专利名称：用于分离和分析血液的装置和方法
技术领域：
本发明涉及一种用于分离血液并分析血液中存在的蛋白质的量的装置。具体地， 本发明涉及一种用于分析血液中的脂肪酸结合蛋白质(FABP)的装置和使用所述装置确定 血液中的FABP的量的方法。
背景技术：
验血能用来确定与正常血像的偏差，根据此偏差，能够确定例如病理异常或致病 因素的存在，或者，其至少可指出进一步检查是必须的或可取的。当然，也能够建立健康的 血像。U. S. 2003/0175167描述了这样一种装置，通过该装置，能将一定量的血液吸收到 腔室中，其中，血液被稀释，然后至少部分血液受压通过过滤器。选择过滤器，使得至少血液 中的血浆部分能够通过过滤器并收集在收集空间中，同时，至少血液中的血细胞部分无法 通过过滤器并留在腔室中。然后，在腔室与所述收集空间之间的通道中设置密封件，以防止 血浆与细胞的交换。然后，通过邮件将该装置发送至实验室，以对血浆进行分析。特别重要 的是，要保持血浆与红血球之间的分离，因为，否则的话，血浆对于之后的许多检验来说都 没有意义。例如，用光谱分析进行血浆的分析。U. S. 2004/0133146描述了一种装置，由此用薄管抽血，然后在腔室中传递血液，这 之后，在活塞的帮助下将其压靠在过滤器上，使得至少迫使血浆通过过滤器，并且，至少红 血球留在腔室中。然后，例如，能用光谱分析检验已分离的血浆。与全血分析相比，这些装置提供不需要使血液离心的好处。这样，抽少量的血液就 够用了，并且，可更快速地进行检验。这些现有技术装置以及其使用的方法，具有这样的缺点在已抽过血的患者或临 床医学家知道检验结果之前，其仍需要相对长的时间周期。毕竟，虽然仅需要抽少量的血 液，并且虽然不再需要离心处理，但是必须在实验室中进行分析，使得，对于运输和处理来 说，需要相对长的时间周期。此外，患者可能感受到这样一个缺点其他人会知道检验结果， 甚至会在患者自己知道之前就知道。此外，例如，从U. S. 4，477，575中得知一种装置，其中，使用试剂，由此，将一滴血 放置在过滤器的顶部上。由毛细管作用和/或重力驱动，引导血浆使其通过过滤层，同时， 将红血球留在过滤器上。在过滤层中或其周围，提供能与血浆中的物质反应的试剂。然后， 装置的可视表面的目视检查能够(通过变色或出现的线)确定血液中是否存在被分析物。 DE 2922958描述了具有用于血液中的不同病理的或其它指示性因素的不同试剂的多层过这种装置提供能由患者执行检验或当着他或她的面执行检验的优点，使得能够显 著缩短获得检验结果所需的时间。然而，这种检验仍需要几十分钟或更长时间，这在许多情况中是不受欢迎的。另 外，这些检验具有这样的缺点其非常易于受到例如来自外部的污染，因为装置是开口的，
4同时，另外，无法足够精确地确定分离的程度以及由此确定所获得的血浆的量。特别是当使 用具有不同的试剂的多层过滤器时，此缺点更严重，因为不清楚对过滤器的哪一层提供多 少血浆并且不清楚运行时间，因此，直到获得检验结果所需的时间随着过滤层的数量而增 加。本发明旨在提供一种分析血液中是否存在被分析物的装置和/或方法。具体地，本发明的一个目的是，提供一种至少将血浆和红血球从全血中相对快速 地分离，然后至少分析血浆的方法和/或装置。本发明的另一目的是，提供一种用户能够独 立地和相对快速地进行验血的方法和/或装置。本发明的又一目的是，提供一种用于血液的分离和分析的装置和/或方法，其给 出关于血液中存在的一种或多种被分析物(尤其是FABP)的阈值或值的指示。
发明内容
在第一方面中，本发明涉及一种用于从患者的血液样本中检测FABP的装置，该装 置包括以下元件a)分离装置，用于分离血浆与红血球，其中，所述分离装置设置有-腔室，用于容纳血液样本并包括用于所述血液样本的稀释液；-过滤器，来自已稀释的血液样本的血浆和FABP(可选地与抗体复合)能通过该过 滤器，但至少红血球不能通过，以及-加压装置，用于使至少部分血液样本受压通过所述过滤器，以提供分离的血浆， 以及b)收集装置，用于收集已分离的血浆，其中，所述分离装置和/或所述收集装置提供有以下抗体中的至少一个-抵抗FABP的第一抗原决定基的检测抗体，所述检测抗体与可检测的标记物结 合，并能够接触已分离的血浆，以及-抵抗FABP的与所述第一抗原决定基不同的第二抗原决定基的捕获抗体，其中， 所述捕获抗体能够以固定形式提供在所述收集装置中，并能够接触已分离的血浆。这里使用的术语“能够接触”指的是这样的事实当使用本发明时，抗体与相应的 液体(主要是血浆)接触或能够与其接触。在其中仅提供检测抗体的优选实施例中，有利的是，检测抗体能够在检测反应中 与FABP复合，检测反应发生在主要由包含均勻分布的检测抗体的已稀释血浆组成的液相 中，由此液相与存在于所述收集装置中的检测表面直接接触，并且，由此能将检测抗体固定 在所述检测表面上。在本发明的装置的一个优选实施例中，所述过滤器设置在能够插入所述腔室中的 管状元件的端部处或其附近，其中，所述收集装置由所述管状元件的内部形成。在另一优选实施例中，所述捕获抗体固定在能够插入所述收集装置中的插入元件 处。在本发明的装置的又一优选实施例中，所述检测抗体被提供在所述稀释液中。在本发明的装置的另一优选实施例中，所述FABP选自由H-FABP、LFABP, I-FABP, ILBP, B-FABP, A-FABP, E-FABP, T-FABP 和 M-FABP 及其组合组成的组。
在本发明的装置的另一优选实施例中，所述可检测的标记物选自由胶态金或银、 抗生蛋白链菌素、生物素、微球体、乳胶微珠、过氧化物酶、抗生蛋白链菌素标记的辣根过氧 化物酶(HRP)、磷酸酶、碱性磷酸酶(AP)发色标记物、荧光标记物、磷光标记物、化学发光标 记物和二次抗体，以及这些物质的组合组成的组。在本发明的装置的又一优选实施例中，收集装置至少是部分透明的，使得从所述 收集装置或装置的外部至少能部分地看到所述已固定捕获抗体(的附着位置)。根据本发明的用于FABP的检测的装置的优点是，现在提供在几分钟内给出检验 结果的快速检验。典型地，从将血液样本提供给装置的时间开始，在3分钟内，优选地在2 分钟内，读出检验结果。此重要的好处由本装置及其方法的两个重要特征来实现。首先，在 优选实施例中，在检测试剂和FABP之间使用检测反应，该反应发生在由包含已溶解的或已 悬浮的(均勻分布的)检测试剂的已稀释血液或血浆组成的液相中，其中，所述液体与检测 表面直接接触，或使所述液体与检测表面直接接触。液相中的这种检测反应进行地非�？�。 