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专利名称：一种表面等离子体手性探针的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种表面等离子体手性探针的制备方法，属于表面等离子体微/纳结构生物探测器领域。
背景技术：
近年来，随着人工合成金属纳米颗粒材料研究的日臻成熟，基于金属纳米颗粒独特的表面等离子体光学性质而发展的各种等离子体传感器已经在生物医学领域发挥重要作用。由于金纳米棒具有各向异性的结构特点，包括其可调谐的表面等离子共振(SPR)电磁响应及其表面增强的光谱特性，是目前人工表面等离子体传感器研究的热点。迄今，基于金纳米棒表面等离子体共振和表面增强光谱的生物传感器在生物感测、生物医学成像、基因、药物的输送、疾病的探测、诊断、以及治疗等领域已经展示巨大的应用前景(X. H. Huang， S. Neretina and Μ. A. El-Sayed, Gold Nanorods :From Synthesis and Properties to Biological and Biomedical Applications, Adv. Mater. 2009,21,4880-4910 ；Z. Nie, A. Petukhova,E. Kumacheva,Properties and emerging applications of self-assembled structures made from inorganic nanoparticles，Nat· Nanotech· 2010，5，15-24.)。其中， 种子生长法为金纳米棒的经典制备方法，即将氯金酸溶液和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB) 溶液混合，加入硼氢化钠溶液引发成核反应得到金种，然后在生长液中加入金种，在CTAB、 硝酸银、还原剂抗坏血酸的作用下，金离子被慢慢还原，并以溶液中的金种为核心定向生长为具有一定长径比的金纳米棒，控制反应条件得到的金纳米棒具有{111}晶面(Anand Gole and Catherine J. Murphy, Seed-Mediated Synthesis of Gold Nanorods :Role of the Size and Nature of the Seed Chem. Mater. 2004,16, 3633-3640 ；Babak Nikoobakht and Mostafa A. El-Sayed,Preparation and Growth Mechanism of Gold Nanorods(NRs)Using Seed-Mediated Growth Method, Chem. Mater. 2003，15，1957-1962 ；金纳米棒的表面改性及其在生物医学领域的应用，化学通报，2010 (3)，195-104)。众所周知，半胱氨酸分子(cysteine，Cys)存在两种手性的同分异构体左旋半胱氨酸分子(L-cys)和右旋半胱氨酸分子(D-cys)。其中，L_Cys在生命系统中具有重要的作用。因此，实现L-cys高效、高灵敏度的手性选择探测在医药行业中具有很高的实用价值。Cys是双功能小分子，其一端巯基化，可以与金纳米棒端部通过Au-S键形成强相互作用，另一端在溶液中能够形成氢键或两性离子，因此Cys可用于组装金纳米棒形成线性链结构。在这样的金纳米棒线性组装结构中，表面等离激子体耦合导致表面等离子体共振(SPR)吸收谱显著变化，可以用来构建具有极高灵敏度的等离子体生物传感器，应用于探测有机分子如半胱氨酸分子。虽然目前基于表面等离子体耦合的金纳米棒传感器可以提供一种高效的、高灵敏度地探测半胱氨酸分子的手段(H.Huang，X. Liu, Τ. Hu, P. K. Chu, Ultra-sensitive detection of cysteine by gold nanorod assembly, Biosensors and Bioelectronics，2010，25，2078-2083 ；P.K. Sudeep, S.Τ. S. Joseph，K. G. Thomas，Selective Detection of Cysteine and Glutathione Using Gold Nanorods, J. Am. Chem. Soc. 2005,127,6516-6517)，然而，不足之处在这种SI3R传感器不能区分手性分子同分异构体的细微差别，缺乏手性识别功能。为此需要一种表面等离子体手性探针，用于半胱氨酸分子的探测及其同分异构体的手性识别，在制药和生物医学上具有重要应用价值。

