一种检测样本的装置制造方法
【专利摘要】本实用新型涉及一种检测样本的装置，包括，试纸条，试纸条包括样本垫、标记垫和检测垫，标记垫位于样本垫的下游，检测垫位于标记垫的下游；其中，该检测样本的装置还包括捕获垫，该捕获垫位于试纸条的上游并与试纸条液体相流通；该捕获垫与试纸条连接或不连接。本实用新型的检测样本的装置因捕获垫及捕获垫上的抗体分为两部分并分开，增加了抗体与样本中被分析物的结合的时间和空间，从而使结合更为充分，特别是针对特殊的样本，排除的假阳性的可能，提高了检测的准确性。
【专利说明】一种检测样本的装置
【技术领域】
[0001] 本实用新型涉及检测样本的装置，特别是用于检测样本的试纸条。
【背景技术】
[0002] 利用免疫结合反应原理来检测样本中是否存在被分析物质的这一技术被广泛用 在各个领域。可以用它来检测各种生物样本（唾液，血液，尿液，血清，汗液等等）的被分析 物质来监测疾病和人类的健康状况（早孕,肿瘤,传染病,毒品等等）。这种检测技术的根本 原理是建立在免疫分子之间具有特异结合的性能，例如抗体与抗原，半抗原/抗体，生物素 与抗生物素等等。另外，很多这样的检测都可以在固体介质上完成，例如常用的横向流动试 剂条，玻璃或塑料多孔盘中，免疫层析装置等等。通常，在免疫特异结合分子上可以再结合 一些固体颗粒或者化学物质，这样可以通过肉眼或其他仪器设备来定性，定量或半定量的 得出检测结果。这种固体颗�？梢允谴丈慕禾蹇帕＃ㄈ榻夯蚪鹂帕＃庵只镏士� 以是带有发色基团的物质，这些物质在其他合适的条件下可以发出特定波长来显示检测结 果。
[0003] 利用这些原理的检测试剂条或装置在现有技术中都可以找到，例如如下一些 专利描述的试剂条或含有试剂条的装置：US 4857453 ;US 5073484 ;US 5119831;US 5185127 ；US 5275785 ；US 5416000 ；US 5504013 ；US 5602040 ；US 5622871 ；US 5654162 ； US 5656503 ；US 5686315 ；US 5766961 ；US 5770460 ；US 5916815 ；US 5976895 ；US 6248598 ；US 6140136 ；US 6187269 ；US 6187598 ；US 6228660 ；US 6235241 ；US 6306642 ； US 6352862 ;US 6372515 ;US 6379620 ;和 US 6403383。
[0004] 免疫检测通常包括两种原理，三明治法和竞争法，其中用竞争方法来检测样本中 的半抗原小分子物质最为常见。利用竞争法检测的方法和试剂以及检测装置在美国专利 US4235601 ;US4442204，US5208535，US5229073里有详细的描述。这些装置都是描述在检测 区域上或结果读取区域上没有颜色变化或没有颜色线条出现的时候，检测结果判为阳性， 表示检测样本可能存在被分析物质，相反，当检测区域或结果读取区域上出现颜色变化或 者有颜色线条出现的时候，检测结果判为阴性，表示检测样本中可能不存在被分析物质。
[0005] 在一些检测装置中，样本处理区域与试纸条分离，比如中国专利 CN200610052628. 1中描述的一种检测装置，包括一个第二试剂区域。该第二试剂区域与试 纸条分离，提前与样本接触，使样本中的被分析物与其抗体能够充分的结合；然后，被处理 过的样本再流向试纸条进行检测。
[0006] 在实际的操作中，这种检测装置存在以下问题：对于粘稠或着含水量低泡沫多的 唾液样本无法将最前期捕获垫（第二试剂区域）中的抗体完全进行洗脱下来，即样本无法 与捕获垫上的抗体进行充分的结合，导致没有足够量的抗体和标记垫中的抗原结合，因此 无法显色，从而造成假阳性。 实用新型内容
[0007] 为了解决这些问题，本实用新型提供一个改进的检测装置以及使用该改进的装置 的方法，通过改进的检测装置和方法能够使样本中的被分析物与捕获垫上的特异结合的分 子（抗体）更充分的结合，从而有效的克服假阳性的问题，提高产品检测的准确率。
[0008] -方面，本实用新型所提供的一种检测样本的装置，包括，试纸条，试纸条包括样 本垫、标记垫和检测垫，标记垫位于标记垫的下游，检测垫位于标记垫的下游；其特征在于， 该检测样本的装置还包括捕获垫，所述的捕获垫还包括与被分析物质不相关的特异结合分 子对之一种分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子，该捕获垫位于试 纸条的上游并与试纸条液体相流通；该捕获垫可以与试纸条连接或不连接。
[0009] -个优选的实施方式中，该捕获垫包括第一捕获垫和第二捕获垫；第二捕获垫上 的特异结合被分析物的分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子的含 量为第一和第二捕获垫总量的15% -50%。
