ÑÇÐÇÓÎÏ·¹ÙÍø-www.yaxin868.com

ɽ¶«ÑÇÐÇÓÎÏ·¹ÙÍø»ú´²ÓÐÏÞ¹«Ë¾Ï³´²¹Ù·½ÍøÕ¾½ñÌìÊÇ£º2025-06-06Çл»³ÇÊÐ[È«¹ú]-ÍøÕ¾µØÍ¼
ÍÆ¼ö²úÆ· :
ÍÆ¼öÐÂÎÅ
¼¼ÊõÎÄÕµ±Ç°Î»ÖÃ:¼¼ÊõÎÄÕÂ>

ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ¡¢¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ìå¼°ÆäÓÃ;µÄÖÆ×÷·½·¨

ʱ¼ä:2025-06-04    ×÷Õß: ¹ÜÀíÔ±

רÀûÃû³Æ£ºÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ¡¢¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ìå¼°ÆäÓÃ;µÄÖÆ×÷·½·¨
¼¼ÊõÁìÓò£º
±¾·¢Ã÷ÊôÓÚ·Ö×ÓÉúÎïѧºÍÃâÒßѧÁìÓò¡£¾ßÌ嵨£¬Éæ¼°Ò»ÖÖÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ¡¢¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ìå¡£±¾·¢Ã÷»¹Éæ¼°·Ö±ðº¬ÓÐËùÊö¿¹Ô­±íλ»ò¿¹ÌåµÄ×éºÏÎï¡¢ÒÔ¼°ËùÊö¿¹ÌåÔÚ¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÖеÄÓÃ;¡£
±³¾°¼¼Êõ£º
ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó(ÓÖ³ÆSpr-5£¬Ã¸·ÖÀàºÅEC:1)ÊǶ¨Î»ÓÚË®µ¾µÚËĺÅȾɫÌåÉϵĻùÒò£¬ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÊÇÒ»¸ö×éÖ¯ÌØÒìÐÔ»ùÒò£¬ÔÚÒ¶ÖÐÓÐÌØÒìÐÔ±í´ï¡£ËüËù±í´ïµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Óµ°°×ÖÊ£¬Æä¹¹ÏóÓëÈË»ùÒòKIAA0601Ëù±àÂëµÄ¶à°·Ñõ»¯Ã¸ÀàËÆ¡£Ë®µ¾ÔçÀÏËØ5 ÒÖÖÆÒò×ÓÊÇλÓÚÒ¶ÂÌÌåÉϵľßÓеç×ÓÔØÌå»îÐÔºÍÑõ»¯»¹Ô­»îÐԵĵ°°×ø£¬ÊôÓÚ°±»ùÑõ»¯Ã¸¼Ò×å¡£Õâ¸ö¼Ò×åÓɸ÷ÖÖ¸÷ÑùµÄ°±»ùÑõ»¯Ã¸×é³É£¬°üÀ¨Ðí¶àµÄ¶à°·Ñõ»¯Ã¸(PAO)ºÍ¸÷ÖÖ»ÆËضà°Í°·Ñõ»¯Ã¸(MAO)¡£ÔÚÖ²Îϸ¾úºÍÔ­Éú¶¯ÎïÖÐPAOs°ÑÑǾ«°·ºÍ¾«°·Ñõ»¯³É°±»ù¶¡ËõÈ©¡¢ Ë«°±»ù±ûÍéºÍ¹ýÑõ»¯Ç⣬²ÎÓëµ½¶à°·µÄ·Ö½â´úлÖС£ÔÚÆäËûÉúÎïÖУ¬´ó²¿·ÖµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÖʵ¼ÖÂhop-¦©µÄµÍ±í´ï¡£ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÓëÒÖÖÆ×ªÂ¼¸´ºÏÌå¾ßÓÐͬԴÐÔ£¬ËüµÄÒÖÖÆ»îÐÔÐèÒª¹¦ÄÜÐÔµÄÔçË¥µ°°×H0P-1£¬²¢Í¨¹ý·ÇµÈλ»ùÒòÌØÒìÐÔʹsel-12Egl±íÐ͵ͱí´ï¡£Ë®µ¾(Oryzae Sativa L.)ÊÇÊÀ½çÉÏ×îÖØÒªµÄÁ¸Ê³×÷ÎҲÊǵ¥×ÓÒ¶Ö²ÎïµÄģʽֲÎËüΪȫÇò½üÒ»°ëµÄÈË¿ÚÌṩʳÎˮµ¾»ùÒò×é²âÐò¹¤×÷µÄ³É¹û¼«´óµØÍƶ¯ÁËË®µ¾Ïà¹ØÑо¿µÄ½øÕ¹£¬´ø¶¯ÁËË®µ¾×ªÂ¼×éѧºÍµ°°×ÖÊ×éѧµÄÑо¿£¬Ä¿Ç°Ò»Ð©Ñо¿¹¦ÄÜ»ùÒò×éѧµÄм¼ÊõÈçcDNA΢ÕóÁС¢»ùÒòоƬ¡¢»ùÒò±í´ïϵͳ·ÖÎö¡¢»ùÒòÇóýµÈÔÚ·ÖÎö»ùÒò±í´ï¡¢·¢¾ò»ùÒò×ÊÔ´ÉÏÈ¡µÄÁ˺ܴó½øÕ¹£¬ºÜ¶àÓëÓÅÁ¼ÐÔ×´Ïà¹ØµÄ»ùÒò±»¿Ë¡²¢×ª»¯Ó¦Óá£ÔÚÑо¿»ùÒò¹¦Äܹý³ÌÖУ¬×÷ΪһÖÖÁéÃô¶È¸ß¡¢ÌØÒìÐԺᢲÙ×÷¼ò±ã¡¢½á¹ûÖ±¹ÛµÄ¼¼Êõ£¬µ°°×ÖÊÓ¡¼Ç(Western Blot)±íÏÖ³öÁËÁ¼ºÃµÄЧ¹û¡£µ°°×Ó¡¼£(Western Blot)ÊǸù¾Ý¿¹Ô­¿¹ÌåµÄÌØÒìÐÔ½áºÏ¼ì²â¸´ÔÓÑùÆ·ÖеÄijÖÖµ°°×µÄ·½·¨£¬ÓÃÓÚ¼ì²â¾­µçÓ¾»ò°ßµãÔÓ½»ºó¹Ì¶¨ÓÚĤÉϵĵ°°×ÖÊ¡£ÌØÒì¡¢Îȶ¨µÄҺ̬ø±ê¿¹ÌåºÍÏàÓ¦µÄµ×Î±£Ö¤ÁË¿ìËÙ¡¢×¼È·µÄ¼ì²â£»¶ø±ÜÃâÁË·ÅÉäÐÔÎïÖʵÄʹÓã¬ÏÖÒѳÉΪµ°°×·ÖÎöµÄÒ»ÖÖ³£¹æ¼¼Êõ£¬¶Ôµ°°×½øÐж¨ÐԺͰ붨Á¿·ÖÎö¡£È»¶ø£¬Æù½ñΪֹ£¬ÔÚË®µ¾Éú³¤·¢Óý¹ý³ÌÖбí´ïµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó»ùÒòµÄ¹¦ÄÜÑо¿Ä¿Ç°²¢²»Çå³þ¡£²¢ÇÒÔÚÏÖÓм¼ÊõÖУ¬Í¨³£ÖƱ¸µÄ¶à¿Ë¡¿¹ÌåÌØÒìÐÔ²»¸ß£¬ÓÃÓÚ¼ì²âÄ¿±êÎïÖÊ»á´æÔÚ׼ȷÐÔ²»×ãµÄÎÊÌâ¡£ÁíÒ»·½Ã棬Èç¹ûÓÃÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÖÆ±¸¿¹Ô­µÄ»°£¬Èç¹ûÊDzÉÓÃÖØ×é±í´ïµÄ·½·¨£¬²½Öè±È½Ï·±Ëö£¬Èç¹ûÊDzÉÓû¯Ñ§ºÏ³ÉµÄ·½·¨£¬È«³¤µÄ°±»ùËáÐòÁÐÓÐ492 ¸ö°±»ùËᣬºÏ³ÉºÜÀ§ÄÑ£¬¶øÇÒµ°°×Öʿռä½á¹¹µÄÖØ½¨ÊÇÒ»¸öºÜÀ§ÄѵŤ×÷£¬ÔÙÏÖÓëÉúÎïÌåÄÚÏàͬµÄ¿Õ¼ä¹¹ÏóÈÔÈ»ÊÇÏֽ׶ε°°×ÖÊѧÑо¿µÄÄѵã¡£Ò»°ãÀ´Ëµ¿¹Ô­±íλºÏ³É¼òÒ×£¬×¼È·ÐԸߣ¬³É±¾µÍÁ®£¬¿Õ¼ä¹¹ÏóÈÝÒ×ÔÙÏÖ£¬Òò´ËÓбØÒª¿ª·¢Ò»ÖÖ¾ßÓдú±íÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó±¾ÉíµÄ¿¹Ô­±íλ(antigenic determinant, AD)(Óֳƿ¹Ô­¾ö¶¨´Ø£¬ÊÇÖ¸¿¹Ô­·Ö×ÓÖоö¶¨¿¹Ô­ÌØÒìÐÔµÄÌØÊ⻯ѧ»ùÍÅ)À´´úÌæÈ«³¤µ°°×¡£¾¡¹ÜĿǰÒѾ­ÓÐÓÃÓÚÔ¤²â¿¹Ô­±íλµÄÈí¼þ£¬ÀýÈ禢¦¥¦±¦©¦³0¦±¦¥Èí¼þ£¬µ«ÊÇÔ¤²âµÃµ½
3µÄ¿¹Ô­±íλÖлáÓÐ30%×óÓҵķÇÓÐЧ¿¹Ô­±í룬¼´²»ÄÜÌØÒìÐԵشú±í¿¹Ô­µÄ¿¹Ô­±í룬 »òÕß²»ÄÜÒý·¢ÃâÒßÓ¦´ð(Chang HT, Liu CH, Pai Tff. Estimation and extraction of B-cell linear epitopes predicted by mathematical morphology approaches. J Mol Recognit. 2008Nov_Dec£»21(6) :431-41)¡£

·¢Ã÷ÄÚÈÝ
ΪÁ˽â¾öÉÏÊöÎÊÌ⣬±¾·¢Ã÷ÈËÔÚͨ¹ýBEPIT0PEÈí¼þÔ¤²âµÃµ½¶à¸ö¿¹Ô­±íλÐòÁеĻù´¡ÉÏ£¬½øÐÐÁË´óÁ¿µÄʵÑéºÍ²»Ð¸µÄŬÁ¦£¬½á¹û·¢ÏÖÔÚÔ¤²âµÄ40¸ö¿¹Ô­±íλÖÐÓÐÒ»¸ö¿¹Ô­±íλÐòÁÐDNISLKNWDQEHVL(SEQID NO 3)ÊÇ×îÓÐЧµÄ¿¹Ô­±í룬²¢ÇÒÆä¾ßÓÐÁ¼ºÃµÄ¿¹Ô­ÌØÒìÐÔ£¬²¢ÇÒÖÆ±¸ÁËÄÜÓë¸Ãµ°°×Ã¸ÌØÒìÃâÒß½áºÏµÄ¿¹Ì壬¸Ã¿¹Ìå¾ßÓÐ×ã¹»µÄÁéÃôÐÔºÍ׼ȷÐÔ¡£ÓÉ´ËÌṩÁËÏÂÊö·¢Ã÷±¾·¢Ã÷µÄÒ»¸ö·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±í룬Æä°±»ùËáÐòÁÐÈçSEQ ID NO 3Ëùʾ¡£ÔÚ±¾·¢Ã÷µÄÒ»¸öʵʩ·½°¸ÖУ¬ÎªÁËÔö¼ÓÓëÔØÌåµÄ½»ÁªÐÔ£¬ÔÚÉÏÊö¿¹Ô­±íλµÄNÄ©¶ËÌí¼ÓÁËÒ»¸ö°ëë×°±Ëá(°ëë×°±ËáÌṩ¶þÁò¼üÓëÔØÌå½»Áª)£¬µÃµ½ÐòÁÐΪ CDNISLKNWDQEHVL(SEQ ID NO 4)µÄ¿¹Ô­±íλ¡£°ëë×°±ËáÒ²¿ÉÒÔ¼ÓÔÚ¶àëĵÄCÄ©¶Ë£¬µÃµ½ÐòÁÐΪDNISLKNWDQEHVLC(SEQ ID NO 5) µÄ¿¹Ô­±íλ¡£Ä©¶Ë¼Ó1¸ö°ëë×°±Ëá¾Í¿ÉÒÔÁË¡£Èç¹ûÔÚͬһ¶Ë¼Ó¶à¸ö°ëë×°±Ëᣬµ¼Ö³ɱ¾ÉÏÉý£¬¶øÇÒ»áÓ°Ï쿹ÌåµÄÌØÒìÐÔ£¬²¢ÇÒ¶þÁò¼üÃܶÈÌ«´ó£¬¶øÊµ¼ÊÉÏÒ²²»ÐèÒªÕâô¶à¶þÁò¼ü¡£ÁíÍâ²»ÒËÔÚNÄ©¶ËºÍCÄ©¶Ë¶¼¼Ó°ëë×°±ËᣬÒòΪһ¸ö¿¹Ô­±íλºÍÒ»¸öÔØÌå½áºÏ£¬Èç¹ûÔÚÁ½¶Ë·Ö±ð¼Ó1 ¸ö°ëë×°±Ëᣬ°ëë×°±ËáÓëÔØÌå½áºÏºó£¬¿¹Ô­±íλÉÙÁËÓÎÀë¶Ë£¬·´¶ø²»ÀûÓÚ²úÉú¿¹Ìå¡£±¾·¢Ã÷µÄ¿¹Ô­±íλ¿ÉÒÔͨ¹ý³£¹æµÄëĺϳɼ¼Êõ»¯Ñ§ºÏ³ÉµÃµ½£¬Ò²¿ÉÒÔÔÚÊʵ±µÄËÞÖ÷Öбí´ïµÃµ½£»ÓÅÑ¡µÄÊÇ»¯Ñ§ºÏ³É¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖ×éºÏÎÆä°üº¬SEQ ID NO :3»òSEQID NO :4»òSEQ ID NO :5ËùʾµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±í룬ÈÎÑ¡µØ£¬¿ÉÒÔº¬ÓÐÃâÒß×ô¼Á£¬ÀýÈçÇâÑõ»¯ÂÁ¡¢¸¥ÊÏÍêÈ«×ô¼Á¡¢»òÕ߸¥Êϲ»ÍêÈ«×ô¼ÁµÈ¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ-ÔØÌ帴ºÏÎÆäÖУ¬ËùÊöÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλΪSEQ ID NO 3»òSEQID NO 4»òSEQ ID NO 5ËùʾµÄÔçÀÏËØ 5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±í룬ËùÊöÔØÌå¿ÉÒÔÊÇÔ¿¿×ÆÝѪÀ¶ËØ(KLH)¡¢BSA¡¢»òÀÒµ°°×µÈ¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ì壬ËùÊö¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹ÌåÄܹ»ÌØÒìÐԵؽáºÏSEQ ID NO :3»òSEQ ID NO :4»òSEQ ID NO :5ËùʾµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ¡£ËùÊö¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ìå¿ÉÒÔÊǵ¥¿Ë¡¿¹Ì壬Ҳ¿ÉÒÔÊǶà¿Ë¡¿¹Ìå¡£±¾·¢Ã÷µÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå¿ÉÒÔµÃ×Ô¸÷ÖÖ³£¹æÖƱ¸¶à¿Ë¡¿¹ÌåµÄ¶¯ÎÀýÈçɽÑò£¬ÍÃ×Ó£¬´óÊó£¬Ð¡ÊóµÈ¡£¶Ô±¾ÁìÓò¼¼ÊõÈËÔ±¶øÑÔ£¬¿ÉÒÔ¸ù¾ÝSEQ ID NO :3»òSEQ ID NO :4»òSEQ ID N0: 5ËùʾµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íÎ»ÖÆ±¸µ¥¿Ë¡¿¹Ì壬¾ßÌå²Ù×÷¿ÉÒԲμû±¾ÁìÓòµÄ¼¼ÊõÊֲᣬҲ¿ÉÒԲο¼ÎÄÏ×Àý Naturel975Kohler & Milstein Vol 256£¬p495¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖº¬Óп¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹ÌåµÄѪÇå(¼ò³Æ¶à
