专利名称：间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法
技术领域：
本发明涉及一种电化学检测方法，尤其涉及间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法。
背景技术：
原初反应是光合作用中最初的和关键的步骤，在光合作用中占有重要的和特殊的地位。但是，由于这个反应进行的时间极短，是在10_9秒内完成的，所以给这方面的研究工作带来了很大困难。目前认为，当光线照射到绿色植物的叶片上面以后，叶绿素中数目众多的"天线色素"分子(包括大部分叶绿素a和全部叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素)，就像收音机中收集无线电波的天线一样，能够接受光能。这些色素所接受的光能可以极其迅速而又高效率地传送到"作用中心"。“作用中心"是一种色素一蛋白质复合体，它含有作用中心色素分子(少数特殊状态的叶绿素a分子)、电子受体(最先接受电子的载体)以及电子供体。作用中心色素分子，它在接受光能以后，首先被激发，变成激发态(当基态的电子获得一定的能量之后，可以跃迁到一个更高能级的轨道上去，这时候的电子处于激发态)。 激发态的作用中心色素分子具有很高的能量，是极不稳定的，犹如坐在跷板上居于高处一端的小孩一样。激发态的作用中心色素分子迅速射出一个高能电子，这个高能电子将被电子受体接受，从而引起电子受体的电荷分离，使光能转变为电能，这个时候，作用中心色素分子由于射出了电子而造成的电子亏缺，将由电子供体提供的电子来补充，使作用中心色素分子恢复到原来的状态。在绿色植物中，吸光物质是一种结构为镁卟啉的光敏络合物。液/液界面电化学是70年代中期发展起来的介于经典的电化学与化学传感器之间的一种新的电化学方法，可用于模拟生物膜模型，考察生物膜的离子转移过程机理以及对生命非常重要的药物的转移行为的研究。同时，液/液界面作为最简单的模拟生物膜模型，可以模拟并研究生命体中电子传递过程，从而达到筛选最佳药物分子，控制电子传递过程等目的。液/液界面(Liquid/Liquid interface, L/L interface)又称之为油/水界 0 (Oil/Water interface, 0/ff interface),/ ^H1M (the interface between two immiscible electrolyte solutions,ITIES)。扫描电化学显微镜(ScanningElectrochemical Microscope, SECM)是 80 年代末由著名的电分析化学家Bard为首的研究小组在超微电极和扫描隧道显微镜(STM)的基础上发展而来的一种新型扫描探针显微镜技术。它是基于70年代末超微电极(UEM)及80年代初扫描隧道显微镜(STM)的发展而产生发展的分辨率(几十纳米)介于普通光学显微镜与STM间的电化学检测新技术，是一种研究液液界面电子转移的良好工具。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种简单、方便、快速的间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法。为解决上述问题，本发明所述的一种间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，包括以下步骤(1)将电化学扫描显微镜专用探针先用砂纸打磨成圆盘形，然后将打磨布用二次蒸馏水浸湿后，用粒径为0. 05 μ m的三氧化二铝粉末抛光成镜面，最后依次经无水乙醇、二次蒸馏水、丙酮超声清洗后，得到处理后的探针；(2)将所述处理后的探针取出用二次蒸馏水冲洗干净，插入盛有3mL含有摩尔浓度为ImM铁氰化钾和摩尔浓度为0. IM氯化钾电解质的溶液中，并采用以所述处理后的探针为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行循环伏安扫描，得到循环伏安曲线；当所述循环伏安曲线闭合良好、电流稳定时，则判定所述处理后的探针可用于实验；(3)将所述处理后的探针取出用二次蒸馏水冲洗，经自然晾干后，得到干燥的探针；(4)在电化学扫描显微镜专用三口电解池的下层注入0.3mL、摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，上层注入0. 3mL、摩尔浓度为ImM铁卟啉的硝基苯溶液作为有机相，然后将所述三口电解池置于所述电化学扫描显微镜上；所述干燥的探针置于所述有机相中，参比电极Ag/AgCl和对电极钼分别置于所述水相中，分别进行循环伏安扫描和渐近线扫描，得到铁卟啉的循环伏安曲线和ImM苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线；根据所述铁卟啉的循环伏安曲线的半波电位计算出反应的驱动力ΔΕ = E1/2,FeTPP-E1/2, BQ，式中ΔΕ为驱动力，Ε1/2,ΜΡΡ为有机相反应物的半波电位，水相反应物的半波电位；(5)重复所述步骤(4)，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基分别为_N02、-NH2, -(NO2)2, -OH的铁卟啉作为有机相进行循环伏安扫描，得到不同取代基铁卟啉的循环伏安曲线；通过所述不同取代基铁卟啉的循环伏安曲线的半波电位计算出不同反应的驱动力；(6)重复所述步骤(4)，以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的铁卟啉的硝基苯溶液作为有机相，分别进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线A ；(7)重复所述步骤(5) (6)，以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-NO2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线B ；以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相， 以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-NH2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线C ；以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相， 以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-(NO2)2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线D ；以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相， 以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-OH的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线E ；(8)采用PAC拟合软件，对所述步骤、步骤(6)、步骤(7)所得的渐近线进行拟合，得到拟合后的渐近曲线，并分别计算各渐近线反应速率常数κ =a*kf/D。