[0010] 更为优选的方式中，第一捕获垫位于第二捕获垫上游，二者不相连接，但液体相连 通。
[0011] 一个具体的实施方式中，第二捕获垫位于试纸条的上游，二者并液体相连通。此 时，第二捕获垫与试纸条可以相连接，也可以不相连接。
[0012] 捕获垫包括两个，并且不相连接，使样本流过的时间加长，即在捕获垫上的总停留 时间加长。当捕获垫上包含有与样本中被分析物发生反应的试剂时，能够使被分析物与试 剂有更充分的时间和空间进行结合。
[0013] 一些实施方式中，第二捕获垫位于试纸条的样本垫的上游，与样本垫相连接。
[0014] 一个具体的实施方式中，第二捕获垫为样本垫的延长部分。
[0015] 另一些实施方式中，捕获垫材质为聚酯纤维膜或玻璃纤维膜。
[0016] 优选的实施方式中，第一捕获垫材质为聚酯纤维膜；第二捕获垫材质为玻璃纤维 膜。
[0017] 本实用新型还提供一种检测样本的试剂盒，包括：检测样本的装置和收集样本的 装置，其中，检测样本的装置包括试剂条，所述的试纸条包括样本垫、标记垫和检测垫，标记 垫位于样本垫的下游，检测垫位于标记垫的下游；其中，收集样本的装置包括可以吸收液体 样本的收集头；其特征在于，所述的检测样本的装置中还包括捕获垫，捕获垫位于试纸条的 上游并与试纸条液体相流通；该捕获垫可以与试纸条连接或不连接。
[0018] 优选的，捕获垫包括第一捕获垫和第二捕获垫；第一捕获垫位于第二捕获垫上游， 二者不相连接但液体相流通；第二捕获垫位于试纸条的样本垫的上游，二者相连接并流体 相连通；第一捕获垫和第二捕获垫上包括特异结合被分析物的分子以及与被分析物质不相 关的特异结合分子对之一种分子。
[0019] 一些具体的实施方式中，第二捕获垫上的特异结合被分析物的分子以及与被分析 物质不相关的特异结合分子对之一种分子的含量为第一和第二捕获垫总量的15% -50%。
[0020] 在第一捕获垫和第二捕获垫上的用于与被分析物结合的试剂（特异结合被分析 物的分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子）具有一定的配比后，能 够与样本中的被分析物进行更充分的反应。一些优选的实施方式中，。第二捕获垫上的特 异结合被分析物的分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子的含量为 第一和第二捕获垫总量的20% -35%。
[0021] 一些实施方式中，检测垫上包括一种固定不动的、与捕获垫上被分析物质不相关 的特异结合分子对之另一种分子。
[0022] 另一些实施方式中，第一捕获垫上与第二捕获垫上的特异结合被分析物的分子包 括被分析物质的第一抗体；标记垫包括被分析物的第二抗体。
[0023] 优选的，所述的与被分析物质不相关的特异结合分子对选自于下列分子对之一： 生物素/亲合素（biotin/avidin);生物素/链霉亲和素（biotin/streptavidin);若丹 明 / 若丹明的抗体（rhodamine/anti-rhodamine);鼠 IgG/ 鼠 IgG 的抗体（Mouse IgG/ anti-mouse IgG)〇
[0024] 包含在捕获垫上的试剂（特异结合被分析物的分子以及与被分析物质不相关的 特异结合分子对之一种分子）是被处理并固定在捕获垫上的，当液体样本被添加在捕获 垫上并流过捕获垫时，被固定处理在捕获垫上的试剂与被分析物结合后可以随液体一起流 动。其中，试剂被处理在捕获垫上方式多样。一些具体的实施方式中，特异结合被分析物的 分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子被处理在整个的第一捕获垫 和第二捕获垫上。这种方式中，能够使被分析物与试剂进行充分的反应。
[0025] 另一些优选的实施方式中，特异结合被分析物的分子以及与被分析物质不相关的 特异结合分子对之一种分子被处理在整个的第一捕获垫上；特异结合被分析物的分子以及 与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子以线性排列的方式被处理在第二捕获 垫的一条线上。第二捕获垫上的线性排列的试剂排列更集中，使所有的样本都能够流经线 性处进行充分的液体接触，使结合更为充分，从而也更有效的方式了产品的假阳性。