4¿¹ÑªÇå)£¬Æäͨ¹ýʹÓÃSEQ ID NO 3»òSEQ ID NO 4»òSEQ ID NO 5ËùʾµÄ¿¹Ô­±íλÃâÒß¶¯ÎïÖÆµÃ¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹ÌåÖÆ±¸·½·¨£¬°üÀ¨½« SEQ ID NO :3»òSEQ ID NO :4»òSEQ ID NO :5ËùʾµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ×÷Ϊ¿¹Ô­ÃâÒß¶¯ÎïµÄ²½Öè¡£ÈÎÑ¡µØ£¬ËùÊöÃâÒß²½Öè¿ÉÒÔ¼ÓÈë×ô¼Á£¬ÀýÈçÇâÑõ»¯ÂÁ¡¢¸¥ÊÏÍêÈ«×ô¼Á¡¢»òÕ߸¥Êϲ»ÍêÈ«×ô¼Á£¬µÈµÈ¡£±¾·¢Ã÷µÄÒ»¸öʵʩ·½°¸ÖУ¬ËùÊö¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹ÌåÖÆ±¸·½·¨£¬°üÀ¨Èçϲ½Öè1)½«SEQ ID NO 3»òSEQ ID NO 4»òSEQ ID NO 5ËùʾµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ×÷Ϊ¿¹Ô­ÃâÒß¶¯Î2)ȡѪ£¬ÀëÐÄÊÕ¼¯¶à¿¹ÑªÇ壻ºÍ3)´¿»¯²½Öè2)ÖеĶ࿹ѪÇ壬µÃµ½¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖ×éºÏÎÆä°üº¬±¾·¢Ã÷µÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¼ì²â¼Á£¬Æä°üº¬±¾·¢Ã÷µÄ¿¹ÔçÀÏËØ 5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå¡£ÆäÖÐÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ӵݱ»ùËáÐòÁÐ(SEQ ID NO 1)ÈçÏÂMDQPSNGFAAGGLFLRHIDGQNASPPSVIVIGGGISGIAAARALSNASFKVTLLESRDRLGGRVHTDYS FGCPIDMGASWLHGVCNENSLAPLIRLLGLRLYRTSGDNSVLYDHDLESYALFDKDGRQVPQEIVTKVGETFEKILK
ETVKVRAEHEDDMPLIQAISI VLDRNPHLKLDGLQYEVLQff CICRLEAWFATDV |DNISLKNWDQEHVL| rGGHGL
MVHGYDPVIKALAQDLDIHLNHRVTKIIQRYNKTIVCVEDGTSFVADAAIITVPLGVLKANIIKFEPELPDffKLSSI SDLGIGIENKIALRFNSVFWPNVEVLGRVAPTSNACGYFLNLHKATGHPVLVCMVAGRFAYEFEKLSDEESVNFVMS QLKKMLPGATEPVQYLVSRWGTDPNSLGSYSCDLVGKPADLYERFCAPVGNLFFAGEAACIDHSGSVHGAYSSGIVA AEDCRRHLSTQLGISDLFQVGKIIMREEMTEVMVPFQISRL(SEQ IDNO 1)ÆäÖУ¬¼Ó±ß¿òµÄÐòÁÐΪSEQ ID NO :3¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°±¾·¢Ã÷µÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹ÌåÔÚÖÆ±¸¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓµÄÒ©ÎïÖеÄÓÃ;¡£±¾·¢Ã÷µÄ»¹Ò»·½ÃæÉæ¼°Ò»ÖÖ¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ӵķ½·¨£¬ËùÊö·½·¨°üÀ¨Ê¹Óñ¾·¢Ã÷µÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹ÌåµÄ²½Öè¡£¾ßÌ嵨£¬°üÀ¨Èçϲ½Öè1)½«´ý²âÑùÆ·Óë±¾·¢Ã÷µÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå·õÓý£¬Ê¹ËùÊöµÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹ÌåÓë´ý²âÑùÆ·ÖеÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÌØÒìÐÔ½áºÏ£¬ÓÉ´ËÐγÉÃâÒ߸´ºÏÎºÍ2)¼ì²âÊÇ·ñ´æÔÚÃâÒ߸´ºÏÎï¡£ÉÏÊö¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ӵķ½·¨¿ÉÒÔ¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓµÄÓÐÎÞ¡¢¶ÔÆä½øÐа붨Á¿(ÀýÈçwestern blot·½·¨)£»ÔÚÓÐÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó±ê׼ƷµÄÇé¿öÏ£¬»¹¿ÉÒÔͨ¹ý ELISA·½·¨¶ÔÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó½øÐж¨Á¿¼ì²â¡£ÔÚ±¾·¢Ã÷µÄÒ»¸öʵʩ·½°¸ÖУ¬ËùÊöÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓΪˮµ¾µÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¡£ ¾ßÌåµÄ£¬ËùÊöË®µ¾ÎªË®µ¾93-11¡£·¢Ã÷µÄÓÐÒæÐ§¹û
