专利名称：一种快速乳酸检测卡的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种乳酸检测卡，尤其是涉及一种测定血液中乳酸含量的快速乳酸检 测卡。
背景技术：
乳酸(lactic acid)是糖酵解途径的终产物。当机体缺氧时，细胞通过无氧代谢 生成ATP。为了能再生成足够的NAD，使糖代谢作用得以继续，乳酸脱氢酶通过将糖酵解途 径产生的丙酮酸还原为乳酸，使NADH氧化。在组织缺氧期间肌肉累积的乳酸释放在血循环 中，通过肝脏代谢。血清乳酸的正常值为1.0士0. 5mmol/L，小于2mmol/L均可视为正常，大于此值即
可诊断为“高乳酸血症”。乳酸升高见于糖尿病酮症酸中毒、肾衰竭、循环衰竭等缺氧和低灌 注状态。乳酸酸血症的严重程度常提示病症的严重性，当乳酸水平10. 5mmol/L时，存活率 仅有30%。对于血气分析无法解释的代谢性酸中毒及阴离子隙升高，必须考虑检测乳酸，吸 人大量丙二醇导致乳酸酸中毒。乳酸广泛运用于临床医学，产房现场检测，及时发现和诊断新生儿宫内缺氧；急 诊现场、急诊病人的血气检测；手术现场，麻醉病人的氧气供应及酸中毒监测的指标；病床 前，高能输液的酸中毒症监测及糖原性疾病患者的代谢监测；医院内，高血压及糖尿病等慢 性病人的运动监护。同时广泛应用于体育界(运动医学)判断个性化的体内乳酸代谢状 态，科学选拔体育人才；运动中多采点间隔性乳酸测定，为科学合理的强度训练提供重要依 据。指导练就选手体内耐乳酸环境，为提高运动成绩提供客观条件。近年来，也应用于康复 医学。乳酸测定方法有化学法和酶法，化学法准确性差，操作烦杂，不能自动化。酶法有 脱氢酶法和氧化酶法，脱氢酶法紫外法和偶连四氮唑盐的比色法，脱氢酶法还存在诸多问 题，不能解决。如用乳酸脱氢酶将乳酸氧化成丙酮酸的同时NAD还原成NADH，但需要偶联 ALT和谷氨酸将底物丙酮酸除去以加速反应，或偶联PMS和NBT用比色测定，但反应无终点。 乳酸氧化酶法灵敏度高，精确度和准确性均很好，适合自动分析，但该方法存在的问题是需 要使用大型血液生化分析仪或紫外分光光度计等特殊装置，测定所需血量较多、时间较长， 价格昂贵，适合在大型医院或实验室中进行。近年出现了不需生化分析仪等特殊装置的乳酸检测试纸，例如专利号为 03129094. 9的中国专利公开了一种全血乳酸浓度检测试纸，用波长590nm的光源照射颜色 区，用光电转换器接收来自颜色区的反射光，反射光的强度与颜色的深浅成反比，而颜色的 深浅反应被测血液样品中乳酸的浓度。专利号为200410048302. 2的中国专利公开了一种 全血乳酸检测试条，是一种电化学生物传感器，其以一绝缘基片做基底，在基底上纵向有一 对互相平行的金属薄膜导电带，两导电带的一端为接入端，在两导电带上覆有隔离片；隔离 片与基底同宽，但短于基底，以露出两接入端；隔离片上有一个槽，并露出部分绝缘基片和 其上的两部分导电带，暴露的两部分导电带形成工作电极和对电极，在工作电极和对电极上覆设有反应试剂层，隔离片上固接一上绝缘基片，其与隔离片同宽，上绝缘基片将隔离片 上的槽覆盖，围成一两端敞口的毛细管腔体，腔体为传感器的反应区。该发明的反应区在不 需要人工干预的情况下即可固定被检测血液的体积，并使微量血液快速进入与反应试剂反 应，在短时间内测出血液中乳酸的含量。这些乳酸检测试纸虽然不需要配套特殊装置，但仍 需要配套小型的光学检测或传感检测装置，生产成本较高，价格较昂贵
发明内容
