专利名称：定喘止咳胶囊有效成分的检测方法
技术领域：
本发明属于药物分析检测领域，涉及一种用于风寒喘咳，胸腹胀满，亦可用于支气管哮喘，支气管炎的药物，具体涉及定喘止咳胶囊有效成分的检测方法。
背景技术：
定喘止咳胶囊为已收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第十册的定喘止咳糖浆的改剂品种，具有宣肺平喘，理气止咳的功效。是一种用于风寒喘咳，胸腹胀满，支气管哮喘，支气管炎的良药。定喘止咳胶囊的内容物为棕褐色的颗粒；味苦、微甜。定喘止咳胶囊的1000粒处方如下麻黄375g ；杏仁500g ；厚朴375g ；陈皮375g ；柴胡WOg ；紫苏叶375g ；甘草WOg。定喘止咳胶囊的制备方法如下以上七味，麻黄、陈皮、厚朴、柴胡、紫苏叶加8倍量的水，蒸馏8小时提取挥发油，药渣与甘草、苦杏仁各加水10倍量煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 10 1. 22 (600C )的清膏，减压干燥，粉碎，加淀粉和微粉硅胶适量混勻，制粒，加入挥发油，混勻，闷润，装入胶囊，制成 1000粒，即得。目前的定喘止咳胶囊执行标准为国家食品药品监督管理局标准YBZ(^642006，该标准通过薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VE B)分别定性检测胶囊内容物中的麻黄、陈皮、厚朴，而含量测定也是通过薄层色谱法检测盐酸麻黄碱，对产品质量控制标准是每粒胶囊含麻黄以盐酸麻黄碱计不少于0. 20mg。但是薄层色谱法检测的重现性较差， 准确性和灵敏度都不高。因此，有必要进一步提高定喘止咳胶囊中有效成分检测的灵敏度。
发明内容
本发明的目的是提供一种定喘止咳胶囊有效成分的检测方法。达到方便的、准确的对定喘止咳胶囊产品中每粒胶囊含麻黄以盐酸麻黄碱计不少于0. 20mg的定量检测的目的。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。本发明提供一种定喘止咳胶囊有效成分的检测方法，其定喘止咳胶囊的1000粒处方如下麻黄375g ；杏仁500g ；厚朴375g ；陈皮375g ；柴胡250g ；紫苏叶375g ；甘草 250g ；其特征是其定喘止咳胶囊本品中的麻黄是采用高效液相色谱法检测盐酸麻黄碱， 照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定；具体地，所述检测麻黄以盐酸麻黄碱的高效液相色谱条件如下色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈和0. 02mol/L磷酸二氢钾溶液混合体积比为15 85至3 97，加含0.2%至0.5%的三乙胺，用磷酸调pH值至 2. 5至3. 5 ；流速0. 8 1. 2mL/min ；柱温10 30°C ；紫外检测波长为206 210nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4000 ；优选地，所述方法还包括通过以下方法制备对照品溶液取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20μ g的溶液，即得；优选地，所述方法还包括通过以下方法制备供试品溶液取本品内容物，研细，取 3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入碱性甲醇(5ml浓氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡 30分钟，用功率250KW、频率40Hz的超声处理15分钟，离心，取上清液，药渣按上述方法重复操作1 3次，合并上清液，50°C以下低温蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液30ml溶解，用浓氨试液调PH值至9，用乙醚提取3 5次，每次30ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解， 置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇勻，滤过，即得；优选地，所述方法还包括以下方法进行测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；另一方面，本发明还提供一种定喘止咳胶囊的质量控制方法，所述方法采用上述方法检测定喘止咳胶囊中的有效成分；优选地，所述定喘止咳胶囊每个制剂单位含麻黄以盐酸麻黄碱(CltlH15NO · HCl)计，不得少于0. 20mg。上面所述制备对照品溶液方法取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定10mg，加甲醇制成每Iml含20 μ g的溶液，即得。本发明的优点和效果1、本发明申请人经过几年大量的实验和摸索，提出定喘止咳胶囊有效成分采用高效液相色谱法检测盐酸麻黄碱的检测方法，并且重新修订了该品种的质量标准，已经经过陕西省食品药品检验所的复核认可，克服了现有技术中的薄层色谱法检测的重现性较差， 准确性和灵敏度都不高的问题。证明了本发明提供的方法简便、稳定、精密度高、重现性好， 能有效表征定喘止咳胶囊的质量，2、通过实践证明，达到方便的、准确的对定喘止咳胶囊产品中每粒胶囊含麻黄以盐酸麻黄碱计不少于0. 20mg的定量检测的目的；实现了方便、有效地检测麻黄以盐酸麻黄碱计的含量来有利于监控产品质量的目的。
