生脉注射剂的质量控制方法-山东亚星游戏官网机床有限公司

专利名称：生脉注射剂的质量控制方法
技术领域：
本发明是一种生脉注射剂的质量控制方法，属于中药的技术领域。
背景技术：
生脉散是传统制剂，以人参、麦冬、五味子为原料制成，具有益气养阴、复脉固脱的功效，用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气虚、四肢厥冷及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克的注射剂，目前临床上还用于治疗冠心病心绞痛、脾胃虚弱证、急性病毒性心肌炎、恶性肿瘤、小儿重症肺炎、病毒性肺炎、病毒性肝炎、视神经萎缩、糖尿病、颈椎病、银屑病、突发性耳聋等疾病。生脉注射剂是由生脉散改剂而成，克服了传统制剂起效慢的缺点，许多发明人及药品企业对其做了大量的研究工作，如专利申请号为“93110807.1”，名称为“生脉注射液及其制备工艺”的申请、专利申请号为“96117457.9”，名称为“一种生脉注射液及其制备方法”的申请；申请人于文勇也曾经向中国专利局申请了名称为“一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法”、专利申请号为02153312.1的发明专利，但是药物制剂必须要在保证产品质量稳定可控安全的基础之上，才能不断的更新发展，为了更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，需要研究、控制该注射液质量的方法；目前，在生脉的相关药物制剂中，一般仅以红参的人参皂苷Re、Rb1为检测指标，但是它根本不能全面反应产品的质量，仅以此用来控制注射液的质量不是十分合理；如果用别的指标进行控制，由于没有现成的检测方案、检测条件等等，所以比较难于实施。

发明内容
本发明的目的在于提供一种生脉注射剂的质量控制方法，这种方法向相关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；以便更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地。
本发明这样构成生脉注射剂的质量控制方法，主要包括性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目，它涉及以红参药材或其提取物、麦冬药材或其提取物和五味子药材或其提取物按某一比例组方而制成的中药注射液含各种部位使用的注射液、滴注液、注射用无菌粉末、冻干粉的质量控制方法，该质量控制方法是将红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3、麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖、五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种作为该中药注射剂的质量控制的检测指标。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法将人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、红参对照药材、麦冬皂苷D、麦冬皂甙B、麦冬对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子对照药材中全部或部分品种作为该中药注射液的鉴别方法的检测指标。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法将人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、红参对照药材、麦冬皂苷D、麦冬皂甙B、麦冬对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子对照药材中全部或部分品种作为该中药注射剂的含量测定方法的检测指标。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法将人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、红参对照药材、麦冬皂苷D、麦冬皂甙B、麦冬对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子对照药材中全部或部分品种作为该中药注射剂的指纹图谱研究的检测指标。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法该中药注射剂中的注射液为无色至棕黄色的澄明液体；粉针为为淡黄色至棕黄色的粉末。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法(1)对于红参的鉴别技术方法1采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，展开剂可以为氯仿、丙酮、甲酸、水、甲醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、冰醋酸、正丁醇中的一种或一种以上按照常规的比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％茚三酮乙醇等溶液显色的方法。
方法2采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，一般使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇、磷酸中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203～350nm范围内。
(2)对于麦冬的鉴别技术方法1采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、氯仿、丙酮、正丁醇、二乙胺、、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照常规的比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法。
方法2采用高效液相色谱法或蒸发光散射与高效液相色谱联用法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，一般使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203～600nm范围内。
(3)对于五味子的鉴别技术方法1采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，展开剂可以为正己烷、醋酸乙酯、石油醚、甲酸乙酯、甲酸、二甲苯、甲苯、环己烷的一种或一种以上试剂按照常规的比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以变色酸硫酸溶液、茴香醛硫酸溶液、碘蒸气、10％磷钼酸乙醇溶液等溶液显色的方法。