然后，检测试剂和FABP的反应产物的扩散从液相扩散到检测表面。在检测表面处固定之 后，能用眼睛观察到反应产物。在根据本发明的用于FABP的检测的系统的一个优选实施例 中，此扩散过程是速度限制步骤，该系统包括如这里描述的装置的应用。然而，与现有技术 系统相比，这仍是非�？斓�。其次，使用特定系统，以产生血浆。然而在现有技术系统中用侧向流动原理将血浆 与血细胞分离，本系统利用具有压力装置的过滤器来实现此效果。这还非常有助于提高本 系统的速度。由于该系统提供第一步骤的事实，在第一步骤中，在使血液受压通过过滤器之 前用稀释液稀释血液，所以，无法预料能够以这样的方式实现这种快速检验(大约是传统 速度的10倍)。但是，检验的灵敏度足以在临床上检测已稀释血浆中的FABP的相关水平。在另一方面，本发明涉及一种用于分析血液中是否存在FABP的方法，其中，将(已 知)一定量的血液至少分离成血浆和红血球，其中，至少将血浆收集在收集装置中，其中， 允许存在于血液中的FABP与至少一种抗体(该抗体具体地与FABP起反应)接触，并且，其 中，从收集装置的外部能观察到抗体与FABP之间的结合。在本发明的方法的一个优选实施例中，从对象或从血液样本取得预定量的血液， 并将其放入装置中，其中，将预定量的血液与预定量的稀释液混合以获得期望的稀释物， 然后，将已稀释的血液压靠在过滤器上，以便迫使血浆通过过滤器并进入所述收集装置，并 且，由过滤器阻止红血球通过。在本发明的方法的一个优选实施例中，所述血浆与所述收集装置中的所述至少一 种抗体接触。在本发明的方法的另一优选实施例中，用检测抗体抵抗(against)FABP的第一抗 原决定基，该检测抗体与可检测的标记物结合，并且，以使得该检测抗体能与已分离的血浆 接触的位置将其提供在装置中。在本发明的方法的另一优选实施例中，用捕获抗体抵抗与FABP的所述抗原决定 基不同的第二抗原决定基，其中，可使所述捕获抗体在所述收集装置中处于固定状态，并 且，以使得其能与已分离的血浆接触的位置将其提供在装置中。具体地，提供了一种方法，其中，使用至少两种抗体，每种抗体具体地与FABP的不 同抗原决定基反应，即，用可检测的标记物标记的检测抗体和用于将FABP-检测抗体复合物固定在装置中的固体表面上的捕获抗体，其中，可将两种抗体与FABP同时结合，其中，将 所述检测抗体添加至所述稀释液，并且，其中，如这里定义的，将所述捕获抗体固定在插入 元件或杆件处，并使其与已分离的血浆接触。在另一方面，本发明涉及一种用于检测取自患者的血液样本中的FABP的方法，其 包括以下步骤-提供如上所述的本发明的装置；-将已知量的血液引入所述腔室中的所述稀释液中，由此，可选地应用多孔体， 在多孔体中可吸收固定量的血液，以在稀释液中提供预定量的血液，并使血液与稀释液混 合；-通过接合该装置的分离装置将红血球与血浆分离；-在抗体与FABP之间出现特异性结合的条件下，使所述血液或血浆中的FABP与所 述检测抗体和捕获抗体中的至少之一接触，以及-检测所述特异性结合。例如，特异性结合将在以下条件下出现，其中，在环境温度和压力下，FABP和抗体 中的一个或两个处于液体状态，例如磷酸盐或其它一般缓冲剂。注意，本领域技术人员非常 了解这些条件，在这些条件中，将出现抗体及其抗原之间的结合。在本发明的方法的一个优选实施例中，在所述稀释液中提供所述检测抗体，并确 保所述捕获抗体以固定状态与所述收集装置中的血浆接触。优选地，这通过在所述血浆中 引入一元件(例如，如这里定义的杆件或插入元件)来实现，将所述捕获抗体固定在所述元 件上。然后，允许将由FABP和检测抗体形成的复合物与捕获抗体结合，其中，具有固定的捕 获抗体的所述元件采用检测表面的功能。在本发明的方法的一个替代优选实施例中，首先允许在液体中(例如，在腔室中 的已稀释血液中，或在收集装置中的已稀释血浆中)形成FABP和检测抗体之间的复合物， 然后，允许该复合物与所述固定的捕获抗体结合。在本发明的方法的另一替代优选实施例中，仅将检测抗体提供给从稀释液、已稀 释血液和已分离的血浆中选择的液体，并允许在该液体中或在通过使用该装置而形成的后 续液体中形成检测抗体-FABP复合物，然后，允许(例如，通过对检测试剂施加顺磁性微珠) 将所述复合物固定至面向限定空间27的装置1的任何元件的一侧的空间27(或第一收集 装置27)的任何表面，使得捕获抗体能与血浆观直接接触。事实上，在这种实施例中，检测 抗体将也是捕获抗体。在本发明的方法的另一替代优选实施例中，所述FABP选自由H-FABP、LFABP, I-FABP, ILBP, B-FABP, A-FABP, E-FABP, T-FABP, M-FABP 及其组合组成的组。在本发明的方法的另一优选实施例中，从由胶态金或银、抗生蛋白链菌素、生物 素、微球体、乳胶微珠、过氧化物酶、抗生蛋白链菌素标记的辣根过氧化物酶(HRP)、磷酸酶、 碱性磷酸酶(AP)发色标记物、荧光标记物、磷光标记物、化学发光标记物和二次抗体，以及 这些物质的组合组成的组中选择所述可检测的标记物。在本发明的另一方面中，提供一种零件套装，包括至少一用于将血液至少分离成 血浆和红血球的装置，其中，所述装置包括用于收集已分离的血浆的收集空间，并且与FABP 反应的至少一特异性抗体适于被引入所述收集空间中。
优选地，根据本发明的零件套装进一步包括用于吸收和释放预定量的血液的元 件，例如海绵。优选地，根据本发明的零件套装包括如上所述的发明的装置。优选地，该套装还包括用于执行本发明的方法、用于操作所述装置和/或元件、以 及/或用于安全地处理所述所使用的装置和/或摄取元件的说明。
为了进一步说明本发明，将基于
根据本发明的装置和方法的实施例。图1示出了在第一实施例中在使用本发明的装置之前的横截面图；图2示出了处于部分接合状态中的图1的装置，其中，管状元件部分地插在腔室 中；图3示出了处于完全接合状态中的图1和图2的装置，其中，管状元件完全插在腔
室中；图4A和图4B示出了分别处于初始位置和最终位置的本发明的装置的替代实施例 的部分横截面侧视图，；图4C在横截面侧视图中示意性地示出了用于图4的装置的过滤器；图5示意性地示出了在本发明的装置中使用的插入元件；图6示出了替代实施例中的图1的装置的插入元件。在此说明书中，相同或相应的元件具有相同或相应的附图标号。并非所有的附图 标号都提供在所有附图中。如下所说明的，图4c中的附图标号57与图5中的附图标号57 并不相应。