发明内容
本发明的目的在于提供了一种表面等离子体手性探针的制备方法，通过所述制备方法得到表面等离子体手性探针，用于半胱氨酸分子的探测及其同分异构体的手性识别。为实现上述目的，本发明的技术方案如下一种表面等离子体手性探针的制备方法，所述方法具体步骤如下步骤一、制备金纳米棒分散液和磷脂分子模板其中，金纳米棒分散液的制备过程如下通过种子生长法制备得到金纳米棒分散液原液后，离心得到沉淀和上层液体，其中沉淀为表面包裹着十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)的金纳米棒；取出上层液体后，向沉淀中加水，得到金纳米棒分散液；在金纳米棒分散液中有游离的CTAB。优选步骤一中通过种子生长法制备得到金纳米棒分散液原液的过程如下1.金种制备取CTAB溶液，搅拌条件下加入氯金酸(HAuCl4)的水溶液后，加入硼氢化钠(NaBH4) 溶液，搅拌:3min，得到金种备用；其中，CTAB的物质的量氯金酸的物质的量硼氢化钠的物质的量= 7500 24. 8 6 ；2.生长液制备取CTAB溶液，加入氯金酸(HAuCl4)的水溶液、硝酸银水溶液、硫酸和抗坏血酸水溶液；其中，CTAB的物质的量氯金酸的物质的量硝酸银的物质的量= IO4 50. 6 4 7 ；CTAB的物质的量硫酸的物质的量抗坏血酸的物质的量=IO3 IO2 8；3.金纳米棒分散液的制备取步骤1制备的金种，加入到步骤2制备的生长液中，在30°C下生长12 15h，得到金纳米棒分散液原液；其中，所取步骤1制备的金种中CTAB的物质的量步骤2制备的生长液中CTAB 的物质的量=1.8 X IO"5 1 ；磷脂分子模板是通过将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)磷脂分子溶于氯仿，将氯仿旋转蒸发后，冷冻干燥得到；其中，优选DMPC磷脂分子的质量(mg)氯仿的体积(ml)彡0. 5。其中在磷脂分子中可加入荧光染料分子，所述荧光染料分子为生物和化学领域的常规试剂，如罗丹明-DHPE、NBD-PE。步骤二、将磷脂分子模板与金纳米棒水合在磷脂分子模板中加入步骤一中得到的金纳米棒分散液和磷酸盐(PBQ缓冲液后，在60 70°C下水合2 4小时，得到反应液；
其中，所述金纳米棒分散液中的金纳米棒长30 60nm，宽12 20nm，两端含 {111}面，长径比为1. 5 5 ；游离在金纳米棒分散液中的CTAB的物质的量磷脂分子模板的物质的量= 1 3 4 ；金纳米棒分散液的体积PBS缓冲液的体积=1 1 4 ；PBS 缓冲液为 1XPBS，浓度为 10mmol/L, pH 值为 7. 4 ；步骤三、将步骤二得到的反应液冷却后放入冰箱，4 5°C下静置M小时，得到一种表面等离子体手性探针，优选探针中金纳米棒浓度为0. 7 1. 5nmol/L。用所述探针探测半光氨酸的种类和浓度时，在探针中加入L-半光氨酸或D-半胱氨酸溶液，探针与半胱氨酸结合，用圆二色光谱(CD)进行探测。有益效果1.本发明所述探针能够在1分钟左右，探测出半胱氨酸的同分异构体L-cys和 D-cys，探测速度快、灵敏度高，同时操作简便，无毒无害；所述探针可探测的半胱氨酸分子的浓度线性测量范围为22. 4-111. 6 μ mol/L,与X. P. Yan等用50 μ mol/L银纳米颗粒与浓度为50 μ mol/L的L-半胱氨酸混合后探测相比(N. Jing and X. P. Yan, A Circular Dichroism Probe for I-Cysteine Based on the Self-Assembly of Chiral Complex Nanoparticles，Chem. Eur. J. 2010，16，423-427)，本发明所述的探针所用金纳米棒浓度在 nmol/L量级，且在较低的浓度范围内具有较高的灵敏度；2.本方法在在紫外区和可见/近红外区域均有特征峰，相比于在紫外区的电子共振吸收圆二色光谱探测的传统方法，在可见/近红外区域的表面等离子共振吸收圆二色光谱实现手性探测的方法具有高效和廉价的优点。