本发明所要解决的技术问题是为病人居家、小型诊所提供一种无需依赖任何装 置、方便、快速、廉价测定血液乳酸含量的快速乳酸检测卡。本发明为解决其技术问题所采取的技术方案是一种快速乳酸检测卡，包括壳 体、试纸系统、溶液体系、加液机构，其特征是壳体包括上盖和下盖，壳体上设有采血孔， 壳体内设有接收垫；试纸系统包括一套置于壳体腔室内的引液试纸、反应试纸与显色试纸； 溶液体系中所含溶液的主要成分是过氧化物酶溶液。为了使在测量结束的时候能够显示结果，所述壳体近顶端处设有结束指示孔，指 示孔下方的显色试纸上含有水溶性终点指示剂。为了能够过滤全血得到血浆，所述采血孔上覆盖有至少两层过滤网。所述接收垫有两个工作位置，当接收垫处于采血位时，接收垫位于采血孔的正下 方；当接收垫处于层析位时，所述接收垫位于引液试纸及反应试纸的下方，其两端承接于两 侧试纸，且重叠0. 5mm 1. 5mm ；所述接收垫定量吸收的血浆体积彡10 μ L。所述的反应试纸上包含有乳酸氧化酶，乳酸氧化酶的浓度为> 2U/cm2。为了能够方便读出所要的结果，所述显色试纸上方的上壳体设有观察窗，观察窗 上标设有刻度线，并有刻度标识。所述的过氧化物酶浓度彡0. 6U/mL。为了溶液体系用起来方便，所述的溶液体系置于壳体腔内或者壳体腔外。为了方便加液，所述的加液机构包括在壳体内设有带针刺部的滑动件。由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点1、本发明结合了血液过滤、酶反应和层析显色技术，因此可以实现对血液中的乳 酸的即时测定。2、本发明结构简单，无须配套仪器使用，使用方便，成本低，符合POCT(point of care testing，即时检测)的应用趋势。
图1是本发明实施例一的结构示意图；图2是本发明实施例一的后视图；图3是本发明实施例一在打开上盖后的示意图；图4是本发明实施例一中的检测结果图。1、上盖2、采血孔3、溶液孔4、观察窗5、结束指示孔6、下盖7、滑动件8、接收垫9、引液试纸10、反应试纸11、显色试纸
具体实施例方式下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述实施例一如图1、图2和图3所示，一种快速乳酸检测卡，包括壳体、试纸系统、溶液体系、 加液机构，壳体包括上盖1和下盖6，壳体上设有采血孔2、溶液孔3和结束指示孔5，壳 体内 设有接收垫8和带尖刺的滑动件7 ；试纸系统包括一套置于壳体腔室内的引液试纸9、反应 试纸10与显色试纸11 ；溶液体系中所含溶液的主要成分是过氧化物酶溶液，过氧化物酶浓 度> 0.6U/mL，所述溶液体系可置于壳体腔室内或壳体腔室外。在壳体内设有一带有针刺 部的滑动件7，拉动滑动件7刺破溶液包，释放溶液与引液试纸9接触或者加一个溶液注入 孔，将溶液管中的溶液通过注入孔注入，与弓I液试纸9接触。所述采血孔2上覆盖有至少两层过滤网，可过滤全血得到血浆；对应于显色试纸 11上方的上壳体设有观察窗4，观察窗4上标设有刻度线，并有刻度标识；所述壳体近顶端 处设有结束指示孔5，结束指示孔5下方的显色试纸11上含有水溶性终点指示剂，当显色试 纸11显色完毕后，剩余溶液层析至结束指示孔5处，结束指示孔5处将出现指示剂颜色，表 明检测已经结束并可以进行结果读取。所述接收垫8设有两个工作位，采血位和层析位，当接收垫8处于采血位时，接收 垫8位于采血孔2的正下方；当接收垫8处于层析位时，所述接收垫8位于引液试纸9及反 应试纸10的下方，其两端承接于两侧试纸，且重叠1mm，该接收垫8所吸收的血浆体积定量 为 15μ L ；所述反应试纸10的制备方法为按下表配方配制溶液，将试纸蘸取酶溶液，反复 蘸取后，40°C干燥。 所述显色试纸11的制备方法为采用溴化氢或者⑶I活化载体，待共价固定的试 剂优选N-烷基苯胺类物质，固定后该试剂不随展开液扩散，浓度优选2-20mmol/L。