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专利名称：马来酸酐—苯乙烯共聚物试管的活化方法
技术领域：
本发明公开了马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化方法，属于生物化学领域。
马来酸酐——苯乙烯共聚物试管主要应用于固相免疫分析中，它的活化是指把抗体或其它蛋白质、多肽类物质以共价结合方式，固定到聚苯乙烯试管(板)表面的技术；即在试管壁上引进活性基团，使蛋白质或抗体与其共价结合，达到固定抗体的目的。目前已知的方法主要是在试管壁植入一种氨基聚苯乙烯载体，通过双功能基团偶联剂使抗体与管壁共价结合，从而固定抗体；其不足是共聚物本身活性不高，与蛋白质、抗体结合能力较弱；已不能满足实际需要。
本发明的目的在于提供一种方法简便、经活化的试管与蛋白质、抗体结合能力强、应用范围广的马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化方法。
本发明的目的是这样实现的本发明由以下步骤组成(1)马来酸酐——苯乙烯共聚物溶液的制备；将马来酸酐和苯乙烯按2∶1分子比混合后，加入过氧化苯甲酰作催化剂，加入比例为马来酸酐重量的0.2％；置于75～80℃水浴中加热，待形成粘稠状物质并沸腾后立即转入冰水浴中，凝成淡黄色固体；冷却后加入相当于苯乙烯体积8倍的丁酮使之充分溶解，再加入乙腈溶液进行稀释，调至丁酮浓度达15～20％，即得共聚物溶液；(2)涂布聚苯乙烯塑料试管取共聚物溶液，注入聚苯乙烯试管中，静置10秒钟后吸出全部溶液，涂布后的试管管壁留有一层均匀的共聚物膜，室温条件下干燥；(3)马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化在涂布后的试管内加入0.1～1.0mol/L氢氧化钠溶液，室温条件下放置6～24小时，弃去管内的溶液，用蒸馏水将试管清洗5次，在50℃条件下烘干，马来酸酐——苯乙烯共聚物试管即被活化。
使用上述活化方法制得的马来酸酐——苯乙烯共聚物试管，由于氢氧化钠溶液的加入，使共聚物由疏水性转变为亲水性，提高了与蛋白质、抗体结合的能力；活化后的共聚物试管结合蛋白质、抗体的能力由活化前的4.0ug/管提高到了131ug/管，使活化率提高了30倍以上；制得的试管在4℃条件下可保存3个月，-20℃条件下可存放3年；并可应用于多克隆、单克隆、亲合素等多种抗体及蛋白质的固相免疫分析，具有应用范围广的优点。
权利要求
1.一种马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化方法，其特征在于由以下步骤组成(1)马来酸酐——苯乙烯共聚物溶液的制备将马来酸酐和苯乙烯按2∶1分子比混合后，加入过氧化苯甲酰作催化剂，加入比例为马来酸酐重量的0.2％；置于75～80℃水浴中加热，待形成粘稠状物质并沸腾后立即转入冰水浴中，凝成淡黄色固体；冷却后加入相当于苯乙烯体积8倍的丁酮使之充分溶解，再加入乙腈溶液进行稀释，调至丁酮浓度达15～20％，即得共聚物溶液；(2)涂布聚苯乙烯试管取共聚物溶液，注入聚苯乙烯试管中，静置10秒钟后吸出全部溶液，涂布后的试管管壁留有一层均匀的共聚物膜，室温条件下干燥；(3)马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化在涂布后的试管内加入0.1～1.0mol/L氢氧化钠溶液，室温条件下放置6～24小时，弃去管内的溶液，用蒸馏水将试管清洗5次，在50℃条件下烘干，马来酸酐——苯乙烯共聚物试管即被活化。
全文摘要
本发明公开了马来酸酐—苯乙烯共聚物试管的活化方法，属于生物化学领域。解决了以往活化方法中存在的共聚物与抗体结合能力弱，活化率低的问题。其特征是将制备好的马来酸酐—苯乙烯共聚物溶液涂布于聚苯乙烯试管上，在涂布后的试管内加入氢氧化钠溶液，室温条件下放置后，弃去管内的溶液，经洗涤、烘干，马来酸酐—苯乙烯共聚物试管即被活化。采用上述活化方法制得的马来酸酐—苯乙烯试管，活化率较活化前提高了30倍以上；并可应用于多种抗体及蛋白质的固相免疫分析，具有应用范围广的优点。
文档编号G01N33/53GK1167262SQ9710075
公开日1997年12月10日 申请日期1997年2月21日 优先权日1997年2月21日
发明者汪寅章, 黄兆坚, 陆思珍 申请人:中国人民解放军总医院