方法2采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，一般使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙腈、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203～600nm范围内。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法对于检查包括pH值、装量差异、澄明度、无菌、不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、重金属、砷盐、农药残留等全部项目或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，钾离子、重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法；药品中的技术要求为(1)pH值在2～10之间，或其中部分范围；(2)重金属不得过百万分之二十；(3)砷盐不得过百万分之二；(4)有机氯农药残留总量不得过百万分之一。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法对于指纹图谱采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、0.1～10％的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以梯度或等度洗脱的方法分离，检测波长在200～600nm范围内，以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、红参药材、麦冬皂苷D、麦冬皂甙B、麦冬药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素中全部或部分品种作为特征指纹峰或内标物峰。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法对于含量测定方法1以可见紫外分光光度法测定本品中的总皂苷含量，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，测定波长为400～600nm中某一波长，一般采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为Rg1。
方法2以可见紫外分光光度法测定本品中的总多糖含量，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，测定波长为400～600nm中某一波长，一般采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为葡萄糖。
方法3以高效液相色谱法测定本品中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇、磷酸中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在203～350nm范围内。
方法4采用高效液相色谱法测定本品中麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以以乙腈、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在203～600nm范围内。
方法5采用高效液相色谱法测定本品中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙腈、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在203～600nm范围内。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法(1)对于红参的鉴别技术采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为1ul，以人参皂苷Rb1、Re、Rg1中全部或部分品种作为对照品，直接取样，展开剂为氯仿、甲醇、水按照常规的比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外等下检视的方法。
(2)对于麦冬的鉴别技术采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1ul，以麦冬对照药材作为对照品，样品前处理包括直接取样，展开剂为氯仿、丙酮按照一定比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外等下检视的方法液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法。
(3)对于五味子的鉴别技术采用薄层色谱法，使用GF254薄层板，点样量为1ul之间某一体积，以五味子醇甲作为对照品，直接取样，展开剂为石油醚、甲酸乙酯、甲酸的上层液，检视条件为紫外光灯下254nm检视。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法对于指纹图谱采用高效液相色谱法，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水为流动相，以梯度洗脱的方法分离，检测波长为203nm，以人参皂苷Rg1作为特征指纹峰或内标物峰。
本发明所述的一种生脉注射剂的质量控制方法对于含量测定方法1以高效液相色谱法测定本品中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长为203m。
方法2采用高效液相色谱法测定本品中五味子醇甲，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长为250nm。
与现有技术相比，本发明提供的质量控制方法能更好的控制一种生脉注射剂的产品质量，保证用药的安全性，使用本发明后，能够保证药物制成品的质量，从生产开始、选用原材料，到每一个生产过程的工艺步骤均必须严格按照工艺规程执行，否则产品就有可能不满足质量要求；我们在进行试验时发现采用本发明就会要求选用红参、麦冬、五味子的等级必须达到一级以上，否则制成品会出现不合格的情况；这样更有利于指导生产，使工艺控制更加严格合理，让消费者全面认识产品品质、放心使用这类药品。本发明选取的指标成分是产品的重要有效活性成分，对控制药品质量是十分必要的，作为含量控制的指标很理想。本申请人为了要从源头抓起产品质量，在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱；在研究中发现本方中的人参、麦冬含有大量的皂苷，并且五味子、人参、麦冬都含有多糖，由于皂苷为一类极性较大、结构复杂的化合物，它无紫外吸收，无专一显色剂，再加上皂苷测定经常受糖的干扰，采用常规技术条件测定时，由于紫外检测末端吸收时灵敏度低，噪音影响大，且有干扰峰，很难使用，因此，本申请人经过流动相等测定条件的一系列考察，最终在A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水的梯度洗脱流动相条件下，分别考察了在不同波段典型波长203、210、230、254下的色谱峰情况，结果显示，在203nm下红参、麦冬、五味子及注射用生脉样品色谱峰较多，峰形较好，故选用203nm作为检测波长，得到的指纹图谱能够很好的检测产品质量。所以本发明选定了一系列的成分和方法作为控制、检测产品质量的技术手段，使实施生脉制剂的生产技术有了保障，得到的制剂更加可靠，达到了发明的目的。