5
1)±¾·¢Ã÷ÌṩµÄ¶à¿Ë¡¿¹Ìå£¬ÌØÒìÐÔºÍÁéÃô¶È¸ß£¬¾ßÓкܸߵÄÓ¦ÓüÛÖµ£»2)±¾·¢Ã÷ÌṩµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­ºÏ³É¼òÒ×£¬×¼È·ÐԸߡ£±¾·¢Ã÷ÌṩµÄ¿¹Ô­±íλÊǾ­Èí¼þÔ¤²âÑ¡³öµÄ¿¹Ô­±íλƬ¶Îºó»¯Ñ§ºÏ³ÉµÄ£¬Æ¬¶Î¶ÌС£¬ÈÝÒ׺ϳɣ¬¿Õ¼ä¹¹ÏóÔÙÏÖ
¸÷ÒצÏ3)±¾·¢Ã÷ÌṩµÄ¿¹ÌåÖÆ±¸·½·¨¼òµ¥£¬ÊÕ»ñÁ¿´ó¡£È¡ºÏ³ÉµÄ¿¹Ô­1-angÃâÒßÐÂÎ÷À¼´ó°×Íã¬Ã¿¸ô14Ìì¼ÓÇ¿ÃâÒßÒ»´Î£»µÚ2´Î¼ÓÇ¿ÃâÒߺó7Ìì¶ú¾²ÂöȡѪ£¬ÀëÐÄÊÕ¼¯¶à¿¹ÑªÇ壬 »ñµÃ´óÁ¿µÄ¶à¿Ë¡¿¹Ìå¡£4)ͨ¹ý±¾·¢Ã÷»ñµÃÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Óµ°°×¶à¿Ë¡¿¹Ì壬³ýÁË¿ÉÒÔÓÃÓÚ¼ì²âÔçÀÏËØ 5ÒÖÖÆÒò×Ó»ùÒòÔÚÖ²ÎïÖÐÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Óµ°°×±í´ïÒÔÍ⣬»¹Ó¦ÓÃÓÚÑо¿ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ӽṹÓ빦ÄÜÏà¹ØµÄ¶à¸ö·½ÃæÍ¨¹ýÃâÒßÓ«¹â¼ì²â£¬¿ÉÒÔ¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÔÚת»ùÒòÖ²ÎïÖеķֲ¼£»Western blot·ÖÎöÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÔÚת»ùÒòÖ²ÎïÖÐÊÇ·ñ±í´ï£»ÃâÒßÓ«¹â¼ì²â¿ÉÒÔÈ·¶¨µ°°×±í´ïµÄ²¿Î»£»È·¶¨±í´ïµÄµ°°×ÊÇÔÚҶƬ¡¢¾¥¸Ñ¡¢ÖÖ×Ó¡¢»¹ÔÚ¸ù²¿µÈ.´ËÍ⣬ÔÚ¶ÔË®µ¾µÄÑо¿ÖУ¬±¾·¢Ã÷µÄ¶à¿Ë¡¿¹Ìå¿ÉÓ¦ÓÃÓÚË®µ¾µ°°×ÖÊˮƽµÄ¿ÆÑ§Ñо¿ÖУ¬Ò²¿ÉÒÔÓÃÓÚÃâÒß¹²³Áµí¡¢µ°°×ÖÊ-µ°°×ÖÊÏ໥×÷Óᢵ°°×оƬ¡¢ÃâÒß×黯¼°Ï¸°û¶¨Î»µÈʵÑéÖУ¬´ËÍ⻹¿ÉÄÜÓÃÓÚÆäËüÖ²ÎïµÄÏà¹ØÑо¿¡£


ͼ1 ʹÓÿ¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå¶ÔÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÔÚË®µ¾²»Í¬×éÖ¯µÄÃâÒßÓ¡¼£¼ì²â½á¹û¡£
¾ßÌåʵʩÀý·½Ê½ÏÂÃæ½«½áºÏʵʩÀý¶Ô±¾·¢Ã÷µÄʵʩ·½°¸½øÐÐÏêϸÃèÊö¡£±¾ÁìÓò¼¼ÊõÈËÔ±½«»áÀí½â£¬ÏÂÃæµÄʵʩÀý½öÓÃÓÚ˵Ã÷±¾·¢Ã÷£¬¶ø²»Ó¦ÊÓΪÏÞ¶¨±¾·¢Ã÷µÄ·¶Î§¡£ÊµÊ©ÀýÖÐδעÃ÷¾ßÌå¼¼Êõ»òÌõ¼þÕߣ¬°´ÕÕ±¾ÁìÓòÄÚµÄÎÄÏ×ËùÃèÊöµÄ¼¼Êõ»òÌõ¼þ(ÀýÈç²Î¿¼J.ÈøÄ·²¼Â³¿ËµÈÖø£¬ »ÆÅàÌõÈÒëµÄ¡¶·Ö×Ó¿Ë¡ʵÑéÖ¸ÄÏ¡·£¬µÚÈý°æ£¬¿ÆÑ§³ö°æÉç)»òÕß°´ÕÕ²úƷ˵Ã÷Êé½øÐС£ËùÓÃÊÔ¼Á»òÒÇÆ÷δעÃ÷Éú²ú³§ÉÌÕߣ¬¾ùΪ¿ÉÒÔͨ¹ýÊйº»ñµÃµÄ³£¹æ²úÆ·¡£ÊµÊ©Àý1 ºòÑ¡¿¹Ô­±íλµÄÔ¤²âË®µ¾ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶ÔÓ¦µÄ»ùÒòÔÚGenBankÖеĻùÒòIDÊÇNP_001(^4219. 1¡£ ¶ÁÂë¿òÐòÁÐÈçÏÂATGGACCAGCCTTCTAATGGCTTCGCCGCCGGAGGTCTTTTTCTTCGTCACATTGATGGGCAAAATGCC TCTCCCCCTTCTGTCATTGTGATTGGTGGAGGGATTTCAGGCATTGCAGCTGCTCGTGCGCTGTCTAATGCTTCGTT TAAGGTCACACTATTAGAGTCACGGGACCGACTTGGTGGCCGTGTGCATACTGACTATTCTTTTGGCTGCCCAATTG ACATGGGAGCATCTTGGTTGCATGGTGTATGCAATGAGAATTCATTGGCACCACTGATTAGGTTGCTTGGCCTTAGA TTATATCGCACCAGTGGTGATAACTCTGTGCTATATGACCATGATCTGGAGAGCTATGCTCTCTTTGATAAGGATGG TCGTCAAGTTCCCCAGGAGATAGTGACAAAAGTCGGGGAAACATTTGAGAAAATTCTTAAGGAGACGGTGAAAGTAA GAGCTGAACATGAAGATGACATGCCTCTTATTCAAGCCATCTCAATTGTGCTTGACAGGAATCCACACCTAAAGCTT GATGGTTTGCAATATGAAGTACTGCAGTGGTGCATATGTAGGCTGGAGGCATGGTTTGCCACAGATGTGGATAATAT ATCTCTGAAAAATTGGGATCAGGAACATGTTCTTACTGGTGGCCATGGGCTTATGGTGCATGGTTATGATCCTGTTA TCAAAGCTCTCGCGCAAGATCTTGATATCCACCTGAACCACAGGGTTACCAAAATCATCCAGAGGTACAACAAAACT
