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    ʱ¼ä:2023-06-15    ×÷Õß: ¹ÜÀíÔ±

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    [0001] ±¾·¢Ã÷Éæ¼°·Ö×ÓÉúÎïѧ¼ì²â¼¼Êõ£¬ÌرðÉæ¼°Ò»ÖÖÉúÎïÌåÒºÑù±¾ÖÐÏ¡ÓÐϸ°ûµÄ¼ì²â ·½·¨¡£

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    [0002] Ï¡ÓÐϸ°ûÊÇÖ¸ÉúÎïÌåÒºÑù±¾£¨°üÀ¨ÑªÒº¡¢ÐØË®¡¢¸¹Ë®¡¢ÄòÒº¡¢ÄÔ¼¹ÒºµÈ£©ÖеÄһЩ·Ç µäÐÍϸ°û£¬´óÁ¿Ñо¿±íÃ÷£¬¶ÔÏ¡ÓÐϸ°ûµÄ¼ì²âºÍ¼ø¶¨¶ÔÓÚÏà¹Ø¼²²¡µÄ²¡Àí»úÖÆ¼°°ÐÏòÒ©Îï ¿ª·¢¾ßÓÐÖØÒªÖ¸µ¼ÒâÒå¡£Òò´Ë£¬Ñ°ÕÒ׼ȷ¡¢¿ìËٵصÄÏ¡ÓÐϸ°û¼ì²â·½·¨½«³ÉΪؽ´ý½â¾öµÄÎÊ Ì⡣Ȼ¶øÏ¡ÓÐϸ°ûÔÚÉúÎïÌåÒºÖеÄŨ¶È·Ç³£µÍ£¬Óë·ÇÄ¿±êϸ°ûµÄ±ÈÀý´óÔ¼ÊÇ1 :1©–7,Óô«Í³ ¼¼ÊõÎÞ·¨¼ÆÊý£¬ËùÒÔÆÈÇÐÐèÒªÒ»ÖÖ¼òµ¥×¼È·¿ìËٵķ½·¨½â¾öÕâÒ»ÄÑÌâ¡£
    [0003] ÓÉÓÚÑ­»·Ï¡ÓÐϸ°ûÔÚÌåÒºÖеĺ¬Á¿ºÜÉÙ£¬Òª¾­¹ýÓÐЧµÄ¸»¼¯²½Öè²ÅÄÜÔÚºóÐøµÄʵ ÑéÖÐʶ±ð¼ø¶¨¡£Ä¿Ç°Êг¡ÉϹ㷺ӦÓÃÓÚÏ¡ÓÐϸ°û¼ì²âÑо¿µÄ·½·¨Ö÷ÒªÓÐÃܶÈÌݶÈÀëÐÄ·¨¡¢ Ĥ¹ýÂË·¨ºÍÃâÒß´ÅÐÔ·ÖÀë¼¼Êõ¡£
    [0004] ÃܶÈÌݶÈÇø´øÀëÐÄ·¨ÓÖ³ÆÎªÇø´øÀëÐÄ·¨£¬Êǽ«ÑùÆ·¼ÓÔÚ¶èÐÔÌݶȽéÖÊÖнøÐÐÀëÐÄ ³Á½µ»ò³Á½µÆ½ºâ£¬ÔÚÒ»¶¨µÄÀëÐÄÁ¦Ï°ѿÅÁ£·ÖÅäµ½ÌݶÈÖÐÄ³Ð©ÌØ¶¨Î»ÖÃÉÏ£¬Ðγɲ»Í¬Çø´ø µÄ·ÖÀë·½·¨¡£Ê¹Óô˷¨¿ÉÒÔͬʱʹÑùÆ·Öм¸¸ö»îÈ«²¿×é·Ö·ÖÀ룬¾ßÓÐÁ¼ºÃµÄ·Ö±æÂÊ¡£´Ë·¨ µÄÓŵãÊÇ£º¢Ù·ÖÀëЧ¹ûºÃ£¬¿ÉÒ»´Î»ñµÃ½Ï´¿¿ÅÁ££»¢ÚÊÊÓ¦·¶Î§¹ã£¬ÄÜÏó²îËÙÀëÐÄ·¨Ò»Ñù·ÖÀë ¾ßÓгÁ½µÏµÊý²îµÄ¿ÅÁ££¬ÓÖÄÜ·ÖÀëÓÐÒ»¶¨¸¡Á¦ÃܶȲîµÄ¿ÅÁ££»¢Û¿ÅÁ£²»»á¼·Ñ¹±äÐΣ¬Äܱ£³Ö ¿ÅÁ£»îÐÔ£¬²¢·ÀÖ¹ÒÑÐγɵÄÇø´øÓÉÓÚ¶ÔÁ÷¶øÒýÆð»ìºÏ¡£´Ë·¨µÄȱµãÊÇ£º¢ÙÀëÐÄʱ¼ä½Ï³¤£»¢Ú ÐèÒªÖÆ±¸¶èÐÔÌݶȽéÖÊÈÜÒº¡£Ñо¿Öо­³£ÀûÓÃÃܶÈÌݶÈÀëÐĵÄÔ­Àí£¬ÓÃFicollÒº·ÖÀëºÍ´¿ »¯ÈË»ò¶¯ÎïÍâÖÜѪµ¥¸öºËϸ°û£¨PBMC)¡£
