专利名称:一种荧光免疫层析试纸条的制作方法
技术领域:
本实用新型属于免疫化学检测领域,具体涉及一种荧光免疫层析试纸条,即一种借助荧光物质标记的免疫层析反应试纸条。
背景技术:
免疫分析技术发展至今已有百年历史,其中免疫层析法(俗称试纸条)具有直观、快速、操作简便、费用低廉等特点,待测试液可以是血、尿、唾液等,因此在快速临床诊断,野外以及实验条件不具备的场所使用中的应用发展迅速。胶体金免疫层析试纸应用最广泛,借助于硝酸纤维素膜制造业的进步和抗体制备以及其他支持技术的成熟,从上世纪八十年代晚期第一个免疫层析试剂盒推向市场开始,免疫层析技术已经应用在临床监测领域,包括妊娠检测、传染病检测、乙肝表面抗原、心肌肌钙蛋白、幽门螺杆等的检测;在环境领域的 应用包括检测镉离子等有毒重金属;在食品安全领域包括检测农药残留以及包括肉毒毒素在内的各种毒素;免疫层析技术还广泛应用在兽医学领域,包括检测禽流感,犬类细小病毒和口蹄疫等方面;在滥用药物检测方面应用于检测甲基苯丙胺等毒品方面。除了纳米金标记物以外,研究开发者探索使用的标记物也发展到脂质体,荧光探针,荧光聚合物微球,顺磁性聚合物微球,上转换发光探针和量子点等。正是基于这个平台的快速简便等特点,国内外开展了广泛的免疫层析技术基础和应用方面的研究。近来,基于荧光或发光的检测方式由于其可定量以及动态范围大的特点,荧光标记的试纸条结合读卡机的免疫层析技术有望实现定量或半定量的检测。Choi等人用荧光免疫层析方法定量检测了 C反应蛋白和人全血样品中的血清白蛋白含量,具有线性范围宽,检测灵敏度高和定量准确的特点,相比于化学发光和酶联免疫技术,充分体现了免疫层析技术方便快捷简便的特点;而相比于传统胶体金免疫层析技术,荧光探针分子的激发和检测需要借助仪器完成,因此可以最大限度地排除人为因素的干扰,从而实现自动化和定量检测。
发明内容本实用新型的目的在于提供一种荧光免疫层析试纸条,并简单介绍其制备方法,以实现有效改善荧光背景信号。本实用新型的目的,将通过以下技术方案得以实现一种荧光免疫层析试纸条,其特征在于,所述试纸条以表面粘贴有一层深色胶条的支撑固定粘衬板为基底,所述基底呈条状结构,且在基底的深色胶条表面从样品端起依次设有样品纤维层、荧光标记纤维层、毛细管层析反应层及吸水材料层;其中所述样品纤维层一端盖住荧光标记纤维层的一端,所述荧光标记纤维层的另一端盖住毛细管层析反应层的一端,吸水材料层盖住毛细管层析反应层的另一端,各层间的交叠宽度为1mm。该荧光免疫层析试纸条的进一步特征,所述深色胶条为用于降低荧光背景的特氟龙耐高温胶带。[0008]该荧光免疫层析试纸条的进一步特征,所述深色胶条与支撑固定粘衬板相粘连的一面为自身的非粘胶面。该荧光免疫层析试纸条的进一步特征,所述毛细管层析反应层为硝酸纤维素反应膜或聚偏氟乙烯反应膜。该荧光免疫层析试纸条的进一步特征,所述吸水材料层为强吸水纸。本实用新型试纸条的应用实施,较之于现有技术的突出效果为该试纸条极大地提高了检测应用的速度、准确率和灵敏度,适用于各种组织、血液、体液、排泄物、饲料等之中的某些物质进行定量、定性的现场检测。以下便结合实施例附图,对本实用新型的具体实施方式
作进一步的详述,以使本实用新型技术方案更易于理解、掌握。
图I是本实用新型试纸条的结构示意图;图2是检测结果示意图;图3是试纸条在黏贴深色胶条前后的ESE荧光检测结果对比图。
具体实施方式
