专利名称：一种干血斑样品制备器件的制作方法
技术领域：
一种干血斑样品制备器件技术领域[0001]本实用新型涉及一种用于医学检测的干血斑样品的制备器件。
技术背景[0002]滤纸片是血液标本采集和运输的极好载体，应用血滴在滤纸片上制成滤纸片干血斑，便于储存和运输，且有很好的生物稳定性，因此，特别适用于发展中国家边远地区的样本采集、贮存与运输。早在1963年，国外就开始研究用滤纸收集血样用于疾病的研究。近年来，干血斑技术应用已经逐步扩展到其他医药药物研究发展过程，治疗药物监控，药理和毒理及药代与毒代动力学的研究。[0003]传统的医学检测需要提供大量血样(每个实验体每个时间点大约需100-500微升)以获取生物分析实验所需的足量血浆。血浆通常通过离心分离全血而得到。常用的分析方法包括固相萃取，液-液萃取或蛋白沉淀结合液相色谱质谱仪器分析等。这些方法费时、费力，所得样品量有限。同时血样的运输和保存需要冷藏，对低温冷冻柜的要求也非常高，实际运行中需要很高的费用。[0004]干血斑(DBQ方法是一项革命性的技术可以弥补以上种种缺点。它由上样、风干、 室温下运输和保存、打孔器取样、洗脱、分析等步骤组成。干血斑上样用移液管移取少量血液样品自由滴落在滤纸卡片上，血液在滤纸上形成圆形斑点，再经2-3小时风干。干血斑微体积样品只需样品量10-20微升，极大的减低了血液样品的体积，比起离心分离提取血浆的传统方法，干血斑方法更简便。干血斑室温环境下节省了冷藏运输的费用，无需冷藏的运输对于长途运输特别是人类临床样品运输极为重要，同时使得干血斑可用于在边远医疗条件差的地方方便采取病人的血液样品。传统的干血斑样品分析采用的是部分样品分析法， 也就是取用血斑的一部分来进行仪器分析。实验中用一个3毫米的打孔器在血斑的中间钻取一个小纸片，将纸片和溶取试剂混合震荡一段时间就能顺利分离出需要检测的化合物， 通常分析干血斑样品要使用超高灵敏度的液相色谱质谱仪等高端仪器。[0005]尽管现有的干血斑方法具有一定的优越性，但它同时也含有如下的局限性。首先干血斑样品暴露在外面，很容易形成污染，造成分析结果的不准确。其次干血斑样品测量的准确度与上样技术有一定的关联，每一次上样的体积和速度必须要有一定的控制，上样用的移液管要保证不能碰到滤纸，这些控制性的因素给样品的采集增加了难度。最后也是最重要的一点在于常规的干血斑方法采用的是部分样品分析法，应用固定面积的打孔器使得分析样品的容积控制步骤发生在纸片打孔时，这样任何产生于打孔之前的样品容积变化都不能正确地反映在干血斑的分析过程中。我们知道，当放置固定容积的血液样品到滤纸上时，血液的血细胞比容(hematocrit)会影响到血斑的大小。高血细胞比容值的血液样品会形成较小面积的血斑。从这样的干血斑中打出的固定表面积的纸片上将会含有较多的血液样品。相类似的，血液的粘度也会改变血斑的大小。由于每一个血液样品的血细胞比容都可能是不同的，它对干血斑分析结果的影响没有办法消除。发明内容[0006]发明目的本实用新型的目的是解决现有干血斑方法所存在的缺陷，提供一种干血斑样品制备器件，它可以消除血细胞比容对干血斑分析结果的影响，避免干血斑样品受到污染。[0007]为了解决上述技术问题，本实用新型采用了如下的技术方案[0008]一种干血斑样品制备器件，包括外套和插件，所述外套内径略大于插件的外径，所述插件能够插入或拔出外套；在外套的上部开设若干进样孔，在插件上与进样孔相应的位置设有用于盛放干血斑滤纸片的空腔。[0009]其中，所述空腔的直径比干血斑滤纸片的直径略大；所述插件上的空腔处开设通气孔，在外套底部与通气孔对应处设有通气槽；所述插件的端部开设固定孔；所述外套和插件均为塑料制成。[0010]有益效果(1)保护干血斑样品免受污染和干扰。将干血斑样品的载体滤纸放在干血斑样品的专用制备器件中，使干血斑样品得到了很好的保护，样品之间没有接触的可能，不会在运输，储存和使用过程中被损坏和污染，。[0011](2)利用全样品溶析方法来实现全面消除血液的血细胞比容(hematocrit)对干血斑分析的影响。本专利申请方案将干血斑样品的载体滤纸预先切割成固定大小的纸片并置于特殊设计的塑料件空腔中。当血液，血浆，或其他液体样品上样时，所有的液体样品都被限制在纸片上。液体样品的体积是由上样步骤中所使用的器具，如定量移液管，来决定的。正确的上样体积保证了本分析方法的准确性。血液样品的血细胞比容(hematocrit) 不再对分析样品的体积造成任何影响。且所需的血液样品体积很少，最大程度地利用所有的样品。[0012](3)将滤纸片预先冲切好并置于塑料器件中，这样实验员就不需要在分析样品的时候进行样品的冲切步骤，简化了样品分析过程。
