专利名称：一种五味甘露药浴制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药物的质量检测方法，具体涉及一种五味甘露药浴制剂的质量检测方法。
背景技术：
藏药浴是藏医独特的外治方法之一，它是在温泉浴疗法的基础上，依据传统藏医药的基础理论而创造出来的。“五味甘露方”是藏药浴的基本配方，现已发展成为经典组方。在治疗各种皮肤病及风湿、类风湿性关节炎等时具有良好的疗效。五味甘露方结合现代新制剂技术产生了五味甘露药浴汤散、五味甘露药浴颗粒、五味甘露药浴洗剂(以上剂型均为金诃藏药股份有限公司生产)。上述制剂的出现，方便了患者的用药。 五味甘露药浴汤散原标准只有显微鉴别、麻黄的薄层鉴别；五味甘露药浴颗粒原标准只有显微鉴别、麻黄的薄层鉴别、烈香杜鹃中槲皮素的含量测定；五味甘露药浴洗剂原标准只有麻黄的薄层鉴别、烈香杜鹃的薄层鉴别、麻黄碱的含量测定。专利一种治疗风湿、类风湿性疾病的药物组合物及制备工艺(CN1733025)，未涉及质量检测方法，专利一种藏药浴散剂的制备方法及其质量控制方法(CN1660051)，只测定麻黄中盐酸麻黄碱的含量，麻黄中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱为同分异构体，性质接近，能在一定条件下相互转化，故只测定盐酸麻黄碱无法准确的控制麻黄的质量，从而难以保证制剂的安全、有效。检索文献未发现对上述五味甘露制剂更加先进的质量控制手段的报道。
本发明标准改进了麻黄及烈香杜鹃的薄层鉴别方法，增加了配方中主药刺柏、大籽蒿质量检测方法，且同时测定盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱的含量，增加了烈香杜鹃中金丝桃苷含量的方法，从而使制剂更安全、有效。
发明内容
本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种五味甘露药浴制剂的质量检测方法。为实现上述目的，本发明采用下述技术方案一种五味甘露药浴制剂的质量检测方法，该五味甘露药浴制剂为由原料刺柏、麻黄、烈香杜鹃、水柏枝、大籽蒿按药剂学常规方法制成的各种制剂，它包括定性鉴别麻黄的方法，还包括至少一种采用薄层鉴别方法定性鉴别烈香杜鹃、刺柏或大籽蒿的方法，和/或采用高效液相色谱法同时检测麻黄中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量的方法，和/或采用高效液相色谱法检测烈香杜鹃中金丝桃苷含量的方法。优选的，它包括定性鉴别麻黄的方法，还包括采用薄层鉴别方法定性鉴别烈香杜鹃、刺柏和大籽蒿的方法，和采用高效液相色谱法同时检测麻黄中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量的方法，和采用高效液相色谱法检测烈香杜鹃中金丝桃苷含量的方法。所述五味甘露药浴制剂为由下列重量份的原料制成刺柏1-10份、麻黄1-10份、烈香杜鹃1-10份、水柏枝1-10份、大籽蒿1-10份。优选的，所述五味甘露药浴制剂为下列重量比的原料制成刺柏100g、麻黄100g、烈香杜醇100g、水柏枝100g、大籽蒿100g。所述五味甘露药浴制剂的剂型为汤散、洗剂或颗粒剂等。所述麻黄的薄层鉴别方法为当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末5g,加入体积份数比为1%盐酸水溶液50ml，超声处理30min，滤过，滤液用氨水调节pH值至10，用二氯甲烷20ml振摇提�。秩《燃淄橐海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品50ml，氨水调节pH值至10，用二氯甲烷20ml振摇提�。秩《燃淄橐海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麻黄对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为20: (3^7) :0. 5的三氯甲烷-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述烈香杜鹃的薄层鉴别方法为当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g，加乙酸乙酯10ml，超声处理30min，滤过，取滤液作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，用乙酸乙酯IOml振摇提�。秩∫宜嵋阴ヒ鹤魑┦云啡芤海涣砣×蚁愣啪槎哉找┎�0. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为9: (0. 8^1. 2)的沸程为6(T90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述刺柏的薄层鉴别方法为挥发油鉴别当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g，加乙醚10ml，超声处理20min，滤过，取滤液作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，用乙醚IOml振摇提�。秩∫颐岩鹤魑┦云啡芤海涣砣〈贪囟哉找┎�0. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4: (0. 5^1) : (0. 5^1)的沸程为6(T90°C石油醚-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C烘至斑点清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；双黄酮类化合物鉴别当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g，加无水乙醇25ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取刺柏对照药材0. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各3 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为 5: (0. 