，式中κ为归一化速率常数，a为探针半径，kf为反应速率常数，D0为有机相扩散系数；(9)采用origin软件作图，绘制所述步骤(8)中所得的拟合后的渐进曲线、绘制所述步骤、步骤( 所得的驱动力与所述步骤(8)所得的反应速率常数的关系图。所述步骤中的摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. Ollg苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。所述步骤中的铁卟啉的硝基苯溶液是由0. 0034g铁卟啉、0. 017g高氯酸四丁基氨在5mL硝基苯中溶解配制而成。所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为15mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由 0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 165g苯醌及0. 0062g 高氯酸钠混合配制而成。所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为IOmM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由 0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. Ilg苯醌及0. 0062g 高氯酸钠混合配制而成。所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为5mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由 0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 055g苯醌及0. 0062g 高氯酸钠混合配制而成。所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由 0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 022g苯醌及0. 0062g 高氯酸钠混合配制而成。本发明与现有技术相比具有以下优点1、本发明以铁卟啉的硝基苯溶液与苯醌的缓冲溶液组成两互不相溶界面模拟叶绿体内光合作用原初反应过程，不同取代基铁卟啉所造成的不同驱动力模拟不同的光照强度，利用电化学扫描显微镜在两互不相溶界面进行扫描，由不同浓度苯醌的缓冲溶液条件下得到的渐近线计算出的反应速率常数与浓度具有良好的对应关系(参见图1)，而且在不同取代基的铁卟啉的条件下得出的反应速率常数与驱动力之间的对应关系并非始终成正比(参见图幻，当有机相氧化还原物质不变，改变水相反应物的浓度时，反应速率常数随着浓度的增大而增大，即反应速度加快；在有机相反应物不同时，反应速率常数与驱动力之间的关系符合马克斯理论，即在低驱动力下，反应速率常数随驱动力的增大而增大，随着驱动力继续增大，反应速率常数随驱动力的增大而减小。这一结果间接揭示可能在自然界光合作用过程中并非光照强度越强光合作用能量转化效率就越大。从而间接说明在叶绿体进行光合作用的过程中，光合作用能量转化效率随光照强度的不同而改变，其转化效率与光照强度之间存在如下趋势即光照强度较小时能量转化效率与光照强度成正比，而当光照强度增加到一定值时能量转化效率达到一个最大值，当光照强度继续增大时，能量转化换效率与光照强度变化成反比。当光照强度处于最大值时，光合作用效率达到最高。2、本发明方法利用简单物质、使用电化学的方法模拟光合作用原初反应过程，避免了叶绿体复杂结构的制作过程及对光源的要求等事项，简化了实验设计，同时降低了实验原料成本。
3、由于本发明所用仪器灵敏度高，所扫描得到的曲线相关性较好、精密度较高，因此，本发明可以实现检测光照强度对光合作用能量转换的目的。4、本发明检测完毕后，有机相溶液在低温情况下可放置2月，再次测定，界面反应状况依旧稳定，提高重现性和利用率，可降低成本和消耗。5、本发明简单、方便、快速。
下面结合附图对本发明的具体实施方式
作进一步详细的说明。图1为本发明异相电子迁移反应的SECM渐近曲线。水相苯醌与有机相中反应物的浓度比Kr为15，10，5，2，1(从上到下)，点线为实验曲线，实线为理论拟合曲线。 其中a为FeTPP-BQ (铁卟啉 苯醌)；b为FeTPP (NO2) -BQ (硝基铁卟啉 苯醌)；c为 FeTPP (NH2)-BQ(氨基铁卟啉 苯醌)；d为FeTPP (NO2)2_BQ(邻硝基铁卟啉 苯醌)；e为 FeTPP (OH) -BQ (羟基铁卟啉 苯醌)。图2为本发明驱动力与反应速率常数的关系图。
具体实施例方式实验过程中使用的水均为二次蒸馏水，实验所用的试剂均为分析纯。实验均在室温下进行。使用的仪器和试剂电化学扫描显微镜(SECM) XHI 900电化学工作站(美国Austin仪器公司)用于渐近线扫描实验；石英管加热式自动双重纯水蒸馏器(1810B，上海亚太技术玻璃公司)用于蒸二次蒸馏水；电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司)用于称量药品；超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司)；三氧化二铝打磨粉(0.05 μ m，上海辰华仪器试剂公司)用于处理工作电极；Ag/AgCl为参比电极(CHIIII，美国CH仪器公司)；钼为对电极；氯化钠、高氯酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、苯醌、硝基苯均由上海化学试剂厂生产；铁卟啉、硝基铁卟啉、氨基铁卟啉、邻硝基铁卟啉、羟基铁卟啉、高氯酸四丁基氨均由西北师范大学提供。—种间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，包括以下步骤(1)将电化学扫描显微镜专用探针先用砂纸打磨成圆盘形，然后将打磨布用二次蒸馏水浸湿后，用粒径为0. 05 μ m的三氧化二铝粉末抛光成镜面，最后依次经无水乙醇、二次蒸馏水、丙酮超声清洗后，得到处理后的探针。(2)将处理后的探针取出用二次蒸馏水冲洗干净，插入盛有3mL含有摩尔浓度为 ImM铁氰化钾和摩尔浓度为0. IM氯化钾电解质的溶液中，并采用以处理后的探针为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行循环伏安扫描，得到循环伏安曲线；当循环伏安曲线闭合良好、电流稳定时，则判定处理后的探针可用于实验。(3)将处理后的探针取出用二次蒸馏水 冲洗，经自然晾干后，得到干燥的探针。