图1是盐酸麻黄碱对照品高效液相色谱图；图2是定喘止咳胶囊供试品高效液相色谱图；图3盐酸麻黄碱紫外扫描图谱。以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案。
具体实施例方式以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。以下各实施例中使用的供试样品定喘止咳胶囊均来源于本发明的申请人。以下各实施例中使用的对照品盐酸麻黄碱购自中国食品药品鉴定研究院。实施例1即定喘止咳胶囊中盐酸麻黄碱的检测的实施例本实施例通过高效液相色谱法，检测了定喘止咳胶囊中麻黄以盐酸麻黄碱的含量。(1)色谱条件与系统适应性
色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(5 μ m，250mmX 4. 6mm)，即设备的规格型号色谱柱的填料直径为5 μ m，柱长250mm，柱直径4. 6mm ；流动相乙腈-0. 02mol/L磷酸二氢钾溶液(体积比4 96)(其中含0.2%三乙胺，用磷酸调pH值至2. 7)；流速1ml/ min ；柱温:30°C ；紫外检测波长:207nm ；也可选流速0. 8,0. 9,1. 1、1. 2ml/min ；对应柱温 15、18、20、25°C ；对应紫外检测波长206、208、209、210nm ；理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4000。(2)对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱对照品10mg，精密称定，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻。精密量取2ml置IOml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml含盐酸麻黄碱20 μ g)。(3)供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加碱性甲醇(5ml浓氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分钟，超声(功率250KW，频率40Hz)处理15分钟，离心，取上清液，药渣按上述方法重复操作3次，合并上清液，低温蒸干(50°C以下)，残渣加饱和氯化钠溶液30ml溶解，用浓氨试液调pH值至9，用乙醚提取5次，每次30ml，合并乙醚液， 挥干，残渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇勻，滤过，即得。(4)测定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每�：榛埔匝嗡崧榛萍�(CltlH15NO · HCl)计，不得少于0. 20mg。附图1为对照品溶液高效液相色谱图，注18. 2min处为盐酸麻黄碱峰。附图2为供试品溶液高效液相色谱图，注18. 2min处为盐酸麻黄碱峰。实施例2即检测波长的确定的实施例取盐酸麻黄碱对照品适量，加甲醇配制成每Iml含盐酸麻黄碱20μ g的对照品溶液，在190 400nm范围内扫描。从紫外扫描图谱可以看出，盐酸麻黄碱甲醇溶液的最大吸收波长为208nm。见图3盐酸麻黄碱紫外扫描图谱。实施例3即含量测定的实施例(1)色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0. 02mol/l磷酸二氢钾溶液(体积比 15 85)(其中含0.5%三乙胺，用磷酸调pH值至3.0，为流动相；流速选其中之一均可 0. 8,0. 9,1. 0,1. 1、1. 2ml/min ；柱温20°C选其中之一均可10、16、20、23、25、27、28、30°C ； 检测波长为选其中之一均可206、207、208、209、210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4000。(2)对照品溶液的制备与实施例1相同，不再赘述。(3)供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加碱性甲醇(5ml浓氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分钟，超声(功率250KW，频率40Hz)处理15分钟， 离心，取上清液，药渣按上述方法重复操作1次，合并上清液，低温蒸干(50°C以下)，残渣
5加饱和氯化钠溶液30ml溶解，用浓氨试液调pH值至9，用乙醚提取3次G次也可)，每次 30ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，精密取^iil 至IOml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇勻，滤过，即得。(4)测定法与实施例1相同。实施例4即含量测定的实施例(1)色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0. 02mol/l磷酸二氢钾溶液(体积比 10 90)(其中含0.3%三乙胺，用磷酸调pH值至2. 8)为流动相；流速1. 2ml/min ；柱温 250C ；检测波长为209nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4000。(2)对照品溶液的制备与实施例1相同。