专利名称：一种测定乳粉中蛋白质含量的方法
技术领域：
本发明涉及食品营养物质领域，特别涉及一种测定乳粉中蛋白质含量的方法。
背景技术：
蛋白质(protein)是构成生物体细胞组织的重要成分，是生命的物质基础。蛋白质与营养代谢、细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、物质运转、遗传等密切相关，人体必须从食物中摄取足够的蛋白质以维持各项生理功能的正常运行。因此，蛋白质含量是乳粉等食品的最重要营养指标之一。由于蛋白质是非常复杂的有机化合物，目前尚无直接测定方法，其检测多采用凯氏定氮法，其基本原理是在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转
化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数，计算出粗蛋白含量。另外，也有人用紫外分光光度法、考马斯亮蓝法、双缩脲法、Folin-酚法、等电点沉淀法等来进行乳粉中蛋白质含量的测定。在这些测定方法中，就方法的准确性和精密度以及应用程度而言，国际经典测定方法一凯氏定氮法为首�。梅ㄒ彩窍喙刈ㄒ等嗽北匦胝莆盏木洳馐苑椒ㄖ�。但是凯氏定氮法检测步骤繁琐、催化时间较长、对催化剂消耗量较大。虽然目前已有半自动或全自动凯氏定氮仪面世，但由于凯氏定氮仪这种自动化设备价格比较昂贵，普及性不广。有机元素分析法是鉴定有机物中存在元素和其含量测定的分析方法，主要用于分析研究C、H、N元素组成。与凯氏定氮法相同，元素分析法可直接测出样品中N元素的百分含量，因此可用于乳粉中蛋白质含量的测定。
发明内容
发明目的为解决上述现有技术中的技术问题，提供一种测定乳粉中蛋白质含量的方法。采用的技术方案提供了一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，其特征在于，使用有机元素分析原理和仪器，通过优化乳粉样品使用量，通氧时间，燃烧温度各个参数，测定乳粉样品中氮元素含量，乘以换算系数，即可得到相应乳粉样品中蛋白质含量；
一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，具体包括以下步骤
步骤100 :设定有机元素分析仪的测定模式CHN模式或CHNS模式；
步骤200 :打开有机元素分析仪开关，对其进行检漏测试，在无漏气的情况下，对有机元素分析仪器进行工作参数设定；
步骤210 :对于CHN模式，氧化炉温度950 °C，还原炉温度500 0C ;对于CHNS模式，氧化炉温度1150°C，还原炉温度:850 0C ；
步骤220 :以上两种模式的热导检测器温度设为52 0C ;载气(He)压力125 kPa ;载气流量200 ml/min ;氧气压力250 kPa,通氧时间:90s 180s ；
步骤300 :进行空白实验，次数以CN S峰面积小于100，H峰面积小于1000为准；
步骤400 :对于CHN模式，用标准物乙酰苯胺做三次条件化测试；对于CHNS模式，用标准物氨基苯磺酸做三次条件化测试；
步骤500 :对于CHN模式，用标准物乙酰苯胺测得日校正因子，重复三次，取平均值；对于CHNS模式，用标准物氨基苯磺酸测得日校正因子，重复三次，取平均值；
步骤600 :称取乳粉样品用微量电子天平精确称取I. 5 200 mg适量乳粉样品，并用锡舟包好压实分批次送入有机元素分析仪的自动进样器中；
步骤700 :热导检测器进行检测，有机元素分析仪自动分析、计算，得到氮元素含量百分数；
步骤800 :重复步骤600和步骤700两次，又得到两个氮元素含量百分数；
步骤900 :取步骤700和步骤800三次测得的乳粉样品氮元素含量百分数的平均值，乘以换算系数6. 25，计算得到乳粉样品的粗蛋白含量。被测乳粉样品三次测定所得到的三次数据的绝对偏差都小于千分之二 ；每25个左右数据重做三次标准物重测日校正因子。其中，所述乳粉样品包括奶粉，蛋白粉，营养粉各类固体乳粉，所述营养粉为米粉、核桃粉、燕麦片、豆奶粉、藕粉。有益效果本发明具有样品需求量少、试剂用量少、操作简单、测定效率高、测定精确度高等优点，适用于各类乳制品中蛋白质含量的测定。
图I为实施例I中乳粉样品进行元素分析的CHN元素分析测量峰。图2为实施例7中乳粉样品进行元素分析的CHN元素分析测量峰。