具体实施例方式在第一实施例中，本发明的装置的特征在于，至少包括用于将血浆与红血球分离 的分离装置，该分离装置包括用于使至少一部分血液受压通过过滤器的压力装置，其中，至 少设置第一收集装置以收集已分离的血浆，并在所述第一收集装置中提供至少一种试剂， 或者，可将所述试剂引入所述第一收集装置中，以与存在于所述血浆中的物质或有机体反应。这种装置提供这样的优点在压力下使至少血浆与至少红血球分离，使得几乎立 刻获得血浆和红血球的期望的分离。此外，至少血浆收集在收集装置中，血浆在收集装置 中与至少一种试剂接触或使血浆能够与至少一种试剂接触，使得，能够在非常短的时间内 (在几分钟或几秒钟内)确定在某位患者的血液中是否存在特定的物质，或至少超过一定 的值或极限值。优选地，使用允许视觉确定是否发生某一反应的试剂，例如通过颜色变化、 结构变化，例如凝结、溶解等。优选地，将血浆收集在第一收集装置中，以与外部环境隔离的空间的形式提供第 一收集装置，使得不会出现血浆的污染、玷污或泄漏。优选地，在使用前，给装置提供已知量 的稀释液，尤其是在腔室中，同时，在腔室中另外提供已知量的血液，以便精确地得知血液 的稀释程度。这确保轻松地获得快速且精确的检验结果。在第一特别有利的实施例中，将该至少一种试剂供应在第一收集装置中或使之在第一收集装置中可获得，尤其是在其壁部。优选地，所述壁部是至少部分透明的，使得，例 如，不需要打开装置，从装置的外部(至少从第一收集装置的外部)能清楚地看到试剂的颜 色或结构(texture)的变化。在一个替代实施例中，该至少一种试剂提供在能插入第一收集装置中的元件上、 提供在该元件中或在该元件处。这至少提供基本上能通用地执行本装置的优点，其中，始终 能根据将执行的检验而选择适当的试剂。优选地，选择和/或按剂量添加本发明的装置和/或方法中的试剂，使得可确定过 渡值，以便至少能确定血液中的特定因素是否高于或低于预定值。在一个具体实施例中，本装置装配有能够使血液或至少使血浆受压通过滤器的活 塞，由此，优选地将第一收集装置设置在活塞内。该至少一种试剂可提供在活塞上或其中。在根据本发明的装置和方法中，每次可应用一种试剂，而且可提供试剂的组合，以 在一个装置中同时进行一系列检验。例如，在第一收集装置的壁部上，可对环或表面提供不 同的试剂。如果需要的话，当然也可能在另一聚集条件下提供试剂，例如液体或以固体的形 式。在一个替代实施例中，在分开的容器中或其上提供至少一种试剂，其中，用于特别 是在第一收集装置中分离血液的装置装配有注入口，使得在将血浆与红血球分离之后，能 将血浆注入到所述容器中或其上的至少所述至少一种试剂处。优选地从仅指示血浆中的物质或有机体的存在并且不指示其浓度的值的试剂的 组中选择该至少一种试剂。优选地，该至少一种试剂本质上是二元的例如，通过试剂、血浆 或其之间的反应的颜色、凝固或其它变化，试剂的反应指示是否超过某一阈值。这里示出和讨论的实施例总是以血液的分离和分析为基础的。然而，可用相同或 相似的装置检验其它生物样本。在实例中给出的装置、方法和试剂的实施例仅为了示意性 的目的而示出，并且，不以任何方式限制本发明。在图1中，提供装置1的部分横截面图，根据本发明，将第一实施例示出为在两个 部分中。在图1中，在左侧示出了第一部分2，其由透明的塑料壳3形成，壳在底部由锥形底 4封闭并且在相对侧5上是开口的。开口侧5装配有具有外螺纹7的颈部6，帽8拧在外螺 纹7上。帽8将垫圈9夹在颈部6处，使得封闭壳3内的内室或腔室10。在腔室10中，提 供有预定量的稀释液11。图1在右侧示出了活塞部分12形式的第二部分20，包括具有开口底部14和相对 的开口顶部15的至少部分透明的管状元件13，该开口顶部由凸缘16包围。在底部14的 外侧周围，装配有具有外径Db的柔性环17，外径Db以下述方式适应第一部分2的壳3的 内径Di。在管状元件13中引入杆件18，其具有外径dl，dl比管状元件13的内径d2小。 在杆件18的顶部设置有凸缘部分19，凸缘部分在其顶侧连接至挡板21，挡板向外延伸并装 配有内螺纹22，该内螺纹能装配在部分2的外螺纹7上。凸缘部分密封地装配在顶部15 中，同时，挡板能紧靠凸缘16的外侧。杆件18和凸缘部分19具有这样的长度，使得，在图 1所示的位置中，杆件18的下端M保持在距离管状元件13内的下端14 一定距离处。在 杆件18的下端M设置有挡块25，其将在下面说明。在管状元件13的底部端14中附接有 过滤器沈，至少通过血液的任何稀释，至少血浆能通过该过滤器，但是红血球不能通过。在 U. S. 2003/0175167A1中给出了使用过滤器和稀释物的实例，其通过引证结合于此，并且不应限制性地对其进行解释。在图2中，示出了处于这样的状态中的第二部分20，其中，将第二部分20部分地 引入或接合入第一部分2中，其中，在稀释液中混合一滴已知量的血液。在此位置中，过滤 器沈位于已稀释的血液上，并用环17密封靠着壳3的内部。从而封闭腔室10。从此位置 开始，可将第二部分20在底部4的方向上进一步向下推动。从而，过滤器沈将用力压靠已 稀释的血液，使得血浆受压向上通过过滤器沈，而红血球被阻止并保持在腔室10中。在杆 件18、管状元件13、过滤器沈以及凸缘部分19之间，形成有环形腔室形式的第一收集装置 27，在其中收集有血浆。在图3中，示出了根据本发明的装置1的横截面侧视图，第二部分20被完全向下 压入第一部分2中至这样的程度，使得内螺纹22拧在外螺纹7上，并使得挡块25密封过滤 器沈上方的管状元件13的开口端部分，以防止血浆观从第一收集装置27回流到腔室中。在图1至图3所示的实施例中，在管状元件13的内部上设置至少一个表面29， 该管状元件容纳有用于存在于或可能存在于血浆观中的至少一种成分或被分析物的试剂 30。优选地，将试剂30应用为环形平面，使得能从复合装置(composite device) 1的外侧 的所有侧面看到试剂。如果此被分析物在血浆中存在一定的程度，那么这允许清楚地观察 试剂30与所述被分析物的反应，例如，通过颜色变化、结构变化、凝固、溶解等。将显而易见 的是，可在必须确定被分析物的存在、浓度、水平等的基础上选择试剂30或多种试剂。如果 希望的话，对两个或多个表面^、29A、29B、29C...提供相同的试剂30，但是优选地提供不 同的试剂 30A、30B、30C. · ·。在图6所示的一个替代实施例中，在环形表面四的形式的杆件18上提供试剂。 这具有这样的优点根据待确定的所期望的被分析物，例如，可从一组具有不同试剂的杆件 18中选择杆件18。实际上，这当然也可用具有不同试剂的各种管状元件13来实现。