[0026] 另一方面，本实用新型还提供一种检测液体样本中是否存在被分析物质的方法， 包括：提供一种检测样本的装置，该检测装置包括试剂条和捕获垫，所述的试剂条试纸条包 括样本垫、标记垫和检测垫，标记垫位于样本垫的下游，检测垫位于标记垫的下游；捕获垫 包括第一捕获垫和第二捕获垫；第一捕获垫位于第二捕获垫上游，二者不相连接但液体相 流通；第二捕获垫位于试纸条的样本垫的上游，二者相连接并流体相连通；其特征在于：向 第一捕获垫上添加液体样本，让该液体样本先与第一捕获垫上的试剂反应30秒-60分钟 后；然后让液体样本依次流到第二捕获垫和试纸条上的样本垫、标记垫、检测垫并与各个垫 上的试剂反应完成检测；读取检测结果。
[0027] -些实施方式中，捕获垫上的试剂包括特异结合被分析物的分子以及与被分析物 质不相关的特异结合分子对之一种分子；该分子和所述的特异结合被分析物质的分子相连 或结合并可以随液体一起流动。
[0028] -些优选的实施方式中，第二捕获垫上的特异结合被分析物的分子以及与被分析 物质不相关的特异结合分子对之一种分子的含量为第一和第二捕获垫总量的15% -50%。
[0029] 另一些优选的实施方式中，向第一捕获垫添加液体样本后，让液体样本和第一捕 获垫上的试剂反应30秒钟-30分钟。
[0030] 有益效果
[0031] 本实用新型的检测样本的装置因捕获垫及捕获垫上的抗体分为两部分并分开，增 加了抗体与样本中被分析物的结合的时间和空间，从而使结合更为充分，特别是针对特殊 的样本，排除的假阳性的可能，提高了检测的准确性。
【专利附图】
【附图说明】
[0032] 图1为普通试纸条的分解结构示意图；
[0033] 图2为普通试纸条的俯视图；
[0034] 图3为本实用新型的改进前的检测样本的装置的结构示意图；
[0035] 图4为本实用新型的改进后的检测样本的装置的结构示意图；
[0036] 图5为本实用新型一个具体方案的检测装置检测前和检测后结果示意图；
[0037] 图6为本实用新型另一个具体方案的检测装置检测前和检测后结果示意图；
[0038] 图7为本实用新型另一个具体方案的检测装置检测前和检测后结果示意图；
[0039] 图8为本实用新型包含改进后检测样本的装置的检测盒的分解示意图；
[0040] 图9为图8检测盒的一个部件的剖面示意图。
[0041] 附图标记说明：
[0042] 100, 300试剂条；101样本垫；102标记垫；103,检测垫；132检测结果线；133检测 结果控制线；104吸水垫；105支撑片；210捕获垫；310第一捕获垫；320第二捕获垫；400 检测装置；500收集装置；501收集手柄；502收集头；4011第一收集腔；4012第二收集腔； 401收集腔；4011-1，4011-2第一收集腔的通孔；403,403-1，403-2密封圈；406样本导入区 域；406-1样本导入通孔；3101粘贴端；3102试剂端；404本体；4041读取窗口；确认腔407 ; 4071底座；4073导出通孔；4072塞子；4043上板；4045下板。
【具体实施方式】
[0043] 下面对本实用新型涉及的结构或这些所使用的技术术语做进一步的说明。
[0044] 试纸备100
[0045] 一般的试剂条，如图1和图2所示，试剂条100包括样本接受区域和标记区域以及 检测区域，检测区域包括一种特异结合分子。更优化的试剂条还包括位于检测区域下游 的吸水区域，样本可以沿着箭头所指的方向在试剂条上流动。在样本接受区域上包括完成 反应所必须的物质，例如一些缓冲试剂、预处理样本试剂等等；在标记区域包括荧光标记物 质，胶体金标记颗粒，或以着色乳胶体标记颗粒，还可以是水溶性标记物质，这些标记物质 可以连接抗体、抗原、半抗原或者被分析物类似物质等等，在检测区域上包括固定不动的特 异结合分子，通过特异结合分子可以在检测区域上出现颜色变化来表示样本中是否存在被 分析物质。在检测区域的下游还可以包括检测结果控制区域133。试剂条可以由下列部件 组成，样本垫101和标记垫102,检测垫103,吸水垫104,这些材料被组装在支撑片105上 组成整个试剂条100(如图1);其中在检测垫103上包括检测区域132,优先的方案是在检 测区域的下游还包括检测结果控制区域133。液体样本可以沿着箭头所指的方向从样本垫 101顺次经过标记垫102、检测垫103最后到达吸水垫104。组成试剂条的各个部件可以是 由吸水材料构成，通常，检测垫103可以为硝酸纤维素膜、醋酸纤维素膜或者尼龙膜之一构 成。这些构成试剂条的部件和材料以及在这些部件上处理一些常用的化学试剂和处理方法 都是现有技术公开的。
[0046] 捕获垫210
[0047] 捕获垫210上包括可以随液体流动的特异结合被分析物质的分子，该捕获垫210 位于试剂条100的上游并和试剂条100分离。如图3所不的一个方案，捕获垫210位于试 剂条100的样本垫101的上游，液体样本先流过捕获垫210然后到达试剂条100上的样本 垫上101完成整个检测。
[0048] 检测裝置400
