专利名称：冰冻组织微阵列载体、制作方法及制作专用设备的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种应用在生物医学研究、教学及临床分析上的产品、产品的制作方法及专用制作设备。尤其是一种应用在癌症基因组学中的冰冻组织微阵列载体、冰冻组织微阵列载体的制作方法及专用制作设备。
背景技术：
目前，癌症已成为威胁人类生命的几大杀手之一，人们正在积极努力地寻求攻克癌症的方法。癌症基因组学研究即是通过比较人体正常细胞、癌前病变以及恶性肿瘤细胞的基因结构和功能的异同，筛查在肿瘤发生、发展过程中的生物学功能、遗传学改变以及演变规律，以期实现癌症的基因防护和有效治疗。癌症基因组学研究过程则需通过基因芯片和生物信息技术筛选与癌症发病密切相关的候选基因，再利用数以百计的癌症标本，对筛选到的各基因的变异规律加以核实。因此，迫切需要一种在同样实验条件下，快速分析/检测各遗传学指标在大量临床标本中变异情况的实验技术，也就需要大量的被检样本。为解决这一问题，以往人们采用了石蜡包埋样本组织阵列方法，即在光镜下使用微量采样器获取各类石蜡包埋组织的目的区域，并以阵列的形式将其置入另一石蜡载体内，连续切片后，可得到较多的被检样本，以适应不同项目的检测需要。虽然此方法操作比较简单，但是石蜡包埋组织中样本的RNA多已降解而只剩下DNA，抗原性也明显降低，易造成实验的假阴性，影响了实验的准确性。为克服石蜡包埋样本组织阵列方法的不足，有人采用了另一种方法，即以OCT材料(记载于2001年12月发表的《美国病理学杂志》上)为基体，在基体上形成用于放置样本的阵列小孔，形成冰冻组织阵列载体。使用时，在显微镜下选择组织切片内的特定区域，将其与主体分隔开，置入载体的阵列小孔中，在冰冻状态下切片，以形成大量的被检样本。OCT材料载体方法确实克服了石蜡包埋样本组织阵列方法的不足，但是，由于OCT材料在低于-20℃时脆性较高，而高于-10℃时基体变软，难于制成高密度阵列载体，最高密度只能达到30孔/cm。另外，OCT材料还存在着切片后阵列不整齐，实验过程中样本组织点容易脱落、变形、重叠等问题，不能满足医学研究的高效率、高准确性要求。
发明目的
本发明的目的是为了解决现有技术所存在的问题，提供一种制作成本低廉、高密度的冰冻组织微阵列载体以及制作该载体的方法、专用设备。
本发明的技术解决方案是一种冰冻组织微阵列载体，有基体1及设置在基体1上的孔2，所述的基体1材料为新鲜鸡胗。
所述的基体1的尺寸为0.8cm×0.8cm×0.5cm或0.6cm×0.6cm×0.5cm。
所述的孔2间距为0.5mm，孔2直径为0.5mm，深度为3～5mm。
制作方法为a.将新鲜鸡胗超低温速冻；b.冷冻状态下将速冻的鸡胗整形成基体1；c.冷冻状态下在基体1上钻出孔2。
所述的a步骤为用液氮对新鲜鸡胗进行超低温速冻。
所述的b步骤的冷冻状态为-20～-35℃。
所述的c步骤的冷冻状态为-75～-85℃。
专用制作设备为设有载物台3，在载物台3上固定有升降杆4，升降杆4上设有卡位夹5、弹簧6及电动手钻固定夹7，电动手钻固定夹7上固定有电动手钻8及电动手钻压杆9，电动手钻压杆9的另一端活动连接卡位夹5上，载物台3上设有标有坐标并可前后左右移动的基体固定夹10。
所述卡位夹5与电动手钻固定夹7之间设有限位尺11。
所述的载物台3上还设有液氮贮槽12。
本发明的特点是以新鲜鸡胗为冰冻组织微阵列载体的基体，不但制作成本低，而且由于鸡胗组织结构致密、有韧性，在低温条件下脆性�。虼丝梢灾瞥筛呙芏仍靥澹罡呙芏瓤纱�64孔/cm。使用时，实验人员可同时对64个样本组织点进行同一指标检测，降低了实验人员的工作强度，提高了工作效率；又因为鸡胗对温度升高的敏感性�。稍�-10℃—-35℃的温度范围内将置有样本的载体切成极薄(4μm)的切片，以产生大量的被检样本，满足对样本的多指标检测及教学研究中的多人使用；鸡胗冰冻组织微阵列载体在切片后阵列十分完整、整齐，易于普通载玻片粘附且样本组织点极少脱落，可避免现有技术的样本组织点丢失、移位或卷边等现象，保证了各项检测结果的科学性和可比性。可用专用制作设备进行制作，整个制作工艺简单。
图1为本发明实施例载体的结构剖示图。
图2为本发明实施例专用制作设备的立体图。
具体实施例方式下面将结合
本发明的