在本发明的装置的一个替代实施例中，如图6中示意性地示出的，可提供一系列 插入元件，例如，(中空的)杆31、环32等，其中，各种插入元件承载有不同的试剂30、30A、 30B...，这便于，在任何时间，根据所期望的检验，可在管状元件13中提供适当的试剂或适 当的试剂组合。例如，环形元件可在杆件18上滑动，以形成如图6所示的杆件18。例如， 可将杆或类似物放在杆件18中的槽或开口中，或放在围绕板或腔室的杆件18中，例如空间 27或管13，例如宽松地插入的。图5示意性地示出了用于在图1至图3的装置中使用的插入元件32的一个替代实 施例的透视图。此插入元件32基本上由中空圆柱体50形成，其在第一端51包括环形部分 52，多个指部53从环形部分52在相对的第二端M的方向上延伸。指部53在第二端M附 近具有再生部分(rejuvenation) 55，由于每个指部的部分56相对于所述本体50的外表面 57向内弯曲。在再生部分55的面向外的表面四上，在每个指部53上提供试剂30。每个 指部上的试剂可以是相同的，但是，在不同的指部53上可提供不同的试剂30、30A、30B...， 例如，为了执行不同的、不论是否相关的检验。圆柱体50具有外径D3，其与本体13的内径 D2基本相等，使得其能够从顶部15插入本体13，优选地在端部14的方向上通过指部53插 入。然后，外表面57能与本体13的内侧临靠，同时表面四保持在距离其一定距离处。这 允许试剂30、3(^、3( ...与收集在空间27中的血浆适当地接触。当然，可以别的方式提供 或应用试剂，例如，将试剂直接提供或应用在表面57上，如果使其保持远离本体13的壁部，或者在插入元件32的面向内的表面上，在此情况中，当至少指部53的至少位于试剂30的 位置处是至少部分透明的时，这是有利的。图4A和图4B示意性地示出了根据本发明的装置1，在一个替代实施例中，其基础 在NL 1016646中描述，该公开物的全部内容通过引证结合于此，至少关于从血液分离血浆 的操作通过引证结合于此。此装置1包括中空圆柱体33，其中，在压力体35的帮助下，第一活塞34能在第一 位置(其中，压力体�？吭诹又恋谝换钊牡谝桓思�36的一端)与第二位置(例如，沿 着杆件36绕着通过本体33的轴线相对于第一位置旋转大约90度的角度)之间密封地移 动。在第一位置中，由此可用压力体35在本体33的下端37的方向上推动第一活塞34，直 到紧靠接合件(abutment) 38。在杆件36周围设置具有杆件46的第二活塞39，并密封杆件 以及本体33的内部。例如，第二活塞39是橡胶圈。在第一活塞34与第二活塞39之间，封 闭有处理室40，其容积是可变的。处理室可容纳处理液或其它材料，例如缓冲剂11，例如磷 酸盐缓冲剂，与图1至图3相似。已经在本体33的壁部44中装配入口 42和出口 43。可将 毛细管44放在入口中，使得毛细管44的内容物能被吸入两个活塞34、39之间的本体，位于 处理室40中，如将描述的。过滤器沈装配至出口 43，至少可迫使处理室40的内容物进入 和/或通过过滤器26。在起始位置中，如图4A所示，活塞34、39定位在本体33中相对较高的位置，并且 彼此相对靠近。入口优选地在处理室中精确地打开，处理室40具有相对小的容积。填充有 全血45的毛细管44作为样本放在入口 42中。通过在本体的下端37的方向上对第一活塞 34施压，其通过出口 43，同时，处理室40的容积增大，因为第二活塞39将不会，或至少不会 完全遵循第一活塞34在最大冲程(即，在压力体35到达第二位置之前，其在下端37的方 向上从起始位置能移动的最大距离)的第一部分上的运动。由于处理室40的容积的增加， 毛细管的内容物将被吸入处理室，并与处理液11混合。然后，使压力体相对于杆件36到达第二位置，使得其能在杆件36上在下端37的 方向上进一步受压，由此，在第一活塞34的方向上挤压第二活塞39。从而，使处理室的容积 回缩，尤其是减到最�。⑶遥贫硪汉脱镜幕旌衔锿ü隹� 43，进入和/或通过过 滤器沈。过滤器可以是任何适当的过滤器，例如，玻璃纤维过滤器。从而，将血液与血浆分 离，因为血浆受压通过过滤器，例如红血球和白血球的血液微粒被去除。根据本发明，在过滤器沈中和/或在过滤器沈处，提供至少一个检验表面四，如 图4C所示，由试剂30形成或包括试剂30，例如以上描述的。因为血浆受压通过过滤器，其 与任何检验表面四直接并密集地接触，并由此与任何试剂30接触，从而允许几乎立刻读出 检验结果。优点是，不需要将其提供至外部试剂表面，由此能防止血浆和/或试剂的污染。此外，可将血浆收集在过滤器沈中，或至少收集在其壳体47中，由此，能防止环境 的污染，特别是环境的玷污。在生物样本(例如，在血液中可能存在致病因子)中使用的情 况中，这特别重要。在图4C中，示出了用于根据图1、图4A和图4B的装置的示意性过滤器沈，该过滤 器沈包括壳体47。壳体47至少部分是透明的，优选地是完全透明的，使得，不需要打开壳 体47便能看见被提供有试剂30的过滤器表面48或至少其一部分。这防止了血浆、试剂和 /或环境的污染。例如，壳体47可包括两个壳体部分48、49，其彼此附接，同时包括如前所述的过滤器元件57，用于将血浆与血细胞分离。在过滤器元件57上方的第一壳体部分48 中，腔室58设置在使用过程中面向出口 43的一侧，血细胞保留在那里。在第二壳体部分49 中，设置有在其中收集已分离的血浆观的收集室或空间27。在此空间中，提供至少一表面 四，在该表面上或其中包括用于与血浆反应的试剂。例如，可在过滤器元件57上，在面向收 集室27的一侧，设置此表面29，由此，例如可提供多孔形式的表面，使得在血浆与试剂之间 形成密集接触。如图4C所示，也可在壳体47的内部上，在收集室27中，或在这两处地方， 设置表面四。在此实施例中，第二壳体部分至少在表面四的位置处是透明的，这里，将表 面四设置在块59上，使得，例如，能从壳体47的外部看到由于血浆和试剂30的成分之间 或血浆和试剂中的成分之间的反应而产生的块的变色。本发明决不限制于在附图和说明书中所提供的实施例。在由本发明的权利要求概 括的范围内，许多变型都是可行的。例如，当使用过滤器时，可使用将血浆至少部分地收集于其中的壳体，其中，壳体 至少部分是透明的，并且在其中提供有试剂。这提供良好地防止污染和/或玷污的优点。此 外，然后可将该装置或至少收集于其中的血浆用于其它检验。例如，可将装置整体或过滤器 和/或壳体发送至实验室，在那里可进行其它检验，例如，为了验证或进一步检查通过试剂 获得的第一指示。