺、0.08克苯胺基萘磺酸盐、0.2克二钾胺基萘磺酰氯、0.5克荧光素钠混合。
实施例四将3克的磷酸、0.2克的磷酸二氢钾、0.5克的柠檬酸钾、0.01克荧胺、0.05克苯胺基萘磺酸盐、0.001克荧光素钠混合。
实施例五将4克的磷酸、20克的磷酸二氢钾、9克的柠檬酸钾、0.8克荧胺、0.1克苯胺基萘磺酸盐、0.9克荧光素钠混合。
实施例六将3克的磷酸、15克的磷酸二氢钾、6克的柠檬酸钾、1克荧胺、0.09克苯胺基萘磺酸盐、0.5克荧光素钠混合。
实施例七将0.1克的硼酸、0.2克的四硼酸钠、0.1克的磷酸氢二钠、0.005克二钾胺基萘磺酰氯、0.1克荧胺、0.001克荧光素钠混合。
实施例八将8克的硼酸、15克的四硼酸钠、0.5克的磷酸氢二钠、0.5克二钾胺基萘磺酰氯、0.5克荧胺、1.8克荧光素钠混合。
实施例九将5克的硼酸、10克的四硼酸钠、0.3克的磷酸氢二钠、0.1克二钾胺基萘磺酰氯、0.2克荧胺、1克荧光素钠混合。
实施例十将醋酸0.1克、醋酸钠0.1克、荧胺0.001克、柠檬酸0.1克、磷酸氢二钠0.1克、吡-3-磺酸盐0.01克、磷酸0.1克、磷酸二氢钾0.2克、NBD-氯0.01克、硼酸0.1克、四硼酸钠0.2克、荧光素钠0.001克、酒石酸0.1克、酒石酸钾0.1克、苯胺基萘磺酸盐0.05克、柠檬酸钾0.2克、二钾胺基萘磺酰氯0.01克混合。
实施例十一将醋酸5克、醋酸钠15克、荧胺5克、柠檬酸9克、磷酸氢二钠50克、吡-3-磺酸盐2克、磷酸8克、磷酸二氢钾20克、NBD-氯5克、硼酸10克、四硼酸钠30克、荧光素钠6克、酒石酸25克、酒石酸钾15克、苯胺基萘磺酸盐9克、柠檬酸钾10克、二钾胺基萘磺酰氯2克混合。
实施例十二将醋酸3克、醋酸钠12克、荧胺1克、柠檬酸2克、磷酸氢二钠30克、吡-3-磺酸盐1克、磷酸3克、磷酸二氢钾10克、NBD-氯1克、硼酸2克、四硼酸钠10克、荧光素钠2克、酒石酸12克、酒石酸钾11克、苯胺基萘磺酸盐5克、柠檬酸钾5克、二钾胺基萘磺酰氯1克混合。
实施例十三将醋酸2克、醋酸钠3克、荧胺4克、柠檬酸8克、磷酸氢二钠12克、吡-3-磺酸盐0.1克、磷酸7克、磷酸二氢钾18克、NBD-氯4克、硼酸8克、四硼酸钠28克、荧光素钠5克、酒石酸24克、酒石酸钾14克、苯胺基萘磺酸盐8克、柠檬酸钾9克、二钾胺基萘磺酰氯0.1克混合。
使用时，将混合物用蒸馏水溶解定容到2000毫升即制得荧光诊断试剂2000毫升。诊断时，取病人胃液2-5毫升，用200-500毫升荧光诊断试剂稀释，2分钟-120分钟后量取5毫升以上液体使用荧光分光光度法在激发波长为250-350纳米，发射波长为300-600纳米时测定荧光值，与正常人胃液的荧光图谱如图2所示进行对比，若胃液的荧光图谱如

图1所示，则荧光诊断结论为胃癌；一般荧光比值为3.825、3.242、2.756，荧光诊断结论为胃癌，经切片验证为胃癌中期，用以上荧光诊断试剂对500例胃病病人进行诊断，胃癌病人的准确率为95％，非胃癌病人的准确率为85％，正常人的准确率为98％。
本发明中的所有钾盐、钠盐均可以用其它碱金属代替。
权利要求