为证明利用本发明提供的质量控制方法能更好的控制一种生脉注射剂的产品质量，得到的药物具有有效的效果，申请人进行了一系列实验；实验例1检测指标的研究1、(1)对CCL4急性肝损伤模型小鼠的影响取小鼠45只，随机分为3组，即正常对照组、模型对照组(0.1％ccl410ml/kg)，五味子醇甲105mg/kg+0.1％ccl410ml/kg)每日分别灌胃给药1次，正常对照组、模型对照组给予等体积蒸馏水，连续7日，末次给药后除正常对照组外均腹腔注射0.1％ccl410ml/kg，18h后采血，取血清测定GPT、GOT值。
组别 nGPT GOT正常对照组1562.5±8.01133.2±9.50模型对照组15171.3±10.56 228.5±30.25五味子醇甲15124.2±5.95 176.2±11.52(2)对D-半乳糖胺急性肝损伤模型小鼠的影响取小鼠30只，随机分为3组，每日灌胃给药1次，连续15日，于给药第14日，药后各鼠同时(除正常对照组)外腹腔注射D-半乳糖胺650mg/kg，24h，采血，测定GPT、GOT值。
组别 n GPT GOT正常对照组1049.5±3.21 116.3±8.24模型对照组10288.2±30.17430.5±80.2310180.3±22.15201.4±34.22结果表明，五味子醇甲对于肝损伤具有良好的治疗作用。
2、不同产地五味子药材的五味子醇甲含量产地五味子醇甲含量(％)辽宁 0.6
吉林2.8内蒙古 1.1黑龙江 0.5五味子果实中木脂素总量为18.1％～19.2％，其中醇甲含量较高，经口给予五味子醇甲可导致小鼠死亡，有毒性，但是五味子醇甲具有一定的治疗作用，也是活性成分之一，所以控制五味子醇甲对于药材质量、制剂安全都是十分重要的。上述研究结果表明重视药材产地及种内变异，对于保证和提高药材质量具有重要意义，对于控制成品疗效至关重要。
实验例2指纹图谱的研究1、流动相的选择研究过程中分别考察了(1)甲醇-水(20∶70)，(2)乙腈-水(10∶70)，(3)乙腈-水(梯度洗脱)(4)A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(70∶20)(梯度洗脱)四种流动相系统。结果显示流动相(1)条件下，峰形较差，1小时内出峰较少，仍有不少组分滞留在后出峰；流动相(2)流动相条件下，峰形较差，分离不好；(3)条件下，峰拖尾严重，出峰不完全；流动相(4)条件下，峰形较好，出峰完全且分布均匀，故而最终被选用。
2、检测波长的确定研究中在A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(70∶20)(梯度洗脱)流动相条件下，分别考察了在不同波段典型波长203、210、230、254下的色谱峰情况，结果显示，在203nm下红参、麦冬、五味子及注射用生脉样品色谱峰较多，峰形较好，故最终选用203nm作为检测波长。
3、药材、中间体和注射用生脉指纹图谱的相关性红参药材指纹图谱相似度计算结果对照指S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10纹图谱S1 1.000 0.983 0.942 0.904 0.960 0.942 0.941 0.965 0.933 0.953 0.956S2 0.984 1.000 0.934 0.916 0.938 0.922 0.918 0.934 0.938 0.950 0.987S3 0.943 0.930 1.000 0.981 0.998 0.981 0.980 0.997 0.993 0.984 0.973S4 0.905 0.913 0.978 1.000 0.977 0.994 0.996 0.980 0.979 0.970 0.974S5 0.960 0.939 0.997 0.977 1.000 0.984 0.981 0.995 1.000 0.987 0.994S6 0.942 0.924 0.983 0.994 0.981 1.000 0.996 0.982 0.982 0.972 0.987S7 0.943 0.918 0.981 0.996 0.979 0.996 1.000 0.983 0.980 0.971 0.986S8 0.961 0.934 0.998 0.982 0.995 0.983 0.980 1.000 0.997 0.985 0.993S9 0.932 0.935 0.996 0.976 1.000 0.981 0.982 0.998 1.000 0.986 0.980S10 0.954 0.948 0.983 0.973 0.984 0.975 0.970 0.985 0.985 1.000 0.945
对照指0.956 0.987 0.973 0.974 0.994 0.987 0.986 0.993 0.980 0.945 1.000纹图谱麦冬药材指纹图谱相似度计算结果对照指S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10纹图谱S1 1.0000.9850.9160.9360.9290.9560.9350.9360.9490.9560.942S2 0.9831.0000.9170.9380.9220.9190.9370.9380.9480.9460.957S3 0.9150.9171.0000.9780.9950.9970.9800.9780.9720.9740.986S4 0.9340.9330.9761.0000.9820.9800.9991.0000.9880.9870.993S5 0.9270.9220.9940.9801.0000.9960.9820.9810.9740.9740.988S6 0.9540.9150.9980.9820.9961.0000.9800.9800.9730.9720.987S7 0.9320.9370.9800.9990.9820.9801.0000.9980.9870.9870.993S8 0.9340.9360.9791.0000.9810.9800.9991.0000.9870.9880.972S9 0.9460.9480.9720.9880.9730.9720.9840.9861.0001.0000.960S100.9500.9470.9730.9890.9740.9730.9870.9891.0001.0000.983对照指0.9420.9570.9860.9930.9880.9870.9930.9720.9600.9831.000纹图谱五味子药材指纹图谱相似度计算结果对照指S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10纹图谱S1 