用该装置检测血液中的被分析物可对本发明的装置提供用于检测的试剂，即，用于被分析物(例如，血浆中的化学 或生物物质或微生物)的定量、半定量或定性存在的确定。例如，血浆中的化学或生物学物 质或微生物。例如，可使用这样的试剂，其可指示幽门螺杆菌的存在，或指示凝血因子的过量或 不足。也可使用这样的试剂，其指示抗原的存在，例如其必须存在的范围或超过极限的 程度，例如通过抗原可证明或确信肿瘤的存在。也可应用这样的试剂，例如，通过该试剂能确定维生素的存在。可进一步使用这样的试剂，利用该试剂，通过超过或消减(undercutting)阈值或 极限值，其能指示出该超过是否会对患者有害。这种试剂可有利地与指示该极限值的超过 或消减的试剂组合。可应用其它试剂，通过该试剂，能确定物质的治疗血液水平，例如药物 (drug)或毒素，例如，为了最佳的作用，药物取决于由于例如不期望的副作用而可能不被超 过的最佳血液水平。而且，可应用如所述的试剂的组合。这些试剂和应用当然仅是示意性 的，并且不应限制性地进行解释。在本说明书中，术语“试剂”或“多种试剂”或类似的措辞，应至少被理解为包括抗 体或酶，这意味着可基于抗体或酶进行检验。可应用几种试剂和其它标记物，例如抗原、化学试剂、酶、化学标记物等。可用试 剂和标记物来指示心脏、肝脏、肾脏或其它器官的问题、血糖异常(例如糖尿病)、胆固醇紊 乱、一种或多种荷尔蒙或细胞因子的缺陷、一般诊断参数等等、病毒性或细菌性异常(例如 流行性感冒、疟疾、肝炎、HIV、炎症、MS、ME)以及其它指标，尤其是用于已存在的和/或潜在 的健康问题的指标。应将此内容中的偏差理解为这种偏离于可被期望的正常值的偏差，对 于有问题的患者，这些值指示或应该向医生指示进一步检查或干预是必要的，例如，施加药物、流体或营养物，或通过手术干预。试剂的实例(其决不限制本发明)包括，例如，用于HTLVI和/或II的抗体，用于 肾功能(例如心脏或心血管问题)的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C或标记物，心脏病发作(心 肌梗塞)和/或中风，单克隆抗体，凝固试剂(例如，狼疮抗凝物敏感或不敏感的试剂)，PSA 抗原，HBS-I，HLA抗体，血色素测量中的HbA(Ic)或GlyHb。在表面四的实施例的第一实例中，在管状部分13的内部上施加胆固醇试剂，用作 试剂30的CHOD-Pap (Boehringer-Mannheim GmbH)，其适于证明胆固醇(总胆固醇，HDL或 LDL)。在腔室10中，提供一定量的稀释液(缓冲剂)(例如，220微升)，在此之后，在其中 稀释血液(例如，60微升的血液，将血液有效地稀释4至5倍)。通过将第二部分压入第一 部分中，如上所述，在第一空间27中收集220微升的血浆。通过摇动(水平摇动)使此血 浆与试剂接触，其结果是，试剂从中性色变成区别颜色，在此情况中是红色，能从外部清楚 地看到。借此，发现血液中的胆固醇水平比6.5mmole/L的阈值高。通过静脉采血来抽取并 在实验室中检验，以及通过手指刺戳来抽取并在实验室中检验的全血的控制测量，表明血 液的确具有高于该阈值的值。以下将描述对于用于肾功能、肝脏、心脏病发作和/或中风的标记物的检测来说 特别优选的一个实施例。此特别优选的实施例可特别应用于身体组织或体液的样本中的FABP的定量、半 定量或定性检测。脂肪酸结合蛋白质(FABP)是一种已知为用于特定组织的损害的早期标 记物的蛋白质，其中，每种组织类型的特征在于其自己的FABP类型。FABP是包括在脂肪酸 的胞内结合中的15kDa菌体蛋白质(cytosolic protein)，并表示为九种不同的异形体，每 种以其第一次在其中被描述的组织命名。-心脏-FABP(H-FABP 或心脏型)；-肝脏-FABP(L FABP 或肝脏型)；-肠-FABP(I-FABP 或小肠型)；-回肠-FABP(ILBP或回肠型)；-脑-FABP(B-FABP 或脑型)；-脂肪细胞-FABP(A-FABP或脂肪细胞型)；-上皮/表皮-FABP(E-FABP或上皮细胞型)；-睾丸-FABP(H-FABP或睾丸型)以及-髓磷脂-FABP(M-FABP或神经细胞型)。至今为止，没有能够在少于几分钟内给出结果的对FABP的快速检验。FABP的快 速确定可产生组织损伤的快速诊断和适当治疗的及早开始，尤其是在危及生命的状态中， 例如心脏病或中风。特定FABP的量的测量可能(在众多因素中，但不是唯一地)应用于 以下损伤的诊断心肌损伤(H-FABP)、骨骼肌损伤(H-FABP)、肝脏损伤(L-FABP)、肾脏损伤 (L-FABP 和 / 或 H-FABP)、肠损伤(包括 I-FABP、ILBP 和 / 或 L-FABP)、脑损伤(B-FABP 和 / 或H-FABP)，并在以下诊断中使用脂类代谢的一系列紊乱、糖尿病、发炎性疾病、多发性硬 化、动脉硬化症、癌症以及移植之后的组织排斥。本发明提供用于每个可能出现在动物或人类患者中的异形体中的基本上任何以 上FABP的检测，其中，优选地在免疫测定的基础上，并优选地在血液中，执行与期望的特异性有关的检测。用于FABP的检测的免疫测定在原则上对技术人员来说是已知的，并且，这种化 验适于在本发明中使用。可用的免疫测定的一个实例采用夹心酶联免疫吸附试验的形 式(Pelser MMAL. 2004. “作为用于组织损伤的血浆标记物的脂肪酸结合蛋白质(Fatty acid-binding protein as plasma markerfor tissue injury)，，马Jffi)=寺 11 ,大学ife文， 荷兰 ISBN 90-9018161-X，第 3 章，第 43 至第 51 页；Wodzig KffH, Pelser MMAL, van der Vusse GJ, Roos W，Glatz JFC.用于血浆脂肪酸结合蛋白质的一步式酶联免疫吸附试验 (One-step enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for plasma fattyacid-binding protein)。Ann Clin Biochem 1997;34:263-8)。此化验(总持续时间是 45 分钟)是最 快的，最特效的，并是敏感的H-FABP ELISA，其可在商业上获得。此化验利用两种不同的单 克隆抗体，每个涉及H-FABP的不同抗原决定基。