6^0. 8):0.5的二氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述大籽蒿的薄层鉴别方法为当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末5g,加无水乙醇50ml,超声30min,滤过，滤液蒸干，残渣加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品50ml，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大籽蒿对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5: (5^7)的环己烷-丙酮为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述麻黄的含量测定方法为
色谱条件与系统适用性试验以辛烷基硅烷键合硅胶或苯基键合硅胶为填充剂；以乙腈-体积份数比O. 1%磷酸水溶液为流动相；流动相体积份数比为(2 5) : (98^95);检测波长为205 215nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2000 ;其中，填充剂优选辛烷基硅烷键合硅胶；流动相体积份数比优选为3:97 ;检测波长优选为210nm ；对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品适量，精密称定，加入甲醇制成每Iml中各含40 μ g的溶液；供试品溶液的制备当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末I. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比O. 1%磷酸水溶液50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用体积份数比O. 1%磷酸水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液20ml，氨水调节pH至10，用三氯甲烷振摇提取5次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；当制剂为液体制剂时，精密量取本品20ml，置60ml分液漏斗中，氨水调节PH至10，用三氯甲烷振摇提取5次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。所述烈香杜鹃的含量测定方法为色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-O. 025mol/l的磷酸二氢钾水溶液(体积份数比10%磷酸水溶液调节pH3. O)为流动相；流动相体积份数比为(2(Γ40) : (80飞0);检测波长为360nm;理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于2000 ;其中，流动相体积份数比优选为30:70 ；对照品溶液的制备取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加入甲醇制成每Iml中含60 μ g的溶液；供试品溶液的制备当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣加IOml水使溶解，用乙酸乙酯振摇提取5次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；当制剂为液体制剂时，精密量取本品10ml，用乙酸乙酯振摇提取5次， 每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明的有益效果是，本发明对现有的五味甘露药浴的质量标准进行了相应提高。本发明在原标准的基础上修订了麻黄的薄层鉴别方法，增加了烈香杜鹃、刺柏、大籽蒿的薄层鉴别方法；在简便的流动相条件下使用辛烷基硅烷键合硅胶或苯基键合硅胶为填充齐U，同时检测麻黄中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量，且提供了一种测定五味甘露制剂烈香杜鹃中金丝桃苷含量的方法，确保了产品质量的安全、有效、质量可控。
图I是五味甘露药浴汤散麻黄的薄层鉴别色谱图；图2是五味甘露药浴汤散烈香杜鹃的薄层鉴别色谱图；图3是五味甘露药浴汤散刺柏中挥发油成分的薄层鉴别色谱图；图4是五味甘露药浴汤散刺柏中双黄酮化合物的薄层鉴别色谱图；图5是五味甘露药浴汤散大籽蒿的薄层鉴别色谱图；图6是五味甘露药浴汤散盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱混合对照高效液相色谱图；图7是五味甘露药浴汤散麻黄对照药材高效液相色谱图；图8是五味甘露药浴汤散麻黄供试品高效液相色谱图；图9是五味甘露药浴汤散麻黄阴性对照高效液相色谱图；图10是五味甘露药浴汤散盐酸麻黄碱线性关系图；图11是五味甘露药浴汤散盐酸伪麻黄碱线性关系图；图12是五味甘露药浴汤散金丝桃苷对照高效液相色谱图；图13是五味甘露药浴汤散烈香杜鹃对照药材高效液相色谱图；图14是五味甘露药浴汤散烈香杜鹃供试品高效液相色谱图；图15是五味甘露药浴汤散烈香杜鹃阴性对照高效液相色谱图；图16是五味甘露药浴汤散金丝桃苷线性关系图。其中，图I、图2、图3、图4、图5中a是对照药材，b是供试品，c是阴性对照；图6、图7、图8、图9、图12、图13、图14、图15的横坐标是时间，单位分钟(Minutes);纵坐标是电压，单位伏特(Volts)。