6ATAGTATGTGTTGAAGATGGGACAAGCTTTGTTGCAGATGCTGCTATAATAACTGTCCCTCTTGGTGTACTTAAAGC AAATATCATCAAGTTTGAACCTGAGCTCCCAGATTGGAAGCTTTCATCAATATCTGATCTTGGTATTGGCATTGAGA ACAAAATAGCCCTCCGCTTCAATAGTGTATTTTGGCCAAATGTAGAAGTGCTAGGCAGGGTTGCCCCAACATCAAAT GCCTGCGGTTACTTTCTTAACCTTCACAAAGCCACAGGGCATCCGGTTCTTGTATGCATGGTAGCAGGAAGATTCGC ATATGAATTCGAGAAGCTATCCGATGAAGAATCCGTAAACTTTGTCATGTCTCAGCTCAAGAAAATGCTACCAGGAG CTACTGAACCGGTCCAGTATTTGGTTTCAAGGTGGGGAACCGACCCGAATTCGCTTGGTTCTTATTCCTGCGACCTT GTTGGGAAGCCAGCTGACTTGTATGAAAGATTCTGTGCTCCGGTGGGCAACCTGTTTTTCGCTGGGGAGGCCGCCTG CATCGATCACTCTGGGTCCGTGCATGGAGCTTATTCTTCAGGCATTGTTGCTGCAGAGGATTGCCGAAGGCATCTGT CGACGCAGCTAGGCATCTCCGACCTTTTCCAGGTTGGGAAGATTATCATGAGGGAGGAGATGACTGAAGTCATGGTC CCCTTCCAGATATCCAGGCTGTGA(SEQ ID NO 2)Ëù±àÂëµÄË®µ¾ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÈ«³¤ÐòÁÐÈçÏÂMDQPSNGFAAGGLFLRHIDGQNASPPSVIVIGGGISGIAAARALSNASFKVTLLESRDRLGGRVHTDYS FGCPIDMGASWLHGVCNENSLAPLIRLLGLRLYRTS¢ÇNSVLYDHDLESYALFDKDGRQVPQEIVTKVGETFEKILK
ETVKVRAEHEDDMPLIQAISIVLDRNPHLKLDGLQYEVLQWCICRLEAWFATDV |DNISLKNWDQEHVL| TGGHG
LMVHGYDPVIKALAQDLDIHLNHRVTKIIQRYNKTIVCVEDGTSFVADAAIITVPLGVLKANIIKFEPELPDWKLSS ISDLGIGIENKIALRFNSVFWPNVEVLGRVAPTSNACGYFLNLHKATGHPVLVCMVAGRFAYEFEKLSDEESVNFVM SQLKKMLPGATEPVQYLVSRWGTDPNSLGSYSCDLVGKPADLYERFCAPVGNLFFAGEAACIDHSGSVHGAYSSGIV AAEDCRRHLSTQLGISDLFQVGKIIMREEMTEVMVPFQISRL(SEQ IDNO :1£¬ÆäÖмӿòµÄÐòÁÐΪ SEQ ID NO 3)ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÀ´Ô´ÓÚË®µ¾(Oryzae Sativa L.)£¬¾ßÓÐÐòÁбíÖеÄSEQ ID NO: 1ÐòÁУ»¼°ÓëÐòÁбíÖÐSEQ ID NO :1ÐòÁÐÖÐÈÎÒâÁ¬Ðø14¸ö°±»ùËáµÄÏàËÆÐÔ´óÓÚ80%µÄ¶àëÄÆ¬¶Î¡£È»ºó¸ù¾ÝSEQ ID NO :3£¬Ó梦¥¦±¦©¦³0¦±¦¥Èí¼þ¶ÔË®µ¾ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó»ùÒò±àÂëµÄµ°°×ÖʽøÐп¹Ô­±íλµÄÔ¤²â¡£±¾ÊµÊ©ÀýÖÐʹÓÃÁË ¦¢¦¥¦±¦©¦³0¦±¦¥Èí¼þÌṩµÄÎåÖÖ·½·¨Mandard¡¢ KarpIus> Emini> Amphiphi> Pellequer,ÒÔ¼°ÕâÎåºÌÖз½·¨µÄ×ۺϷ½·¨ cons_Sta_Kar_Emi_ Amp_Pel£¬ËùÓвÎÊýÑ¡ÔñĬÈÏ¡£¾ßÌå·½·¨¿ÉÒԲο¼Odorico M, Pellequer J L. BEPITOPE predicting the location of continuous epitopes and patterns in proteins[J]. J Mol Recognit£¬2003£¬16(1) :20-22 ¡ª¹²Ô¤²âµÃµ½ÁË 40¸öºòÑ¡µÄ¿¹Ô­±í룬ÔÚTIGRË®µ¾Êý¾Ý¿âÉÏɸѡëĶνṹ£¬Ñ¡³ö¿¹Ô­±íλ·åÖµ½Ï¸ßµÄƬ¶ÎDNISLKNWDQEHVL(SEQ ID NO :3)¡£È»ºó¸ÃƬ¶ÎÔÚË®µ¾µ°°×ÖÊ¿â(RAP-DBÊý¾Ý¿â£¬ÍøÖ·http//rapdb. dna. affrc. go.jp/)½øÐÐΨһÐÔ¼ìË÷(µ°°×ÐòÁбȶÔ)£¬È·¶¨ÁË¸ÃÆ¬¶ÎÔÚË®µ¾µ°°×ÖÊ¿âÖеÄΨһÐÔ¡£ÊµÊ©Àý2 ¿¹Ô­±íλµÄ»¯Ñ§ºÏ³ÉʵʩÀý1Öеõ½µÄºòÑ¡¿¹Ô­±íλµÄÁ½¶ËûÓаëë×°±ËᣬΪÁËʵÏÖÓëÔØÌåµÄ½»Áª£¬ ºÏ³ÉµÄÐòÁÐÐè¼ÓÈë°ëë×°±ËᣬÒò´ËÒªºÏ³ÉµÄ¶àëÄÐòÁÐΪ¢ÇNISLKNWDQEHVL(SEQ ID NO :4)¡£¶ÔSEQ ID NO 4ËùʾµÄ¶àëÄÐòÁнøÐл¯Ñ§ºÏ³É(Óɼª¶ûÉú»¯¹«Ë¾ºÏ³É)£¬µÃµ½ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ӵĿ¹Ô­±íλ¡£ÊµÊ©Àý3 ¿¹Ô­±íλ-KLH¸´ºÏÎïµÄÖÆ±¸²ÉÓÃÎì¶þÈ©Á¬½Ó·¨£¬½«ÊµÊ©Àý2ÖкϳɵĿ¹Ô­±íλµÄN¶ËÓë½»ÁªÔØÌåµ°°×-Ô¿¿×ÆÝѪÀ¶ËØ(KLH)½»Áª£¬µÃµ½¿¹Ô­±íλ-KLH¸´ºÏÎï¡£