1.000 0.941 0.932 0.969 0.932 0.971 0.991 0.973 0.995 0.986 0.984S2 0.941 1.000 0.971 0.995 0.998 0.970 0.971 0.958 0.956 0.959 0.986S3 0.932 0.972 1.000 0.973 0.972 0.998 1.000 0.989 0.989 0.985 0.996S4 0.967 0.995 0.974 1.000 0.997 0.972 0.973 0.960 0.961 0.962 0.985S5 0.933 0.999 0.972 0.997 1.000 0.974 0.974 0.960 0.960 0.961 0.984S6 0.972 0.970 0.998 0.972 0.971 1.000 0.998 0.985 0.986 0.988 0.995S7 0.991 0.971 1.000 0.975 0.978 0.996 1.000 0.989 0.989 0.987 0.997S8 0.973 0.956 0.989 0.960 0.960 0.987 0.989 1.000 0.993 0.991 0.993S9 0.994 0.959 0.989 0.961 0.960 0.988 0.988 0.994 1.000 0.989 0.992S100.986 0.959 0.989 0.962 0.961 0.986 0.989 0.990 0.989 1.000 0.994对照指0.984 0.986 0.996 0.985 0.984 0.995 0.997 0.993 0.992 0.994 1.000纹图谱提取混和物中间体指纹图谱相似度计算结果对照指S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10纹图谱S1 1.000 0.951 0.960 0.961 0.972 0.966 0.957 0.977 0.964 0.993 0.976S2 0.951 1.000 0.965 0.956 0.973 0.964 0.994 0.968 0.970 0.959 0.967S3 0.960 0.967 1.000 0.980 0.999 0.982 0.980 0.997 0.996 0.975 0.973S4 0.963 0.957 0.982 1.000 0.979 0.995 0.998 0.980 0.979 0.962 0.975S5 0.971 0.971 0.999 0.979 1.000 0.981 0.979 0.997 1.000 0.986 0.982S6 0.969 0.963 0.982 0.994 0.981 1.000 0.997 0.982 0.983 0.979 0.989S7 0.957 0.994 0.980 0.998 0.980 0.997 1.000 0.978 0.980 0.978 0.988S8 0.976 0.966 0.997 0.980 0.998 0.983 0.980 1.000 0.999 0.965 0.995
S9 0.965 0.970 0.999 0.977 1.000 0.982 0.980 0.999 1.000 0.976 0.984S100.994 0.959 0.975 0.961 0.986 0.979 0.977 0.965 0.976 1.000 0.976对照指0.976 0.967 0.973 0.975 0.982 0.989 0.988 0.995 0.984 0.976 1.000纹图谱注射用生脉指纹图谱相似度计算结果对照指S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9S10纹图谱S1 1.000 0.987 0.993 0.993 0.986 0.990 0.991 0.993 0.996 0.998 0.996S2 0.986 1.000 0.996 0.996 0.988 0.994 0.993 0.994 0.993 0.989 0.996S3 0.994 0.996 1.000 0.996 0.992 0.996 0.995 0.995 0.990 0.991 0.997S4 0.992 0.996 0.996 1.000 0.989 0.992 0.993 0.996 0.992 0.994 0.998S5 0.985 0.988 0.992 0.989 1.000 0.990 0.990 0.989 0.984 0.986 0.994S6 0.990 0.994 0.997 0.992 0.990 1.000 0.997 0.995 0.989 0.986 0.995S7 0.991 0.992 0.996 0.993 0.991 0.998 1.000 0.996 0.99 0.989 0.997S8 0.992 0.994 0.994 0.996 0.989 0.996 0.996 1.000 0.992 0.995 0.999S9 0.996 0.991 0.990 0.993 0.984 0.989 0.990 0.994 1.000 0.997 0.996S100.997 0.987 0.991 0.994 0.985 0.988 0.986 0.993 0.998 1.000 0.998对照指0.996 0.996 0.997 0.998 0.994 0.995 0.997 0.999 0.996 0.998 1.000纹图谱结果显示，药材、中间体浸膏和成品粉针三者间有良好的相关性，本申请人研究的生脉指纹图谱能很好的控制产品质量。
具体的实施方式本发明的实施例1一种生脉注射剂的质量控制方法，主要包括性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目。
1、性状该中药注射剂中的注射液为无色至棕黄色的澄明液体；粉针为为淡黄色至棕黄色的粉末。
2、鉴别(1)对于红参的鉴别技术方法1采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，展开剂可以为氯仿、丙酮、甲酸、水、甲醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、冰醋酸、正丁醇中的一种或一种以上按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％茚三酮乙醇等溶液显色的方法。
方法2采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，一般使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇、磷酸中的一种或一种以上品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203~350nm范围内。