具体实施例方式下面通过具体实例对本发明进行进一步的阐述，应该说明的是，下述说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。实验例I :鉴别实验(方法采用实施例I中的方法)五味甘露药浴汤散由青海金诃藏药药业股份有限公司提供。A.麻黄的薄层鉴别取本品研细后粉末5g，加入体积份数比为1%盐酸水溶液50ml，超声处理30min，滤过，滤液用氨水调节pH值至10，用二氯甲烷20ml振摇提�。秩《燃淄橐海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液。另取麻黄对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液。取按处方比例配制的缺麻黄阴性对照品，按供试品溶液制备方法同法制得阴性样品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为20: (3^7) :0. 5的三氯甲烷-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，说明该鉴别方法的专属性强，可作为五味甘露药浴汤散中麻黄的薄层鉴别方法。结果见图I。结果分析在体积份数比为20:31:0. 5的三氯甲烷-甲醇-浓氨试液的展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比为20:5:0. 5的三氯甲烷-甲醇-浓氨试液展开剂展开效果最好。
B.烈香杜鹃的薄层鉴别取本品研细后粉末2. 5g，加乙酸乙酯10ml，超声处理30min，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取烈香杜鹃对照药材O. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液。取按处方比例配制的缺烈香杜鹃阴性对照品，按供试品溶液制备方法同法制得阴性样品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为9:0. 8^1. 2的石油醚(沸程为6(T90°C)-乙酸乙酯(9:0. 8 1. 2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，说明该鉴别方法的专属性强，可作为五味甘露药浴汤散中烈香杜鹃的薄层鉴别方法。结果见图2。结果分析在体积份数比为9:0. 8^1. 2的石油醚(沸程为6O、(TC )-乙酸乙酯展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比为9:1的石油醚(沸程为6(T90°C)-乙酸乙酯展开剂展开效果最佳，Rf值合适，分离度好，特征斑点清晰。C.刺柏的薄层鉴别挥发油鉴别取本品研细后粉末2. 5g，加乙醚10ml，超声处理20min，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取刺柏对照药材O. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液。取按处方比例配制的缺刺柏阴性对照品，按供试品溶液制备方法同法制得阴性样品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4:0. 5^1:0. 5^1的石油醚(沸程为6(T90°C)-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C烘至斑点清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，说明该鉴别方法的专属性强，可作为五味甘露药浴汤散刺柏中挥发油的薄层鉴别方法。结果见图3。结果分析在体积份数比为4:0. 5^1:0. 5^1的石油醚(沸程为6(T9(TC )-乙酸乙酯-甲醇展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比为4:1:0. 5的石油醚(沸程为6(T90°C)-乙酸乙酯-甲醇展开剂展开效果最佳。双黄酮类化合物鉴别
取本品研细后粉末2. 5g,加无水乙醇25ml,超声30min,滤过,滤液蒸干,残洛加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液。另取刺柏对照药材O. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液。取按处方比例配制的缺刺柏阴性对照品，按供试品溶液制备方法同法制得阴性样品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各3μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5:0. 6 0. 8:0. 5的二氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰，说明该鉴别方法的专属性强，可作为五味甘露药浴汤散刺柏中双黄酮类化合物的薄层鉴别方法。结果见图4。
结果分析在体积份数比为5:0. 6、. 8:0. 5的二氯甲烷-甲醇-甲酸展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比为5:0. 7:0. 5的二氯甲烷-甲醇-甲酸展开剂展开效果最佳，特征斑点清晰，Rf合适。D.大籽蒿的薄层鉴别取本品研细后粉末5g,加无水乙醇50ml,超声30min,滤过,滤液蒸干,残洛加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取大籽蒿对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液。取按处方比例配制的缺大籽蒿阴性对照品，按供试品溶液制备方法同法制得阴性样品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5:5 7的环己烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰，说明该鉴别方法的专属性强，可作为五味甘露药浴汤散大籽蒿的薄层鉴别方法。结果见图5。结果分析在体积份数比为5:5 7的环己烷-丙酮展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比为5:6的环己烷-丙酮展开剂展开效果最佳。实验例2 :麻黄含量测定实验I.仪器、试药和供试样品仪器日立L-2100泵，日立L-2400紫外检测器，岛津AUW-220D型电子天平。对照品盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所)批号171241-201007，盐酸伪麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所)批号171237-200807 ;麻黄对照药材(中国药品生物制品检定所)批号121051-200704。样品五味甘露药浴汤散(青海金诃藏药药业股份有限公司)批号20100701、20100702,20100703ο2.检测波长的选择取盐酸麻黄碱对照品、盐酸伪麻黄碱对照品混合溶液，于19(T400nm波长范围内进行扫描，根据紫外吸收图谱，选定210nm为检测波长。3.色谱柱、流动相选择分别研究了Waters C18 (250mmX 4. 6mm, 5 μ m)、Thermo C8 (250mmX4. 6mm, 5 μ m)、Welch XB-C8 (250mmX4. 6mm, 5 μ m)、Welch Mitimitee PHenyl-Ether (250mmX4. 6mm, 5 μ m)