如图I所示,本实用新型所述提出的一种荧光免疫层析试纸条,以表面粘贴有一层深色胶条2的支撑固定粘衬板I为基底,该试纸条基底的整体呈条状结构,且在基底的深色胶条2表面从样品端起依次设有样品纤维层3、荧光标记纤维层4、毛细管层析反应层5及吸水材料层6 ;其中该样品纤维层3 —端盖住突光标记纤维层4的一端,突光标记纤维层4的另一端盖住毛细管层析反应层5的一端,吸水材料层6盖住毛细管层析反应层5的另一端,图示可见各层间相互交叠形成一个类“V”字形的叠膜结构,且交叠宽度为1mm。进一步地细化来看,上述深色胶条为用于降低荧光背景的特氟龙耐高温胶带,其与支撑固定粘衬板相粘连的一面为自身的非粘胶面。上述毛细管层析反应层为硝酸纤维素反应膜或聚偏氟乙烯反应膜。上述吸水材料层为强吸水纸。上述荧光标记纤维层的标记物可多元化选择,对于一种荧光二氧化硅纳米粒子作为标记物制成的荧光免疫层析试纸条,滴加不同量cTnl抗原(从左至右依次为I μ g/ml, 100ng/ml, 10ng/ml, O)后凝胶成像结果是变化的。而且,在毛细管层析反应层5上形成有检测线和质控线两条功能性示性线条。该试纸条制作过程为撕去支撑固定粘衬板的不干胶层,将日本电工的特氟龙高温胶带的不带粘胶的一面粘贴在上面;先将划好质控线及检测线的毛细管层析反应层贴于距样品端
2.Icm处,将荧光标记纤维层贴于距样品端I. 7cm处,再将样品纤维层贴上,最后将吸水材料贴于毛细管层析反应层的另一端。检测样品时,将样品加入几滴至样品纤维层,由于毛细作用,样品液体向跑样区泳动,在经过荧光标记纤维层时,带着溶解的荧光物质迅速在跑样区内往前泳动,在特定的抗原或抗体区带位置进行特异性结合,在特定仪器的帮助下,观察检测结果,从而实现定性或定量的检测,其检测过程及检测结果示意如图2所示,在仪器下观察可见,阳性结果呈现两条线,即检测线和质控线,阴性结果只呈现一条质控线。本实用新型该种荧光免疫层析试纸条与现有技术相比,具有以下优点。[0020]I、检测快速检测时间只需5min,能够满足现场检测的需求。2、检测准确率高,特异性强灵敏度高,背景干净,效果对比如图3所示。3、适用于各种荧光物质的标记,如荧光二氧化硅纳米粒子、量子点、上转换纳米粒子等。4、工艺简单,操作简便,适用于各类人群。5、检测试纸条在常温下即可保存,无需特殊设备,保存期可达I年,且重复性好。6、可用于快速检测各种组织、血液、体液、排泄物、饲料等中的某物质的定性或定量检测。
权利要求1.一种荧光免疫层析试纸条,其特征在于,所述试纸条以表面粘贴有一层深色胶条的支撑固定粘衬板为基底,所述基底呈条状结构,且在基底的深色I父条表面从样品端起依次设有样品纤维层、荧光标记纤维层、毛细管层析反应层及吸水材料层;其中所述样品纤维层一端盖住荧光标记纤维层的一端,所述荧光标记纤维层的另一端盖住毛细管层析反应层的一端,吸水材料层盖住毛细管层析反应层的另一端。
2.根据权利要求I所述的一种荧光免疫层析试纸条,其特征在于各层间的交叠宽度为 Imm0
3.根据权利要求I所述的一种荧光免疫层析试纸条,其特征在于所述深色胶条为用于降低荧光背景的特氟龙耐高温胶带。
4.根据权利要求I所述的一种荧光免疫层析试纸条,其特征在于所述深色胶条与支撑固定粘衬板相粘连的一面为自身的非粘胶面。
5.根据权利要求I所述的一种荧光免疫层析试纸条,其特征在于所述毛细管层析反应层为硝酸纤维素反应膜或聚偏氟乙烯反应膜。
6.根据权利要求I所述的一种荧光免疫层析试纸条,其特征在于所述吸水材料层为强吸水纸。
专利摘要本实用新型揭示了一种荧光免疫层析试纸条,以表面粘贴有一层深色胶条的支撑固定粘衬板为基底,该基底呈条状结构,且在基底的深色胶条表面从样品端起依次设有样品纤维层、荧光标记纤维层、毛细管层析反应层及吸水材料层;其中该样品纤维层一端盖住荧光标记纤维层的一端,该荧光标记纤维层的另一端盖住毛细管层析反应层的一端,吸水材料层盖住毛细管层析反应层的另一端,各层间的交叠宽度为1mm。本实用新型的应用实施,在传统的纳米金试纸条的基础上增加深色胶条,降低荧光背景的干扰,结构简单、实用,使用效果好。
文档编号G01N33/558GK202599957SQ20112055866
公开日2012年12月12日 申请日期2011年12月28日 优先权日2011年12月28日
发明者贾俊丽, 费浩 申请人:中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所