显色系 统还包括另一个组分苯并噻唑酮腙类，浓度优选0. 01-lmg/mL。快速乳酸检测卡的工作过程为当全血滴加到壳体上的采血孔2时，采血孔2可将 全血过滤得到血浆；血浆被接收垫8定量吸收；溶液盒中的溶液释放，引液试纸9通过毛细 作用将溶液依次层析至接收垫8、反应试纸10和显色试纸11 ；显色试纸11呈现一定高度的 蓝紫色色带，通过色带高度指示全血中乳酸的浓度。快速乳酸检测卡的使用方法为①平放置检测卡，用采血针将手指刺破，滴一到两滴血到采血孔2中，血液没过采 血孔2的刻度线，接收垫8位于采血孔2的正下方，定量采集15 μ L的血浆；②等待2分钟，拉动拨块，将接收垫8置于层析位，启动反应；③等待10-12分钟，当结束指示孔5中指示剂变绿时反应结束；
④读出显色高度，在结果对照表中找出相应的乳酸浓度。人基质校准血清乳酸检测结果，如下表和图4所示
权利要求
一种快速乳酸检测卡，包括壳体、试纸系统、溶液体系、加液机构，其特征是壳体包括上盖(1)和下盖(6)，壳体上设有采血孔(2)、溶液孔(3)和结束指示孔(5)，壳体内设有接收垫(8)；试纸系统包括一套置于壳体腔室内的引液试纸(9)、反应试纸(10)与显色试纸(11)；溶液体系中所含溶液的主要成分是过氧化物酶溶液。
2.根据权利要求1所述的快速乳酸检测卡，其特征是所述壳体近顶端处设有结束指 示孔(5)，结束指示孔(5)下方的显色试纸(11)上含有水溶性终点指示剂。
3.根据权利要求1所述的快速乳酸检测卡，其特征是所述采血孔(2)上覆盖有至少 两层过滤网。
4.根据权利要求1所述的快速乳酸检测卡，其特征是所述接收垫(8)设有两个工作 位，采血位和层析位，当接收垫(8)处于采血位时，接收垫(8)位于采血孔(2)的正下方；当 接收垫(8)处于层析位时，所述接收垫(8)位于引液试纸(9)及反应试纸(10)的下方，其两 端承接于两侧试纸，且重叠0. 5mm 1. 5mm ；所述接收垫(8)定量吸收的血浆体积彡10 u L。
5.根据权利要求1所述快速乳酸检测卡，其特征在于，所述的反应试纸(10)上包含有 乳酸氧化酶成分。
6.根据权利要求5所述的快速乳酸检测卡，其特征是所述的乳酸氧化酶的浓度为 彡 2U/cm2。
7.根据权利要求1所述的快速乳酸检测卡，其特征是显色试纸(11)上方的上壳体设 有观察窗⑷。
8.根据权利要求1所述快速乳酸检测卡，其特征是所述的过氧化物酶浓度>0. 6U/mL0
9.根据权利要求1所述的快速乳酸检测卡，其特征是所述的溶液体系置于壳体腔内 或者壳体腔外。
10.根据权利要求1所述的快速乳酸检测卡，其特征是所述的加液机构包括在壳体内 设有带针刺部的滑动件(7)。
全文摘要
本发明涉及一种快速乳酸检测卡，包括壳体、试纸系统、溶液体系、加液机构，壳体包括上盖和下盖，壳体上设有采血孔、溶液孔和结束孔，壳体内设有接收垫；试纸系统包括一套置于壳体腔室内的引液试纸、反应试纸与显色试纸；溶液体系中所含溶液的主要成分是过氧化物酶溶液。本发明结合了血液过滤、酶反应和层析显色技术，因此可以实现对血液中的乳酸的即时测定，结构简单，无须配套仪器使用，使用方便，成本低，符合POCT(point of care testing，即时检测)的应用趋势。
文档编号G01N33/52GK101865851SQ20101012520
公开日2010年10月20日 申请日期2010年3月16日 优先权日2010年3月16日
发明者邹丽萍, 顾瑜 申请人:苏州市玮琪生物科技有限公司
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