[0049] 如图8,9所示，检测装置400包括本体404和样本收集腔401，其中试剂条100, 300 位于本体404中，捕获垫位于样本收集腔401中；捕获垫和试剂条处于液体流通状态。这里 所说的"液体流通状态"是指液体可以从收集腔401流到试剂条上，这种流动可以由于液体 本身的重力作用而流动，也可以经过收集腔401和试剂条300之间开有通孔而流动，同时在 收集腔和试剂条之间还可以安装上一些引流结构，这样可以让液体更加顺畅的从收集腔流 到试剂条上。更具体的讲，本体404上包括读取窗口 4041和样本导入区域406,样本导入 区域406包括样本导入通孔406-1等，试剂条上的检测区域和本体404中的读取窗口 4041 对应，试剂条的样本接受区域（样本垫）和样本导入通孔对应。通过样本导入通孔406-1 流入的样本可以流到试剂条上的样本接受区域然后到达检测区域完成整个检测反应。收集 腔401包括第一收集腔4011和第二收集腔4012,第一收集腔4011 -端开口用于接纳需要 检测的样本或者接纳带有样本的收集装置，在另一端上开有几个可以让液体通过的液体通 孔4011-1，4011-2等（图9);在液体通孔4011-1的对应位置上有一坚条梁，该梁一端可以 固定在第一收集腔4011的侧壁上，另一端向下延伸并穿过液体通孔4011-1，捕获垫位于坚 条梁上。捕获垫一端可以固定在坚梁的表面上，另一端可以穿过液体通孔到达第二收集腔 4012的底部，在捕获垫的一端上包括可以随液体流动的特异结合被分析物的分子（Yl)和 与被分析物不相关的特异结合分子对（M1/M2)中之一种分子（Ml);该捕获垫的材料可以是 一些吸水性材料组成，在上面可以处理一些蛋白物质，例如玻璃纤维、滤纸、醋酸纤维等等， 捕获垫的一端可以被有机无或机胶水粘在坚梁的表面。该捕获垫也可以胶粘在液体通孔 4011-2中。捕获垫也可以其它形式存在于收集腔401中，例如捕获垫可以直接放在第一收 集腔4011的底部，也可以放在第一收集腔底部和第二收集腔底部之间形成的隔离空间里， 只要捕获垫放置在收集腔401中，可以让样本充分和它接触就可以了，在收集腔401里，捕 获垫可以完全浸泡在样本里，也可以部分浸泡在样本里。捕获垫上还可以包括一些其他辅 助试剂，例如缓冲作用的缓冲试剂，一些蛋白分子等等。本领域的一般技术人员结合本实用 新型都容易想到的其他形式或方式都可以作为本实用新型的一个实施例子。第一收集腔 4011和第二收集腔4012组装成收集腔401 (图8)。第二收集腔4012包括一端开口，另一端 开有几个液体通孔，在这些液体通孔的分别安装有相应的密封圈403,403-1，403-2等。类 似与本装置的其他具体的结构描述在美国专利申请2005/0180882A1中有具体的描述。
[0050] 在一个具体的实施例子中，捕获垫上还可以包括与被分析物质不相关的特异结合 分子对之一种分子M1，该分子和特异结合被分析物质的分子Yl相连或结合。捕获垫可以位 于试剂条上样本垫的上游。更具体的讲，就是捕获垫位于样本垫201的上游，样本垫位于标 记垫202的上游，标记垫位于检测垫的上游；在检测垫上的检测区域上固定有特异结合被 分析物质的另一种分子Y2,在标记垫上包括标记物质L和与被分析物质不相关的特异结合 分子对之另一种分子M2 (图5A)。当进行反应的时候，如果样本中含有被分析物质A，则被 分析物质A和捕获垫上的特异结合分子Yl进行结合形成复合物质A-Yl-Ml ;当该复合物质 通过样本垫到达标记垫上，便形成新的复合物质A-Y1-M1-M2-L ;当新的复合物质流过检测 垫上的时候，固定在检测区域上的特异结合分子Y2特异结合新的复合物质，从而在检测区 域上出现颜色表示阳性结果（图5B)。
[0051] 在另一个具体的实施例子中，捕获垫上还可以包括与被分析物质不相关的特异 结合分子对之一种分子M1，该分子和特异结合被分析物质的分子Yl相连或结合，在检测 垫的检测区域上固定有与被分析物质不相关的特异结合分子对之另一种分子M2,在标记 垫上包括标记物质L和与特异结合被分析物质的另一种分子Yl (图6A)。当进行反应的 时候，如果样本中含有被分析物质A，则被分析物质A和捕获垫上的特异结合分子Yl进 行特异结合形成复合物质A-Yl-Ml ;当该复合物质通过样本垫到达标记垫上，便形成新 的复合物质M1-Y1-A-Y2-L ;当新的复合物质流过检测垫上的时候，固定在检测区域上的 与被分析物质不相关的特异结合分子对之另一种分子M2特异结合新的复合物质，形成 M2-M1-Y1-A-Y2-L，从而在检测区域上出现颜色表示阳性结果（图6B)。