¾ßÌåʵʩ²½ÖèÈçϽ«5mgºÏ³É¶àëļÓÈë7mg KLHÖУ¬±ßÕ𵴱߻ºÂý¼ÓÈëÐÂÏÊÅäÖÆµÄ3g/LÎì¶þÈ©ÈÜÒº lml£¬ÊÒηõÓý³Ø¡£ÒÔpH8. 5µÄÅðËỺ³åҺ͸ÎöMh£¬µÃµ½¿¹Ô­±íλ-KLH¸´ºÏÎʵʩÀý4 ¶à¿¹ÑªÇåµÄÖÆ±¸È¡¦©-aiigʵʩÀý3ÖÐÖÆ±¸µÄ¿¹Ô­±íλ-KLH¸´ºÏÎÃâÒßÐÂÎ÷À¼´ó°×Íã¬Ã¿¸ô14Ìì¼ÓÇ¿ÃâÒßÒ»´Î£»µÚ2´Î¼ÓÇ¿ÃâÒߺó7Ì죬¶ú¾²ÂöȡѪ£¬·ÖÀëѪÇå(5000rpmÀëÐÄIOmin)£¬ÊÕ¼¯ÉÏÇ壬²âЧ¼Û¡£Í¬Ê±°´ÕÕÏàͬµÄ²½Ö裬Óÿ¹Ô­±íλ(SEQ ID NO 4)×÷Ϊ¶ÔÕÕ¡£¾ßÌå²½ÖèÈçÏÂÈ¡l-2mgʵʩÀý3ÖÐÖÆ±¸µÄ¿¹Ô­±íλ-KLH¸´ºÏÎïÓëµÈÁ¿µÄÍêÈ«¸£ÊÏ×ô¼Á³ä·ÖÈ黯£¬ÐγÉÓÍË®°ü£¬ÓÚÍþ±²¿ºÍ±³²¿Æ¤Ï¶àµã×¢É䣬ÿµãÔ¼100 ¦Ì g¡£2Öܺó¼ÓÇ¿ÃâÒߣ¬¼ÁÁ¿Í¬Ç°£¬Óò»ÍêÈ«¸£ÊÏ×ô¼Á³ä·ÖÈ黯ºó£¬ÓÚÍñ³²¿Æ¤Ï¶àµã×¢É䣻ÒÔºó¸ô2ÖܼÓÇ¿ÃâÒß1´Î£»´ÓµÚ2´Î¼ÓÇ¿ÃâÒß¿ªÊ¼£¬Ã¿´ÎÃâÒß7Ììºó£¬¾­¶ú¾²ÂöȡѪ²â¶¨¿¹ÌåµÄЧ¼Û¡£ÆäÖУ¬¶ú¾²ÂöȡѪ½øÐÐЧ¼Û¼ì²â(ELI SA·¨)µÄ²½ÖèÈçÏÂÔÚ96¿×°åÉÏ£¬Ã¿¿×¼ÓÈë50¦Ì¦Â/¦Ð¦É1Á×ËáÀÒ°±Ëᦩ¦¯¦¯¦Ì 1£¬4¡ãC¹ýÒ¹ºó£¬½øÐаü±»£¬Ï´µÓ¡£ ½«°´ÕÕǰÊö·½·¨ÖƱ¸µÄ¶ú¾²ÂöѪµÄ¶à¿¹ÑªÇåÏ¡ÊÍΪ1 100£¬1 500,1 2500,1 3200£¬ 1 12800,1 25600£¬Ã¿¿×¸÷¼Ó100¦Ì 1£¬37¡ãC±£ÎÂ30min£¬Ï´µÓ¡£¸÷¼ÓÈë1 100Ï¡Ê͵ÄÑò¿¹ÍÃIgø½áºÏÎï100¦Ì 1£¬37¡ãC±£ÎÂ30min£¬Ï´µÓ¡£¼ÓÈëTMB (3£¬3£¬5£¬5-Ëļ׻ùÁª±½°·)100 ¦Ì 1£¬ 20minºó£¬¼Ó2mol/lµÄH2SO4ÖÕÖ¹·´Ó¦¾­¹ý2´Î¼ÓÇ¿ÃâÒߺó£¬Ð§¼Û¼ì²âµÄ½á¹ûÈç϶࿹ѪÇå(¿¹Ô­±íλ-KLH¸´ºÏÎïÃâÒß)> 25600 (¿¹Ô­±íλ-KLH¸´ºÏÎïÓÐÃâÒßÔ­ÐÔµÄ×î´óÏ¡Êͱ¶ÊýÊÇ51200)£»ÂãëÄÃâÒß(¿¹Ô­±í룬SEQ ID NO 4)µÃµ½µÄ¶à¿¹ÑªÇå> 800(½ö½öÓÉ¿¹Ô­±íλ×é³ÉµÄÂãëľßÓÐÃâÒßÔ­ÐÔµÄ×î´óÏ¡Êͱ¶ÊýÊÇ800)¡£ÉÏÊö½á¹ûÒѾ­·ûºÏÒªÇó£¬ËìÓÚÄ©´Î¼ÓÇ¿ÃâÒß7Ììºó¾±¶¯Âö·ÅѪ£¬ÊÕ¼¯ÑªÑù¡£½«ÊÕ¼¯µÄѪÑùÔÚ3-4¡ãCϾ²ÖÃ3-4Сʱ£¬È»ºó5000rpmÀëÐÄ10·ÖÖÓ£¬ÊÕ¼¯ÑªÇ壬µÃµ½¶à¿¹ÑªÇå(¶ú¾²Âö¼ì²âЧ¼Û·ûºÏÒªÇóºó£¬¾±¶¯ÂöÈ¡µÄѪÑù²»±ØÔÙ¼ì²âЧ¼Û)¡£ÎÞ¾ú·Ö×°±£´æÓÚ-80¡ãC±¸Óá£ÊµÊ©Àý5 ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå(¶à¿¹)µÄÖÆ±¸½«ÊµÊ©Àý4ÖÐÖÆ±¸µÄ¶à¿¹ÑªÇå½øÐд¿»¯£¬ÖƵöà¿Ë¡¿¹Ìå(¶à¿¹)¡£½«¿¹Ô­±íλDNISLKNWDQEHVL(SEQ ID NO 4)¶àëÄÓëä廯Çè»î»¯µÄkpharose 4B żÁª£¬ÖƱ¸¶àëÄÇ׺ͲãÎöÖù¡£½«ÖƱ¸µÄ¶à¿¹ÑªÇå¼ÓÈëµ½ÒÔÉÏÖÆ±¸µÄ²ãÎöÖùÖУ¬·ÅÖÃÓÚ4¡ãC·õÓý¹ýÒ¹ºó£¬Ï´ÍÑ¿¹Ì壬¼´µÃµ½¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå(¶à¿¹)¡£ÊµÊ©Àý6 ¶à¿¹¶ÔÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓµÄÌØÒìÐÔ¼ìÑéѡȡˮµ¾93-11²»Í¬·¢Óý½×¶ÎºÍ²»Í¬²¿Î»µÄ×éÖ¯£¬ÌáÈ¡×ܵ°°×ÖÊ£¬ÓÃBradford·¨²â¶¨ÑùÆ·Ë®µ¾×ܵ°°×º¬Á¿£¬Ã¿¸öÑùÆ··Ö±ðÉÏÑùΪÃçÆÚµØÉϲ¿ÉÏÑùÁ¿7 yL £»·ÖÞÁÆÚҶƬÉÏÑùÁ¿8 ¦Ì L £»ÔÐËëÆÚ½£Ò¶ÉÏÑùÁ¿7 ¦Ì L £»¿ª»¨ÆÚ½£Ò¶ÉÏÑùÁ¿6 ¦Ì L £»³ÉÊìÆÚ½£Ò¶ÉÏÑùÁ¿ 6 ¦Ì L £»ÃçÆÚµØÏ²¿ÉÏÑùÁ¿6 ¦Ì L £»·ÖÞÁÆÚ¾¥ÉÏÑùÁ¿10 ¦Ì L £»¿ª»¨ÆÚËë×ÓÉÏÑùÁ¿3 ¦Ì L £»³ÉÊìÆÚÖÖ×ÓÉÏÑùÁ¿5¦Ì¦ª£¬ÀûÓÃÖÆ±¸µÄeEF-ld¶à¿Ë¡¿¹Ìå¼ì²âµ°°×Öʱí´ï(ͼ1)¡£
8