(4)在电化学扫描显微镜专用三口电解池的下层注入0.3mL、摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，上层注入0. 3mL、摩尔浓度为ImM铁卟啉的硝基苯溶液作为有机相，然后将三口电解池置于电化学扫描显微镜上；干燥的探针置于有机相中，参比电极 Ag/AgCl和对电极钼分别置于水相中，分别进行循环伏安扫描和渐近线扫描，得到铁卟啉的循环伏安曲线和ImM苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线；根据该铁卟啉的循环伏安曲线的半波电位计算出反应的驱动力。ΔΕ = E1/2,FeTPP-E1/2,BQ，式中ΔΕ为驱动力，El72j FeTPP为有机相反应物的半波电位， E172,BQ为水相反应物的半波电位。其中摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. Ollg苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。铁卟啉的硝基苯溶液是由0. 0034g铁卟啉、0. 017g高氯酸四丁基氨在5mL硝基苯中溶解配制而成。(5)重复步骤(4)，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以 0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基分别为_N02、-NH2, -(NO2)2, -OH的铁卟啉作为有机相进行循环伏安扫描，得到不同取代基铁卟啉的循环伏安曲线；通过不同取代基铁卟啉的循环伏安曲线的半波电位计算出不同反应的驱动力。(6)重复步骤⑷，以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的铁卟啉的硝基苯溶液作为有机相，分别进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐 缓冲溶液时两相反应的渐近曲线A。其中摩尔浓度为15mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 165g苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。摩尔浓度为IOmM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. Ilg苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。摩尔浓度为5mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 055g苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。摩尔浓度为2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 022g苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。(7)重复步骤(5) (6)，以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-NO2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线B。以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相， 以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-NH2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线C。以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相， 以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-(NO2)2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线D。以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相， 以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-OH的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线E。(8)采用PAC拟合软件，对步骤(4)、步骤(6)、步骤(7)所得的渐近线进行拟合，得到拟合后的渐近曲线，并分别计算各渐近线反应速率常数。κ =a*kf/D。，式中κ为归一化速率常数，从PAC拟合软件拟合渐近线时读�。籥 为探针半径，kf为反应速率常数，D0为有机相扩散系数。
(9)采用origin软件作图，绘制步骤(8)中所得的拟合后的渐进曲线，绘制步骤 (4)、步骤(5)所得的驱动力与所述步骤(8)所得的反应速率常数的关系图。
权利要求
1. 一种间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，包括以下步骤(1)将电化学扫描显微镜专用探针先用砂纸打磨成圆盘形，然后将打磨布用二次蒸馏水浸湿后，用粒径为0. 05 μ m的三氧化二铝粉末抛光成镜面，最后依次经无水乙醇、二次蒸馏水、丙酮超声清洗后，得到处理后的探针；(2)将所述处理后的探针取出用二次蒸馏水冲洗干净，插入盛有3mL含有摩尔浓度为 ImM铁氰化钾和摩尔浓度为0. IM氯化钾电解质的溶液中，并采用以所述处理后的探针为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行循环伏安扫描，得到循环伏安曲线；当所述循环伏安曲线闭合良好、电流稳定时，则判定所述处理后的探针可用于实验；(3)将所述处理后的探针取出用二次蒸馏水冲洗，经自然晾干后，得到干燥的探针；(4)在电化学扫描显微镜专用三口电解池的下层注入0.3mL、摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，上层注入0. 