(3)供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加碱性甲醇(5ml浓氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分钟，超声(功率250KW，频率40Hz)处理15分钟，离心，取上清液，药渣按上述方法重复操作2次，合并上清液，低温蒸干(50°C以下)，残渣加饱和氯化钠溶液30ml溶解，用浓氨试液调pH值至9，用乙醚提取4次，每次30ml，合并乙醚液， 挥干，残渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，精密取2ml至IOml量瓶中，力口流动相定容至刻度，摇勻，滤过，即得。(4)测定法与实施例1相同。实施例5即干扰试验的实施例按实施例1 (3)的方法制备供试品溶液，同时制备不含麻黄的阴性供试品溶液及盐酸麻黄碱对照品溶液，各取10 μ 1进样。结果表明，空白供试品对盐酸麻黄碱的测定无干扰。通过此干扰试验证实了其他成分对盐酸麻黄碱的检测无干扰。实施例6即线性范围的考察的实施例取盐酸麻黄碱对照品溶液(0. 322mg/ml)适量，分别配制成浓度为0. 007728, 0. 01288,0. 02576,0. 03864,0. 05152,0. 07728mg/ml 对照品溶液，各取 10 μ 1 进样，记录色谱图，测定峰面积，结果见表1。并以峰面积A对进样量M进行回归，得标准曲线方程。表1盐酸麻黄碱对照品测定结果
权利要求
1.一种定喘止咳胶囊有效成分的检测方法，其定喘止咳胶囊的1000粒处方如下麻黄375g ；杏仁500g ；厚朴375g ；陈皮375g ；柴胡WOg ；紫苏叶375g ；甘草WOg ；其特征是 其定喘止咳胶囊本品中的麻黄是采用高效液相色谱法检测盐酸麻黄碱，照高效液相色谱法 (中国药典2010年版一部附录VID)测定；具体地，所述检测麻黄以盐酸麻黄碱的高效液相色谱条件如下色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈和0. 02mol/L磷酸二氢钾溶液混合体积比为15 85至3 97，加含0.2%至0.5%的三乙胺，用磷酸调pH值至2. 5至 3. 5 ；流速0. 8 1. 2mL/min ；柱温10 30°C ；紫外检测波长为206 210nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4000 ；优选地，所述方法还包括通过以下方法制备对照品溶液取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含20 μ g的溶液，即得；优选地，所述方法还包括通过以下方法制备供试品溶液取本品内容物，研细，取3g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，加入碱性甲醇(5ml浓氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30 分钟，用功率250KW、频率40Hz的超声处理15分钟，离心，取上清液，药渣按上述方法重复操作1 3次，合并上清液，50°C以下低温蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液30ml溶解，用浓氨试液调PH值至9，用乙醚提取3 5次，每次30ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，置 25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流动相定容至刻度，摇勻， 滤过，即得；优选地，所述方法还包括以下方法进行测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.根据权利要求1所述的一种定喘止咳胶囊有效成分的检测方法，其特征是采用上述方法检测定喘止咳胶囊中的有效成分；优选地，所述定喘止咳胶囊每个制剂单位含麻黄以盐酸麻黄碱(CltlH15NO · HCl)计，不得少于0. 20mg。
3.根据权利要求1所述的一种定喘止咳胶囊有效成分的检测方法，其特征是上面所述制备对照品溶液方法取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定10mg，加甲醇制成每Iml含 20 μ g的溶液，即得。
全文摘要
本发明属于药物分析检测领域，涉及定喘止咳胶囊有效成分的检测方法。目前其含量测定通过薄层色谱法检测盐酸麻黄碱，但其重现性较差，准确性和灵敏度都不高。本发明的目的是提供一种定喘止咳胶囊有效成分的检测方法。采用高效液相色谱法检测盐酸麻黄碱，照高效液相色谱法测定；色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相乙腈和磷酸二氢钾溶液混合，加三乙胺，用磷酸调pH值至2.5至3.5；流速1mL/min；柱温20℃；紫外检测波长为208nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于4000。本发明效果达到方便的、准确的对定喘止咳胶囊产品中每粒胶囊含麻黄以盐酸麻黄碱计不少于0.20mg的定量检测的目的。
文档编号G01N30/88GK102507821SQ20111033041
公开日2012年6月20日 申请日期2011年10月26日 优先权日2011年10月26日
发明者杜小英, 王宇 申请人:陕西方舟制药有限公司
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