×ܵ°°×ÖÊÑùÆ·µÄÖÆ±¸ÓÃÒºµªÑÐÄ¥ÉÏÊöÐÂÏÊË®µ¾×éÖ¯ÖÁ·Ûĩ״£¬·Ö×°µ½Ô¤ÀäÀëÐĹÜÖУ¬Ã¿300 ¦Ì 1·ÛÄ©¼ÓÈë800 ¦Ì 1µ°°×ÖÊÁѽâÒº(62. 5mmol/L ¦Ñ¦§7¡¤ 4Tris ¡¤ HC1£¬10%¸ÊÓÍ£¬ 2% SDS,20mmol/LNaF,2mmol/L EDTA£¬lmmol/L PMSF,5% ¦Â -ÛÏ»ùÒÒ´¼)£¬Ñ¸ËÙ»ì„ò²¢ÖÃÓÚ±ùÉÏ£¬±ùË®»ìºÏÎïÖзõÓý10·ÖÖÓ£¬Ô¼Ã¿2·ÖÖÓÕðµ´»ì„ò1´Î¡£4V£¬12000r/minÀëÐÄ15·ÖÖÓ¡£È¡ÉÏÇå£¬×ªÒÆµ½ÐµÄÀëÐĹÜÖУ¬-70¡ãC±£´æ¡£µÃµ½Ë®µ¾×ܵ°°×¡£Western Ó¡¼ÇÃâÒß·´Ó¦western blotingΪ½«ÌáÈ¡µÄË®µ¾µ°°×ÖʽøÐÐSDS-PAGEºóµç×ªÒÆµ½PVDFĤÉÏ£¬ÓÃ5%ÍÑÖ¬ÄÌ·Û·â±ÕPVDFĤ£¬ÓÃÖÆ±¸µÄ¿¹ÌåÊÒηõÓý3h£¬TTBS(2mmol/L Tris ¡¤ HClpH7. 6£¬13. 6mmol/LNaCl,0. 1% Tween Ò» 20)ϴĤ 3 ´Î£¬Ã¿´Î 5min£¬Ö®ºó¼ÓÈëÑò¿¹Íöþ¿¹ÊÒηõÓýlh£¬TTBSϴĤ3´Î£¬Ã¿´Î5min£¬¼ÓECL Plus¼ì²âÒº¼ì²â£¬°µÊÒÆØ¹â5min.ÃâÒß·´Ó¦¼ì²âµ½ÃçÆÚ(µØÉϲ¿)¡¢·ÖÞÁÆÚ(ҶƬ)¡¢ÔÐËëÆÚ(½£Ò¶)¡¢¿ª»¨ÆÚ(½£Ò¶)¡¢³ÉÊìÆÚ(½£Ò¶)Îå¸öʱÆÚµÄҶƬÑùÆ·ÖÐÓëÀíÂÛÖеÄ35KD·Ö×ÓÁ¿Ïà½Ó½üµÄÌõ´ø£¬¸Ãµ°°×ÖÊÔÚ²»Í¬×éÖ¯ÖÐÓÐÌØÒìÐÔ±í´ï¡£ÐèҪ˵Ã÷µÄÊÇ£¬¾¡¹ÜË®µ¾È«µ°°×ÖпÉÄÜÓкܶà·Ö×ÓÁ¿ÓëÆäÏàËÆµÄµ°°×£¬µ«ÊÇÓë¶à¿¹ÌØÒìÐÔ½áºÏµÄ¾ÍÖ»ÓÐÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓÒ»¸ö¡£¹ØÓÚÌØÒìÐÔµÄÔ¤²âSEQ ID NO :4 ¾­¹ý http://rice.plantbiology.msu.edu/blast.shtml (ÓëʵʩÀý 1 ÖеÄhttp://rapdb. dna. affrc. go. jp/×÷ÓÃÏàͬ£¬Ä¿µÄÊÇÔٴμìÑéΨһÐÔ)µÄ¼ì²é£¬È·¶¨´Ë¶àëÄÐòÁÐÌØÒ죬¸ÃÐòÁÐÔÚË®µ¾×ܵ°°×ÖÐΨһȷ¶¨ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¡£¾¡¹Ü±¾·¢Ã÷µÄ¾ßÌåʵʩ·½Ê½
ÒѾ­µÃµ½ÏêϸµÄÃèÊö£¬±¾ÁìÓò¼¼ÊõÈËÔ±½«»áÀí½â¡£¸ù¾ÝÒѾ­¹«¿ªµÄËùÓн̵¼£¬¿ÉÒÔ¶ÔÄÇЩϸ½Ú½øÐи÷ÖÖÐ޸ĺÍÌæ»»£¬ÕâЩ¸Ä±ä¾ùÔÚ±¾·¢Ã÷µÄ±£»¤·¶Î§Ö®ÄÚ¡£±¾·¢Ã÷µÄÈ«²¿·¶Î§ÓÉËù¸½È¨ÀûÒªÇó¼°ÆäÈκεÈͬÎï¸ø³ö¡£
ȨÀûÒªÇó
1.Ò»ÖÖÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±í룬ÆäÓÉSEQ ID NO 3»òSEQID NO 4»òSEQ ID NO 5ËùʾµÄ°±»ùËáÐòÁÐ×é³É¡£
2.Ò»ÖÖ×éºÏÎÆäÖк¬ÓÐȨÀûÒªÇó1ËùÊöµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±í룬ÈÎÑ¡µØ£¬»¹º¬ÓÐÓÃÓÚÃâÒßµÄ×ô¼Á¡£
3.Ò»ÖÖÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ-ÔØÌ帴ºÏÎÆäÖУ¬ËùÊöÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλΪȨÀûÒªÇó1ËùÊöµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±í룬ËùÊöÔØÌåÑ¡×ÔÔ¿¿×ÆÝѪÀ¶ËØ¡¢BSA¡¢ÒÔ¼°ÀÒµ°°×¡£
4.Ò»ÖÖ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹ÌåµÄÖÆ±¸·½·¨£¬°üÀ¨Ê¹ÓÃȨÀûÒªÇó1µÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ»òÕßȨÀûÒªÇó2µÄ×éºÏÎï»òÕßȨÀûÒªÇó3µÄ¸´ºÏÎïµÄ²½Ö裻ÈÎÑ¡µØ£¬ËùÊö¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹ÌåÊǵ¥¿Ë¡¿¹Ìå»òÕß¶à¿Ë¡¿¹Ì壻¾ßÌ嵨£¬ËùÊöÖÆ±¸·½·¨°üÀ¨Èçϲ½Öè1)½«È¨ÀûÒªÇó1ËùÊöµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ»òÕßȨÀûÒªÇó2µÄ×éºÏÎï»òÕßȨÀûÒªÇó3µÄ¸´ºÏÎïÃâÒß¶¯ÎïµÃµ½µÄѪÑù½øÐÐÀëÐÄ£¬µÃµ½¶à¿¹ÑªÇ壻ºÍ2)´¿»¯²½Öè1)ÖеĶ࿹ѪÇ壬µÃµ½¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ìå¡£
5.Ò»Öֶ࿹ѪÇ壬ÆäÓÉȨÀûÒªÇó1µÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ»òÕßȨÀûÒªÇó2µÄ×éºÏÎï»òÕßȨÀûÒªÇó3µÄ¸´ºÏÎïÃâÒß¶¯ÎïÖÆµÃ¡£
6.Ò»ÖÖ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ì壬ÆäÄܹ»ÌØÒìµØ½áºÏȨÀûÒªÇó1ËùÊöµÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±í룬ÈÎÑ¡µØ£¬ÆäΪ¶à¿Ë¡¿¹Ìå»òÕßµ¥¿Ë¡¿¹Ìå¡£
7.Ò»ÖÖ×éºÏÎÆä°üº¬È¨ÀûÒªÇó6ËùÊöµÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ìå¡£
8.Ò»ÖÖÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¼ì²â¼Á£¬Æä°üº¬È¨ÀûÒªÇó6ËùÊöµÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ìå¡£
