一种蔬菜硝酸盐的测定方法-山东亚星游戏官网机床有限公司

专利名称：：一种蔬菜硝酸盐的测定方法
技术领域：
：本发明涉及一种蔬菜硝酸盐的测定方法。
背景技术：
：蔬菜是人们日常生活中不可缺少的重要食品，它为人类提供各种维生素、矿物质和纤维素，在食物的构成中占有重要地位。但它较其它农作物更易于富集硝酸盐。据报道，人体摄取的硝酸盐80％以上来自蔬菜。世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)早在1973年就规定了硝酸盐的日允许量(ADI值)为3.6mg/kg(体重)。我国人体重以60kg、城镇居民日食菜量按0.5kg计，则1kg蔬菜的硝酸盐允许量为432mg。蔬菜经过盐渍、煮熟后硝酸盐含量最高减少70％，依此折算，其允许含量可最高扩大为1440mg/kg。现在许多国家已制定农作物硝酸盐含量标准，并将硝酸盐含量作为衡量蔬菜品质的一个重要指标。但我国2001年才制定蔬菜中硝酸盐含量标准，且指标明显高于世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)，这可能是导致了我国成为消化道癌症高发国家的直接原因。近年来氮肥的大量使用以及塑料棚种植技术的推广，使得蔬菜中硝酸盐的含量大大提高，蔬菜的硝酸盐超标问题日益突出，也日益受到人们的关注，控制人体从蔬菜中摄入过量的硝酸盐，是减少其对人体造成�：Φ幕颈Ｕ�。蔬菜检测作为杜绝硝酸盐�：Σ⑻峁└愦笙颜哂胖拾踩返淖詈笃琳希笞既吠猓挂竽苁视ξ夜卟朔稚ⅰ⑸鲜惺奔涠痰瓤焖偬氐�。国家标准GB/T15401的测定方法，测定过程繁琐，耗时长；其中的镉对环境造成污染，紫外法易受色素等干扰，空白较大，结果偏高，特别是茶叶等在紫外区有强吸收的物质根本无法用紫外法测定。
发明内容为了快速检测蔬菜中的硝酸盐，为了避免检测对环境的污染，本发明提供一种蔬菜硝酸盐的测定方法，其特征在于第一步，用中性溶液将蔬菜中的硝酸盐提�。⒔湎∈臀�5-20mg/kg硝酸盐溶液；第二步，检测剂为磺胺1.6克、萘胺0.8克、锌粉1.0克，其余是填充剂，将检测剂0.05-0.2克加入到经稀释的硝酸盐溶液中，混匀，充分反应，过滤；第三步，用分光光度计测定滤液，与标准曲线比较，得到检测溶液中硝酸盐的含量；第四步，经计算得到蔬菜中硝酸盐的含量。在上述方法中，中性溶液一般用水；将蔬菜中的硝酸盐提取液稀释为5-20mg/kg硝酸盐溶液，在此范围内测定值与硝酸盐浓度的相关性最好。填充剂的作用是方便于检测剂的准确地定量。检测剂的加入量为0.05-0.2克，高于0.2克，易因锌的还原能力过强而使测定值偏低，达到0.3克后测定值急剧下降到最低，无法测定。低于0.05时又因反应不彻底而使结果偏低。标准曲线是指用易溶的硝酸盐，如硝酸钠或硝酸钾配制的额定浓度的标准溶液，再将其配制成不同浓度的标准系列，和样品同时测定。第四步，经计算得到蔬菜中硝酸盐的含量的做法是常规的专业操作。填充剂可以采用柠檬酸30克、硫酸锰4克。检测剂为0.1克时测定最准确，效果最好。图1、本发明的硝酸盐浓度在1mg/kg时检测剂的不同加入量对样品吸光值的影响图2、本发明的硝酸盐浓度在5mg/kg时检测剂的不同加入量对样品吸光值的影响图3、本发明的硝酸盐浓度在10mg/kg时检测剂的不同加入量对样品吸光值的影响图4、本发明的硝酸盐浓度在50mg/kg时检测剂的不同加入量对样品吸光值的影响实施方案第一步，用水将蔬菜中的硝酸盐提�。聪冉卟嗽冉俪迫≡冉�5-10克，加入50毫升的水，充分搅动后过滤，再用水将滤液稀释为5-20mg/kg的硝酸盐溶液；第二步，配制检测剂将磺胺1.6克、萘胺0.8克、锌粉1.0克、柠檬酸30克、硫酸锰4克粉碎、混匀。将检测剂0.1克加入到装有25毫升经稀释的硝酸盐溶液的比色管中，摇动装有反应溶液的比色管使其混匀，待充分反应后，过滤；第三步，用分光光度计测定滤液，与标准曲线比较，得到检测溶液中硝酸盐的含量；第四步，经计算得到蔬菜中硝酸盐的含量。具体做法如下1材料与方法1.1主要仪器与试剂主要仪器包括岛津UV-2501PC型紫外可见分光光度计；家用电动搅拌机；SKC型水浴锅(上海天水仪器有限公司)；主要试剂包括硝酸钠、硼酸钠、亚铁氰化钾、乙酸锌、磺胺、萘乙二胺盐酸盐、盐酸、氨水、醋酸、镉粉(中国医药集团上海化学试剂公司)硝酸盐标准溶液称取经110～120℃烘干2h的NaNO3(分析纯)0.5000g，溶解定容至1000mL，此为500mg/L的NaNO3贮备液，使用前用蒸馏水稀释至100mg/L作为使用液；国标法所用提取试剂均按GB/T15401-94配制。1.2供试蔬菜品种及其预处理供试材料为市售的新鲜菜心、小白菜、生菜、菜豆、番茄、辣椒、茄子、甘蓝、豇豆、丝瓜、苦瓜、黄瓜、芥兰、芥菜、芹菜和通心菜等16种主要蔬菜类型。