1.一种胃癌荧光诊断试剂，其特征是该试剂由醋酸、柠檬酸、磷酸、硼酸、酒石酸中的任意一种或几种，醋酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、四硼酸钠、酒石酸钾、柠檬酸钾中的任意一种或几种，荧胺、吡-3-磺酸盐、NBD-氯、荧光素钠、苯胺基萘磺酸盐、二钾胺基萘磺酰氯中的任意一种或几种混合而成；各成分在使用中的重量份数为醋酸 0.1-5醋酸钠 0.1-15荧胺 0.001-5柠檬酸 0.1-9磷酸氢二钠 0.1-50吡-3-磺酸盐 0.01-2磷酸 0.1-8磷酸二氢钾 0.2-20NBD-氯 0.01-5硼酸 0.1-10 四硼酸钠 0.2-30荧光素钠 0.001-6酒石酸 0.1-25 酒石酸钾 0.1-15苯胺基萘磺酸盐 0.05-9柠檬酸钾 0.2-10 二钾胺基萘磺酰氯 0.01-2。
2.如权利要求1所述的胃癌荧光诊断试剂，其特征是所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为磷酸0.1-5 磷酸氢二钠 0.1-20 荧胺0.1-0.5硼酸1-5四硼酸钠 2-30 苯胺基萘磺酸盐 0.05-0.1酒石酸 0.3-2.5二钾胺基萘磺酰氯 0.01-0.3 荧光素钠 0.2-0.8。
3.如权利要求1所述的胃癌荧光诊断试剂，其特征是所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为磷酸 0.1-5柠檬酸钾 0.5-9 荧胺0.01-0.8磷酸二氢钾 0.2-20 荧光素钠 0.001-0.9 苯胺基萘磺酸盐 0.05-0.1。
4.如权利要求1所述的胃癌荧光诊断试剂，其特征是所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为硼酸 0.1-8 四硼酸钠 0.2-15 磷酸氢二钠 0.1-0.5荧胺 0.1-0.5荧光素钠 0.001-1.8 二钾胺基萘磺酰氯 0.005-0.5。
5.如权利要求1所述的胃癌荧光诊断试剂，其特征是所述试剂由下述成分混合而成，每种成分的重量份数为醋酸 0.1-5醋酸钠 0.1-15荧胺 0.001-5柠檬酸 0.1-9磷酸氢二钠 0.1-50吡-3-磺酸盐 0.01-2磷酸 0.1-8磷酸二氢钾 0.2-20NBD-氯 0.01-5硼酸 0.1-10 四硼酸钠 0.2-30荧光素钠 0.001-6酒石酸 0.1-25 酒石酸钾 0.1-15苯胺基萘磺酸盐 0.05-9柠檬酸钾 0.2-10 二钾胺基萘磺酰氯 0.01-2。
6.如权利要求1所述的胃癌荧光诊断试剂，其特征是所述试剂用蒸馏水或双蒸馏水配成液体。
全文摘要
本发明涉及一种采用荧光分光光度法在激发波长为250－350纳米，发射波长为300－600纳米时测定胃液中特异性蛋白质的含量，配合胃镜和生理切片诊断胃癌的试剂，该试剂由醋酸、柠檬酸、磷酸、硼酸、酒石酸中的任意一种或几种，醋酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、四硼酸钠、酒石酸钾、柠檬酸钾中的任意一种或几种，荧胺、吡－3－磺酸盐、NBD－氯、荧光素钠、苯胺基萘磺酸盐、二钾胺基萘磺酰氯中的任意一种或几种混合而成，本发明提供的试剂与胃镜检查结合，能快速检查病人胃液中特异性蛋白质的含量，提高胃癌的诊断速度，简化胃癌的诊断程序。
文档编号G01N33/52GK1442695SQ0310810
公开日2003年9月17日 申请日期2003年3月19日 优先权日2003年3月19日
发明者李莉 申请人:李莉