具体实施例方式本发明一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，其特征在于，使用有机元素分析原理和仪器，通过优化乳粉样品使用量，通氧时间，燃烧温度各个参数，测定乳粉样品中氮元素含量，乘以换算系数，即可得到相应乳粉样品中蛋白质含量；
一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，具体包括以下步骤
步骤100 :设定有机元素分析仪的测定模式CHN模式或CHNS模式；
步骤200 :打开有机元素分析仪开关，对其进行检漏测试，在无漏气的情况下，对有机元素分析仪器进行工作参数设定；
步骤210 :对于CHN模式，氧化炉温度950 0C,还原炉温度500 0C ;对于CHNS模式，氧化炉温度1150°C，还原炉温度:850 0C ；
步骤220 :以上两种模式的热导检测器温度设为52 0C ;载气(He)压力125 kPa ;载气流量200 ml/min ;氧气压力250 kPa,通氧时间:90s 180s ；
步骤300 :进行空白实验，次数以CN S峰面积小于100，H峰面积小于1000为准；
步骤400 :对于CHN模式，用标准物乙酰苯胺做三次条件化测试；对于CHNS模式，用标准物氨基苯磺酸做三次条件化测试；
步骤500 :对于CHN模式，用标准物乙酰苯胺测得日校正因子，重复三次，取平均值；对于CHNS模式，用标准物氨基苯磺酸测得日校正因子，重复三次，取平均值；
步骤600 :称取乳粉样品用微量电子天平精确称取I. 5 200 mg适量乳粉样品，并用锡舟包好压实分批次送入有机元素分析仪的自动进样器中；
步骤700 :热导检测器进行检测，有机元素分析仪自动分析、计算，得到氮元素含量百分数；
步骤800 :重复步骤600和步骤700两次，又得到两个氮元素含量百分数；
步骤900 :取步骤700和步骤800三次测得的乳粉样品氮元素含量百分数的平均值，乘以换算系数6. 25，计算得到乳粉样品的粗蛋白含量。被测乳粉样品三次测定所得到的三次数据的绝对偏差都小于千分之二 ；每25个左右数据重做三次标准物重测日校正因子。其中，所述乳粉样品包括奶粉，蛋白粉，营养粉各类固体乳粉，所述营养粉为米粉、核桃粉、燕麦片、豆奶粉、藕粉。下面结合附图和实施例对本发明进行详细说明。实施例I
称取2. 000 mg某奶粉样品于锡舟中，包好压实置于有机元素分析仪的自动进样器中；元素分析的操作参数为CHN模式,燃烧温度设为950 °C,通O2时间为90 s ;进行元素分析测定N含量为2. 731%。重复包括称量在内的以上操作两次，元素分析测定N含量分别为
2.724%，2. 698% ;取三次平均值2. 718%，乘以换算系数6. 25，得到奶粉样品中的粗蛋白含量为16. 99%，参照图I。实施例2
取10. 000 mg某奶粉样品于锡舟中，包好压实置于有机元素分析仪的自动进样器中；元素分析的操作参数为CHNS模式,燃烧温度设为1150 °C,通O2时间为120 s ;进行元素分析测定N含量为3. 018%。重复包括称量在内的以上操作两次，元素分析测定N含量分别为
3.032%，2. 984%，取三次平均值3. 011%，乘以换算系数6. 25，得到奶粉样品中的粗蛋白含量为 18. 82%。实施例3
取50. 000 mg某营养米粉样品于锡舟中，包好压实置于有机元素分析仪的自动进样器中；元素分析的操作参数为CHNS模式,燃烧温度设为1150 °C,通O2时间为150 s ;进行元素分析测定N含量为1.056%。重复包括称量在内的以上操作两次，元素分析测定N含量分别为I. 053%, I. 036%，取三次平均值I. 048%，乘以换算系数6. 25，得到营养米粉样品中的粗蛋白含量为6. 55%。实施例4
取200. 000 mg某营养核桃粉样品于锡舟中，包好压实置于有机元素分析仪的自动进样器中；元素分析的操作参数为CHN模式,燃烧温度设为950 °C,通O2时间为180 s ;进行元素分析测定N含量为1.004%。重复包括称量在内的以上操作两次，元素分析测定N含量分别为I. 028%, I. 018%，取三次平均值I. 017%，乘以换算系数6. 25，得到核桃粉样品中的粗蛋白含量为6. 36%ο实施例5
取100. 000 mg某营养燕麦片样品于锡舟中，包好压实置于有机兀素分析仪的自动进样器中；元素分析的操作参数为=CHNS模式，燃烧温度设为1150 °C，通O2时间为150 s ;进行元素分析测定N含量为2. 015%。重复包括称量在内的以上操作两次，元素分析测定N含量分别为I. 945%，I. 933%，取三次平均值I. 964%，乘以换算系数6. 25，得到营养燕麦片样品中的粗蛋白含量为12. 28%。实施例6
