专利名称：一种动物尿液中sal的快速检测方法
一种动物尿液中SAL的快速;f全测方法
(一) 技术领域 本发明涉及一种动物尿液中SAL的快速检测方法。
(二)
背景技术：
SAL(SalbutamoI,沙丁胺醇)，化学名称为1- (4-羟基-3-羟曱基苯基)-2-
(叔丁氨基)-乙醇，是一种选择性e-受体激动剂，有较强的支气管扩张作用，
临床上被广泛应用于人类哮喘和心脏病的治疗，但是在高于治疗剂量长期服用 SAL时可使动物体内的营养成分由脂肪组织向肌肉组织转化，减少脂肪沉积和 促进动物生长，提高饲养动物的瘦肉率。
随着对"瘦肉精"(盐酸克伦特罗)的监察和检测力度的增大， 一些非法 使用者开始转向其它替代品。由于SAL的结构和"瘦肉精，，相似，都属于(3-受体激动剂，所以它们的促生长作用也相差不大；同时又由于SAL在动物体内 消除的时间比"瘦肉精"短，毒性较弱，因此SAL成为"瘦肉精'，最主要的替 代品，但药物通过代谢易在动物体内集聚残留，并可通过食物链传入人体，会 严重危害人类的健康，所以对SAL的检测和控制已势在必行。
目前国内对SAL的检测手段相对滞后，对SAL检测方法的研究也处于起步 阶段，尚无动物体内此药物残留的统一的国家^f企测方法及标准。现行的检测方 法多为定性的方法，从抗干扰、定量的准确程度方面都存在很大的问题。所用 仪器昂贵、样品处理程序复杂、操作费时并需要专门的操作技能，其分析方法 的灵敏度尚不能满足需要或大量监控的价格难以承受，且仪器体积较大，不适 合做现场检测。
由药物在动物体内代谢过程可知，尿中的药物除少数有机酸、碱类药可以 在近曲小管被主动分泌入尿外，大多数药物(游离部分)都是从肾小球以滤过 方式，由血浆进入原尿中。随着尿液生成过程中的浓缩，尿药浓度逐渐升高， 大多远远高出血药浓度，因此易于测定；其次，尿液也可无损伤收集，这也是在检测药物浓度时通常选尿液为检测标本的原因。此外，检测动物尿液中的药 物含量，适用于动物的宰前控制，可有效地预防药物残留超标的动物食品流入 市�。员Ｕ隙锸称返陌踩哂兄卮笠庖�。但目前对尿液中SAL的定量方法 尚无4艮道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种动物尿液中SAL的快速检测方法，以对动物体 内的SAL浓度进行检测，同时克服了传统检测手段准确度低、操作繁瑣、价格 高以及不适合现场检测等缺点。
本发明采用的技术方案如下
一种动物尿液中SAL的快速检测方法，调节尿样pH值为8. 5-9, 5,以正丁 醇、异丁醇或乙酸乙酯为溶剂提�。掷氤鲇谢愫笤谄渲屑尤隤-环糊精和 乙醇，浓缩至尿样取样体积后检测其荧光强度值，并根据公式I计算出尿液中 SAL的浓度；其中尿样、提取溶剂与乙醇的体积比为1:5-7: 0.006-0.008; 加入(3-环糊精的量为每升尿液加入0. 0004-0. 0006mol (3-环糊精；公式I如 下，其中y为荧光强度值，x ( pg/mL)为尿样中的SAL浓度 y = 1. 1971x+ 1. 8655 。
由于尿液样品一般为微黄色，焚光检测时会对结果有影响，所以本发明先 对尿液提取后再进行检测。本方法给出了最佳提取溶剂及其用量，其中提取溶 剂又优选异丁醇；pH值的选择是考虑到在酸性条件下，SAL会生成相应的离子 而影响提�。崛÷始停虼嗽诩钚蕴跫绿崛。坏莗H值过高也会影响 提取率；其中，调节尿液pH值为9最为合适。P-环糊精作为增敏剂，可对与 其极性相似、分子大小与其空腔相匹配的不同类型的分子形成包络物以屏蔽干 扰。对提取后分出的有机层进行浓缩后，用荧光光度仪进行检测；较好的检测 焚光强度值时激发光和发射光分别为280nm和310nm。
具体的，所述动物尿液中SAL的快速检测方法可按照以下步骤进行调 节尿样pH值为9,异丁醇提取后分离出有机层，在其中加入p-环糊精和乙醇，浓缩至尿样取样体积后在激发光和发射光分别为280nm和31 Onm条件下;f金测其 荧光强度值，并根据公式I计算出尿液中SAL的浓度；其中尿样、异丁醇与乙 醇的体积比为1: 6: 0.007; P -环糊精加入的量为每升尿液加入0. 0005mol p
-环糊精。
以上所述乙醇为无水乙醇。
本发明方法线性范围为0-20.0ng/mL，检出限为0.8ng/mL,精密度(用 相对标准偏差表示)和回收率分别为1. 3%和96. 57%,。
本发明相对于现有技术，有以下优点
