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专利名称：一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒。
背景技术：
疟疾(malaria)是因疟原虫寄生人体组织而引起的寄生原虫病。临床上以间歇性发冷、发热、肝脾肿大为主要特征。主要包括间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。间日疟是疟疾的一种类型，为间日痕原虫(Plasmodium vivax)所引起,其特点为每隔48小时反复发作一次，主要表现为先冷后热，出汗后恢复正常，两次发作期间表现正常。其传播媒介为中华按蚊。目前对间日疟检测的主要方法是对血液样本进行采集检测间日疟原虫，在胶体金的检测方法中，有检测间日疟和恶性疟抗原的报道，但使用口腔液拭子进行IgG检测尚未有相关报道。和传统试剂相比，使用口腔液拭子进行IgG检测具有采样容易，减少患者的痛苦，减少检测人员的工作量的优点。
发明内容本实用新型的目的是提供一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒，具有采样容易、操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测等优点。
本实用新型提供一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒，其特征在于塑料支撑板(7) —端连接上样垫(1)，上样垫(I)的一端紧密压接含有标记间日疟特异性的抗原的胶体金垫(2)，胶体金垫(2) —端紧密压接硝酸纤维素(NC)膜(3)，硝酸纤维素膜包被有相互分离的检测线T线(5)和质控C线(6)，检测线T (5)为包被在NC膜上的抗人IgG抗体，质控(C)线(6)为包被在NC膜上的抗间日疟特异性抗原的抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(4)形成试纸。所述的一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒，其特征在于其抗体的包被方法为:以0.0lM pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgG抗体配制成5mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被间日疟特异性抗原的抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25 V，湿度小于30 %，干燥2-5小时。将标记好间日疟特异性抗原的胶体金颗粒制成胶体金垫，与包被抗体的硝酸纤维素膜和其他辅料制备成试纸条。所述的一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒，其特征在于其检测方法为:用口腔拭子尼龙垫端从嘴的上牙龈一角开始，从左慢慢压拭到右，用时5到6秒，然后，从右慢慢压拭到左，用时5到6秒，反复3次，然后反转口腔拭子，从嘴的下牙龈一角开始，重复上述过程，压拭力度，以受检者有酸胀感，且无明显不适为准；压拭后，立即将口腔拭子浸入样本缓冲液中，先后让拭子的两面紧贴试管壁，上下刮擦6-8次，管内液体即为口腔液样本，将试纸条平放，在上样垫上加入IOOul样品，使胶体金溶解并在NC膜上层析，然后用肉眼直接观察在15分钟内C、T线的出现情况，并判定检测结果。本实用新型的有益效果是:提供一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒。和传统试剂相比，使用口腔液拭子进行IgG检测具有采样容易，减少患者的痛苦，减少检测人员的工作量的优点。

:图1使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒试纸结构示意图。附图符号说明:1:上样垫；2:胶体金垫；3:NC膜；4:吸样垫5:检测线Tl ；6:质控(C)线；7:塑料支撑板。图2采集口腔液拭子结构示意图附图符号说明:1:尼龙垫端；2:手持端。
具体实施方式
实施例:制备间日疟的检测试剂盒试纸将间日疟特异性抗原使用胶体金标记，制成胶体金垫，以0.0lM pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgG抗体配制成5mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1_1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被间日疟特异性抗原抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25°C，湿度小于30%，干燥2_5小时。将胶体金垫和包被好的NC膜和其他辅料装配成试纸条。 将已确诊间日疟IgG抗体阳性的病人作为待检者，将50例已确诊间日疟IgG抗体阴性的健康人作为对照组待检者。用口腔拭子尼龙垫端从嘴的上牙龈一角开始，从左慢慢压拭到右，用时5到6秒，然后，从右慢慢压拭到左，用时5到6秒，反复3次，然后反转口腔拭子，从嘴的下牙龈一角开始，重复上述过程，压拭力度，以受检者有酸胀感，且无明显不适为准；压拭后，立即将口腔拭子浸入样本缓冲液中，先后让拭子的两面紧贴试管壁，上下刮擦6-8次，管内液体即为口腔液样本，将试纸条平放，在上样垫上加入IOOul样品，使胶体金溶解并在NC膜上层析，然后用肉眼直接观察在15分钟内C、T线的出现情况，并判定检测结果O检测结果的解释:如果对照区内的对照线没有出现，检测结果无效，如果仅在对照区出现一条线对照线，结果为阴性。如果检测线和对照线都出现，即试纸上出现两条线，则检测结果为阳性。通过临床血清检测，IgG为阳性的样本和IgG为阴性的样本，本试剂检测和临床诊断结果完全一致。临床检测表明本试剂的性能和现有诊断手段相比无显著性差异，适合用于临床检测。
权利要求1.一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒，其特征在于塑料支撑板(7) —端连接上样垫(1)，上样垫(I)的一端紧密压接含有标记间日疟特异性抗原的胶体金垫(2)，胶体金垫(2) —端紧密压接硝酸纤维素膜(3)，硝酸纤维素膜包被有相互分离的检测线T线(5)和质控C线(6)，检 测线T(5)为包被在硝酸纤维素膜上的抗人IgG抗体，质控(C)线(6)为包被在硝酸纤维素膜上的抗间日疟特异性抗原的抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫⑷形成试纸。
专利摘要本实用新型涉及生物应用技术领域，特别涉及一种使用拭子采集体液检测间日疟的检测试剂盒，采用拭子采集口腔液，用胶体金标记间日疟重组抗原，包被抗人IgG抗体实现对口腔液中抗间日疟IgG抗体的检测。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。
文档编号G01N33/569GK203101393SQ20122059677
公开日2013年7月31日 申请日期2012年11月12日 优先权日2012年11月12日
发明者祁军, 刘寅, 于智睿, 刘振宇, 柴宏森, 左锋, 于佳 申请人:中华人民共和国天津出入境检验检疫局