(2)对于麦冬的鉴别技术方法1采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、氯仿、丙酮、正丁醇、二乙胺、、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法。
方法2采用高效液相色谱法或蒸发光散射与高效液相色谱联用法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，一般使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203~600nm范围内。
(3)对于五味子的鉴别技术方法1采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，展开剂可以为正己烷、醋酸乙酯、石油醚、甲酸乙酯、甲酸、二甲苯、甲苯、环己烷的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以变色酸硫酸溶液、茴香醛硫酸溶液、碘蒸气、10％磷钼酸乙醇溶液等溶液显色的方法。
方法2采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，一般使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙腈、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203~600nm范围内。
3、检查包括pH值、装量差异、澄明度、无菌、不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、重金属、砷盐、农药残留等全部项目或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，钾离子、重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法；药品中的技术要求为(1)pH值在2~10之间，或其中部分范围；(2)重金属不得过百万分之二十；(3)砷盐不得过百万分之二；(4)有机氯农药残留总量不得过百万分之一。
4、指纹图谱采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、0.1~10％的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷中的一种或一种以上品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以梯度或等度洗脱的方法分离，检测波长在200~600nm范围内，以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、红参药材、麦冬皂苷D、麦冬皂甙B、麦冬药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素中全部或部分品种作为特征指纹峰或内标物峰。
5、含量测定方法1以可见紫外分光光度法测定本品中的总皂苷含量，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，测定波长为400~600nm中某一波长，一般采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为Rg1。
方法2以可见紫外分光光度法测定本品中的总多糖含量，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，测定波长为400~600nm中某一波长，一般采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为葡萄糖。
方法3以高效液相色谱法测定本品中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇、磷酸中的一种或一种以上品种溶剂在合适比例条件下为流动相，检测波长在203~350nm范围内。
方法4采用高效液相色谱法测定本品中麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以以乙腈、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在合适比例条件下为流动相，检测波长在203~600nm范围内。
方法5采用高效液相色谱法测定本品中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙腈、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在合适比例条件下为流动相，检测波长在203~600nm范围内。
本发明的实施例2一种生脉注射剂的质量控制方法，主要包括性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目。
1、性状该中药注射剂中的注射液为无色至棕黄色的澄明液体；粉针为为淡黄色至棕黄色的粉末。
2鉴别(1)对于红参的鉴别技术采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为1ul，以人参皂苷Rb1、Re、Rg1中全部或部分品种作为对照品，直接取样，展开剂为氯仿、甲醇、水按照一定比例配制而成，检视条件为喷以2~30％硫酸乙醇显色后紫外等下检视的方法。
(2)对于麦冬的鉴别技术采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1ul，以麦冬对照药材作为对照品，样品前处理包括直接取样，展开剂为氯仿、丙酮按照一定比例配制而成，检视条件为喷以2~30％硫酸乙醇显色后紫外等下检视的方法液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法。
(3)对于五味子的鉴别技术采用薄层色谱法，使用GF254薄层板，点样量为1ul之间某一体积，以五味子醇甲作为对照品，直接取样，展开剂为石油醚、甲酸乙酯、甲酸的上层液，检视条件为紫外光灯下254nm检视。
3、检查包括pH值、装量差异、澄明度、无菌、不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、重金属、砷盐、农药残留等全部项目或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，钾离子、重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法；药品中的技术要求为(1)pH值在2~10之间，或其中部分范围；(2)重金属不得过百万分之二十；(3)砷盐不得过百万分之二；(4)有机氯农药残留总量不得过百万分之一。
4、指纹图谱采用高效液相色谱法，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水为流动相，以梯度洗脱的方法分离，检测波长为203nm，以人参皂苷Rg1作为特征指纹峰或内标物峰。