图1为实施例1所述探针的环境扫描电镜图；图2为实施例1所述探针识别半胱氨酸的同分异构体的圆二色光谱图；图3为实施例2所述探针的环境扫描电镜图；图4为实施例2所述探针识别半胱氨酸同分异构体的圆二色光谱图；图5为实施例3所述探针识别L-半胱氨酸以及D-半胱氨酸的PCD峰值随半胱氨酸分子浓度的线性变化图；图6为实施例4所述探针识别半胱氨酸的同分异构体的圆二色光谱图。
具体实施例方式下面通过具体实施例来详细描述本发明在实施例1 4中，通过紫外-可见系数光谱仪，检测金纳米棒分散液中的金纳米棒浓度和游离的CTAB浓度，以及表面等离子体手性探针中的金纳米棒浓度；通过环境扫描电子显微镜，得到所述探针的形貌和结构；通过圆二色光谱仪，检测所述探针识别L-半胱氨酸和D-半胱氨酸的光谱特征。实施例1步骤一、制备金纳米棒分散液和磷脂分子模板
其中，金纳米棒的制备过程如下1.金种制备取0. lmol/L的CTAB溶液7. 5ml，加入1. 8ml水，搅拌条件下加入浓度为24. 7mmol/ L的氯金酸(HAuCl4)的水溶液100. 4μ 1后，加入0. 01mmol/L的硼氢化钠(NaBH4)溶液 600 μ 1，搅拌3min，得到金种备用；2.生长液制备取0. lmol/L的CTAB溶液100ml，加入浓度为24. 7mmol/L的氯金酸(HAuCl4)的水溶液2. 05ml，浓度为0. 01mol/L的硝酸银水溶液0. 5ml，浓度为0. 5mol/L的硫酸^il,浓度为0. lmol/L的抗坏血酸水溶液0. 8ml。3.金纳米棒分散液的制备取步骤1制备的金种240 μ L加入到步骤2制备的生长液中，在30°C下生长12h， 得到金纳米棒分散液原液。将所述金纳米棒原液经离心分离后，得到沉淀和上层液体，其中沉淀为表面包裹着CTAB的金纳米棒；用移液器取出上层液体后，向沉淀中加入20ml水，得到金纳米棒分散液；在所述金纳米棒分散液中，金纳米棒浓度为2nmol/L，游离的CTAB浓度为5mmol/ L ；通过透射电镜(TEM)测得所述金纳米棒长30 60nm，宽12 20nm，两端含{111}面，长径比为1. 5 5。磷脂分子模板的制备过程如下将8mg DMPC磷脂分子溶于20mL氯仿后装入250mL圆底烧瓶中，在40°C下旋转蒸发7小时，得到产物1，将产物1冷冻干燥36小时后，得到磷脂分子模板；其中，冷冻干燥为将产物1置于盛有液氮的容器中后，将所述容器置于真空干燥箱中，对真空干燥箱设置真空度至最大量程，进行真空干燥处理。步骤二、将磷脂分子模板与金纳米棒水合在步骤一中得到的磷脂分子模板中加入金纳米棒分散液1. 5ml和PBS缓冲液2ml 后，在60°C下水合4小时，得到反应液；其中，游离在金纳米棒分散液中的CTAB的物质的量磷脂分子模板的物质的量 =1:4;金纳米棒分散液的体积PBS溶液的体积=1 1.3；PBS 缓冲液为 1XPBS，浓度为 10mmol/L, pH = 7. 4 ；步骤三、将步骤二得到的反应液冷却后放入冰箱，5°C下静置M小时，得到一种表面等离子体手性探针；所述探针中金纳米棒浓度为0. 7nmol/L。图1为实施例1所述的探针的环境扫描电镜图，从图中得到探针的形貌及微结构， 其中虚线圈出的为表面等离子体探针的肩并肩排列结构。取三份体积均为600 μ 1的探针分别命名为al、a2、a3,向al中加入L-cys溶液， 向a2中加入D-cys溶液，a3作为空白对照，加入半胱氨酸溶液后al和a2中半胱氨酸浓度均为166. 