这些单克隆抗体中的一个用作捕获抗体， 并附接至检测表面。另一抗体与辣根过氧物酶(HRP)结合，并用作检测抗体。在别的地方 更详细地描述了在此化验中应用的单克隆抗体(参见Pelser MMAL. 2004，上述第3章，第 43 至第 51 页和第 4 章，第 53 至第 67 页；Roos W, Eymann Ε, M Symannek, Duppenthaler J, Wodzig KffH, Pelser MMAL, Glatz JFC. “对人心脏脂肪酸结合蛋白质的单克隆抗体 (Monoclonalantibodies to human heart fatty acid-binding protein)" ^M^Tj^i: 期刊1995 ；183 :149-53)。在捕获抗体/H-FABP/检测抗体复合物的形成之后，可通过使用 HRP-特异酶基质来检测所述检测，例如色原四甲基联苯胺(TMB)，其在由HRP转化之后提供 蓝色反应产物，通过测量在450nm处的吸收，可用分光光度法检测该反应产物。本领域的技术人员将理解，可在本发明的各方面中使用关于以上检测原理的许多 变型。因此，除了 H-FABP以外，抵抗其它FABP类型的抗体可用来检测此蛋白质的其它异 形体。而且，可对抗体与FABP之间的结合应用其它抗原决定基。抵抗特定FABP(对抗原决 定基的抗体已经可用于此FABP)的其它抗原决定基的抗体的开发，或者表现出与其它FABP 异形体的特异性结合的抗体的开发，在本领域技术人员的理解范围内，在这里不需要详细 描述。在本发明的各方面中，可用作试剂的抗体可以是多克隆或单克隆抗体。优选地，使 用单克隆抗体。抗体可包括全部的免疫球蛋白或其片段，其中，可从不同的类和同种异型中 选择免疫球蛋白，例如，IgA, IgD, IgE, IgGU IgG2a、IgG2b和IgG3、IgM等。其片段可包括 Fab、Fv和F (ab ’)2、Fab ’等。此外，可适当地应用免疫球蛋白或其片段的凝聚物、聚合物和 结合物(conjugate)，只要保持用于给定的FABP的结合亲和力。这里通常被称做试剂30的成分将通常由捕获抗体形成。可将此捕获抗体固定至 限制空间27 (或第一收集装置27)的装置1的任何元件的表面，并且，该表面朝着空间27 面向内部，使得捕获抗体与血浆观直接接触或能够与血浆观直接接触。因此，可将捕获抗 体应用于杆件18 (至少其一部分)、管状元件13 (的至少一部分)、或至少如这里描述的表 面四。而且，如以下实例中描述的，可将捕获抗体固定至多孔元件，该多孔元件固定在限制 空间27 (或第一收集装置27)的装置1的任何元件的表面上或其中，并且，该表面朝着空间 27面向内部，使得在捕获抗体与血浆之间能产生改进的接触。例如，通过生物素-亲和素抗 生物素蛋白连接(biotin-(sti^pt)avidin link)，可实现捕获抗体至固体表面的粘附。可以可选地对捕获抗体提供顺磁性标记物，使得能从液体中收集其，并在通过磁吸引进行的 反应的过程中的任何时间将其固定至固相。杆件(18)优选地是这样的形式，其允许插入压力装置的管状元件中。该杆件可以 是管状的，这意味着内部是中空的，杆件可以是实心的，并且在横截面中可以是圆的、椭圆 的、正方形的、三角形的或长方形的。杆件可包括这样的元件，试剂在元件上或者可对元件 施加试剂。这种元件可以是多孔的或实心的。优选地，含有试剂的元件由于其多孔特性而支 持从收集装置吸收已稀释的血浆。优选地，含有试剂的元件能够吸收多于来自收集装置27 的已分离的血浆的10 %，优选地多于20 %、30 %、40 %或50 %。结果，基本上缩短了捕获抗 体与存在于液相中的FABP之间的扩散距离，其中，所述FABP优选地存在于这样的形式中， 其中，其与检测抗体复合。非常优选地，含有试剂的元件支持毛细流动，由此，在毛细力的影 响下，血浆被吸入多孔的含有试剂的元件中，毛细力作用的结果是使其与已固定试剂(即， 已固定捕获抗体)接触。优选地，本发明的检验是夹心酶联免疫吸附试验的形式，其中，检测抗体进一步用 于FABP至捕获抗体的结合的检测。检测抗体至FABP的结合原则上可在FABP至捕获抗体的 结合之前、之中或之后发生。优选地，首先允许检测抗体结合至存在于身体样本中的FABP， 然后允许此复合物结合至已固定的或将要固定的捕获抗体。为了实现此效果，可将检测抗 体非常适当地添加至本发明的装置的腔室10中的稀释液11。在一个替代实施例中，可将抗 体添加至(多孔)元件，通过该元件将已知量的血液引入稀释液11中。这种元件可采用海 绵的形式，其中，存在检测抗体，使得，能在将整个海绵放入稀释液11中以将血液和检测抗 体从海绵转移至稀释液11之前，该检测抗体与所采样的血液直接混合。在另一替代实施例中，可在之后将抗体添加至该空间，或者，抗体可在将血浆收集 于空间27中之前就已经存在于该空间中。重要的是，在发生至FABP的结合或者此结合是 可能的条件下，将检测抗体与血液或血浆均勻地混合。在一个实施例中，其中，施加将要固 定的或首先允许与液相中的FABP反应的捕获抗体，还可在血浆在空间27中分离之后，将此 捕获抗体添加至稀释液11、添加至抽血元件或血液收集元件或添加至血浆。事实上，每种可 能的组合或顺序都是可能的，只要最终结果提供捕获抗体-/-FABP-/-检测抗体的固定复 合物。检测抗体可标记有任何适当的检测标记物，例如胶态金或银、抗生蛋白链菌素、生 物素、微球体、乳胶微珠、过氧化物酶、抗生蛋白链菌素标记的辣根过氧化物酶(HRP)、磷酸 酶、碱性磷酸酶(AP)发色标记物、荧光标记物、磷光标记物、化学发光标记物、二次抗体，或 任何其它适当的标记物，通过所述标记物能建立成功结合的检测。可选的二次抗体可包括 任何以上标记物。优选地，使用胶态金，因为不需要清洗步骤，并可获得简单的一步式检验。胶态金 由具有IOnm至IOOnm的直径和非常高的消光系数的离散的红色颗粒组成。当集中在固体 表面时，胶态金会非常容易地从视觉上被看成是红色。优选地，由此将捕获抗体以可识别的 形式施加至限制空间27的装置1的任何元件的表面，并且该表面朝着空间27面向内，使得 捕获抗体与血浆观直接接触，并且，从装置的外部至少能观察到该表面的一部分。本领域的技术人员将理解，在本发明中可以想象到侧向流动应用。本领域的技术 人员还将理解，可与主要检验一起或并行地执行辅助检验，通过该辅助检验或者检测第二FABP,或者通过该辅助检验提供控制反应。可在根据本发明的检验中使用的身体样本原则上不限于血液。