5、含量测定方法1以高效液相色谱法测定本品中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水在合适比例条件下为流动相，检测波长为203nm。
方法2采用高效液相色谱法测定本品中五味子醇甲，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水在合适比例条件下为流动相，检测波长为250nm。
本发明的实施例3一种生脉注射剂的质量控制方法，主要包括性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目。
1、性状该中药注射剂中的注射液为无色至棕黄色的澄明液体；粉针为为淡黄色至棕黄色的粉末。
2鉴别(1)对于红参的鉴别技术采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为1ul，以人参皂苷Rb1、Re、Rg1中全部或部分品种作为对照品，直接取样，展开剂为氯仿、甲醇、水按照一定比例配制而成，检视条件为喷以2~30％硫酸乙醇显色后紫外等下检视的方法。
3、检查包括pH值、装量差异、澄明度、无菌、不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、重金属、砷盐、农药残留等全部项目或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，钾离子、重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法；药品中的技术要求为(1)pH值在2~10之间，或其中部分范围；(2)重金属不得过百万分之二十；(3)砷盐不得过百万分之二；(4)有机氯农药残留总量不得过百万分之一。
4、指纹图谱采用高效液相色谱法，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇-水为流动相，以等度洗脱的方法分离，检测波长为203nm，以人参皂苷Re作为特征指纹峰或内标物峰。
5、含量测定方法1以高效液相色谱法测定本品中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水在合适比例条件下为流动相，检测波长为203nm。
权利要求
1.一种生脉注射剂的质量控制方法，主要包括性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目，其特征在于它是将红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3、麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖、五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素及五味子酯甲、五味子酯乙中的全部或部分品种作为该中药注射剂的质量控制的检测指标。
2.按照权利要求1所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于将人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、红参对照药材、麦冬皂苷D、麦冬皂甙B、麦冬对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子对照药材中的全部或部分品种作为该中药注射液的鉴别方法、含量测定方法和指纹图谱研究的检测指标。
3.按照权利要求1所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于该中药注射剂中的注射液为无色至棕黄色的澄明液体；粉针为淡黄色至棕黄色的粉末。
4.按照权利要求1或2所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于红参的鉴别方法采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为氯仿、丙酮、甲酸、水、甲醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、冰醋酸、正丁醇中的一种或一种以上按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％茚三酮乙醇等溶液显色的方法；对于麦冬的鉴别方法采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、氯仿、丙酮、正丁醇、二乙胺、、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法；对于五味子的鉴别方法采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，展开剂可以为正己烷、醋酸乙酯、石油醚、甲酸乙酯、甲酸、二甲苯、甲苯、环己烷的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以变色酸硫酸溶液、茴香醛硫酸溶液、碘蒸气、10％磷钼酸乙醇溶液溶液显色的方法。
5.按照权利要求4所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于红参的鉴别方法采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇、磷酸中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以红参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203～350nm范围内；对于麦冬的鉴别方法采用高效液相色谱法或蒸发光散射与高效液相色谱联用法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以麦冬对照药材、麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203～600nm范围内；对于五味子的鉴别方法采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙腈、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规合适的比例条件下为流动相，以五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种作为对照品，检测波长在203～600nm范围内。