3mL、摩尔浓度为ImM铁卟啉的硝基苯溶液作为有机相，然后将所述三口电解池置于所述电化学扫描显微镜上；所述干燥的探针置于所述有机相中，参比电极Ag/AgCl和对电极钼分别置于所述水相中，分别进行循环伏安扫描和渐近线扫描，得到铁卟啉的循环伏安曲线和ImM苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线； 根据所述铁卟啉的循环伏安曲线的半波电位计算出反应的驱动力ΔΕ = E1/2,MPP-E1/2,BQ，式中ΔΕ为驱动力，E1/2,mpp为有机相反应物的半波电位，E172,BQ为水相反应物的半波电位；(5)重复所述步骤(4)，以0.3mL、摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以 0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基分别为_N02、-NH2, -(NO2)2, -OH的铁卟啉作为有机相进行循环伏安扫描，得到不同取代基铁卟啉的循环伏安曲线；通过所述不同取代基铁卟啉的循环伏安曲线的半波电位计算出不同反应的驱动力；(6)重复所述步骤⑷，以0.3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的铁卟啉的硝基苯溶液作为有机相，分别进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线A ；(7)重复所述步骤(5) (6)，以0.3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-NO2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线B ；以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以 0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-NH2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线C ；以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以 0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-(NO2)2的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线D ；以0. 3mL、摩尔浓度分别为15mM、10mM、5mM、2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液作为水相，以 0. 3mL、摩尔浓度为ImM的取代基为-OH的铁卟啉作为有机相进行渐近线扫描，得到不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线E ；(8)采用PAC拟合软件，对所述步骤、步骤(6)、步骤(7)所得的渐近线进行拟合，得到拟合后的渐近曲线，并分别计算各渐近线反应速率常数κ =a*kf/D。，式中κ为归一化速率常数，a为探针半径，kf为反应速率常数，D0为有机相扩散系数；(9)采用origin软件作图，绘制所述步骤(8)中所得的拟合后的渐进曲线、绘制所述步骤、步骤( 所得的驱动力与所述步骤(8)所得的反应速率常数的关系图。
2.如权利要求1所述的间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，其特征在于所述步骤中的摩尔浓度为ImM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g磷酸二氢钠、 0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. Ollg苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。
3.如权利要求1所述的间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，其特征在于所述步骤中的铁卟啉的硝基苯溶液是由0.0034g铁卟啉、0.017g高氯酸四丁基氨在5mL硝基苯中溶解配制而成。
4.如权利要求1所述的间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，其特征在于所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为15mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由 0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 165g苯醌及0. 0062g 高氯酸钠混合配制而成。
5.如权利要求1所述的间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，其特征在于所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为IOmM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由 0. 02g磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. Ilg苯醌及0. 0062g 高氯酸钠混合配制而成。
6.如权利要求1所述的间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，其特征在于所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为5mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g 磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 055g苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。
7.如权利要求1所述的间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，其特征在于所述步骤(6)和所述步骤(7)中的摩尔浓度为2mM的苯醌磷酸盐缓冲溶液是由0. 02g 磷酸二氢钠、0. Ilg磷酸氢二钠、0. 43g氯化钠的5mL水溶液与0. 022g苯醌及0. 0062g高氯酸钠混合配制而成。
全文摘要
本发明涉及一种间接检测光照强度对光合作用能量转换的影响的方法，该方法包括以下步骤(1)对电化学扫描显微镜专用探针进行处理；(2)判定处理后的探针是否可用于实验；(3)将处理后的探针进行干燥；(4)将干燥的探针分别进行循环伏安扫描和渐近线扫描，得到铁卟啉的循环伏安曲线和1mM苯醌磷酸盐缓冲溶液时两相反应的渐近曲线，并计算驱动力；(5)进行不同取代基的铁卟啉循环伏安扫描，并计算各驱动力；(6)进行不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液渐近线扫描；(7)进行不同取代基、不同摩尔浓度苯醌磷酸盐缓冲溶液渐近线扫描；(8)对所得渐近线进行拟合，并计算反应速率常数；(9)绘制拟合后的渐进曲线、驱动力与反应速率常数的关系图。本发明操作简单，方便快捷。
文档编号G01N27/48GK102175743SQ201010604910
公开日2011年9月7日 申请日期2010年12月22日 优先权日2010年12月22日
发明者乔志刚, 卢小泉, 孙瑞平, 孙萍, 王天夏, 陕多亮 申请人:西北师范大学
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