9.ȨÀûÒªÇó6ËùÊöµÄ¿¹ÌåÔÚÖÆ±¸¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓµÄÒ©ÎïÖеÄÓÃ;¡£
10.Ò»ÖÖ¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ӵķ½·¨£¬ËùÊö·½·¨°üÀ¨Ê¹ÓÃȨÀûÒªÇó6ËùÊöµÄ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹ÌåµÄ²½Ö裻¾ßÌ嵨£¬ËùÊöÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ÓΪˮµ¾µÄÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¡£
È«ÎÄÕªÒª
±¾·¢Ã÷ÊôÓÚ·Ö×ÓÉúÎïѧºÍÃâÒßѧÁìÓò£¬Éæ¼°ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ¡¢¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ìå¼°ÆäÓÃ;¡£¾ßÌ嵨£¬ËùÊöÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¿¹Ô­±íλ¾ßÓÐSEQ ID NO3»òSEQ ID NO4»òSEQ ID NO5ËùʾµÄÐòÁС£±¾·¢Ã÷»¹Éæ¼°Ò»ÖÖ¿¹ÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×Ó¶à¿Ë¡¿¹Ì壬ËùÊö¶à¿Ë¡¿¹ÌåÓëÉÏÊö¿¹Ô­±íÎ»ÌØÒìÐÔ½áºÏ¡£ËùÊö¶à¿Ë¡¿¹Ìå¾ßÓиߵÄÌØÒìÐÔºÍЧ¼Û¡£±¾·¢Ã÷»¹Éæ¼°ËùÊö¶à¿Ë¡¿¹ÌåµÄÖÆ±¸·½·¨ºÍÓÃ;¡¢º¬Óиöà¿Ë¡¿¹ÌåµÄ×éºÏÎï¡¢ÒÔ¼°¼ì²âÔçÀÏËØ5ÒÖÖÆÒò×ӵķ½·¨¡£
Îĵµ±àºÅG01N33/53GK102206252SQ20101052030
¹«¿ªÈÕ2011Äê10ÔÂ5ÈÕ ÉêÇëÈÕÆÚ2010Äê10ÔÂ25ÈÕ ÓÅÏÈȨÈÕ2010Äê10ÔÂ25ÈÕ
·¢Ã÷ÕßÁõË¹Ææ, Ê·ÏþÈå, Òü³ÉÔ°, Ö콡»Ô, º«ÓîÄþ ÉêÇëÈË:ÉîÛÚ»ª´ó»ùÒò¿Æ¼¼ÓÐÏÞ¹«Ë¾

  • רÀûÃû³Æ£º¹â¿Ì×°Öã¬Æ÷¼þÖÆÔì·½·¨£¬¼°ÓÉ´ËÖÆ³ÉµÄÆ÷¼þµÄÖÆ×÷·½·¨¼¼ÊõÁìÓò£º±¾·¢Ã÷Éæ¼°Ò»ÖÖ¹â¿ÌͶӰװÖã¬Ëü°üÀ¨-·øÉäϵͳ£¬ÓÃÀ´Ìṩ·øÉäÍ¶Ó°Êø£»-Ö§³Å½á¹¹£¬ÓÃÀ´Ö§³Å×÷ͼװÖã¬×÷ͼװÖÃÓÃÓÚ¶ÔÍ¶Ó°Êø°´ÕÕËùÐèµÄͼ°¸×÷ͼ£»-³Äµ×̨£¬ÓÃÓڼгֳĵף»-ͶӰϵͳ
  • רÀûÃû³Æ£ºÄÍѹ²Õ¿ìËÙ¼ì©װÖõÄÖÆ×÷·½·¨¼¼ÊõÁìÓò£º±¾ÊµÓÃÐÂÐÍÉæ¼°ÉîË®»·¾³ÖÐʹÓõijÐÊÜÍâѹµÄÄÍѹ²ÕµÄÃÜ·âºÍÃÜ·âЧ¹û¼ìÑé¼¼Êõ£¬¾ßÌåµØËµÊÇÒ»ÖÖͨ¹ýʹÓÃÕæ¿Õ×°ÖÿìËÙ¼ìÑéÄÍѹ²ÕÃÜ·âЧ¹ûµÄÄÍѹ²Õ¿ìËÙ¼ì©װÖᣱ³¾°¼¼Êõ£ºÄÍѹ²ÕÊÇˮϻúÆ÷È˵ÈÉîË®É豸ÉÏÓÃÓÚ°²
  • רÀûÃû³Æ£º¸ïÀ¼ÒõÐÔ¾úÖ¬¶àÌÇ(ÄÚ¶¾ËØ)±ÈÉ«¼ì²âÊÔ¼ÁºÐµÄÖÆ±¸¼°ÆäʹÓ÷½·¨¸ïÀ¼ÒõÐÔ¾úÖ¬¶àÌÇ(ÄÚ¶¾ËØ)±ÈÉ«¼ì²âÊÔ¼ÁºÐµÄÖÆ±¸¼°ÆäʹÓ÷½·¨ËùÊôÁìÓòÉúÎïÒ½Ò©·¶³ë£¬¸üÈ·ÇÐ˵ÊÇÓ¦ÓÃÈ˹¤ºÏ³ÉÏÔÉ«»ùÖÊ£¬ÀûÓøïÀ¼ÒõÐÔ¾úÄÚ¶¾Ëؼ¤»î¶«·½ö×Ѫϸ°ûÁѽâÎïÖÐCÒò×Ó£¬´Ó¶øË®½â
  • רÀûÃû³Æ£º£ºÒ»ÖÖ¼ì²âÔæôúÖÐËáÔæÈÊÔíÜպ͵±Ò©»ÆÍªËغ¬Á¿µÄ·½·¨¼¼ÊõÁìÓò£º£º±¾·¢Ã÷Éæ¼°Ò»ÖÖ¼ì²âÔæôúÖÐËáÔæÈÊÔíÜպ͵±Ò©»ÆÍªËغ¬Á¿µÄ·½·¨£¬ÊôÓÚºÛÁ¿·ÖÎö¼¼ÊõÁìÓò£º¡£±³¾°¼¼Êõ£º£ººìÔæÊÇÒ»ÖÖÓªÑø·á¸»µÄ¹ûʵ£¬ÆäÖк¬ÓжàÖÖÓªÑøÎïÖÊ£¬±ÈÈçÔíÜÕÀ࣬»ÆÍªÀ࣬ÉúÎï¼îÀà
  • רÀûÃû³Æ£ºÓªÑøÑÎ×Ô¶¯·ÖÎöÒǵÄÖÆ×÷·½·¨¼¼ÊõÁìÓò£º±¾ÊµÓÃÐÂÐÍÊôÓÚº£Ë®¡¢ºÓ¿ÚË®¡¢¹¤ÒµÎÛË®ÖеÄÓªÑøÑμ°Óк¦ÎïÖʵÄ×Ô¶¯·ÖÎöÒÇÆ÷¡£Ëæ×Ź¤ÒµµÄ·¢Õ¹£¬º£Ë®ÓëºÓ¿ÚË®µÄÎÛȾԽÀ´Ô½ÑÏÖØ£¬Òò¶øµ¼Öº£Ë®¡¢ºÓ¿ÚË®ÖеÄNO2-¡¢NO3-¡¢NH4+¡¢PO43-¡¢SiO32
  • רÀûÃû³Æ£º²Éú»ú½Ø¸î»ú¹¹¼ÓÔØÊÔÑé×°ÖõÄÖÆ×÷·½·¨¼¼ÊõÁìÓò£º±¾ÊµÓÃÐÂÐÍÉæ¼°Ò»ÖÖ²âÁ¿²Éú»ú½Ø¸î»ú¹¹ÔÚÊÔÑéʱ¼äÄÚÒ»¶¨µÄÊäÈëµçѹÏÂÄÚ¸÷²¿·ÖζÈ¡¢Êä³öŤ¾ØºÍÊä³öתËÙµÄ×°Öᣱ³¾°¼¼Êõ£º²Éú»úµÄ½Ø¸î»ú¹¹ÊÇÖ±½ÓÇиîú²ãµÄ×°Ö㬲Éú»úÔÚͶÈëÉú²úǰÐèÒª²âÊÔËüµÄ½Ø
ɽ¶«ÑÇÐÇÓÎÏ·¹ÙÍø»ú´²ÓÐÏÞ¹«Ë¾
È«¹ú·þÎñÈÈÏߣº13062023238
µç»°£º13062023238
µØÖ·£ºëøÖÝÊÐÁúȪ¹¤ÒµÔ°68ºÅ
¹Ø¼ü´Ê£ºÏ³´²£¬Êý¿ØÏ³´²£¬ÁúÃÅϳ´²
¹«Ë¾¶þάÂë
Copyright 2010-2024 °æÈ¨ËùÓÐ All rights reserved ³ICP±¸19044495ºÅ-12
¡¾ÍøÕ¾µØÍ¼¡¿¡¾sitemap¡¿