[0013]图1为干血斑样品的制备器件的组装示意图。[0014]图2为图1中的A-A向剖视图。[0015]图3为图2中的B-B向剖视图。[0016]图4为外套的俯视图。[0017]图5为外套的仰视图。[0018]图6为图4中的A-A向剖视图。[0019]图7为图6中的B-B向剖视图。[0020]图8为插件的俯视图。[0021]图9为插件的仰视图。[0022]图10为图8中的A-A向剖视图。[0023]图11为图10中的B-B向剖视图。[0024]图12为使用本实用新型份预切割干血斑分析方法和现有干血斑分析方法对样1的检测结果示意图。[0025]图13为使用本实用新型份预切割干血斑分析方法和现有干血斑分析方法对样2的检测结果示意图。[0026]图14为使用本实用新型份预切割干血斑分析方法和现有干血斑分析方法对样品 3的检测结果示意图。
具体实施方式
[0027]
以下结合附图对本实用新型做更进一步的解释。[0028]如图1-11所示，本实用新型的干血斑样品的制备器件包括塑料制成的长条形的外套1和插件2，所述插件2的长度略大于外套1的内腔深度，插件2能够自由插入或拔出外套1中。在外套1的上部沿长度方向设有呈一字型排布的数个进样孔3，在插件2上对应进样孔3的位置处设有六个呈一字型排布的用于盛放干血斑滤纸片的空腔4。当插件2完全插入外套1内时，插件2的空腔4和外套1上的进样孔3 —一对齐。[0029]所述空腔4的直径比干血斑滤纸片的直径略大；且对于同一个采样对象来说，为了保证分析结果的准确性，应保证所有滤纸片的大小一致。插件2的底部，在每个空腔4处开设通气孔5，在外套1下部与通气孔5相应的位置开设通气槽6。通气孔5和通气槽6用于空气流通，干燥干血斑滤纸片。[0030]此外，在插件2未插入的端部开设固定孔7，便于在分析实验过程中，将插件2固定在自动化干血斑分析仪器上。[0031]通过本实用新型，可将干血斑样品的载体滤纸放置于插件2上的空腔4内。在血液样品的上样、储存及运输过程中，避免了样品和外界、样品与样品之间的接触，这样就免除了样品受外界污染以及样品之间互相干扰的问题。[0032]利用本实用新型的干血斑制备器件加工干血斑样品的方法包括以下步骤[0033]a)预切割干血斑滤纸片将干血斑样品的载体滤纸预先切割成与略小于空腔横截面积的干血斑滤纸片，并置于插件的空腔中。例如空腔的直径为6毫米，则滤纸片的直径就取5毫米。[0034]本实用新型将干血斑样品的载体滤纸预先切割成固定大小的纸片，所用滤纸可以是任何类型的滤纸，但所有预切割滤纸片大小要保持一致，当血液，血浆，或其他液体样品上样时，所有的液体样品都被限制在纸片上，液体样品的体积是由上样步骤中所使用的器具来决定的。这样一来，只要控制好上样体积便可以保证分析的准确性，血液样品的血细胞比容不再对分析样品的体积造成任何影响。[0035]为了确保样品分析的准确性，建议使用干血斑(DBQ专用滤纸来制备滤纸片。例如GE Whatman公司生产的多种FTA DMPK卡所用的滤纸。[0036](b)样品上样通过移液装置移取定量的血液样品至干血斑滤纸片上；所述移液装置采用定量移液管或毛细玻璃管。[0037]对于较小面积的滤纸片，即直径小于或等于4毫米；或者面积小于或等于12. 5平方毫米的滤纸片。本实用新型提供了一个简洁便利的定量上样方法，本实用新型使用毛细玻璃管实现上样体积的自动控制。首先是选用内径小于0. 02毫米的玻璃毛细管，并利用毛细管张力吸取一定量的血液。毛细玻璃管作用力能够抵抗所吸取的液体的重力，玻璃毛细管的内径足够细�。诖怪钡淖纯鱿旅覆ＡЧ苤械囊禾宀换岽酉露肆鞒鲂纬梢旱�。毛细玻璃管吸入的样品体积不需要非常准确，但必须是大于塑料器件中滤纸片饱和状态下能容纳的样品体积，例如滤纸片饱和状态下能容纳的样品体积为3微升，则毛细玻璃管内血液体积要达到大于5微升。将带有血液或其他液体生物样品的毛细玻璃管放入含有滤纸片的塑料器件上方进样孔3中。当毛细玻璃管接触到滤纸片后，滤纸片对血液样品的吸力会大于毛细管的作用力而造成了血液样品从毛细管中转移到滤纸片上。这一过程一直会持续到液体样品充满了滤纸片达到饱和时为止。当毛细玻璃管中的样品液面停止向下移动时， 可以将毛细玻璃管移离塑料器件来完成上样过程。多余的液体样品继续保留在毛细玻璃管中。这样一来血液样品转移到滤纸片上的体积就被限制为滤纸片在饱和状态下所能吸收的最大体积。