等不同色谱柱盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱的分离效果，结果发现使用Welch Mhimale·'PHenyl-Ether (250mmX4. 6mm, 5 μ m)色谱柱,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱的峰形较好。研究了乙腈-体积份数比O. 1%磷酸水溶液不同体积比例为流动相盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱的分离效果，研究表明，乙腈-O. 1%磷酸水溶液体积份数比为3:97效果最优，盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱与其它组分的分离度均大于I. 5。4.对照品溶液制备
取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品适量，精密称定，加入甲醇制成每Iml中各含40 μ g的溶液。 5.供试品溶液制备分别考察了不同提取方法超声、回流、振�。惶崛∪芗亮�30ml、40ml、50ml，不同提取时间20min、30min、40min,对供试品中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱提取效果的影响，结果见表I、表2和表3。表I提取方法考察试验结果
权利要求
1.一种五味甘露药浴制剂的质量检测方法，该五味甘露药浴制剂为由原料刺柏、麻黄、烈香杜鹃、水柏枝、大籽蒿按药剂学常规方法制成的各种制剂，包括定性鉴别麻黄的方法，其特征是，还包括至少一种采用薄层鉴别方法定性鉴别烈香杜鹃、刺柏或大籽蒿的方法，和/或采用高效液相色谱法同时检测麻黄中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量的方法，和/或采用高效液相色谱法检测烈香杜鹃中金丝桃苷含量的方法。
2.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，它包括定性鉴别麻黄的方法，还包括采用薄层鉴别方法定性鉴别烈香杜鹃、刺柏和大籽蒿的方法，和采用高效液相色谱法同时检测麻黄中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量的方法，和采用高效液相色谱法检测烈香杜鹃中金丝桃苷含量的方法。
3.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述五味甘露药浴制剂的剂型为汤散、洗剂或颗粒剂；五味甘露药浴制剂由下列重量份的原料制成刺柏1-10份、麻黄1-10份、烈香杜鹃1-10份、水柏枝1-10份、大籽蒿1-10份。
4.如权利要求1-3任一项所述的质量检测方法，其特征是，所述麻黄的薄层鉴别方法为 当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末5g，加入体积份数比为1%盐酸水溶液50ml，超声处理30min,滤过,滤液用氨水调节pH值至10,用二氯甲烧20ml振摇提�。秩《燃淄橐海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品50ml，氨水调节pH值至10，用二氯甲烷20ml振摇提�。秩《燃淄橐海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麻黄对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为20: (3 7) :0. 5的三氯甲烷-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.如权利要求1-3任一项所述的质量检测方法，其特征是，所述烈香杜鹃的薄层鉴别方法为 当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g,加乙酸乙酯IOml,超声处理30min,滤过，取滤液作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，用乙酸乙酯IOml振摇提�。秩∫宜嵋阴ヒ鹤魑┦云啡芤海涣砣×蚁愣啪槎哉找┎腛. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为9: (O. 8^1. 2)的沸程为6(T90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.如权利要求1-3任一项所述的质量检测方法，其特征是，所述刺柏的薄层鉴别方法为 挥发油鉴别当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g，加乙醚10ml，超声处理20min，滤过，取滤液作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，用乙醚IOml振摇提取，分取乙醚液作为供试品溶液；另取刺柏对照药材O. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4: (O. 5^1) : (O. 5^1)的沸程为6(T90°C石油醚-乙酸乙酯-甲醇为展开齐U，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C烘至斑点清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 双黄酮类化合物鉴别当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g，加无水乙醇25ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，先用20ml石油醚萃取，弃去石油醚液，水液再用20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取刺柏对照药材O. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各3 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5: (O. 6^0. 8) :0. 5的二氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
7.如权利要求1-3任一项所述的质量检测方法，其特征是，所述大籽蒿的薄层鉴别方法为 当制剂为固体制剂时，取本品制剂粉末5g,加无水乙醇50ml,超声30min,滤过,滤液蒸干，残渣加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品50ml，先用20ml石油醚萃取，弃去石油醚液，水液再用20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大籽蒿对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5: (5^7)的环己烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
8.如权利要求1-3任一项所述的质量检测方法，其特征是，所述麻黄的含量测定方法为 色谱条件与系统适用性试验以辛烷基硅烷键合硅胶或苯基键合硅胶为填充剂；以乙腈-体积份数比O. 1%磷酸水溶液为流动相；流动相体积份数比为(2 5) : (95^98);检测波长为205 215nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品适量，精密称定，加入甲醇制成每Iml中各含40 μ g的溶液； 供试品溶液的制备当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末I. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比O. 1%磷酸水溶液50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用体积份数比O. 1%磷酸水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液20ml，氨水调节PH至10，用三氯甲烷振摇提取5次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；当制剂为液体制剂时，精密量取本品20ml，置60ml分液漏斗中，氨水调节PH至10，用三氯甲烷振摇提取3次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
9.如权利要求1-3任一项所述的质量检测方法，其特征是，所述烈香杜鹃的含量测定方法为 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-O. 025mol/I的磷酸二氢钾水溶液为流动相；流动相体积份数比为(2(Γ40) : (8(Γ60);检测波长为360nm ;理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加入甲醇制成每Iml中含60 μ g的溶液； 供试品溶液的制备当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣加IOml水使溶解，用乙酸乙酯振摇提取5次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；当制剂为液体制剂时，精密量取本品10ml，用乙酸乙酯振摇提取5次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
10.如权利要求2或3所述质量检测方法，其特征是，所述麻黄的薄层鉴别方法为 当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末5g，加入体积份数比为1%盐酸水溶液50ml，超声处理30min,滤过,滤液用氨水调节pH值至10,用二氯甲烧20ml振摇提取,分取二氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品50ml，氨水调节pH值至10，用二氯甲烷20ml振摇提�。秩《燃淄橐海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麻黄对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为20:5:0. 5的三氯甲烷-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 所述烈香杜鹃的薄层鉴别方法为 当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g,加乙酸乙酯IOml,超声处理30min,滤过，取滤液作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，用乙酸乙酯IOml振摇提取，分取乙酸乙酯液作为供试品溶液；另取烈香杜鹃对照药材O. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为9:1的沸程为6(T90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 所述刺柏的薄层鉴别方法为 挥发油鉴别当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g，加乙醚10ml，超声处理.20min，滤过，取滤液作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，用乙醚IOml振摇提�。