专利名称：银杏叶及其提取物的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种中药材的质量控制方法，具体涉及银杏叶及其提取物的质量控制方法。
背景技术：
银杏叶为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶，秋季叶尚绿时采收。性味:甘、苦、涩、平。具有活血化瘀，通络止痛、敛肺平喘，化浊降脂的功效。目前2010版《中国药典》银杏叶质量标准中规定:总黄酮醇苷是通过HPLC-UV法测定酸水解后槲皮素、山柰酚和异鼠李素的含量来控制的，该方法不仅前处理繁琐，耗时长，而且不能充分反映黄酮类活性成分；现有技术银杏叶中的萜内酯成分是以HPLC-ELSD法测定，该方法供试品溶液制备需经酸性氧化铝柱前处理，同样处理复杂；且没有银杏酚酸类成分的质量控制方法也未能全面检测银杏叶的活性成分。因此，为了充分控制好银杏叶药材及其提取物及其制剂的临床安全性，维护患者的利益，很有必要在现有技术的基础之上研究设计出能准确全面检测银杏叶及其制剂有效成分的检测方法。
发明内容
发明目的:本发明的目的是解决现有技术的不足，经过大量实验筛�。捎贸咝б合嗌准觳猓眉觳夥椒ǹ梢酝奔觳庖右吨械幕仆�、萜内酯和酚酸3类成分，共24种活性化合物。该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确地评价银杏叶药材及其提取物与制剂的质量，对控制质量和保证疗效具有重要意义。技术方案:为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为:一种银杏叶的质 量控制方法，其包括以下步骤:(I)样品溶液的制备精密称取银杏叶或银杏叶提取物，加入甲醇，超声或加热回流提�。耍⌒艘汗�0.22 μ m滤膜，得样品溶液；(2)对照品溶液的制备分别精密称定表没食子酸儿茶素、儿茶素、表儿茶素、芦丁、异槲皮苷、白果内酯、银杏内酯C、槲皮素3-0-α -L-葡萄糖基-β -D-1，2_鼠李糖苷、槲皮苷、银杏内酯B、银杏内酯Α、木犀草素、槲皮素、疗菜素、山柰酹、异鼠李素、穗花杉双黄酮、去甲银杏双黄酮、芫花素、银杏双黄酮、异银杏双黄酮、金松双黄酮、白果新酸、白果酸24种对照品置于量瓶中，用浓度为709Γ80%甲醇溶解稀释，制得各单一对照品储备液；然后分别量取不同体积单一对照品溶液，混合稀释制成系列浓度混合对照品溶液，于4°C保存，备用；(3)液相色谱图的获取将步骤(I)制备得到的样品溶液和步骤(2)制备得到的混合对照品溶液，分别进行超高效液相色谱检测，获得样品和对照品的色谱图，进行定性定量分析；所用超高效液相色谱参数设置如下:
仪器:WatersACQUITY UPLC 系统；固定相:WatersACQUITY BEH C18 色谱柱；流动相:0.1°/Γ2%浓度的甲酸水溶液和乙腈；梯度洗脱；流速:0.4 0.5mL/min ;进样量:lyL;检测器:Xevo TQ检测器；离子化模式:ESr/ESI+ ;检测方式:多反应检测；毛细管电压:3.0kV ;离子源温度:150°C ;脱溶剂气温度:5500C ;脱溶剂气流量:1000L;锥孔气流量:50L.h-1 ;碰撞气流量:0.15mL.mirf1。作为优选方案，以上所述的银杏叶的质量控制方法，步骤(3)所述的梯度洗脱程序如表I所示:表I梯度洗脱 程序表
权利要求
1.一种银杏叶的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)样品溶液的制备 精密称取银杏叶或银杏叶提取物，加入甲醇，超声或加热回流提�。耍⌒艘汗�0.22 μ m滤膜，得样品溶液； (2)对照品溶液的制备分别精密称定表没食子酸儿茶素、儿茶素、表儿茶素、芦丁、异槲皮苷、白果内酯、银杏内酯C、槲皮素3-0-a-L-葡萄糖基-β-D-l，2-鼠李糖苷、槲皮苷、银杏内酯B、银杏内酯Α、木犀草素、槲皮素、芹菜素、山柰酚、异鼠李素、穗花杉双黄酮、去甲银杏双黄酮、芫花素、银杏双黄酮、异银杏双黄酮、金松双黄酮、白果新酸、白果酸24种对照品置于量瓶中，用浓度为709Γ80%甲醇溶解稀释，制得各单一对照品储备液；然后分别量取不同体积单一对照品溶液，混合稀释制成系列浓度混合对照品溶液，于4°C保存，备用； (3)液相色谱图的获取 将步骤(1)制备得到的样品溶液和步骤(2)制备得到的混合对照品溶液，分别进行超高效液相色谱检测，获得样品和对照品的色谱图，进行定性定量分析； 所用超高效液相色谱参数设置如下: 仪器:Waters ACQUITY UPLC 系统； 固定相:Waters ACQUITY BEH C18 色谱柱； 流动相:0.1°/Γ2%浓度的甲酸水溶液和乙腈；梯度洗脱；流速:0.4 0.5 mL/min ;进样量:1 μ L ； 检测器:Xevo TQ检测器； 离子化模式:ESI—/ESI+;检测方式:多反应检测；毛细管电压:3.0 kV;离子源温度:150。。;脱溶剂气温度:5500C ;脱溶剂气流量:1000 L.h-1 ;锥孔气流量:50 L.h-1 ;碰撞气流量:0.15 mL.mirf1。
2.根据权利要求1所述的银杏叶的质量控制方法，其特征在于， 步骤(3)所述的梯度洗脱程序如表I所示: 表1梯度洗脱程序表
3.根据权利要求1所述的银杏叶的质量控制方法，其特征在于， 步骤(1)样品溶液的制备方法为:精密称取银杏叶或银杏叶提取物，加入6-10倍浓度为70-80%的甲醇，超声或加热回流提取2 3次，每次1-2小时，合并提取液，过滤，取续滤液过0.22 μπι滤膜，得样品溶液。
4.根据权利要求1所述的银杏叶的质量控制方法，其特征在于，步骤(1)所述的银杏叶提取物为银杏叶的水提取物或者乙醇提取物。
全文摘要
本发明公开了一种银杏叶及其提取物的质量控制方法，本发明通过大量实验筛�。捎贸咝б合嗌准觳猓眉觳夥椒ǹ梢酝奔觳庖右都捌涮崛∥镏械幕仆�、萜内酯和酚酸3类成分，共24种活性化合物。实验结果表明，该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确地评价银杏叶药材及其提取物与制剂的质量，对控制质量和保证临床疗效具有重要意义。
文档编号G01N30/02GK103175912SQ20131004671
公开日2013年6月26日 申请日期2013年2月6日 优先权日2013年2月6日
发明者段金廒, 钱大玮, 尚尔鑫, 唐于平, 宿树兰 申请人:南京中医药大学
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