本方法前处理简单、容易操作；快捷，整个过程只需15-20min;准确，精 密度为1.3%;灵敏度高，检出限为0, 8ng/mL;可以很好的对尿液中的SAL进 行定量检测，且此方法也适用于人类尿液的检测，对SAL的监控提供了很好的平台。
具体实施例方式
以下以具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于
此
实施例1
取10ml猪的尿样，用NaOH溶液调pH为9，用60ml异丁醇提�。殖鲇谢悖� 加入lnil 0. 005mol/L的p -环糊精和0. 007mL的乙醇后，浓缩至lOmL，在激发 光(Ex)和发射光(Em)为280/310nm处检测其焚光强度值，检测得到的荧光 强度值为1. 952,根据公式计算出尿液中SAL的浓度为0. 072)ig/mL。
实施例2
取10ml猪的尿样，用NaOH溶液调pH为9，用60ml正丁醇提�。殖鲇谢悖� 加入lml 0. 005mol/L的(3 -环糊精和0. 007mL的乙醇后，浓缩至10mL，在激发 光(Ex)和发射光(Em)为280/310nm处检测其焚光强度值，检测得到的荧光 强度值为1. 969，根据公式计算出尿液中SAL的浓度为0. 087|ig/mL。实施例3
取10ml猪的尿样，用NaOH溶液调pH为8. 8,用50ml乙酸乙酯提�。殖鲇� 机层，加入lnil 0. 004niol/L的(3 -环糊精和0. 006mL的乙醇后，浓缩至10mL， 在激发光(Ex)和发射光(Em)为280/310腿处检测其荧光强度值，检测得到 的荧光强度值为1. 989,根据公式计算出尿液中SAL的浓度为0. 103(ig/mL.
实施例4
取10ml猪的尿样，用NaOH溶液调pH为9. 5，用70ml异丁醇提�。殖鲇胁偶� 层，加入1ml 0, 006mol/L的(3 -环糊精和0. Q08mL的乙醇后，浓缩至lOmL，在 激发光(Ex)和发射光(Em)为280/310nm处检测其突光强度值，检测得到的 荧光强度值为1. 976,根据公式计算出尿液中SAL的浓度为0. 092ng/m.
权利要求
1. 一种动物尿液中SAL的快速检测方法，其特征在于调节尿样pH值为8.5-9.5，以正丁醇、异丁醇或乙酸乙酯为溶剂提�。掷氤鲇谢愫笤谄渲屑尤毽�-环糊精和乙醇，浓缩至尿样取样体积后检测其荧光强度值，并根据公式I计算出尿液中SAL的浓度；其中尿样、提取溶剂与乙醇的体积比为1∶5-7∶0.006-0.008；加入β-环糊精的量为每升尿液加入0.0004-0.0006molβ-环糊精；公式I如下，其中y为荧光强度值，x(μg/mL)为尿样中的SAL浓度y＝1.1971x+1.8655。
2. 如权利要求1所述的动物尿液中SAL的快速检测方法，其特征在于检测荧光 强度值时激发光和发射光分别为280nni和310nm。
3. 如权利要求1所述的动物尿液中SAL的快速检测方法，其特征在于尿样的pH 值调节为9。
4. 如权利要求1所述的动物尿液中SAL的快速^^测方法，其特征在于以异丁醇 为提取溶剂。
5. 如权利要求1-4之一所述的动物尿液中SAL的快速检测方法，其特征在于按 照以下步骤进行调节尿样pH值为9，异丁醇提取后分离出有机层，在其中加 入(3-环糊精和乙醇，浓缩至尿样取样体积后在激发光和发射光分别为280腿 和310nm条件下检测其荧光强度值，并根据公式I计算出尿液中SAL的浓度； 其中尿样、异丁醇与乙醇的体积比为1: 6: 0.007; P-环糊精加入的量为每升 尿液加入Q. QQQ5mo1 [3 -环糊津青。
全文摘要
本发明涉及一种动物尿液中SAL的快速检测方法，调节尿样pH值为8.5-9.5，以正丁醇、异丁醇或乙酸乙酯为溶剂提�。掷氤鲇谢愫笤谄渲屑尤毽�-环糊精和乙醇，浓缩至尿样取样体积后检测其荧光强度值，并根据公式计算出尿液中SAL的浓度。本方法前处理简单、容易操作；快捷，整个过程只需15-20min；准确，精密度为1.3％；灵敏度高，检出限为0.8ng/mL；可以很好的对尿液中的SAL进行定量检测，且此方法也适用于人类尿液的检测，对SAL的监控提供了很好的平台。
文档编号G01N33/50GK101285830SQ200810049959
公开日2008年10月15日 申请日期2008年6月4日 优先权日2008年6月4日
发明者季 伍, 刘红伟, 尹红娜, 永 王, 磊 竹 申请人:河南省商业科学研究所有限责任公司
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