秩∫颐岩鹤魑┦云啡芤海涣砣〈贪囟哉找┎腛. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4:1:0. 5的沸程为6(T90°C石油醚-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为5%香草醛硫酸溶液，在105°C烘至斑点清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 双黄酮类化合物鉴别当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末2. 5g，加无水乙醇25ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品25ml，先用20ml石油醚萃取，弃去石油醚液，水液再用20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取刺柏对照药材O. 5g，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各3 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5:0. 7:0. 5的二氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 所述大籽蒿的薄层鉴别方法为 当制剂为固体制剂时，取本品制剂粉末5g,加无水乙醇50ml,超声30min,滤过,滤液蒸干，残渣加20ml水溶解，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；当制剂为液体制剂时，取本品50ml，先用20ml石油醚萃�。ナ兔岩海涸儆�20ml乙酸乙酯萃�。∫宜嵋阴ヒ海舾桑性游匏掖�2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大籽蒿对照药材lg，按供试品溶液制备方法同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5:6的环己烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105°C烘干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 所述麻黄的含量测定方法为 色谱条件与系统适用性试验以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-体积份数比O.1%磷酸水溶液为流动相；流动相体积份数比为3:97 ;检测波长为210nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品适量，精密称定，加入甲醇制成每Iml中各含40 μ g的溶液； 供试品溶液的制备当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末I. 4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比O. 1%磷酸水溶液50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用体积份数比O. 1%磷酸水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液20ml，氨水调节PH至10，用三氯甲烷振摇提取5次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；当制剂为液体制剂时，精密量取本品20ml，置60ml分液漏斗中，氨水调节pH至10，用三氯甲烷振摇提取3次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 所述烈香杜鹃的含量测定方法为 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-O. 025mol/I的磷酸二氢钾水溶液为流动相；流动相体积份数比为30:70 ;检测波长为360nm ;理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加入甲醇制成每Iml中含60 μ g的溶液； 供试品溶液的制备当制剂为固体制剂时，取本品研细后粉末lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣加IOml水使溶解，用乙酸乙酯振摇提取5次，每次IOml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；当制剂为液体制剂时，精密量取本品10ml，用乙酸乙酯振摇提取5次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
本发明公开了一种五味甘露药浴制剂的质量检测方法，该五味甘露药浴制剂为由原料刺柏、麻黄、烈香杜鹃、水柏枝、大籽蒿按药剂学常规方法制成的各种制剂，本法在原标准的基础上修订了麻黄、烈香杜鹃的薄层鉴别方法，增加了刺柏、大籽蒿的薄层鉴别方法；在简便的流动相条件下使用辛烷基硅烷键合硅胶或苯基键合硅胶为填充剂，同时检测麻黄中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量，且提供了一种测定五味甘露制剂烈香杜鹃中金丝桃苷含量的方法，确保了产品质量的安全、有效、质量可控。本发明对现有的五味甘露药浴制剂的质量标准进行了相应提高。
文档编号G01N30/02GK102707007SQ20121017632
公开日2012年10月3日 申请日期2012年5月31日 优先权日2012年5月31日
发明者刘玉芹, 彭坤, 杨敬燕, 江玉娟, 王悦, 白文静, 董玉波 申请人:山东阿如拉药物研究开发有限公司
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