    [0005] Ĥ¹ýÂË·½·¨ÊǸù¾ÝijЩϡÓÐϸ°ûÌå»ý´óÓÚÍâÖÜѪÖÐÁ£Ï¸°û´Ó¶øÊ¹Ï¡ÓÐϸ°û´ÓÍâ ÖÜѪÖзÖÀ븻¼¯³öÀ´£¬È»ºóÀûÓÃÃâÒßÓ«¹â¼¼Êõ¶ÔÏ¡ÓÐϸ°û½øÐмø±ðÕï¶Ï¡£¸Ã·½·¨ÖУ¬Ä¤¹ýÂË Ï¸°û¸»¼¯¹ý³ÌÏà¶ÔÈÝÒ×£¬µ«ÊDz¢²»ÊÇËùÓÐÏ¡ÓÐϸ°ûÌå»ý¶¼´óÓÚÍâÖÜѪÖÐÁ£Ï¸°ûµÄ£¬ºÜ¶àÏ¡ ÓÐϸ°ûµÄÌå»ýºÍÁ£Ï¸°û´óС²î²»¶à£¬ÉõÖÁ±ÈÁ£Ï¸°ûÌå»ý¸üС¡£»ùÓÚÒÔÉϵÄÈÏʶ£¬Ä¤¹ýÂË·½·¨ ±»Öð½¥Åׯú¡£


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    [0006] ±¾·¢Ã÷µÄÄ¿µÄÔÚÓÚÌṩһÖֿɼò±ã¡¢¿ìËÙ¡¢¸ßÌØÒìÐԺ͸ßÁéÃô¶ÈµØ¼ì²âÉúÎïÌåÒº Ñù±¾Öк¬Á¿½ÏµÍµÄÏ¡ÓÐϸ°ûµÄµÍ³¡ºË´Å¹²Õñ¼ì²â·ÖÎö·½·¨¡£
    [0007] Ϊ½â¾öÉÏÊö¼¼ÊõÎÊÌ⣬±¾·¢Ã÷ÌṩÁËÒ»ÖÖ»ùÓÚ´ÅÐÔ΢ÖéµÄµÍ³¡NMRÏ¡ÓÐϸ°û¼ì²â ·½·¨£¬°üº¬ÒÔϲ½Ö裺
    [0008] (1)Ñù±¾ÖƱ¸
    [0009] ½«´¿ÅàÑøµÄÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûµÄϸ°ûϵ£¬ÒÔ»º³åÒº½øÐв»Í¬ÌݶÈÏ¡ÊÍ£¬ÖƵÃϵÁÐŨ¶È µÄÏ¡ÓÐϸ°ûÐü¸¡Òº±ê×¼Ñù±¾£»
    [0010] ¶Ô´ý²âÉúÎïÌåÒºÑù±¾½øÐÐFicollÃܶÈÌݶÈÀëÐÄ»ñÈ¡ºòÑ¡»ìºÏϸ°ûȺ£¬µÝ¾­Ï´µÓ ¸ßÐÄÖØÐü£¬ÖƵÃÏ¡ÓÐϸ°ûÐü¸¡Òº´ý¼ìÑù±¾£»
    [0011] (2)ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼ÁÇ׺͸»¼¯
    [0012] È¡ÉÏÊö±ê×¼Ñù±¾£¬¼ÓÈëżÁªÓÐÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûÌØÒì±í´ï¿¹ÌåµÄºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á£¬Ê¹ ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼ÁÓë±ê×¼Ñù±¾ÖеÄÏ¡ÓÐϸ°û·¢ÉúÃâÒß·´Ó¦¸»¼¯£¬È»ºó³ýȥδ·´Ó¦µÄºË´Å¹²Õñ ÔìÓ°¼Á£¬µÃµ½ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á¸»¼¯µÄ±ê×¼Ñù±¾£»
