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专利名称：血液分析用试剂(1)的制作方法
技术领域：
本发明是有关在临床检查方面，用于测定白血球数和血红蛋白浓度的试剂。
测定血液试样中的白血球数和血红蛋白浓度，对于临床诊断白血病和贫血等，是非常重要的。
过去化验白血球数是通过显微镜进行目测计数，是在经过血液的涂抹、固定、染色等操作之后进行观测的。
关于血红蛋白浓度是根据国际标准方法、将血红蛋白转化为氰化高铁血红蛋白之后，用分光光度计，通过测定540nm附近的吸光度而求出的。
另外的测定方法是研制了基于电阻方式的血球计数装置、用缘皂角苷或季铵盐这样的溶剂将红血球溶解而保留白血球原封不动、使血红蛋白与氰化物反应转化为氰化高铁血红蛋白之后、用血球计数装置同时测定白血球数和血红蛋白浓度的方法。
上述基于显微镜的检查和基于分光光度计的测定存在有操作复杂而且花费时间的问题。
另外，在用皂角苷溶解红血球的方法中，由于皂角苷是天然存在的物质、它的溶血力不稳定、而且到可以对白血球进行计数所需的时间比较长。在随着用季铵盐对红血球的溶解、用氰化物将血红蛋白转化为氰化高铁血红蛋白的方法中，到对白血球可以计数的时间虽然缩短了、但由于表面活性剂的影响、使氰化高铁血红蛋白的吸收曲线，比用国际标准方法得到的吸收曲线向长波长的方向发生位移，因而在540nm附近的吸光度减少、比本来的血红蛋白浓度值要低、不能够求出正确的浓度值。
因此，本发明的目的是提供既能简便地对白血球进行计数同时又能正确地求得血红蛋白浓度的试剂。
为了解决上述课题，本发明的血液分析用试剂由以下各组分构成十四烷基三甲基铵溴化物27.3-50.0g/l、十六烷基二甲基乙基铵溴化物27.3-50.0g/l、聚氧乙烯壬基苯醚40-60g/l、硝基氢氰酸钠0.8-1.4g/l、氰化物5.0-7.6g/l。
用稀释液将血液稀释后、通过加入本发明的血液分析用试剂、使白血球保持原封不动、而使红血球很快地溶血。适宜的表面活性剂浓度是十四烷基三甲基铵溴化物27.3-50.0g/l、十六烷基二甲基乙基铵溴化物27.3-50.0g/l、聚氧乙烯壬基苯醚40-60g/l，如果不在上述浓度范围之内、则会由于溶血不良或是溶血亢进，使得与血球空壳不容易辨别，从而不能够对白血球数进行测定。另外，通过季铵盐和氰化物使血红蛋白转化为氰化高铁血红蛋白。这时，血红蛋白的吸收峰与用国际标准方法得到的吸收峰相比较，虽然向长波长方向位移、但是通过使用硝基氢氰酸钠、与用国际标准方法得到的氰化高铁血红蛋白的吸收曲线是相同的。必要的氰化物浓度是5.0-7.6g/l、硝基氢氰酸钠浓度是0.8-1.4g/l。如果在该浓度范围之外，则不能得到与国际标准方法同样的氰化高铁血红蛋白吸收曲线。通过测定这种白血球悬浮液的吸光度可以求出血红蛋白浓度。进而，将白血球浮游液引入血球计数装置的测量部分、通过检测由测量部分发出的电信号、可以求出白血球数目。
本发明的实施例如下
实施例(溶血剂组成)十四烷基三甲基铵溴化物 37.6g十六烷基二甲基乙基铵溴化物 30.7g聚氧乙烯壬基苯醚 55.0g硝基氢氰酸钠 1.2g氰化钾 5.7g提纯水 11将20μl血液稀释成10ml、添加上述组成的溶血剂100μl、经30秒之后，用血球计数装置进行测定，可求出白血球数和血红蛋白浓度。
按照本发明，由于表面活性剂的作用，红血球通过电阻方式的测定可在无阻碍地迅速被破坏，从而可以进行白血球的计数，同时血红蛋白通过季铵盐、氰化物、硝基氢氰酸钠的作用转化为氰化高铁血红蛋白，可以正确的测定血红蛋白浓度。
权利要求
1.一种测定血液中白血球数和血红蛋白浓度的试剂，该血液分析用试剂含有十四烷基三甲基铵溴化物27.3-50.0g/l、十六烷基二甲基乙基铵溴化物27.3-50.0g/l、聚氧乙烯壬基苯醚40-60g/l、硝基氢氰酸钠0.8-1.4g/l、氰化物5.0-7.6g/l。
全文摘要
本发明是一种测定血液中白血球数和血红蛋白浓度的试剂，该试剂由十四烷基三甲基铵溴化物、十六烷基二甲基乙基铵溴化物、聚氧乙烯壬基苯醚硝基氢氰酸钠和氰化物组成。
文档编号G01N33/50GK1101979SQ9312038
公开日1995年4月26日 申请日期1993年10月20日 优先权日1993年10月20日
发明者浜口行雄 申请人:东亚医用电子株式会社