专利名称：一种食用油脂过氧化值检测组合试剂及其检测方法
技术领域：
本发明涉及一种过氧化值的检测方法，尤其涉及一种食用油脂过氧化值检测组合试剂及其检测方法。
背景技术：
食用油脂是人类膳食重要组成部分，是人类三大营养素之一。油脂在贮存中由于受空气、光线、温度等因素影响，而易发生自身氧化，从而产生各种过氧化物。过氧化值是衡量油脂中过氧化物含量的重要指标，在食品卫生检验中，过氧化值是一项重要的卫生指标。其中最主要的是氢过氧化物，另外还有环状过氧化物，过氧基键台的聚合体，过氧化氢等。过氧化值表示油脂自动氧化初期形成的氢过氧化物的数量，其值愈高，表明脂肪酸进行氧化的程度愈强。当过氧化值开始明显升高时，表明了油脂大量被氧化，油脂的稳定性降低，脂肪酸发生酸败。油脂氧化后所产生的过氧化物还会继续被氧化分解而造成油脂的酸败变质。由于油脂氧化后的过氧化物十分复杂，要直接测定其具体含量亦很困难。所以目前测定油脂过氧化物的方法大多都是测定其间接含量，即利用过氧物具有氧化性的特点，通过用某种还原剂如氢碘酸(HI)等，去还原过氧化物，最后根据还原剂被氧化的量来间接表示油脂中过氧化物的含量。现有对过氧化值进行检测的方法有以下几种滴定法根据过氧化物在酸性(冰醋酸)条件下可以氧化碘化钾，从而析出碘，因硫代硫酸钠能与碘进行定量反应，所以可以用硫代硫酸钠的标准溶液滴定析出的碘，并根据消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积来计算油脂的过氧化值。由于所用KI试剂的还原性、所析出碘的挥发性滴定终点的不明显性和加指示剂迟早对测定结果的影响，使此法操作既繁琐又不易掌握。分光光度比色法根据油脂中过氧化物氧化I-生成12从而使溶液着色，最后通过在410nm波长下测定样液吸光值并与碘标准系列溶液吸光值比较定量。试纸法试纸法即制备碘化钾试纸，将被测油样滴在其上，斑痕直径以2_3mm为宜，在室温下暗处放置2min后即可根据斑痕颜色变化确定过氧化值的含量程度。此法耗时较长，且显色不容易分辨。固定化酶法通过检测过氧化氢试纸条的制备，但是样品处理方法还未确定，检测要求不能过酸或过碱。
发明内容
本发明要解决的技术问题之一是提供一种食用油脂过氧化值检测组合试剂及其检测方法，该组合试剂采用比色法原理，通过试剂变色并进行色度比对，以检测待测样品的过氧化值，简便快捷，准确率高。本发明是通过以下技术方案来实现的，本发明包括溶剂、还原试剂、显色试剂，所述溶剂为溶解样品的极性有机溶剂，所述还原试剂用于还原待测样品中的过氧化物，所述被氧化的还原试剂与显色试剂反应产生有色沉淀络合物，所述络合物为硫氰酸铁。、
所述极性有机溶剂按照体积百分比记，包括60 80%的氯仿和20 40%的甲醇。所述还原试剂按重量百分比记，包括80 85%氯化亚铁和15 20%的盐酸；所述氯化亚铁的质量浓度为3 4g/L，盐酸的摩尔浓度O. I O. 3mol/L。所述显色试剂为硫氰酸钾溶液，所述硫氰酸钾的质量浓度为250 350g/L。一种食用油脂过氧化值检测组合试剂的检测方法，包括以下步骤(I)称取液态待测样品，使用极性有机溶剂进行溶解并定容；(2)将步骤(I)的定容溶液中滴加还原试剂，再使用极性有机溶剂定容，并在室温下静置；(3)将步骤(2)的溶液注入分析薄膜上，在自然通风条件下晾干或吹风机吹干；
·
(4)将显色试剂滴入步骤(3)的分析薄膜上，并待分析薄膜充分显色；(5)将步骤(4)经显色的分析薄膜参照标准比色卡进行对比，即可判定待测样品过氧化值的大致范围。所述步骤(I)的定容溶液中，待测样品的质量浓度为I 200g/L。所述检测方法中，每g待测样品滴加的还原试剂的体积为O. 4 50ml，所述还原试剂与所述显色试剂的体积比为1:10 1:13。所述待测样品在检测前若出现凝固或结晶显现，先使其融化为液态。所述标准比色卡的建立包括以下步骤(a)将还原铁粉加入盐酸和过氧化氢溶解后，加热除去过氧化氢，冷却后用水稀释混匀，制得I. Omg/mL的铁标准储备液；(b)将步骤(a)制得的溶液加入所述极性有机溶剂后，制得lOug/mL的铁标准使用液，吸取铁标准使用液0、0. 2,0. 5、I. O、I. 5,2. 0,2. 5,3. 0,3. 5,4. OmL，分别相当于含铁量0、2、5、10、15、20、25、30、35、40ug，将上述铁标准使用液中分别加入所述还原试剂，使用极