    [0013] È¡ÉÏÊö´ý¼ìÑù±¾£¬¼ÓÈëżÁªÓÐÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûÌØÒì±í´ï¿¹ÌåµÄºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á£¬Ê¹ ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼ÁÓë´ý¼ìÑù±¾ÖеÄÏ¡ÓÐϸ°û·¢ÉúÃâÒß·´Ó¦¸»¼¯£¬È»ºó³ýȥδ·´Ó¦µÄºË´Å¹²Õñ ÔìÓ°¼Á£¬µÃµ½ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á¸»¼¯µÄ´ý¼ìÑù±¾£»
    [0014] (3)ºË´Å¹²Õñ³Úԥʱ¼ä¼ì²â
    [0015] È¡ÉÏÊöºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á¸»¼¯µÄ±ê×¼Ñù±¾£¬Óõͳ¡ºË´Å¹²Õñ·ÖÎöÒǽøÐгÚԥʱ¼ä²â ¶¨£¬µÃ³Úԥʱ¼äÖµT sampl^ÒÔ»º³åÒº×÷Ϊ¿Õ°×¶ÔÕÕ£¬Óõͳ¡ºË´Å¹²Õñ·ÖÎöÒǽøÐгÚԥʱ¼ä²â ¶¨£¬µÃ³Úԥʱ¼äÖµ ^blank ?
    [0016] È¡ÉÏÊöºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á¸»¼¯µÄ´ý¼ìÑù±¾£¬Óõͳ¡ºË´Å¹²Õñ·ÖÎöÒǽøÐгÚԥʱ¼ä²â ¶¨£¬µÃ³Úԥʱ¼äÖµT test;
    [0017] (4)±ê×¼ÇúÏßÖÆ×÷Óë½á¹ûµÃ³ö
    [0018] ¼ÆËã±ê×¼Ñù±¾µÄ³Úԥʱ¼ä¸Ä±äÁ¿¦« T2,ËùÊö¦« T2 = Tsample_Tblank£¬ÒÔ¦« T2Ϊ×Ý×ø ±ê£¬ÒÔ±ê×¼Ñù±¾ÖеÄÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûº¬Á¿Îªºá×ø±ê£¬»æÖƳɱê×¼ÇúÏߣ»
    [0019] ¼ÆËã´ý¼ìÑù±¾µÄ³Úԥʱ¼ä¸Ä±äÁ¿AT2test£¬ËùÊöAT2test = Ttest_Tblank£¬AT2test²»Îª ¦Ï£¬Ôò±íÃ÷´ý¼ìÑù±¾Öк¬ÓÐÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°û£¬Í¬Ê±ÒÀ¾ÝÉÏÊö±ê×¼ÇúÏߵóö´ý¼ìÑù±¾ÖÐÄ¿±êÏ¡ÓРϸ°ûµÄº¬Á¿¡£