7ymol/L，得到圆二色(CD)光谱如图2所示，其中横坐标为激发光波长，单位为纳米；纵坐标为CD信号强度，单位为毫弧度，对应探针al、a2、a3将谱线依次分别命名为Al、 A2、A3 ；对于A3，探针没有和半胱氨酸结合，在波长为210 350nm的紫外波段，⑶信号来自CTAB和磷脂分子模板，峰值处对应的波长为220nm，所得CD光谱为电子共振吸收圆二色 (EOT)光谱；而在波长350 820nm的可见/近红外波段，⑶信号接近于0，所得⑶光谱为表面等离子体共振吸收圆二色(PCD)光谱；从A1、A2中可看出，当探针和L-cys或D-cys结合时，在可见/近红外和紫外波段产生镜像光谱响应，说明探针可以识别不同构型的半胱氨酸。实施例2步骤一、制备金纳米棒分散液和磷脂分子模板其中，金纳米棒分散液为实施例1中制备得到的；磷脂分子模板的制备过程如下将6. 5mg DMPC磷脂分子溶于20mL氯仿后装入250mL圆底烧瓶中，在40°C下旋转蒸发4. 5小时，得到产物1，将产物1冷冻干燥处理36小时后，得到磷脂分子模板；步骤二、将磷脂分子模板与金纳米棒水合在步骤一中得到的磷脂分子模板中加入金纳米棒分散液1. 5ml和PBS缓冲液細1 后，在70°C下水合2小时，得到反应液；其中，游离在金纳米棒分散液中的CTAB的物质的量磷脂分子模板的物质的量 =1 3. 25 ；金纳米棒分散液的体积PBS溶液的体积=1 2.7；PBS 缓冲液为 1XPBS，浓度为 10mmol/L, pH = 7. 4 ；步骤三、将步骤二得到的反应液冷却后放入冰箱，4°C下静置M小时，得到一种表面等离子体手性探针，所述探针中金纳米棒浓度为1. InmoVL0图3为实施例2所述的探针的环境扫描电镜图，从图中可得到探针的形貌及微结构，其中虚线圈出的为表面等离子体探针的肩并肩排列结构。取三份体积均为600 μ 1的探针分别命名为bl、b2、b3，向bl中加入L-cys溶液， 向1^2中加入D-cys溶液，b3作为空白对照，bl和M中半胱氨酸浓度均为166. 7μπι01/1， 得到圆二色(⑶)光谱如图4所示，对应探针bl、b2、b3将谱线依次分别命名为Β1、Β2、Β3 ；对于Β3，探针没有和半胱氨酸结合，在波长为210 350nm的紫外波段，⑶信号来自CTAB和磷脂分子模板，峰值处对应的波长为220nm，所得CD光谱为电子共振吸收圆二色 (EOT)光谱；而在波长350 820nm的可见/近红外波段，⑶信号接近于0，所得⑶光谱为表面等离子体共振吸收圆二色(PCD)光谱；从B1、B2中可看出，当探针和L-cys或D-cys结合时，在可见/近红外和紫外波段产生镜像光谱响应，说明探针可以识别不同构型的半胱氨酸。实施例3步骤一、制备金纳米棒分散液和磷脂分子模板其中，金纳米棒的制备过程如下1.金种制备取0. lmol/L的CTAB溶液7. 5ml，加入1. 8ml水，搅拌条件下加入浓度为24. 7mmol/ L的氯金酸(HAuCl4)的水溶液100. 4μ 1后，加入0. 01mmol/L的硼氢化钠(NaBH4)溶液 600 μ 1，搅拌3min，得到金种备用；2.生长液制备
取0. lmol/L的CTAB溶液100ml，加入浓度为24. 7mmol/L的氯金酸(HAuCl4)的水溶液2. 05ml，浓度为0. 01mol/L的硝酸银水溶液0. 7ml，浓度为0. 5mol/L的硫酸^il,浓度为0. lmol/L的抗坏血酸水溶液0. 8ml。3.金纳米棒分散液的制备取步骤1制备的金种240 μ L加入到步骤2制备的生长液中，在30°C下生长14h， 得到金纳米棒分散液原液。将所述金纳米棒原液经离心分离后，得到沉淀和上层液体，其中沉淀为表面包裹着CTAB的金纳米棒；用移液器取出上层液体后，向沉淀中加入20ml水，得到金纳米棒分散液；磷脂分子模板的制备过程如下将6. 5mg DMPC磷脂分子和染料NBD-PE 0. 05mg溶于20mL氯仿后装入250mL圆底烧瓶中，在40°C下旋转蒸发4. 5小时，得到产物1，将产物1冷冻干燥处理36小时后，得到磷脂分子模板，染料分子分布在磷脂分子模板中；步骤二、将磷脂分子模板与金纳米棒水合在步骤一中得到的磷脂分子模板中加入金纳米棒分散液1. 5ml和PBS缓冲液6ml 后，在65°C下水合3小时，得到反应液；其中，游离在金纳米棒分散液中的CTAB的物质的量磷脂分子模板的物质的量 =1 3. 