[0052] 在另一个具体的实施例子中，基于竞争法，捕获垫上包括与被分析物质不相关的 特异结合分子对之一种分子M1，该分子和特异结合被分析物质的分子Yl相连或结合，在检 测垫的检测区域上固定有与被分析物质不相关的特异结合分子对之另一种分子M2,在标记 垫上包括标记物质L和被分析物质的类似物质A* (图7A)。捕获垫和试纸条上的试剂浓度 可以随着检测的要求不同而任意调节；例如在毒品检测中，需要让样本中某种毒品的浓度 大于预先设置的浓度C的时候，让在检测区域上不出现颜色线条表示阳性结果，小于浓度C 的时候，在检测区域上出现颜色线条表示阴性结果。
[0053] 当进行反应的时候，如果样本中含有被分析物质A，而且大于预先设置的浓度C的 时候，则捕获垫上的特异结合分子Yl几乎完全和被分析物质A进行特异结合形成复合物质 A-Y1-M1，此时可能还存在剩余过量的被分析物质A ;当该复合物质通过样本垫到达标记垫 上，由于捕获垫上的试剂Yl-Ml被完全反应，标记垫上的试剂A*-L就不能结合到Yl-Ml上； 当该复合物质A-Yl-Ml流过检测垫上的时候，固定在检测区域上的与被分析物质不相关的 特异结合分子对之另一种分子M2特异结合该复合物质，形成M2-M1-Y1-A，从而在检测区域 上不出现颜色表示阳性结果（图7B)。
[0054] 相反，如果样本中含有被分析物质A，而且小于预先设置的浓度C的时候，则捕获 垫上的特异结合分子Yl只是部分的和被分析物质A进行特异结合形成复合物质A-Y1-M1， 此时可能还存在剩余过量的Yl-Ml ;当该复合物质通过样本垫到达标记垫上，标记垫上的 试剂A*-L就和Yl-Ml结合形成M1-Y1-A*-L ;当这些复合物质A-Y1-M1、M1-Y1-A*-L流过检 测垫上的时候，固定在检测区域上的与被分析物质不相关的特异结合分子对之另一种分子 M2特异结合该复合物质，形成M2-M1-Y1-A和M2-Y1-A*-L，从而在检测区域上出现颜色表示 阴性结果（图7B)。
[0055] 被分析物质不相关的特异结合分子对（M1/M2)包括，但不仅限于此，生物素/ 亲合素〇3；1〇1：；[11/^￥1(1；[11)，生物素/链霉亲和素（13；[01：；[11/81^6口七3￥1(1；[11)，抗体/抗原 (antibody/antigen)(不包括抗被分析物质的抗体和被分析物本身），若丹明/若丹明的抗 体（rhodamine/anti-rhodamine)，老鼠 IgG/ 鼠 IgG 的抗体（Mouse IgG/anti-mouse IgG) 等等。被分析物质A可以是抗体或抗原，Yl和Y2可以是被分析物质上不同位点对应的特 异抗原或抗体分子或者抗体片段。标记物质L包括，但是不局限于此，胶体金颗粒，乳胶颗 粒，水溶性标记物质等等，标记物质和一些特异的抗原、抗体或者其他特异结合分子相连或 者结合的技术是现有公知的技术。当然，在样本接受区域还可以包括一些调节反应体系条 件的其他化学试剂，例如磷酸缓冲试剂、硼酸缓冲试剂、碳酸缓冲试剂或者其他蛋白、大分 子等等来优化反应体系的。这些优化措施都是本领域一般技术人员结合本实用新型和现有 技术容易想到和实施的。
[0056] 利用上面具体施例子中的装置可以检测样本中低浓度或者小分子物质，因为一些 重要的被分析物质在样本中的浓度非常底或者被分析物质的分子量很�。么车募觳� 装置经常由于样本中的被分析物质浓度很低而不能检测出或到达临床意义上的要求。利用 本实用新型的装置预先把需要和样本反应的试剂处理在捕获垫上，一是可以让样本和试剂 反应充分，不会因为液体要及时流动而影响反应完成的程度，另一个就是操作者不需要再 另外添加其他的试剂。
[0057] 但在实际的检测中，上述的包括捕获垫的检测装置针对一些特别粘稠或者含水量 低泡沫多的样本，比如粘稠的唾液样本，还是会出现以下的问题：由于样本的粘度较高，含 水量少，或是呈泡沫状态，导致样本在捕获垫上时不能与捕获垫上的试剂进行充分的反应， 导致不能将捕获垫上的试剂（抗体或特异结合的分子）完全结合并随着样本流入下游的试 纸条上，随后在试纸条的检测过程中，会导致没有足够量的抗体和标记垫中的抗原结合，无 法显色，从而造成假阳性（尤其是针对竞争法检测的产品）。
[0058] 要解决这一问题，则需要使样本中的被分析物能够充分与捕获垫上的试剂（特异 结合被分析物的分子Yl以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子Ml)结合， 一个优选的实施方式中，增加一个捕获垫，使捕获垫包括2个，并且2个捕获垫分开不相连 接，在分开的两个捕获垫上分别处理有与样本中被分析物结合的试剂（Y1，M1)，该试剂的总 量与原先的一个捕获垫的总量相同。这样，使样本先流过第一捕获垫，与捕获垫上的试剂进 行充分的反应后，再流经第二捕获垫，与其上的试剂再进行反应。这样，在试剂总量相同的 情况下，被分析物与试剂进行结合的时间和空间都均增加，从而使二者的结合更为充分，因 此，在后续的试纸条的检测过程中，避免了因被分析物携带的抗体的不足而无法在检测区 显色造成的假阳性。