    [0020] ÓÉÉÏÊö¼ì²â²½Öè¿ÉÖª£º±¾·¢Ã÷ÀûÓú˴ʲÕñÔìÓ°¼Á¿ÉÒÔºÍÏ¡ÓÐϸ°û½áºÏµÄÌØÐÔ£¬ ÔËÓÃÃâÒß´ÅÐÔ·ÖÀë¼¼Êõ£¬ÔÚÍâ¼ÓµÍ´Å³¡µÄ×÷ÓÃÏÂͨ¹ý¼ìÑé´ÅÖé-ϸ°ûÐü¸¡ÒºÖÐË®·Ö×ÓµÄÇâ Ô­×ÓÐźÅÀ´¶¨Á¿Ñ­»·Ï¡ÓÐϸ°û¡£
    [0021] ¾ßÌåÀ´Ëµ£¬±¾·¢Ã÷Ê×ÏÈÔÚÑùƷǰ´¦ÀíÖнøÐÐÏ¡ÓÐϸ°ûµÄ¿ìËÙ¸»¼¯£»È»ºó£¬»ùÓÚÌØÒì ÐÔ¿¹Ì忹ԭÃâÒß·´Ó¦¡¢ÀûÓõͳ¡ºË´Å¹²Õñ·ÖÎöÒǼì²â±»½áºÏÔÚÏ¡ÓÐϸ°û±íÃæµÄºË´Å¹²ÕñÔì Ó°¼ÁµÄ³Úԥʱ¼äµÄ±ä»¯£¬ÊµÏÖ¶ÔÏ¡ÓÐϸ°ûµÄ¿ìËÙ¶øÁéÃôµØ¶¨ÐÔ¼°¶¨Á¿µÄ¼ì²â¡£±¾·¢Ã÷ÖÐËù ÊöµÄÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûµÄ×îÖÕ¼ì³öÆÀ¼Û·½·¨»ùÓں˴ʲÕñ¼¼ÊõµÄ³Úԥʱ¼äÌØÐÔ²ÎÊýµÄ±ä»¯£¬Ëù Êö³Úԥʱ¼äÌØÐÔ£¬ÊÇÖ¸×ÔÐý-¾§¸ñ³Úԥʱ¼äºÍ×ÔÐý-×ÔÐý³Úԥʱ¼ä¡£
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    [0023] ÓÅÑ¡µØ£¬±¾·¢Ã÷µÄ¼ì²â·½·¨ÖУ¬Ê¹ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á·Ö±ðÓë±ê×¼Ñù±¾¡¢´ý¼ìÑù±¾ÖÐµÄ Ï¡ÓÐϸ°û·¢ÉúÃâÒß·´Ó¦¸»¼¯µÄ·´Ó¦Ìõ¼þΪ£º»ìºÏ¾ùÔȺóÔÚ4?8¡ãCµÍÎÂÏ·õÓý10?15min¡£
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    [0025] ÓÅÑ¡µØ£¬±¾·¢Ã÷µÄ¼ì²â·½·¨ÖУ¬ËùÊö²½Ö裨2)ÖУ¬ÔÚ¼ÓÈëżÁªÓÐÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûÌØÒì ±í´ï¿¹ÌåµÄºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á֮ǰ£¬»¹°üÀ¨ÏÂÊö²½Ö裺¼ÓÈëżÁªÓп¹CD45µÄºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á ½«·ÇÄ¿±êϸ°û½øÐдÅÐÔ±ê¼Ç£¬Í¨¹ýÍâ¼Ó´Å³¡·½Ê½½«ÉÏÊö±ê¼ÇµÄ·ÇÄ¿±êϸ°û³ýÈ¥¡£