将新鲜蔬菜冼净，晾去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，用搅拌机制成匀浆。1.3实验方法1.3.1提取剂的选择(1)碱性溶剂提取按国标《水果、蔬菜及其制品亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定》GB/T15401-94法略作修改，活性炭的加入量改为1g；(2)酸性溶剂提取称取5～10g蔬菜匀浆液于100mL烧杯中，加50mL2％醋酸溶液，充分搅动后过滤；(3)中性溶剂提取称取5～10g蔬菜匀浆液于100mL烧杯中，加50mL蒸馏水，充分搅动后过滤。用上述各方法提取的提取液用《食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法》GB/T5009.33-1996方法测定。1.3.2试粉加入量的确定取10mg/L的NaNO3标准溶液2.5mL于13支25mL比色管中，定容配成1mg/L的NaNO3标准容液，分别加入0、0.02、0.05、0.075、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0g试粉，振荡均匀后，过滤，在538nm处测定其吸光值。同样分别吸50mg/L、100mg/L和500mg/L的NaNO3标准溶液2.5mL于13支25mL比色管中，定容配成5mg/L、10mg/L和50mg/LNaNO3标准溶液各13支。同上加入不同量的混合试粉，按上述操作步骤测定。各3次重复。1.3.3工作曲线的制备分别吸取100mg/L的NaNO3溶液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、4.0、5.0mL，定容25mL配成0、2、4、6、8、10、16、20mg/L的NaNO3标准溶液，用改进试粉法进行测定。1.3.4精密度的测定以芥菜和菜心等为材料，按前面试验结果所确定的提取剂、试粉加入量及测定范围等进行10次重复测定，计算其测定值及变异系数。1.3.5回收率与检测限的测定选取菜心、小白菜、茄子、丝瓜、芥菜、芥蓝和莼菜等7种有代表性的蔬菜种类进行回收率试验，根据蔬菜硝酸盐含量的不同，瓜果类蔬菜加入NaNO3的量为2mg，叶菜类为20mg。具体方法为称取瓜果类蔬菜10.00g，加0.5mg/mL的NaNO3溶液4mL；称取叶菜类5.00g，加5mg/mL的NaNO3溶液4mL，在称样时加入，每种蔬菜各称取6个样品，加标与不加标的各3个，然后用前面试验确定的方法进行测定。2试验结果分析2.1蔬菜硝酸盐提取剂的选择分别采用碱性剂、酸性溶剂和中性溶剂3种蔬菜硝酸盐提取方法，12种蔬菜硝酸盐的测定结果(表1)可知，3种提取剂测得的砂硝酸盐含量基本相同，酸性溶剂(2％HAc)和中性溶剂(水)提取分别与碱性溶剂(国标法)提取结果的相关系数r分别达0.9913和0.9991，均达极显著水平(p＜0.01)。分别比较二者与国标法的偏差值，中性溶剂水提取与国标法的偏差值明显低于酸性溶剂提以法的，表明中性溶剂(水)的测定准确性更高且水具有简便易得等优点，故本法选择以水作为提取剂。表1不同提取方法测定蔬菜中硝酸盐含量(以NaNO3计)Table1Comparethreemethodsforextractionofnitrateinvegetables碱性溶剂(A0)酸性溶剂中性溶剂蔬菜VegetableStandard(A1)(A2)A0-A1A0-A2method2％HAcH2O茄子Eggplant200.0127.2198.872.81.2辣椒Pepper27.6115.6428.5411.97-0.93豇豆Asparagusbean150.796.62152.254.08-1.5丝瓜Spongegourd124.8101.9116.122.98.7苦瓜Bittergourd298.4229.9281.068.517.4黄瓜Cucumber23.5217.7423.035.780.49甘蓝Cabbage828.2733.2848.395-20.1菜心Falsepakchoi440531454356126049芥兰Chinesecabbage47033790468891315芹菜Chinesecelery118212181181-361大白菜Chinesecabbage1286121312437343通心菜Waterspinach33463042333630410平均Mean138111441337237442.2试粉加入量的确定由图1可见，在NaNO3含量分别为1mg/L、5mg/L、10mg/L和50mg/L的4种溶液浓度下，其吸光值开始都随试粉加入量的增加而上升，在0.1g时达最大后，再随试粉量的增加而急剧下降，试粉达到0.3g或0.4g时处于最低值，以后增加试粉量，其吸光值基本不变。