[0059] -些具体的实施例中，第一捕获垫310与原先的捕获垫210形状相同，区别是在其 上处理的试剂（Yl，Ml等）量减少；并且第一捕获垫310仍然位于检测装置的第一收集腔 401上。第二捕获垫320位于试纸条上，更为具体的，位于试纸条的样本垫101上，与样本垫 101部分搭接，如图4所示；第二捕获垫320上处理有另一部分的试剂（YLMl)，样本先流经 第二捕获垫320并与其上的试剂进行结合，而后再依次流经试纸条上的样本垫、标记垫、检 测垫和吸水垫，完成检测。
[0060] 在一些具体的实施方式中，第一捕获垫310与第二捕获垫320上的试剂含量具有 一定的配比，在一些具体的实施例中，第二捕获垫上的试剂（特异结合被分析物的分子Yl 以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子Ml)在试剂总量的15-50%之间。 在这一配比下，样本中的被分析物与试剂的结合更为充分。另一个更为优选的实施例中，第 二捕获垫上的试剂（特异结合被分析物的分子Yl以及与被分析物质不相关的特异结合分 子对之一种分子Ml)在试剂总量的20-35%之间。
[0061] 在一个具体的实施例中，为了方便试纸条的生产，第二捕获垫可以直接与样本垫 相同，为样本垫的延长部分。在延长的部分处理有Yl和Ml后，即相当于第二捕获垫的功能， 起到第二捕获垫的作用。
[0062] 捕获垫的材质可以选自于捕获垫材质为聚酯纤维膜、玻璃纤维膜以及可溪水材质 的滤纸等。第一捕获垫与第二捕获垫的材质可以相同，也可以不同。一个优选的实施方式 中，第一捕获垫材质为聚酯纤维膜；第二捕获垫材质为玻璃纤维膜。
[0063] 下面用收集唾液来检测唾液中是否存在毒品来为例来详细描述如何使用本实用 新型的检测装置和检测盒。如图8所示，是检测前的收集阶段，第一收集腔4011位于第二 收集腔4012内部，而且第二收集腔上的液体通孔并不是和样本导入区域406上的样本导入 通孔406-1相通，而是被样本导入区域406的底平面密封，为了增加收集腔401和样本导入 区域306的底平面的密封性，可以在第二收集腔4012的底部的液体通孔对应位置安装密封 圈。首先收集要检测的唾液，先用样本收集装置500收集需要检测的唾液样本，把收集头 502放入到被检测者的口中，502由吸水材料组成，例如海绵材料，所以该收集头可以吸收 需要检测的唾液样本。然后把吸有唾液样本的收集头502放入到收集腔401中的第一收集 腔4011中，通过转动收集装置的手柄501来挤压收集头502,这时候收集头上的唾液样本就 被挤压到第一收集腔4011中，并通过液体通孔流入到二收集腔4012中。在这个过程中，由 于第一收集腔4011中的第一捕获垫310通过液体通孔延伸到第二收集腔4012的底部，在 挤压样本的同时，唾液样本就和第一捕获垫310上的试剂充分反应，在等到反应合适的时 间后，如 10、20 或 30 秒，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、45、60分钟后，转动收集腔401， 让第二收集腔的液体通孔和液体导入区域上的液体导入通孔相通，液体通孔和液体导入通 孔相通。这个时候，唾液样本就通过液体导入通孔流到试剂条上，液体首先到达试纸条上游 端的第二捕获垫处，液体样本继续与第二捕获垫上的试剂进行充分的结合，而后，液体再流 入到样本垫上，依次向下游流动，到达标记垫和检测垫，最后到达吸水垫，进行检测反应，如 果唾液中存在一定量的毒品，在试剂条的检测区域上不出现颜色线条表示阳性结果，相反 就出现颜色线条表示阴性结果，这种在检测区域上的检测结果可以通过本体上的读取窗口 4041观察结果，读取窗口 4041上可以是透明的材料覆盖检测区域也可以直接让检测区域 裸露在外面。唾液样本还可以通过液体导入通孔进入确认腔407,为了进一步的确认而检测 唾液样本的。确认腔407由底座4071和周围的侧壁围成，进入确认腔的液体可以通过导出 通孔4073取出，导出通孔4073在取样前被一塞子4072密封。当认为检测结果需要进一步 通过其他手段，例如用液相色普、气相色普或其他更精确的仪器来确认检测结果的时候，移 开塞子4073,从确认腔407取出部分唾液样本来检测（如图8和9)。这里仅仅是用唾液样 本作为一个例子来详细说明如何使用本实用新型的检测装置，除了唾液外，还可以是其他 液体样本，例如血液、尿液、汗液、粪便等等。
[0064] 实施例
[0065] 为了更清楚的阐述本实用新型如何实现，现在以有限的实验进行说明，这些说明 仅在本实用新型的权利要求的精髓下做有限的举例，并不构成对本实用新型权利要求的限 制。