可检验其它身体样 本，例如组织样本，或尿、粪便、唾液、泪液、粘液、痰、精液、宫颈分泌物、脑脊髓液、呕吐物、 鼻分泌物、汗液、羊膜液或母乳样本。在另一方面中，本发明提供一种零件套装，优选地将其部件包装在一起。根据本发 明的套装优选地包括-具有稀释液的管(装置1的第一部分2，根据如图1所示的发明，包括腔室10，其 具有如上所述的稀释液11，并优选地具有如附图所示的外螺纹7)；-可选地，海绵(未在图中示出)，其提供用于采样已知量的血液以将其引入装置1 的腔室10中的稀释液11中的可能性。可应用此元件，以将已知量的血液样本引入装置的 腔室中的稀释液(典型地是大约60 μ L的血液，但是此量可能变化)，由此在稀释液中稀释 血液成分；-血液过滤器(活塞部分12，其包括具有开口下端14的至少部分地透明的管状元 件13，其中，设置至少血浆能通过但是红血球不能通过的过滤器沈，并且，该活塞部分能被 引入腔室10中并能朝着底部4沿着腔室10的壁部密封地滑动)；-帽(如图1所示的具有杆件18的凸缘部分19，由此在杆件18的下端M上设置 有挡块25，其能在过滤器沈上方密封管状元件13的开口端，如图3所示，从而防止血浆观 从第一收集装置27返回，并且，其中，凸缘部分19在顶部上并连接至挡板21，该挡板向外延 伸并设置有内螺纹22，该内螺纹能够装配在装置1的第一部分2的外螺纹7上，根据如图1 所示的发明)；-捕获抗体，能特异地结合至FABP(试剂30)的第一抗原决定基。该捕获抗体可 有利地是这样的形式其中，其被固定在限制空间27的元件的面向空间27的一侧的表面中 或该表面上，并且从装置的外面能观察到该捕获抗体。适于用作用来检测H-FABP的捕获抗 体的抗体是抗人类单克隆抗体H-FABP 67D3 (例如，可从荷兰Uden的Hycult生物技术公司 (Biotechnology BV)获得的)。适当的表面是具有毛细管作用的多孔部分，例如，可在侧向 流动检测中应用此毛细管作用。-可选地，能够与FABP的第二抗原决定基特异性结合的检测抗体，第二抗原决 定基与第一抗原决定基不同，并且，其中，两种抗体本质上不会以有害方式影响彼此与 FABP的结合。有利地，可在稀释液中提供检测抗体。稀释液中的检测抗体的适当浓度是 5至20 μ g/L。适于用作用于检测H-FABP的检测抗体的抗体是抗人类单克隆抗体H-FABP 66E2 (例如，可从荷兰Uden的Hycult生物技术公司获得的)。根据本发明的装置和检测系统的应用提供即时的(POC)快速检验，即，由全科医 生在救护车中、在医院中使用的快速检验，或作为检测血浆中的FABP的家用检验。检测来自患者的血液样本中的FABP的方法优选地包括以下步骤-提供如上所述的本发明的装置；-将已知量的血液引入所述腔室中的所述稀释液中，由此，可选地，施加多孔体，在 多孔体中可吸收固定量的血液，以将预定量的血液提供到稀释液中，并使血液与稀释液混 合；-通过接合装置的分离装置使红血球与血浆分离；
-在其中发生在抗体与FABP之间的特异性结合的条件下，使所述血液或血浆中的 FABP与所述检测抗体和捕获抗体中的至少一个接触，以及-检测该特异性结合。在上面详细说明了此过程的实施例中的不同变型。现在将通过以下决不限制本发明的实例来举例说明本发明。实例开发即时的(POC)快谏检验(用于在全科医牛的办公室中、在救护车中、在医院中 使用的检验,或作为检测血浆中的FABP的家用检验)该检验提供用于在血浆中存在的浓度增加(> 6 μ g/L)的心脏型脂肪酸结合蛋白 质(H-FABP)的免疫化学测定，并与如这里描述的装置结合。血液样本的采集与获得检验结 果之间的时间小于90秒。本实施例详细描述了如上所述的并由发明人所设计的零件套装。此实施例包括-刺血针(手指刺针)，用于刺破指尖以提供血液样本；-管(腔室)，包括稀释液(IOOmMHEPES EDTA (pH 7. 4)和 0. 9% NaCl)；-海绵，用于收集限定量的血液；-血液过滤器，用于在管状元件的尖端分离血浆和血细胞；-帽，装配有具有挡块的杆件，通过挡块可分别密封腔室(帽)的顶侧和通过血液 过滤器(挡块)的回流。稀释液提供有用直接抵抗人类心脏型FABP的鼠单克隆抗体66E2 (可从荷兰Uden 的Hycult生物技术公司获得)(此单克隆抗体叫做“第一抗体”，HiAbi^)，并且，稀释液与胶 态金或其它适当颜色指示剂结合。HiAbi^在稀释液中的适当浓度是5至20 μ g/L。应用海绵，以将大约60μ L的血液从血液样本引入装置的腔室中的稀释液中，血 液在腔室中被稀释。存在于血液样本中的FABP将基本上立刻与存在于稀释液中的金结合 单克隆抗体mAb_结合，以形成FABP-mAb·-金复合物。例如，平均摇动腔室的内容物40 秒，有助于将血液溶解在稀释液中并通过mAbFABP完全结合。然后，将血液过滤器放在腔室中，并在腔室底部的方向上向下缓慢挤压血液过滤 器。用力将血液过滤器压靠在包含血液-FABP-mAb^-金复合物的已稀释血液上，使得血 浆与FABP-HiAbi^-金复合物一起受压向上通过血液过滤器，同时将红血球阻止并保留在腔 室中。将血浆和FABP-mAb -金复合物一起收集在管状元件的内部空间中的血液过滤器 的另一侧。在放在管状元件中之后，密封装配有杆件的密封帽，杆件在管状元件的位于血液 过滤器上方的开口端具有挡块，以防止通过血液过滤器的回流。同时，用帽在顶部处密封腔 室。在本实施例中，以中空管的形式提供将挡块连接至帽的杆件，该中空管具有至少 部分透明或在大约IOmm的长度上为开口的的壁部。杆件的壁部的透明或开口部分优选地 从离杆件下端2_3mm处开始，并优选地延伸至离杆部下端大约12_13mm。用多孔部分填充杆 件的中空管，该多孔部分对液体具有毛细活性，并且，借助杆件的至少部分地透明或开口的 壁部，可从装置的外部看到该多孔部分。在距离杆件下端大约5mm的距离处，多孔部分包括 固定至其上的一定量的200ng的单克隆抗体67D3 (荷兰Uden的Hycult生物技术公司)，其 直接抵抗人类心脏-FABP类型(其叫做“第二抗体”，mAb)，并且，该抗体识别与由HiAbs 识别的抗原决定基不同的人类心脏型FABP上的抗原决定基。类似地，处于距离杆件下端大约IOmm距离处的多孔部分包括固定至其上的直接 抵抗另一蛋白质(例如，控制或参考或第二检验蛋白质)的单克隆抗体。多孔部分的总长 和体积(即尺寸)优选地是这样的，使得在多孔部分中吸收已稀释的血浆样本的绝大部分 (大约 100 μ L)。在将血浆吸入多孔部分之后，在色带的形成下，FABP-HiAbi^-金复合物将结合至 固定于其上的第二单克隆抗体mAb_s，可通过杆件的透明或开口的壁部看到色带。此色带 的色度将随着血液样本中的FABP的浓度而增加。在原始血液样本中的FABP浓度< 6 μ g/ L的情况中，将看不到色带。类似地，存在于血液中的另一蛋白质将与如上所述在离杆件下端IOmm的距离处 固定在多孔部分上的特异性抗体结合，并且，如果对稀释液还提供抵抗该蛋白质的另一抗 原决定基的金结合抗体，那么，当多孔部分上的色带处于离杆件下端IOmm的距离处时，将 看到此复合物。此反应可用作对检验中血浆的存在的控制，并由此用作适当执行的控制。