性有机溶剂定容，并在室温下静置；(c)将静置后的溶液分别注入分析薄膜上，自然干燥后加入显色试剂，使分析薄膜充分显色，制得标准比色卡。本发明的有益效果在于，I、采用比色分析的方法，使操作简便，检测结果直观性好；2、所用的检测试剂种类较少，便于装配携带；3、检测时间较短，操作简便；4、可以同时对多个油脂样本进行显色和检测，显色均匀，方便快捷，易于现场检测。
具体实施例方式下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。实施例I本实施例的试剂盒包括溶剂、还原试剂、显色试剂、取样管、反应器、显色器、注射器、分析薄膜、标准比色卡；反应器为普通反应器皿；显色器有至少一个，本实施例中有四个，每个显色器包括依次连通的上通管、下通管、上盖和下盖，上通管固定在上盖上，下通管固定在下盖上，分析薄膜夹持于上盖和下盖之间。所述溶剂为溶解样品的极性有机溶剂，所述还原试剂用于还原待测样品中的过氧化物，所述被氧化的还原试剂与显色试剂反应产生有色沉淀络合物，所述络合物为硫氰酸铁。极性有机溶剂按照体积百分比记，包括60%的氯仿和40%的甲醇。还原试剂按重量百分比记，包括80%氯化亚铁和20%的盐酸；氯化亚铁的质量浓度为3g/L，盐酸的摩尔浓度O. lmol/L。显色试剂为硫氰酸钾溶液，所述硫氰酸钾的质量浓度为250g/L。本实施例的标准比色卡的建立包括以下步骤(a)将O. Ig还原铁粉放入100 mL的烧杯中，然后加入IOmL盐酸(10mol/L)和ImL过氧化氢(体积百分比30%)溶解后，加热煮沸后除去过量的过氧化氢，冷却到室温后移入IOOmL容量瓶，用水稀释到刻度，混匀，制得I. Omg/mL的铁标准储备液；(b)将步骤(a)制得的溶液加入所述极性有机溶剂后，制得lOug/mL的铁标准使用液，吸取铁标准使用液0、0. 2,0. 5、I. O、I. 5,2. 0,2. 5,3. 0,3. 5,4. OmL，分别相当于含铁量0、2、5、10、15、20、25、30、35、40ug，将上述铁标准使用液中分别加入所述还原试剂，使用极性有机溶剂定容，并在室温下静置；(c)将静置后的溶液分别注入分析薄膜上，自然干燥后加入显色试剂，使分析薄膜充分显色，制得标准比色卡。本实施例中食用油脂过氧化值检测组合试剂的检测方法，包括以下步骤(I)称取液态待测样品0. Olg,使用极性有机溶剂进行溶解并定容至5mL，混匀；(2)取步骤(I)的定容溶液I mL，滴加还原试剂0. 4ml，再使用极性有机溶剂定容至5mL，并在室温下静置15分钟；(3)将分析薄膜放入反应器中，然后将步骤(2)的溶液注入分析薄膜上，在自然通风条件下晾干或吹风机冷风吹干，所述分析薄膜是聚偏氟乙烯微孔滤膜(F型)，规格是25mm,孔径0. 45um ；(4)将步骤(3)的分析薄膜放入到显色器中，然后将显色试剂滴入显色器内，确保分析薄膜完全被显色试剂浸透，反应10分钟以上，并待分析薄膜充分显色；(5)将步骤(4)经显色的分析薄膜参照标准比色卡进行对比，即可判定待测样品过氧化值的大致范围。实施例2本实施例中，极性有机溶剂按照体积百分比记，包括65%的氯仿和35%的甲醇。
还原试剂按重量百分比记，包括85%氯化亚铁和15%的盐酸；氯化亚铁的质量浓度为3. 5g/L，盐酸的摩尔浓度0. 2mol/L。显色试剂为硫氰酸钾溶液，所述硫氰酸钾的质量浓度为300g/L。本实施例中食用油脂过氧化值检测组合试剂的检测方法的步骤(I)中，称取待测样品0. 05g ;步骤(2)中，滴加还原试剂10ml。其他实施方式和实施例I相同。实施例3
本实施例中，极性有机溶剂按照体积百分比记，包括80%的氯仿和20%的甲醇。还原试剂按重量百分比记，包括83%氯化亚铁和17%的盐酸；氯化亚铁的质量浓度为4g/L，盐酸的摩尔浓度O. 3mol/L。显色试剂为硫氰酸钾溶液，所述硫氰酸钾的质量浓度为350g/L。本实施例中食用油脂过氧化值检测组合试剂的检测方法的步骤(I)中，称取待测样品lg，步骤(2)中，滴加还原试剂50ml。其他实施方式和实施例I相同。实施例4 本实施例中，极性有机溶剂按照体积百分比记，包括70%的氯仿和30%的甲醇。 还原试剂按重量百分比记，包括84%氯化亚铁和16%的盐酸；氯化亚铁的质量浓度为3. 6g/L，盐酸的摩尔浓度O. 25mol/L。显色试剂为硫氰酸钾溶液，所述硫氰酸钾的质量浓度为330g/L。本实施例中食用油脂过氧化值检测组合试剂的检测方法的步骤(I)中，称取待测样品O. 5g，步骤(2)中，滴加还原试剂30ml。其他实施方式和实施例I相同。