25 ；金纳米棒分散液的体积PBS溶液的体积=1 4；PBS 缓冲液为 1XPBS，浓度为 10mmol/L, pH = 7. 4 ；步骤三、将步骤二得到的反应液冷却后放入冰箱，4°C下静置M小时，得到一种表面等离子体手性探针，所述探针中金纳米棒浓度为1. 5nmol/L。在荧光显微镜下，探针在蓝光激发下发出可见绿光，说明能够用荧光识别探针的磷脂分子模板。图5为取十份体积均为600 μ 1的探针，向其中五份中加入不同浓度的L-cys溶液，向另外五份中加入不同浓度的D-cys溶液后，得到圆二色(CD)光谱；取527nm处出现的 P⑶峰值作图，得到探针识别L-cys以及D-cys时，在527nm出现的P⑶峰值随着半胱氨酸浓度的线性变化；将探针识别L-cys得到的直线命名为Cl，探针识别D-cys得到的直线命名为C2。其中横坐标为半胱氨酸浓度，单位μ mol/L;纵坐标为PCD信号强度，单位为毫弧度。探针测量半胱氨酸浓度的测量范围为22. 4-111.6ymol/L ；在测量范围内，P⑶峰值和半胱氨酸浓度呈现良好线性度，说明探针可用于L-半胱氨酸以及D-半胱氨酸浓度的准确探测。实施例4步骤一、制备金纳米棒分散液和磷脂分子模板其中，金纳米棒的制备过程如下1.金种制备取0. lmol/L的CTAB溶液7. 5ml，加入1. 8ml水，搅拌条件下加入浓度为24. 7mmol/ L的氯金酸(HAuCl4)的水溶液100. 4μ 1后，加入0. 01mmol/L的硼氢化钠(NaBH4)溶液 600 μ 1，搅拌3min，得到金种备用；2.生长液制备
取0. lmol/L的CTAB溶液100ml，加入浓度为24. 7mmol/L的氯金酸(HAuCl4)的水溶液2. 05ml，浓度为0. 01mol/L的硝酸银水溶液0.細1，浓度为0. 5mol/L的硫酸^il,浓度为0. lmol/L的抗坏血酸水溶液0. 8ml。3.金纳米棒分散液的制备取步骤1制备的金种240 μ L加入到步骤2制备的生长液中，在30°C下生长15h， 得到金纳米棒分散液原液。将所述金纳米棒原液经离心分离后，得到沉淀和上层液体，其中沉淀为表面包裹着CTAB的金纳米棒；用移液器取出上层液体后，向沉淀中加入20ml水，得到金纳米棒分散液；磷脂分子模板的制备过程如下将7mg DMPC磷脂分子和染料NBD-PE 0. 05mg溶于20mL氯仿后装入250mL圆底烧瓶中，在40°C下旋转蒸发4. 5小时，得到产物1，将产物1冷冻干燥处理38小时后，得到磷脂分子模板，染料分子分布在磷脂分子模板中；步骤二、将磷脂分子模板与金纳米棒水合在步骤一中得到的磷脂分子模板中加入金纳米棒分散液1. 5ml和PBS缓冲液 4. 5ml后，在65°C下水合2小时，得到反应液3 ；其中，游离在金纳米棒分散液中的CTAB的物质的量磷脂分子模板的物质的量 =1 3. 47 ；金纳米棒分散液的体积PBS溶液的体积=1 3；PBS 缓冲液为 1XPBS，浓度为 10mmol/L，pH= 7.4;步骤三、将步骤二得到的反应液冷却后放入冰箱，4°C下静置M小时，得到一种表面等离子体手性探针，所述探针中金纳米棒浓度为1. 2nmol/L。在荧光显微镜下，探针在蓝光激发下发出可见绿光，说明能够用荧光识别探针的磷脂分子模板。取五份体积均为600 μ 1的探针命名为dl、d2、d3、d4、d5，向dl中加入L-cys溶液， 向d2中加入D-cys溶液，dl和d2中半胱氨酸浓度均为221. 3 μ mol/L ；向d4中加入L-cys 溶液，向d5中加入D-cys溶液，d4和d5中半胱氨酸浓度均为56. 01 μ mol/L ；d3作为空白对照，得到圆二色(⑶)光谱如图6所示，对应探针dl、d2、d3、d4、d5将谱线依次分别命名为Dl、D2、D3、D4、D5，其中横坐标为激发光波长，单位为纳米；纵坐标为⑶信号强度，单位为毫弧度；对于D3，探针没有和半胱氨酸结合，在波长为210 350nm的紫外波段，⑶信号来自CTAB和磷脂分子模板，峰值处对应的波长为220nm，所得CD光谱为电子共振吸收圆二色 (EOT)光谱；而在波长350 820nm的可见/近红外波段，⑶信号接近于0，所得⑶光谱为表面等离子体共振吸收圆二色(PCD)光谱；其中，Dl和D2，D4和D5分别在可见/近红外和紫外波段产生镜像光谱响应，说明探针可以识别不同构型的半胱氨酸。