6.按照权利要求1、2或3所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于检查包括pH值、装量差异、澄明度、无菌、不溶性微粒、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、重金属、砷盐、农药残留等全部项目或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，钾离子、重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱或电感耦合等离子质谱法进行测定的方法；药品中的技术要求为(1)pH值在2～10之间，(2)重金属不超过百万分之二十，(3)砷盐不超过百万分之二，(4)有机氯农药残留总量不超过百万分之一。
7.按照权利要求1或2所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于指纹图谱采用高效液相色谱法，样品前处理包括直接取样以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、0.1～10％的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以梯度或等度洗脱的方法分离，检测波长在200～600nm范围内，以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、红参药材、麦冬皂苷D、麦冬皂甙B、麦冬药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素中全部或部分品种作为特征指纹峰或内标物峰。
8.按照权利要求1或2所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于含量测定以可见紫外分光光度法测定本品中的总皂苷含量，样品前处理包括直接取样以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，测定波长为400～600nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为Rg1；对于含量测定也可以以可见紫外分光光度法测定本品中的总多糖含量，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，测定波长为400～600nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为葡萄糖；对于含量测定还可以以高效液相色谱法测定本品中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷-Rh2、人参二醇、人参三醇、人参皂甙Rb1、人参皂甙Rc、人参皂甙Rb2、人参皂甙Rd、焦谷氨酸、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇、磷酸中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在203～350nm范围内。对于含量测定也可以采用高效液相色谱法测定本品中麦冬皂苷D、鲁斯可皂甙元、薯蓣皂甙元、麦冬皂甙B、假叶树皂甙元、β-谷甾醇中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在203～600nm范围内。对于含量测定还可以采用高效液相色谱法测定本品中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、及五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙腈、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在203～600nm范围内。
9.按照权利要求4或5所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于红参的鉴别采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为1ul，以人参皂苷Rb1、Re、Rg1中全部或部分品种作为对照品，直接取样，展开剂为氯仿、甲醇、水按照常规比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外下检视的方法；对于麦冬的鉴别采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1ul，以麦冬对照药材作为对照品，样品前处理包括直接取样，展开剂为氯仿、丙酮按照常规比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外下检视的方法液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液溶液显色的方法；对于五味子的鉴别采用薄层色谱法，使用GF254薄层板，点样量为1ul之间某一体积，以五味子醇甲作为对照品，直接取样，展开剂为石油醚、甲酸乙酯、甲酸的上层液，检视条件为紫外光灯下254nm检视。
10.按照权利要求7所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于指纹图谱可以采用高效液相色谱法，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水为流动相，以梯度洗脱的方法分离，检测波长为203nm，以人参皂苷Rg1作为特征指纹峰或内标物峰。
11.按照权利要求8所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于对于含量测定以高效液相色谱法测定本品中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以乙腈、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长为203nm；也可以采用高效液相色谱法测定本品中五味子醇甲，样品前处理为直接取样，使用C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长为250nm。
全文摘要
本发明提供一种生脉注射剂的质量控制方法，主要包括性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目，这种控制方法向相关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、具体的技术方法等等；以便更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使用本发明后，能够保证药物制成品的质量，从生产开始、选用原材料，到每一个生产过程的工艺步骤均必须严格按照工艺规程执行，才有可能保证产品的质量符合国家标准的要求。
文档编号G01N30/02GK1621836SQ20041008151
公开日2005年6月1日申请日期2004年12月13日优先权日2004年12月13日
发明者于文勇申请人:贵阳云岩西创药物科技开发有限公司

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生脉注射剂的质量控制方法