权利要求
1.一种用于检测来自患者的血液样本中的FABP的装置，所述装置包括以下元件a)分离装置，用于将血液分离成血浆和红血球，其中，所述分离装置设置有-腔室，用于容纳血液样本并包括用于所述血液样本的稀释液；-过滤器，来自已稀释的血液样本的血浆和FABP能够通过所述过滤器，但至少红血球 不能通过，FABP可选地复合至抗体，以及-加压装置，用于使至少部分血液样本受压通过所述过滤器，以提供分离的血浆，以及b)收集装置，用于收集已分离的血浆，并且，其中，所述分离装置和/或所述收集装置设置有以下抗体中的至少一个(i)抵抗FABP的第一抗原决定基的检测抗体，所述检测抗体与可检测的标记物结合， 并能够接触已分离的血浆，以及( )抵抗FABP的与所述第一抗原决定基不同的第二抗原决定基的捕获抗体，其中，所 述捕获抗体能够以固定形式提供在所述收集装置中，并能够接触已分离的血浆。
2.根据权利要求1所述的装置，其中，所述过滤器设置在能够插入所述腔室中的管状 元件的端部处或该端部附近，并且其中，所述收集装置由所述管状元件的内部形成。
3.根据权利要求1或2所述的装置，其中，所述捕获抗体被固定在能够插入所述收集装 置中的插入元件上或插入该插入元件中。
4.根据权利要求3所述的装置，其中，所述检测抗体被提供在所述稀释液中。
5.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述FABP选自由H-FABP、LFABP, I-FABP、ILBP, B-FABP, A-FABP, E-FABP, T-FABP 及 M-FABP 组成的组。
6.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述可检测的标记物选自由胶态金 或银、抗生蛋白链菌素、生物素、微球体、乳胶微珠、过氧化物酶、抗生蛋白链菌素标记的辣 根过氧化物酶(HRP)、磷酸酶、碱性磷酸酶(AP)、发色标记物、荧光标记物、磷光标记物、化 学发光标记物及二次抗体组成的组。
7.根据前述权利要求中任一项所述的装置，其中，所述收集装置至少是部分透明的，使 得从所述装置的外部至少能部分地看到所述已固定捕获抗体的附着位置。
8.一种用于分析血液中的FABP的存在的方法，其中，将一定量的血液至少分离成血浆 和红血球，其中，至少将所述血浆收集在收集装置中，其中，允许存在于血液中的FABP与至 少一种抗体接触，所述抗体具体地与FABP起反应，并且，其中，从所述收集装置的外部能观 察到所述抗体与所述FABP之间的结合。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，从血液样本中取得预定量的血液，并将其引入装 置中，其中，将所述预定量的血液与预定量的稀释液混合以获得期望的稀释物，然后，使已 稀释的血液压靠在过滤器上，以便迫使血浆通过所述过滤器并进入所述收集装置，并且，红 血球被所述过滤器阻止。
10.根据权利要求8或9所述的方法，其中，所述血浆与所述收集装置中的所述抗体接触。
11.根据权利要求8至10中任一项所述的方法，其中，用检测抗体抵抗FABP的第一 抗原决定基，并且，其中，所述检测抗体与可检测的标记物结合并能够接触所述已分离的血 浆。
12.根据权利要求8至11中任一项所述的方法，其中，用捕获抗体抵抗FABP的与所述第一抗原决定基不同的第二抗原决定基，其中，所述捕获抗体能够固定在所述收集装置中 并能够接触所述已分离的血浆。
13.一种用于检测来自患者的血液样本中的FABP的方法，包括以下步骤-提供根据权利要求1至7中任一项所述的装置；-将预定量的血液引入所述腔室中的所述稀释液中，可选地使用多孔体进行该引入，在 所述多孔体中能够吸收预定量的血液，然后将所述预定量的血液提供到所述腔室中的所述 稀释液中，并使所述血液与所述稀释液混合；-通过接合所述装置的分离装置，用过滤将红血球与血浆分离；-在所述抗体与所述FABP之间出现特异性结合的条件下，使所述血液或血浆中的FABP 与所述检测抗体和捕获抗体中的至少之一接触，以及-检测所述特异性结合。
14.根据权利要求13所述的方法，其中，在所述稀释液中提供所述检测抗体，并且，其 中，所述捕获抗体能够以固定状态与所述收集装置中的血浆接触。
15.根据权利要求13或14所述的方法，其中，形成检测抗体-FABP复合物，然后允许所 述检测抗体-FABP复合物结合至已固定的捕获抗体。
16.根据权利要求8至15中任一项所述的方法，其中，所述FABP选自由H-FABP、L FABP、I-FABP、ILBP, B-FABP, A-FABP, E-FABP, T-FABP 及 M-FABP 组成的组。
17.一种零件套装，包括至少一用于将血液至少分离成血浆和红血球的装置，其中，所 述装置包括用于收集已分离的血浆的收集空间，并且与FABP反应的至少一特异性抗体适 于被引入所述收集空间中。
18.根据权利要求17所述的套装，进一步包括用于吸收和释放预定量的血液的元件。
19.根据权利要求17或18所述的套装，包括根据权利要求1至7中任一项所述的装 置，并适于执行根据权利要求8至16中任一项所述的方法。
全文摘要
本发明提供一种用于检测来自患者的血液样本中的FABP的装置、用于分析血液中的FABP的存在的方法、以及用于检测来自患者的血液样本中的FABP的方法和成套工具。
文档编号G01N33/543GK102099683SQ200980127554
公开日2011年6月15日 申请日期2009年5月14日 优先权日2008年5月14日
发明者约翰内斯·弗雷德里克斯·卡罗卢斯·格拉兹, 赫拉尔杜斯·马热拉·别斯布鲁克 申请人:菲伯普鲁斯有限公司
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