权利要求
1.一种食用油脂过氧化值检测组合试剂，其特征在于，包括溶剂、还原试剂、显色试剂，所述溶剂为溶解样品的极性有机溶剂，所述还原试剂用于还原待测样品中的过氧化物，所述被氧化的还原试剂与显色试剂反应产生有色沉淀络合物，所述络合物为硫氰酸铁。
2.根据权利要求I所述的食用油脂过氧化值检测组合试剂，其特征在于，所述极性有机溶剂按照体积百分比记，包括60 80%的氯仿和20 40%的甲醇。
3.根据权利要求I所述的食用油脂过氧化值检测组合试剂，其特征在于，所述还原试剂按重量百分比记，包括80 85%氯化亚铁和15 20%的盐酸；所述氯化亚铁的质量浓度为3 4g/L，盐酸的摩尔浓度0. I 0. 3mol/L。
4.根据权利要求I所述的食用油脂过氧化值检测组合试剂，其特征在于，所述显色试剂为硫氰酸钾溶液，所述硫氰酸钾的质量浓度为250 350g/L。
5.一种如权利要求I 4中任意一项食用油脂过氧化值检测组合试剂的检测方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)称取液态待测样品，使用极性有机溶剂进行溶解并定容； (2)将步骤(I)的定容溶液中滴加还原试剂，再使用极性有机溶剂定容，并在室温下静置； (3)将步骤(2)的溶液注入分析薄膜上，在自然通风条件下晾干或吹风机吹干； (4)将显色试剂滴入步骤(3)的分析薄膜上，并待分析薄膜充分显色； (5)将步骤(4)经显色的分析薄膜参照标准比色卡进行对比，即可判定待测样品过氧化值的大致范围。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(I)的定容溶液中，待测样品的质量浓度为I 200g/L。
7.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法中，每g待测样品滴加的还原试剂的体积为0. 4 50ml,所述还原试剂与所述显色试剂的体积比为1:10 1:13。
8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品在检测前若出现凝固或结晶显现，先使其融化为液态。
9.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述标准比色卡的建立包括以下步骤 (a)将还原铁粉加入盐酸和过氧化氢溶解后，加热除去过氧化氢，冷却后用水稀释混匀，制得I. Omg/mL的铁标准储备液； (b)将步骤(a)制得的溶液加入所述极性有机溶剂后，制得lOug/mL的铁标准使用液，吸取铁标准使用液0、0. 2,0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5,3. 0,3. 5,4. OmL，分别相当于含铁量0、2、5、10、15、20、25、30、35、40ug，将上述铁标准使用液中分别加入所述还原试剂，使用极性有机溶剂定容，并在室温下静置； (c)将静置后的溶液分别注入分析薄膜上，自然干燥后加入显色试剂，使分析薄膜充分显色，制得标准比色卡。
10.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述分析薄膜是聚偏氟乙烯滤膜。
全文摘要
本发明公开了一种食用油脂过氧化值检测组合试剂及其检测方法，包括溶剂、还原试剂、显色试剂，上述溶剂为溶解样品的极性有机溶剂，上述还原试剂用于还原待测样品中的过氧化物，上述被氧化的还原试剂与显色试剂反应产生有色沉淀络合物，上述络合物为硫氰酸铁。本发明还公开了使用该组合试剂的检测方法。本发明的有益效果在于，该组合试剂采用比色法原理，通过试剂变色并进行色度比对，以检测待测样品的过氧化值，简便快捷，准确率高。
文档编号G01N21/78GK102706872SQ20121019502
公开日2012年10月3日 申请日期2012年6月13日 优先权日2012年6月13日
发明者王辰龙, 程江华, 闫晓明, 陈蕾 申请人:安徽省农业科学院农产品加工研究所
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