1m/L的吸光值的最大值虽不在0.1g，但其在0.1g处的吸光值仍较大，另一方面，在实际样品测定时，待测溶液中NaNO3浓度多在5～15mg/L范围内，故在应用的时候选择0.1g作为试粉的最佳加入量。2.3工作曲线按0.1g试粉加入量测得不同质量浓度硝酸钠标准溶液吸光度结果见表2，以测得吸光度A为纵坐标(Y)对硝酸钠质量浓度(X)绘制标准曲线，回归方程为Y＝0.03119X-4.62×10-4，r＝0.9999(n＝8)结果表明蔬菜硝酸钠质量浓度在0～20mg/L范围内线性关系良好。表2标准溶液质量浓度与吸光度关系Table2CorrelationbetweentheabsorbencyandNO3-content质量浓度NaNO302468101620content(mg/L)吸光度(A)00.0620.1260.1820.2510.3130.4960.6252.4方法的准确度和精密度回收率试验结果见表3。由表3可见，本文建立的水提取和0.1g试粉加入量的测定方法的加标回收率在97.7％～104.5％，表明本方法具有较高的回收率，证明其准确度较高。以芥菜和菜心为材料，按本方法重复测定10次，样品中NaNO3含量分别为4656±42.51mg/kg和4431±60.35mg/kg，RSD分别为0.913％和1.34％，说明本方法具有良好的重现性和精密度。表3回收率试验结果Table3RecoveriesofNO3-determination蔬菜种类NaNO3原始含量NaNO3加入量NaNO3回收率VegetablesOriginal(mg/kg)Added(mg)Recovery(％)茄子Eggplant2452102.5小白菜Pakchoi553420104.5菜心Falsepakchoi56672098.6丝瓜spongegourd272299.7芥兰Chinesekale59352097.7芥菜Leafmustard480020104.5莼菜Watershield326720102.02.6样品测定以茄子、丝瓜、芥菜和菜心等4种蔬菜为材料，分别以本文确定的测定方法和国标法(GB/T15401-94提�。珿B/T5009.33-1996镉柱法测定)进行比较，经t检验差异不显著，表明本方法与国标法的测定结果具有一致性。表4样品测定结果(x±S，n＝10)Table4DeterminationresultsforNO3-insamples本法Thismethod国标法Standard蔬菜Vegetables(mg/kg)(X1)method(mg/kg)(X2)tx1-x2茄子Eggplant185.0±1.05184.5±0.641.29丝瓜Spongegokurd115.7±2.03114.4±1.061.71芥菜Leafshield3246.3±44.853216.2±67.551.17菜心Falsepakchoi3970.0±69.653939.4±58.041.10上述实验结果表明，采用改进的试粉法用于新鲜蔬菜的硝酸盐测定，具有重现性好，测定结果准确可靠，操作简便、快速等优点，还可适用于室外快速测定。权利要求1.一种蔬菜硝酸盐的测定方法，其特征在于第一步，用中性溶液将蔬菜中的硝酸盐提�。⒔湎∈臀�5-20mg/kg硝酸盐溶液；第二步，检测剂为磺胺1.6克、萘胺0.8克、锌粉1.0克、其余是填充剂，将检测剂0.05-0.2克加入到经稀释的硝酸盐溶液中，混匀，充分反应，过滤；第三步，用分光光度计测定滤液，与标准曲线比较，得到检测溶液中硝酸盐的含量；第四步，经计算得到蔬菜中硝酸盐的含量。2.根据权利要求1所述的蔬菜硝酸盐的测定方法，其特征在于填充剂是，柠檬酸30克、硫酸锰4克。3.根据权利要求1所述的蔬菜硝酸盐的测定方法，其特征在于检测剂0.1克。全文摘要本发明涉及一种蔬菜硝酸盐的测定方法。其特征在于第一步，用中性溶液将蔬菜中的硝酸盐提�。⒔湎∈臀�5－20mg/kg硝酸盐溶液；第二步，检测剂为磺胺1.6克、萘胺0.8克、锌粉1.0克、其余是填充剂，将检测剂0.05－0.2克加入到经稀释的硝酸盐溶液中，混匀，充分反应，过滤；第三步，用分光光度计测定滤液，与标准曲线比较，得到检测溶液中硝酸盐的含量；第四步，经计算得到蔬菜中硝酸盐的含量。该法快速、准确，无污染。文档编号G01N21/27GK1619290SQ200310112230公开日2005年5月25日申请日期2003年11月21日优先权日2003年11月21日发明者杜应琼,王富华,袁利升,李乃坚,苏青云,刘洪标申请人:广东省农业科学院蔬菜研究所

亚星游戏官网-www.yaxin868.com

一种蔬菜硝酸盐的测定方法