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专利名称：利用小麦麦谷蛋白作蛋白质分子量标准的技术的制作方法
技术领域：
本专利技术属于生物科学和生物技术等领域。
背景技术：
蛋白质研究是生命科学中重要的组成部分。其中，蛋白质分子量标准作为蛋白质的定性甚至定量研究的重要工具。目前，蛋白质分子量标准的来源较窄，尤其是高分子量蛋白质标准，更为缺乏，国内的研究单位主要依赖进口的国外产品，价格贵，实验成本高。因此，开发具有自主知识产权的廉价高分子量蛋白质分子量标准具有重要应用价值。
小麦麦谷蛋白质分为两类高分子量麦谷蛋白质亚基和低分子量麦谷蛋白质，分子量分布范围从20000到数十万道尔顿，而且，一个品种只含有特定蛋白质的几种，其不受栽培条件和环境的影响，具有稳定的遗传性。小麦来源广泛、价格低廉、麦谷蛋白质分子量分布较宽，提取方便，对非蛋白质杂质要求不严，是制备蛋白质分子量标准的较佳。

发明内容
小麦麦谷蛋白质作为蛋白质分子量标准大大增加了蛋白质分子量标准的上下限和分布密度。通过含不同分子量麦谷蛋白质的特定品种的搭配，采用适宜方法，提取麦谷蛋白质，获取各类分子量分布范围的蛋白质分子量标准。本专利技术主要应用于基础生物学和应用生物技术等领域具体实施方式
1品种搭配1)蛋白质高分子量标准，选择含高分子量麦谷蛋白质亚基1-20号的2-5个品种搭配，分子量范围80000-180000道尔顿，含7-10条带；2)蛋白质中等分子量标准，选择含高分子量麦谷蛋白质亚基2-22号的2-3个品种和含低分子量麦谷蛋白质前端编号的1-2个品种搭配，分子量范围50000-100000道尔顿，含7-12带；3)蛋白质中等偏下分子量标准，选择含低分子量麦谷蛋白质丰富的2-4个品种搭配，分子量范围30000-50000道尔顿，含8-14带。
2麦谷蛋白质提取小麦籽粒磨碎；取心粉加入含SDS的提取液；搅拌后置沸水中煮1-20分钟；离心若干时间；取上清液；重复前步；加乙醇沉淀蛋白质；并冲洗若干次后离收集沉淀；离子交换吸附；按商品要求分段收集不同分子量的蛋白质混合物；低温贮藏或加缓冲液低温贮藏备用。
3麦谷蛋白质分子量标准使用的缓冲系统利用SDS连续缓冲系统和不连续缓冲系统，分离胶的pH范围在8.3-8.9，浓缩胶的pH范围在6.5-6.8。4麦谷蛋白质分子量标准使用的染色、显色反应经过聚丙烯酰胺电泳后，无论胶离板或黏合在一块板上均可进行考马斯亮蓝染色、显色，黏合在一块板上的胶也可以进行银染而显色。
权利要求
1品种搭配1)蛋白质高分子量标准，选择含高分子量麦谷蛋白质亚基1-20号的2-5个品种搭配，分子量范围80000-180000道尔顿，含7-10条带；2)蛋白质中等分子量标准，选择含高分子量麦谷蛋白质亚基2-22号的2-3个品种和含低分子量麦谷蛋白质前端编号的1-2个品种搭配，分子量范围50000-90000道尔顿，含7-12带；3)蛋白质中等偏下分子量标准，选择含低分子量麦谷蛋白质丰富的2-4个品种搭配，分子量范围30000-50000道尔顿，含8-14带。
2麦谷蛋白质提取小麦籽粒磨碎；取心粉加入含SDS的提取液；搅拌后置沸水中煮1-20分钟；离心若干时间；取上清液；重复前步；加乙醇沉淀蛋白质；并冲洗若干次后离收集沉淀；离子交换吸附，按商品要求分段收集不同分子量的蛋白质混合物；低温贮藏或加缓冲液低温贮藏备用。
全文摘要
本发明技术属于生物科学和生物技术等领域。小麦麦谷蛋白质作为蛋白质分子量标准大大增加了蛋白质分子量标准的上下限和分布密度。通过含不同分子量麦谷蛋白质的特定品种的搭配，采用适宜方法，提取麦谷蛋白质，获取各类分子量分布范围的蛋白质分子量标准。本发明技术主要应用于基础生物学和应用生物技术等领域。
文档编号G01N21/78GK101021538SQ20071005693
公开日2007年8月22日 申请日期2007年3月16日 优先权日2007年3月16日
发明者李兴林, 崔兴华, 蔡津, 周鑫, 王丹丹, 周侃, 张晓芳, 吴鑫 申请人:天津科技大学