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    [0027] ÓÅÑ¡µØ£¬±¾·¢Ã÷µÄ¼ì²â·½·¨ÖУ¬ËùÊö²½Ö裨2)ÖУ¬ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á¼ÓÈëÁ¿ÓÅѡΪ£º ÿ200¸öÄ¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûÖмÓÈë1΢ÉýºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á£¬³ýȥδ·´Ó¦µÄºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼ÁµÄ·½ ·¨Îª£º»ºÂýÎü×ßÉÏÇåÒº£¬È»ºóÊ©¼ÓÍâ¼Ó´Å³¡»òÎȶ¨ÀëÐÄ£¬½«¸»¼¯ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼ÁµÄÑù±¾Óûº ³åÒº½øÐÐÏ´µÓ¡£´Ë±ÈÀýµÄºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á²»µ«¿ÉÒÔ×îÓÅ»¯µØ»ñµÃÏ¡ÓÐϸ°û£¬»¹Äܹ»¼õÉÙÓÉ Óں˴ʲÕñÔìÓ°¼Á¼ÓÈë¹ý¶àµ¼Öµı³¾°ÔöÇ¿£¬Ó°Ïì¼ì²âЧ¹û¡£
    [0028] ÓÅÑ¡µØ£¬±¾·¢Ã÷µÄ¼ì²â·½·¨ÖУ¬ËùÊö²½Ö裨3)ÖУ¬¿ØÖƵͳ¡ºË´Å¹²Õñ·ÖÎöÒǵĴų¡ Ç¿¶ÈΪ20?25MHz£¬´ÅÌåζÈΪ30?35¡ãC£¬Öظ´Ê±¼ä3?5s¡£¸üÓÅÑ¡µØ£¬¿ØÖƵͳ¡ºË´Å¹² Õñ·ÖÎöÒǵĴų¡Ç¿¶ÈÓÅѡΪ20. 18MHz£¬´ÅÌåζÈÓÅѡΪ35¡ãC£¬Öظ´Ê±¼äÓÅѡΪ5s¡£
    [0029] ¶ÔÉÏÊöºË´Å¹²ÕñÌåϵ´Å³¡Ç¿¶È¡¢´ÅÌåζȺÍÖØ¸´Ê±¼äµÄ¿ØÖÆ£¬¿Éʹ¼ì²â¸ü¼Ó׼ȷ£¬ ¿É¿ØÐÔ¸üÇ¿£¬ÇÒÀûÓÚÆ½ÐÐʵÑéµÄ±È½ÏºÍÖʿء£
    [0030] ÓÅÑ¡µØ£¬±¾·¢Ã÷µÄ¼ì²â·½·¨ÖУ¬ËùÊö²½Ö裨4)ÖУ¬¼ÆËã±ê×¼Ñù±¾µÄ³Úԥʱ¼ä¸Ä±äÁ¿ ¦« T2ºÍ´ý¼ìÑù±¾µÄ³Úԥʱ¼ä¸Ä±äÁ¿¡÷ T2testʱ£¬·Ö±ðÈ¡¶à´Î²âÁ¿³Úԥʱ¼äµÄƽ¾ùÖµ½øÐÐ¼Æ Ë㣬´Ó¶øÄÜʹ±¾·¢Ã÷µÄ¼ì²â½á¹û¸üΪ׼ȷ¿É¿¿¡£
    [0031] ÓÉÉÏÊöµÄÂÛÊö¿ÉÖª£¬±¾·¢Ã÷ͨ¹ý½«ºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á£¨È糬˳ÃâÒß΢´ÅÖ飩¸»¼¯ºÍ µÍ³¡ºË´Å¹²ÕñÒǼì²âÏà½áºÏ£¬½«Ï¡ÓÐϸ°ûµÄ·ÖÀëºÍ¼ø¶¨ÓлúÕûºÏÔÚÒ»Æð£¬´Ó¶ø¿ìËÙʵÏÖ´Ó »ìºÏϸ°ûȺÖв¶»ñºÍ·ÖÀëÏ¡ÓÐÄ¿±êϸ°û¡£ÔÚ±¾·¢Ã÷ÖÐÀûÓÃÃâÒß´ÅÐÔ΢ÖéÑ¡ÔñºÍ·ÖÀëÀ´¸ß¶È ¸»¼¯ºÍŨËõÌåÒºÑùÆ·ÖдæÔÚµÄÈκÎÏ¡ÓÐϸ°û£¬½«Ëù²¶»ñµÄϸ°û¿É¼ì²âµØ±êÒÔÏ¡ÓÐϸ°ûÌØÒì ÐÔ±í´ï¿¹Ì壬ÇÒ±»³¬Ë³´ÅÐÔ΢ÖéËù°ü±»£¬ÒÔʹµÃÄܶÔËù²¶»ñµÄÏ¡ÓÐϸ°û½øÐмø±ðºÍ¼ÆÊýÒÔ ¼°ÓëÎÛȾÐԷǰÐϸ°ûÃ÷È·µØÔں˴ʲÕñÒÇÉÏ×öÇø·Ö¡£ÓÉÓÚ¾ßÓÐÔÚÿ7. 5mlÌåÒºÖпɼì²âµ½ ΢Á¿Ï¡ÓÐϸ°ûµÄ¼«Ç¿Ãô¸ÐÐÔ£¬ÊÇÒ»ÖÖ¾ßÓм«Ç¿Ãô¸ÐÐÔºÍÌØÒìÐԵĹãÆ×µÄ·ÖÀë·½°¸¡£
    [0032] ÏÖÓеĶÔÓÚÏ¡ÓÐϸ°ûµÄ¼ì²â·½·¨¾ùÉæ¼°µ½ÃâÒßÓ«¹â¼¼Êõ£¬Ðèͨ¹ýÓ«¹âÏÔ΢¾µ¾µ¼ì À´¶ÔÌåÒºÖÐÑ­»·Ï¡ÓÐϸ°ûµÄ¸öÊý½øÐж¨Á¿£¬ÆÕ±é¾ßÓвÙ×÷¸´ÔÓ¡¢ÁéÃôÐԵ͡¢¼ìÑéʱ¼ä³¤¡¢¼Û ¸ñ¸ß¡¢¶Ô²Ù×÷ÈËÔ±ÒªÇó¸ß£¬²»Ò×ÖØ¸´µÄ±×¶Ë£¨Èçi ¡¤ FISH¼ì²â·½·¨³ÉÊìµÄ²Ù×÷ÈËÔ±µ¥´Î½ö ÄÜͬʱ²Ù×÷6¸öÑù±¾£¬Õû¸ö¹ý³ÌºÄʱ2Ì죩¡£ÓëÏÖÓм¼ÊõÏà±È£¬±¾·¢Ã÷½«Å¼ÁªÓÐÌØÒì±í´ï¿¹ ÌåµÄºË´Å¹²ÕñÔìÓ°¼Á¸»¼¯Ï¡ÓÐÄ¿±êϸ°û¼¼ÊõÓë¾ßÓпìËٺ͸ßÁéÃô¶È¼ì²â¼¼ÊõµÄµÍ³¡ºË´Å ¹²ÕñÒÇÏà½áºÏ£¬´Ó¶øÊµÏÖÁË¿ìËÙ¡¢¸ßЧ¶ø¸ßÁéÃôµØ¼ì²âÍâÖÜѪÖÐÏ¡ÓÐϸ°ûµÄÄ¿µÄ£¬¾ßÓÐÈçÏ Óŵ㣺£¨1)¿ÉʹĿ±êÏ¡ÓÐϸ°ûÖ±½Ó´ÓÉúÎïÌåÒºÖзÖÀë³öÀ´£¬¾ßÓмò±ã¡¢¿ìËÙµÄÌØµã£»£¨2)ºÍ ÀëÐÄ¡¢¹ýÂ˵ȷ½·¨Ïà±È£¬Ï¡ÓÐϸ°ûÔÚ´ÅÐÔ·ÖÀëʱÊܵ½µÄ¼ôÇÐÁ¦Ð¡£¬¿É±ÜÃâϸ°ûµÄʧ»î£»(3) ¾ßÓкܸߵÄÑ¡ÔñÐÔ£»(4)Íâ¼Ó´Å³¡²»»á¶ÔÔ­ÁÏÒºÖеÄÀë×ӺʹøµçÈÜÖʵÄÔ˶¯²úÉúÓ°Ï죻£¨5) ÒÇÆ÷É豸¼òµ¥£¬²Ù×÷·ÑÓõÍ¡£±¾·¢Ã÷µÄ·½·¨¿ÉÒÔʵÏÖ´ó¹æÄ£Ñù±¾µÄÏ¡ÓÐϸ°û¿ìËÙ¼ì²â£¬ÎÞ ÂÛ¶ÔÓÚ²úÒµ»¯»¹Êǿͻ§ÌåÑéÉ϶¼ÎÞÒɾßÓÐÖØÒªµÄÒâÒå¡£¸Ã·½·¨ÎªÊ״α»Ìá³ö£¬Ä¿Ç°Î´¼ûÏà ¹Ø±¨µÀ£¬ÇҸ÷½·¨ÊÊÓÃÓÚ¶ÔÉúÎïÌåÒºÑù±¾Öеĸ÷ÖÖÏ¡ÓÐϸ°û£¨°üÀ¨ËùÓеÄÑ­»·Ï¡ÓÐÉÏÆ¤Ï¸ °û£©µÄ¼ì²â¡¢¼ø¶¨ºÍ¶¨Á¿·ÖÎö¡£