[0066] 实验：用本实用新型改进前后的检测装置检测唾液中是否存在一定浓度的抗焦虑 药与镇静催眠药（BZO)。
[0067] 第一部分：本实用新型的试剂条和检测装置的组装和部件制作（具有第一和第二 捕获垫）
[0068] 如图3所示的试剂条100用来说明本实验所用本实用新型的试剂条的部件和制作 方法。
[0069] 硝酸纤维素膜的处理。检测垫103为硝酸纤维素膜（NC)，在硝酸纤维素膜上有两 条线条，一个是检测线132,位于检测线下游的检测结果控制线133。在检测线上固定连接 有IgG的链霉亲和素（streptavidin-IgG);在检测结果控制线上固定养抗兔IgG。固定的 方法可以用自动喷膜处理机器来自动处理，其中在处理检测线条的浓度为1.0毫克/毫升， 稀释缓冲液体为磷酸缓冲液（PBS);在检测结果控制线上固定羊抗兔IgG抗体；浓度为1.0 毫克/毫升，稀释缓冲液体为磷酸缓冲液（PBS)。把处理好的硝酸纤维素膜放在37°C烘箱 里烘干即可。
[0070] 标记垫102的处理。标记片为聚脂膜，被胶体金颗粒标记好的带有耦联蛋白分BSA 的BZO半抗原被处理在聚脂膜上。处理溶液的OD值为57,稀释溶液为1倍PBS缓冲溶液， 其中还含有1 %的BSA。在标记片上还处理有胶体金标记的兔IgG抗体。把处理好的标记 片放在37°C烘箱里烘干即可。
[0071] 样本垫101的处理。样本接受片为玻璃纤维素膜，在该膜上处理的溶液为： Borax(0.07M/L) ;Tween20(l%) ;Cholic Acid(l%) ;Tris(0.1M)。把处理好的样本接受 片放在37°C烘箱里烘干即可。
[0072] 第一捕获垫310的处理。捕获垫包括非吸水性的粘贴端3101和吸水性的试剂端 3102。试剂端的材料为聚酯膜，试剂端处理的化学溶液包括：把连接上生物素（Biotin)的 抗BZO抗体物质被溶解在1倍PBS缓冲溶液中，使最终浓度为I. 0毫克/毫升；其中还含有 1 %的BSA，使处理好的第一捕获垫上的抗BZO抗体物质含量为0. 0025毫克。把处理好的捕 获垫放在37°C烘箱里烘干即可。然后把含有试剂的聚脂膜小片（3102)粘贴在非吸水性的 小片上（3101)上。
[0073] 第二捕获垫320的处理。一部分第二捕获垫在整个捕获垫上处理化学溶液：把连 接上生物素（Biotin)的抗BZO抗体物质被溶解在1倍PBS缓冲溶液中，使最终浓度为0. 2 毫克/毫升；其中还含有1 %的BSA ;使处理好的第二捕获垫上的抗BZO抗体物质含量为 0. 0005晕克。另一部分第二捕获垫，以点喷的方式将0. 2晕克/晕升的抗BZO抗体物质喷 在的第二捕获垫距一个端口 2mm处的一列线性的位置上。将所有的第二捕获垫放在37°C烘 箱里烘干。
[0074] 最终使第一样本垫上的抗BZO抗体物质含量与第二捕获垫上的含量比约为5 :1。
[0075] 试剂条300的组装。把处理好的各个部件按照图4所示的样子组装，让第二捕获 垫（两种）位于样本垫的上游，让样本垫位于标记垫的上游，标记垫位于检测垫和样本垫之 间，在检测垫的下游放置吸水的滤纸104。这些部件都放置在一个非吸水性的支撑片105 上。
[0076] 检测装置的组装。检测装置如图8,9所示。把第一捕获垫的粘贴端3101粘贴在 第一收集腔4011上的坚条梁的表面上，另一端3102穿过液体通孔并到达第二收集腔4012 的底部。然后把整个收集腔401安装在本体404的样本导入区406的卡环中，并且让第二 收集腔4012的底部处于被导入区域的底表面密封（图8)的位置。把带有捕获垫的试剂条 300放置在上板4043和下板4045之间，让试剂条100的检测区域与读数窗口 4041对应，样 本接受区域和液体导入通孔306-1对应。上板和下板扣合为一整体。这样就组装成了本实 验所用的检测装置。
[0077] 第二部分：对照试纸条100和检测装置400的组装和制作（具有捕获垫）。
[0078] 与上面所述的试剂条和检测装置相比，对照试剂条与检测装置基本与之相同。与 之不同的是，安装在检测装置上的为捕获垫，同时在试纸条上不具有第二捕获垫。其中，捕 获垫210的处理。捕获垫的试剂端处理的化学溶液包括：把连接上生物素（Biotin)的抗 BZO抗体物质被溶解在1倍PBS缓冲溶液中，使最终浓度为I. 0毫克/毫升；其中还含有1 % 的BSA，使处理好的捕获垫上的抗BZO抗体物质含量约为0. 003毫克。
[0079] 检测结果记录都在加唾液样本10分钟后读取。通常，设定唾液样本中BZO的浓度 为lOng/ml (纳克/毫升）为检测阈值。检测阈值的意思就是指如果样本中的被分析物质 BZO的浓度大于检测阈值，在理论上，检测结果应该是阳性，反之，如果被分析物质BZO的浓 度小于检测阈值，检测结果为阴性。