其中，在实施例1 4中，所述磷脂分子和荧光染料分子购自Avanti公司；PBS缓冲液购自上海西格玛试剂公司。本发明得到了国家自然科学基金的支持，所述基金号为10874015、11174033。综上所述，以上仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。 凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种表面等离子体手性探针的制备方法，其特征在于所述方法具体步骤如下步骤一、制备金纳米棒分散液和磷脂分子模板其中，金纳米棒分散液的制备过程如下通过种子生长法制备得到金纳米棒分散液原液后，离心得到沉淀和上层液体，其中沉淀为表面包裹着十六烷基三甲基溴化铵的金纳米棒；取出上层液体后，向沉淀中加水，得到金纳米棒分散液；在金纳米棒分散液中有游离的十六烷基三甲基溴化铵；磷脂分子模板是通过将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱磷脂分子溶于氯仿，将氯仿旋转蒸发后，冷冻干燥得到；步骤二、将磷脂分子模板与金纳米棒水合在磷脂分子模板中加入步骤一中得到的金纳米棒分散液和磷酸盐缓冲液后，在60 70°C下水合2 4小时，得到反应液；其中，所述金纳米棒分散液中的金纳米棒长30 60nm，宽12 20nm，两端含{111}面，长径比为1.5 5;游离在金纳米棒分散液中的十六烷基三甲基溴化铵的物质的量磷脂分子模板的物质的量=1 3 4 ；金纳米棒分散液的体积磷酸盐缓冲液的体积=1 1 4 ；磷酸盐缓冲液的浓度为lOmmol/L，pH值为7. 4 ；步骤三、将步骤二得到的反应液冷却后放入冰箱，4 5°C下静置M小时，得到一种表面等离子体手性探针。
2.根据权利要求1所述的一种表面等离子体手性探针的制备方法，其特征在于步骤一中通过种子生长法制备得到金纳米棒分散液原液的过程如下(1)金种制备取十六烷基三甲基溴化铵溶液，搅拌条件下加入氯金酸的水溶液后，加入硼氢化钠溶液，搅拌:3min，得到金种备用；其中，十六烷基三甲基溴化铵的物质的量氯金酸的物质的量硼氢化钠的物质的量=7500 24. 8 6 ；(2)生长液制备取十六烷基三甲基溴化铵溶液，加入氯金酸的水溶液、硝酸银水溶液、硫酸和抗坏血酸水溶液；其中，十六烷基三甲基溴化铵的物质的量氯金酸的物质的量硝酸银的物质的量=IO4 50. 6 4 7 ；十六烷基三甲基溴化铵的物质的量硫酸的物质的量抗坏血酸的物质的量=IO3 IO2 8 ；(3)金纳米棒分散液的制备取步骤1制备的金种，加入到步骤2制备的生长液中，在30°C下生长12 15h，得到金纳米棒分散液原液；其中，所取步骤(1)制备的金种中十六烷基三甲基溴化铵的物质的量步骤( 制备的生长液中十六烷基三甲基溴化铵的物质的量=1.8X10—5 1。
3.根据权利要求1所述的一种表面等离子体手性探针的制备方法，其特征在于步骤一中磷脂分子的质量氯仿的体积< 0. 5mg 1ml。
4.根据权利要求1所述的一种表面等离子体手性探针的制备方法，其特征在于所述探针中金纳米棒浓度为0. 7 1. 5nmol/L0
5.根据权利要求1所述的一种表面等离子体手性探针的制备方法，其特征在于步骤一在磷脂分子模板的制备过程中，向磷脂分子中加入荧光染料分子。
全文摘要
本发明公开了一种表面等离子体手性探针的制备方法，属于表面等离子体微/纳结构生物探测器领域。所述方法为分别制备得到金纳米棒分散液和磷脂分子模板，再将磷脂分子模板与金纳米棒水合，得到所述探针。本发明所述探针能够在1分钟左右探测出半胱氨酸的同分异构体，探测速度快、灵敏度高，同时操作简便，无毒无害；所述探针所用金纳米棒浓度在nmol/L量级，且在较低的浓度范围内具有较高的灵敏度。
文档编号G01N33/52GK102565380SQ201210032890
公开日2012年7月11日 申请日期2012年2月14日 优先权日2012年2月14日
发明者王荣瑶, 王鹏 申请人:北京理工大学