由于每一个滤纸片的大小都是固定不变的，实现了简便的准确定量干血斑上样方法。[0038]此外，对于上样体积较大的情况直径大于4毫米；或面积大于12. 5平方毫米的滤纸片。可使用定量移液管来进行操作。例如5毫米直径的GE Whatman FTA DMI3K卡滤纸片可以容纳6-8微升的血液样品，此时就可以采用定量移液管来上样。由于不需考虑血液在纸片上的扩散造成的血斑大小不一的问题，上样过程得到了简化。实验人员不需要注意寻找上样的位置，移液管端部也不需要严格控制在纸片上方1-2毫米处。由于制备器件的上样孔4位置被设计在滤纸片的正上方，血液样品能够准确地加载到纸片的中心点上，实验人员不需要注意寻找上样的位置。[0039]采用定量移液管或玻璃毛细管进行干血斑上样，样品的体积完全由滤纸片的大小来自动控制，上样的步骤得到进一步的简化。[0040](c)血斑干燥干血斑滤纸片自然风干。干血斑样品的底部通过通风孔5、通风槽 6和外部空气接触，为样品提供了有效的通风条件，使进样后的滤纸片能够在较短的时间里得到干燥。[0041](d)样品溶取溶取整个干血斑滤纸片上的血液样品。本方法中样品溶取常规干血斑方法相同。在进行液体样品分时，实验员就不需要在分析样品的时候进行样品的冲切步骤，而是对整个干血斑滤纸片进行溶�。蚧搜贩治龉�。[0042](e)样品分析对血液样品进行分析。[0043]如图12、13和14所示，针对传统干血斑分析方法中存在的血细胞比容 (hematocrit)对干血斑分析产生影响的问题，本实用新型提供的利用塑料器件进行预切割干血斑进行样品分析，采用全干血斑样品溶取分析的办法。针对不同的实验样品，如图12、 13和14所示，实验数据证明采用本方法能有效地消除血细胞比容的影响。[0044]为模拟不同的血细胞比容(hematocrit)，将血浆按一定比例加入到新鲜血液中。 血浆比例越高代表了血细胞比容值越低。如图12、13和14所示，图中横向坐标表示血浆比例，竖向坐标表示样品浓度；图中白色方框表示使用本实用新型的方法进行干血斑分析的结果，黑色方框表示使用传统方法进行干血斑分析的结果。[0045]把一个实验化合物，例如乙醯基氨基苯(Acetaminophen分别以三种不同的浓度加入到这些血液样品中，图12、13和14中的血液样品浓度分别是每毫升260毫微克，每毫升26毫微克和每毫升2毫微克。用传统干血斑方法分析的结果显示随着血浆比例的增高 (血细胞比容降低)，干血斑的面积逐渐加大，测得的样品浓度逐渐降低，与样品的实际浓度的偏离也逐渐加大，即测得的结果越不准确。与之相反的是，采用与本实用新型的预切割干血斑方法得到了不受血浆比例(血细胞比容)影响的稳定结果，即虽然血浆比例增高，血6细胞比容降低，但是测得的样品浓度基本上没有变化，测量结果准确地反映了血液中的化合物浓度。
权利要求1.一种干血斑样品制备器件，其特征在于包括外套⑴和插件O)，所述外套⑴内径略大于插件O)的外径，所述插件( 能够插入或拔出外套(1)；在外套(1)的上部开设若干进样孔(3)，在插件( 上与进样孔( 相应的位置设有用于盛放干血斑滤纸片的空腔⑷。
2.根据权利要求1所述的一种干血斑样品制备器件，其特征在于所述空腔(4)的直径比干血斑滤纸片的直径略大。
3.根据权利要求1所述的一种干血斑样品制备器件，其特征在于所述插件( 上的空腔(4)处开设通气孔(5)，在外套(1)底部与通气孔( 对应处设有通气槽(6)。
4.根据权利要求1所述的一种干血斑样品制备器件，其特征在于所述插件O)的端部开设固定孔(7)。
5.根据权利要求1至4中任意一项所述的一种干血斑样品制备器件，其特征在于所述外套(1)和插件( 均为塑料制成。
专利摘要本实用新型公开了一种干血斑样品的制备器件，制备器件包括外套和插件，所述插件能够自由插入外套中；在外套的上部开设若干进样孔，在插件上相应的位置设有用于盛放干血斑滤纸片的空腔。本实用新型使干血斑样品得到了很好的保护，样品不会在运输，储存和使用过程中被损坏和污染；采用玻璃毛细管进行干血斑进样，样品的体积完全由滤纸片的大小来自动控制，进样的步骤得到进一步的简化；将滤纸片预先冲切好并置于塑料器件中，这样实验员就不需要在分析样品的时候进行样品的冲切步骤，简化了样品分析过程。
文档编号G01N1/28GK202330105SQ20112037905
公开日2012年7月11日 申请日期2011年9月30日 优先权日2011年9月30日
发明者范婥民 申请人:范婥民
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