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    [0033] ͼ1ÊDZ¾·¢Ã÷µÄµÍ³¡NMRÏ¡ÓÐϸ°û¼ì²â·½·¨µÄÁ÷³Ìͼ£»
    [0034] ͼ2ÊÇʵʩÀý1ÖÐÒÔ±ê×¼Ñù±¾µÄ³Úԥʱ¼ä¸Ä±äÁ¿¦« T2Ϊ×Ý×ø±ê¡¢ÒÔ±ê×¼Ñù±¾ÖÐµÄ Ä¿±êÏ¡ÓÐϸ°ûº¬Á¿Îªºá×ø±êËùÖÆ³ÉµÄ±ê×¼ÇúÏß¡£

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    [0035] Ϊʹ±¾·¢Ã÷µÄÄ¿µÄ¡¢¼¼Êõ·½°¸ºÍÓŵã¸ü¼ÓÇå³þ£¬ÏÂÃæ½«½áºÏ¸½Í¼¶Ô±¾·¢Ã÷µÄ¸÷ʵ Ê©·½Ê½½øÐÐÏêϸµÄ²ûÊö¡£È»¶ø£¬±¾ÁìÓòµÄÆÕͨ¼¼ÊõÈËÔ±¿ÉÒÔÀí½â£¬ÔÚ±¾·¢Ã÷¸÷ʵʩ·½Ê½ÖУ¬ ΪÁËʹ¶ÁÕ߸üºÃµØÀí½â±¾ÉêÇë¶øÌá³öÁËÐí¶à¼¼Êõϸ½Ú¡£µ«ÊÇ£¬¼´Ê¹Ã»ÓÐÕâЩ¼¼Êõϸ½ÚºÍ»ù ÓÚÒÔϸ÷ʵʩ·½Ê½µÄÖÖÖֱ仯ºÍÐ޸ģ¬Ò²¿ÉÒÔʵÏÖ±¾ÉêÇë¸÷ȨÀûÒªÇóËùÒªÇó±£»¤µÄ¼¼Êõ·½ °¸¡£
    [0036] ʵʩÀý1
    [0037] (1)Ñù±¾ÖƱ¸
    [0038] ´ý¼ìÑù±¾ÖƱ¸£º
    [0039] 1. 1´ÓÈéÏÙ°©Ä£ÐÍÊóÖлñµÃ¿¹ÄýѪÑù£¨?10ml)£¬ËùÊöÑùÆ·°üº¬»³Òɺ¬ÓÐÄ¿±êÏ¡ÓРϸ°ûµÄ»ìºÏϸ°ûȺ¡£²É¼¯µÄ±ê±¾Ó¦ÔÚµ±Ìì´¦Àí£¡ÊÒαܹⱣ³Öʱ¼ä²»Ó¦³¬¹ý24Сʱ£»
    [0040] 1. 2FicollÃܶÈÌݶÈÀëÐÄ·¨»ñÈ¡ºòÑ¡»ìºÏϸ°ûȺ
    [0041] 1)¼ÓÈëÊÊÁ¿Ï¸°û·Ö²ãÒº£¨FicollÈÜÒºÅäÖÆ¶ø³É£©ÖÁÎÞ¾úÀëÐĹÜAµ×²¿£¬È»ºó½«ÉÏ Êö¿¹ÄýѪ²âÊÔÑùÒÔPBSÒº×÷Êʵ±Ï¡Êͺó£¨2:1)£¬ÑعܱÚÇáÇá¼ÓÔÚ·Ö²ãÒºÉÏÃæ£¬Ê¹Á½ÕßÐγÉÒ» ¸öÇåÎúµÄ½çÃæ¡£
    [0042] 2) 400 XgˮƽÀëÐÄ30min (ÀëÐÄ»úתËÙµÄÔö¼ÓºÍ¼õÉÙÒª¾ùÔÈ¡¢Æ½ÎÈ£¬ÒÔ±£Ö¤ÐγÉÇå ÎúµÄ½çÃæ£©¡£
    [0043] 3)ÀëÐĺó¹ÜÄÚ×îÖտɼûÈý²ãÒºÌ壬ÉϲãΪ»ÆÉ«ÒºÌ壬Öмä²ãΪ͸Ã÷ÒºÌ壬µ×²ãΪ רºìÉ«³Á»ýºìϸ°û£¨ºìϸ°ûºÍÁ£Ï¸°ûÃܶȴóÓÚ·Ö²ãÒº£¬Í¬Ê±Òòºìϸ°ûÓöµ½Ficoll¶øÄý¼¯ ³É´®Ç®×´¶ø³Á»ýÓڹܵס£ÑªÐ¡°åÔòÒòÃܶÈС¶øÐü¸¡ÓÚѪ½¬ÖУ¬Î¨ÓÐÓë·Ö²ãÒºÃܶÈÏ൱µÄµ¥ ¸öºËϸ°ûÃܼ¯ÔÚѪ½¬²ãºÍ·Ö²ãÒºµÄ½çÃæÖУ¬³Ê°×Ĥ״£©£¬ÎüÈ¡¸Ã²ãϸ°ûµÝ¾­Ï´µÓ¸ßÐÄÖØÐü (300XglOminÏ´µÓÁ½´Î£©ÓÚB¹ÜÖжø»ñµÃ¿ÉÓÃÓÚÏÂÒ»²½ÃâÒß΢´ÅÖ鸻¼¯µÄϸ°ûÐü¸¡Òº´ý¼ì Ñù±¾¡£