[0080] 操作方法：
[0081] 先让每个检测装置处于收集腔401的第二收集腔4012的底部被导入区域406封 闭的状态。
[0082] 然后加入要检测的样本，让样本和收集腔401中捕获垫（第一捕获垫）上的试剂 反应1分钟；
[0083] 旋转收集腔401，让唾液液体从收集腔中流到试剂条的样本接受区域并完成反 应；
[0084] 10分钟后记录检测的实际结果。
[0085] 说明：
[0086] Control为改进前的检测装置；Lotl为改进后装置,其中第二捕获垫整体处理试 齐IJ ;l〇t2为改进后装置，其中第二捕获垫线性处理试剂
[0087] 1.利用标准品溶液来比较改进前后检测装置的检测灵敏度。在标准样本中分别设 置BZO的浓度为Ong/ml (阴性样本）；30ng/ml，利用各个装置进行检测。
[0088]
【权利要求】
1. 一种检测样本的装置，包括，试纸条，试纸条包括样本垫、标记垫和检测垫，标记垫 位于样本垫的下游，检测垫位于标记垫的下游；其特征在于，该检测样本的装置还包括捕获 垫，所述的捕获垫还包括与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子以及与被分析 物质不相关的特异结合分子对之一种分子，该捕获垫位于试纸条的上游并与试纸条液体相 流通；该捕获垫与试纸条连接或不连接。
2. 根据权利要求1所述的检测样本的装置，其特征在于，该捕获垫包括第一捕获垫和 第二捕获垫；第二捕获垫上的特异结合被分析物的分子以及与被分析物质不相关的特异结 合分子对之一种分子的含量为第一和第二捕获垫总量的15% -50%。
3. 根据权利要求2所述的检测样本的装置，其特征在于，第一捕获垫位于第二捕获垫 上游，二者不相连接，但液体相连通。
4. 根据权利要求3所述的检测样本的装置，其特征在于，第二捕获垫位于试纸条的上 游，二者液体相连通。
5. 根据权利要求4所述的检测样本的装置，其特征在于，第二捕获垫位于试纸条的样 本垫的上游，并与样本垫相连接。
6. 根据权利要求5所述的检测样本的装置，其特征在于，第二捕获垫为样本垫的延长 部分。
7. 根据权利要求6所述的检测样本的装置，其特征在于，捕获垫材质为聚酯纤维膜或 玻璃纤维膜。
8. 根据权利要求7所述的检测样本的装置，其特征在于，第一捕获垫材质为聚酯纤维 膜；第二捕获垫材质为玻璃纤维膜。
9. 根据权利要求8所述的检测样本的装置，其特征在于，特异结合被分析物的分子以 及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子被处理在整个的第一捕获垫和第二 捕获垫上。
10. 根据权利要求8所述的检测样本的装置，其特征在于，特异结合被分析物的分子以 及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子被处理在整个的第一捕获垫上；特异 结合被分析物的分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子以线性排列 的方式被处理在第二捕获垫的一条线上。
11. 一种检测样本的试剂盒，包括：检测样本的装置和收集样本的装置，其中，检测样 本的装置包括试剂条，所述的试纸条包括样本垫、标记垫和检测垫，标记垫位于样本垫的下 游，检测垫位于标记垫的下游；其中，收集样本的装置包括可以吸收液体样本的收集头；其 特征在于，所述的检测样本的装置中还包括捕获垫，捕获垫位于试纸条的上游并与试纸条 液体相流通；该捕获垫可以与试纸条连接或不连接。
12. 如权利要求11所述的试剂盒，其特征在于，捕获垫包括第一捕获垫和第二捕获垫； 第一捕获垫位于第二捕获垫上游，二者不相连接但液体相流通；第二捕获垫位于试纸条的 样本垫的上游，二者相连接并流体相连通；第一捕获垫和第二捕获垫上包括特异结合被分 析物的分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子。
13. 如权利要求12所述的试剂盒，其特征在于，第二捕获垫上的特异结合被分析物的 分子以及与被分析物质不相关的特异结合分子对之一种分子的含量为第一和第二捕获垫 总量的15% -50%。
【文档编号】G01N33/558GK204214874SQ201420360442
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2014年7月1日 优先权日:2014年7月1日
【发明者】沈丽荔, 伍欣 申请人:艾博生物医药(杭州)有限公司
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