具体实施例方式取新鲜鸡胗，最好是宰生后1小时左右的鸡胗，置于液氮中进行超低温速冻，然后将速冻后的鸡胗在-20～-35℃的冷冻状态下进行整形，即将速冻的鸡胗切成尺寸为0.8cm×0.8cm×0.5cm或0.6cm×0.6cm×0.5cm的小块，形成基体1。再在-75～-80℃的冷冻状态下，在基体1上钻出直径为0.6mm，深度为3～5mm的阵列小孔2，小孔2的间距为0.7m，这样即形成了如图2所示的冰冻组织微阵列载体。钻孔时需用专用制作设备，专用设备的结构如图2所示即设有载物台3，在载物台3上固定有升降杆4，升降杆4上设有卡位夹5、弹簧6及电动手钻固定夹7，电动手钻固定夹7上固定有电动手钻8及电动手钻压杆9，电动手钻压杆9的另一端活动连接卡位夹5上，载物台3上设有标有坐标并可前后左右移动的基体固定夹10，可采用显微镜下的标有标尺的移动夹形式，卡位夹5与电动手钻固定夹7之间设有限位尺11，载物台3上还设有液氮贮槽12。
具体操作为，将基体1固定在基体固定夹10上，调整固定夹的横向、纵向调节钮，使基体1固定在所需位置上，调整限位尺11以控制所钻孔的深度。脚踏电动手钻开关13，按动电动手钻压杆9，电动手钻8即可在基体1上钻出符合要求的小孔2。载物台3上的液氮贮槽12可放置液氮，钻孔时可适时向基体1上浇注液氮，保证基体总是处于冷冻状态。
冰冻组织微阵列载体应在冷冻状态下保存。使用时，同现有的OCT材料载体一样，将样本置入载体的阵列小孔中，在冰冻状态下切片，即可形成大量的被检样本。
权利要求
1.一种冰冻组织微阵列载体，有基体(1)及设置在基体(1)上的孔(2)，其特征在于所述的基体(1)材料为新鲜鸡胗。
2.根据权利要求1所述的冰冻组织微阵列载体，其特征在于所述的基体(1)的尺寸为0.8cm×0.8cm×0.5cm或0.6cm×0.6cm×0.5cm。
3.根据权利要求1或2所述的冰冻组织微阵列载体，其特征在于所述的孔(2)间距为0.5mm，孔(2)直径为0.5mm，深度为3～5mm。
4.一种冰冻组织微阵列载体的制作方法，包括如下步骤a.将新鲜鸡胗超低温速冻；b.冷冻状态下将速冻的鸡胗整形成基体(1)；c.冷冻状态下在基体(1)上钻出孔(2)。
5.根据权利要求所述4所述的冰冻组织微阵列载体的制作方法，其特征在于所述的a步骤为用液氮对新鲜鸡胗进行超低温速冻。
6.根据权利要求4或5所述的冰冻组织微阵列载体的制作方法，其特征在于所述的b步骤的冷冻状态为-20～-35℃。
7.根据权利要求6所述的冰冻组织微阵列载体的制作方法，其特征在于所述的c步骤的冷冻状态为-75～-85℃。
8.一种制作冰冻组织微阵列载体的专用设备，设有载物台(3)，在载物台(3)上固定有升降杆(4)，升降杆(4)上设有卡位夹(5)、弹簧(6)及电动手钻固定夹(7)，电动手钻固定夹(7)上固定有电动手钻(8)及电动手钻压杆(9)，电动手钻压杆(9)的另一端活动连接在卡位夹(5)上，其特征在于载物台(3)上设有标有坐标并可前后左右移动的基体固定夹(10)。
9.根据权利要求8所述的制作冰冻组织微阵列载体的专用设备，其特征在于所述卡位夹(5)与电动手钻固定夹(7)之间设有限位尺(11)。
10.根据权利要求9所述的制作冰冻组织微阵列载体的专用设备，其特征在于所述的载物台(3)上还设有液氮贮槽(12)。
全文摘要
本发明提供一种冰冻组织微阵列载体、制作方法及专用制作设备。冰冻组织微阵列载体有基体1及设置在基体1上的孔2，基体1材料为新鲜鸡胗。制作方法为将新鲜鸡胗超低温速冻；在冷冻状态下将速冻的鸡胗整形成基体1；在冷冻状态下将基体1上钻出孔2。钻孔时的专用设备可将现有的台钻进行改造，在载物台3上安装标有坐标并可前后左右移动的基体固定夹10。所制作的冰冻组织微阵列载体成本低，阵列小孔密度高，降低了实验人员的工作强度，提高了工作效率；可以产生大量的被检样本，满足在同一条件下，短时间对大量样本的多指标检测及教学研究中的多人使用，并可保证各项检测结果的科学性和可比性。
文档编号G01N1/42GK1391094SQ0210982
公开日2003年1月15日 申请日期2002年5月24日 优先权日2002年5月24日
发明者李宏, 孔庆友, 孙媛, 刘佳, 陈晓燕, 王晓炜, 赵杰, 王茜, 张开立 申请人:大连高新园区全国高技术产业化微生态中试基地
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