    [0044] ±ê×¼Ñù±¾ÖƱ¸£º
    [0045] ½«´¿ÅàÑøÐ¡ÊóÈéÏÙ°©Ï¸°û£¬ÒÔPBS½øÐв»Í¬ÌݶÈÏ¡ÊÍ£¨0, 10, 102, 103, 104, 105, 106£¬ 107cells/ml)£¬´Ó¶ø»ñµÃϵÁÐŨ¶ÈµÄÏ¡ÓÐϸ°ûÐü¸¡Òº±ê×¼Ñù±¾£»
    [0046] (2)´ÅÐÔ΢ÖéÃâÒßÇ׺͸»¼¯
    [0047] ·Ö±ðÈ¡ÉÏÊö±ê×¼Ñù±¾ºÍ´ý¼ìÑù±¾Ï¸°ûÐü¸¡Òº±ê׼ϵÁÐÓÚ96¿×ϸ°ûÅàÑø°åÖУ¬·Ö ±ð¼ÓÈë100 ¦Ì LżÁªÓÐÏ¡ÓÐϸ°ûÌØÒì±í´ï¿¹ÌåµÄ³¬Ë³´ÅÃâÒß´ÅÖ飬ÓÚ4_8¡ãC·õÓý·´Ó¦15min£¬ Êʵ±¿ÉÑ¡ÔñκÍÒ¡´²½øÐлì„ò·õÓý£¬µÃµ½ÏµÁÐRare cell-Microbeads-Ab¸´ºÏÎï±ê×¼Òº¡£´Ë Ϧ²·£¬Îª·Àֹϸ°û±íÃæ¿¹ÌåµÄ·ÇÌØÒìÐÔ½áºÏ£¬²Ù×÷±ØÐëѸËÙ¡¢Ï¸°ûÐèÖÃÓÚ±ùÉÏ¡¢ËùÐèÈÜÒºÐèÔ¤ Àä¡£»ñµÃ´ÅÐÔ΢Ö鸻¼¯µÄ±ê×¼Ñù±¾ºÍ´ÅÐÔ΢Ö鸻¼¯µÄ´ý¼ìÑù±¾¡£
    [0048] (3)´Å¹²Õñ³Úԥʱ¼ä²âÊÔ
    [0049] ÒÇÆ÷²ÎÊýÈçÏ£º´Å³¡Ç¿¶È20. 18MHz£¬´ÅÌåζÈ35¡ãC£¬Öظ´Ê±¼ä5s£¬Ã¿´ÎÊý¾Ý²âÁ¿3 ´Îºóȡƽ¾ùÖµ¡£
    [0050] ±ê×¼Ñù±¾³Úԥʱ¼ä²âÁ¿Óë±ê×¼ÇúÏßÖÆ×÷£º
    [0051] ·Ö±ðÈ¡180 ¦Ì LÉÏÊöϵÁÐRare cell-Microbeads-Ab¸´ºÏÎï±ê×¼ÒºÖÁºË´Å¹²Õñ¹Ü ÖУ¬Óõͳ¡ºË´Å¹²Õñ¼ì²âÒDzâÁ¿´ý²âÊÔÑùºáÏò³Úԥʱ¼ä£¬µÃ³Úԥʱ¼äÖµT sample;ÒÔÎÞ¾úµÄÈ¥ Àë×ÓË®»ò»º³åÒº×÷Ϊ¿Õ°×¶ÔÕÕ£¬Óõͳ¡ºË´Å¹²Õñ·ÖÎöÒǽøÐгÚԥʱ¼ä²â¶¨£¬µÃ³Úԥʱ¼äÖµ Tblank£¬ÒÔ³Úԥʱ¼ä¸Ä±äÁ¿£¨ ¦¤¦³2)Ϊ×Ý×ø±ê£¬ÒÔ±ê×¼Ñù±¾ÖÐÏ¡ÓÐϸ°ûµÄº¬Á¿Îªºá×ø±ê£¬»æÖÆ³É ±ê×¼ÇúÏß¡£ÆäÖУ¬¦«¦³2°´ÕÕʽ£¨1)±íʾ¡£
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    [0055]

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