取1.500 mg某豆奶粉于锡舟中，包好压实置于有机元素分析仪的自动进样器中；元素分析的操作参数为CHN模式，燃烧温度设为950 °C，通O2时间为90 s ;进行元素分析测定N含量为2. 626%。重复包括称量在内的以上操作两次，元素分析测定N含量分别为2. 577%，
2.590%，取三次平均值2. 598%，乘以换算系数6. 25，得到蛋白粉样品中的粗蛋白含量为16. 24%ο实施例7
取2. 000 mg某蛋白质粉于锡舟中，包好压实置于有机元素分析仪的自动进样器中；元素分析的操作参数为CHN模式,燃烧温度设为950 °C,通O2时间为90 s ;进行元素分析测定N含量为12.45%。重复包括称量在内的以上操作两次，元素分析测定N含量分别为12. 64%，12. 58%，取三次平均值12. 56%，乘以换算系数6. 25，得到蛋白粉样品中的粗蛋白含量为78. 50%，参照图2。以上内容是结合优选技术方案对本发明所做的进一步详细说明，不能认定发明的具体实施仅限于这些说明。对本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的构思的前提下，还可以做出简单的推演及替换，都应当视为本发明的保护范围。
权利要求
1.一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，其特征在于，使用有机元素分析原理和仪器，通过优化乳粉样品使用量，通氧时间，燃烧温度各个参数，测定乳粉样品中氮元素含量，乘以换算系数，即可得到相应乳粉样品中蛋白质含量； 一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，具体包括以下步骤 步骤100 :设定有机元素分析仪的测定模式CHN模式或CHNS模式； 步骤200 :打开有机元素分析仪开关，对其进行检漏测试，在无漏气的情况下，对有机元素分析仪器进行工作参数设定； 步骤210 :对于CHN模式，氧化炉温度950 °C，还原炉温度500 0C ;对于CHNS模式，氧化炉温度1150°C，还原炉温度:850 0C ； 步骤220 :以上两种模式的热导检测器温度设为52 0C ;载气压力125 kPa ;载气流量200 ml/min ;氧气压力250 kPa,通氧时间:90s 180s ； 步骤300 :进行空白实验，次数以CN S峰面积小于100，H峰面积小于1000为准； 步骤400 :对于CHN模式，用标准物乙酰苯胺做三次条件化测试；对于CHNS模式，用标准物氨基苯磺酸做三次条件化测试； 步骤500 :对于CHN模式，用标准物乙酰苯胺测得日校正因子，重复三次，取平均值；对于CHNS模式，用标准物氨基苯磺酸测得日校正因子，重复三次，取平均值； 步骤600 :称取乳粉样品用微量电子天平精确称取I. 5 200 mg适量乳粉样品，并用锡舟包好压实分批次送入有机元素分析仪的自动进样器中； 步骤700 :热导检测器进行检测，有机元素分析仪自动分析、计算，得到氮元素含量百分数； 步骤800 :重复步骤600和步骤700两次，又得到两个氮元素含量百分数； 步骤900 :取步骤700和步骤800三次测得的乳粉样品氮元素含量百分数的平均值，乘以换算系数6. 25，计算得到乳粉样品的粗蛋白含量。
2.根据权利要求I所述一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，其特征在于，所述乳粉样品包括奶粉，蛋白粉，营养粉各类固体乳粉，所述营养粉为米粉、核桃粉、燕麦片、豆奶粉、藕粉。
全文摘要
本发明公开了一种测定乳粉中蛋白质含量的方法，本发明使用有机元素分析原理和仪器，通过优化样品使用量、通氧时间，燃烧温度等参数，测定样品中氮元素含量，实现了奶粉，蛋白粉，营养粉等乳粉蛋白质含量的测定。本发明具有样品需求量少、试剂用量少、操作简单、测定效率高、测定精确度高等优点，适用于各类乳制品中蛋白质含量的测定。
文档编号G01N33/04GK102879538SQ20121030494
公开日2013年1月16日 申请日期2012年8月26日 优先权日2012年8月26日
发明者钟虹敏, 张华 申请人:大连理工大学
专业数控铣床产品供应商
20年生产经验，实力工厂，精工品质，质量有保障
