专利名称：一种快速分析粉末大豆磷脂成分的方法
技术领域：
本发明涉及产品分析检测领域，尤其涉及对现有粉末大豆磷脂成分的分析方法进行改进和创新，达到快速、简便、低成本地分析粉末大豆磷脂成分的目的。
背景技术：
常规定磷法只能分析粉末大豆磷脂样品中总磷脂含量，不能确定粉末大豆磷脂样品中各磷脂成分(卵磷脂、脑磷脂、肌醇磷脂)及其含量。
国外通常采用高效液相色谱或核磁共振31P-NMR法对粉末大豆磷脂成分进行分析，但这两种仪器价格昂贵，普通实验室不具备。所以对粉末大豆磷脂成分进行分析，一直是困扰生产厂家的难题。
普通实验室通常采用薄层层析法对粉末大豆磷脂成分进行分析。其方法是采用20cm×20cm的薄层层析板，将粉末大豆磷脂用溶剂溶解，然后与各磷脂标准品溶液在同一直线处点样、展开(各点相距2～3cm)。用碘蒸汽显色。将粉末大豆磷脂各磷脂成分的斑点与各标准品斑点进行比较，从而确定粉末大豆磷脂的成分，进而确定其含量。该方法需要用到纯的标准品，而这些用于分析检测的纯标准品价格极贵，也很不稳定，难以保存，几乎是一次性使用。其次，20cm×20cm的薄层层析板用于分析需要耗费很长时间，而且展开剂的用量太大，造成很大的浪费和环境污染。
发明内容
根据现有粉末大豆磷脂成分分析方法所存在的上述缺点，本发明所要解决的粉末大豆磷脂成分分析方案是要提供一种高效展开剂，使粉末大豆磷脂各磷脂成分在很小的薄层层析板上得到快速分离。其次，采用显色剂组合显色法确定各磷脂成分，不用价格昂贵的标准品。
为此，本发明的技术方案是采用2.5cm×7.5cm的载玻片制成的硅胶板作为薄层层析板，点样后用高效展开剂展开，采用几种显色剂进行组合显色。具体方法是称取适量粉末大豆磷脂，用溶剂溶解配制成一定浓度。在距薄板下端0.5～1cm处点样。将已点样的薄层层析板放入到装有展开剂的层析缸中，当展开剂上升到薄层层析板高度的4/5处，取出薄层层析板。将上述薄层层析板在室温下放置几分钟，待溶剂挥发后，用显色剂1喷在薄板上，卵磷脂斑点会显示橙色，而其它磷脂斑点不显色。用显色剂2喷在薄板上，在烘箱中加热几分钟，脑磷脂斑点会显示粉红色。对上述两种显色剂不显色，而对碘蒸气显色的斑点即为肌醇磷脂。若要进行定量分析，可采用定磷分析法计算各磷脂的含量。
采用本发明方法对粉末大豆磷脂成分进行分析，所需时间仅为20cm×20cm大薄层层析板的1/5，展开剂用量减少了80％。进行定量分析时其结果与用20cm×20cm的大薄层层析板分析结果相同。
本发明所用展开剂如下展开剂为氯仿、甲醇、乙酸乙酯和水的混合物。其中氯仿含量为20～30％，甲醇含量为50～70％，乙酸乙酯含量为5～10％，水的含量为5～15％，(重量比)。调节pH至2～5。
本发明所用显色剂如下1.显色剂1将醋酸、硝酸铋、碘化钾溶于水中，其中醋酸含量控制在0.5～5％。硝酸铋的含量控制在1～10％，碘化钾的含量控制在3～10％(重量比)。
2.显色剂2将茚三酮溶于醇中配成0.1～1％的溶液。在此溶液中加入浓度为5～15％醋酸水溶液。醋酸水溶液的加入量控制在3～15％(重量比)。
具体实施例方式
1粉末大豆磷脂成分的定性分析用毛细管蘸取粉末大豆磷脂的氯仿浓溶液，在距薄层层析板底部约0.5～1cm处点样。将点样后的薄层层析板放入装有展开剂的烧杯中。烧杯上部用塑料薄膜封口，使溶剂不能挥发出来。待展开剂上升到薄层层析板高度的4/5处时，取出薄层层析板。将此薄层层析板在室温下放置几分钟，待溶剂挥发后，用显色剂1喷在薄板上，卵磷脂斑点会显示橙色，而其它磷脂斑点不显色。然后用显色剂2喷在薄板上，在烘箱中加热几分钟，脑磷脂斑点会显示粉红色。对上述两种显色剂不显色，而对碘蒸汽显棕色的斑点即为肌醇磷脂。
具体实施例方式
2粉末大豆磷脂成分的定量分析准确称取30mg粉末大豆磷脂，用氯仿溶解，制成1％的粉末大豆磷脂氯仿溶液。用微量注射器吸取10μl此溶液，在距薄层层析板底部约0.5～1cm处点样。将点样后的薄层层析板放入装有展开剂的烧杯中，烧杯上部用塑料薄膜封口，使溶剂不能挥发出来。待展开剂上升到薄层层析板高度的4/5处时，取出薄层层析板。将上述薄层层析板在室温下放置几分钟，待溶剂挥发后，用显色剂进行组合显色，采用定磷分析法计算各磷脂的含量。
权利要求
1.一种快速分析粉末大豆磷脂成分的方法。其特征是用一种高效展开剂，使粉末大豆磷脂成分在2.5cm×7.5cm的载玻片制成的硅胶薄层层析板上得到快速完全展开和分离，然后用显色剂1和显色剂2进行组合显色，以确定粉末大豆磷脂中含有何种磷脂成分。整个分析过程不需用标准品。
2.根据权利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是高效展开剂是氯仿、甲醇、乙酸乙酯和水的混合物。其中氯仿含量为20～30％，甲醇含量为50～70％，乙酸乙酯含量为5～10％，水的含量为5～15％，(重量比)。调节pH至2～5。
3.根据权利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是显色剂1是醋酸、硝酸铋、碘化钾混合水溶液，其中醋酸含量为0.5～5％，硝酸铋的含量为1～10％，碘化钾的含量为3～10％(重量比)。
4.根据权利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是显色剂2是0.1～1％的茚三酮醇溶液中加入浓度为5～15％醋酸水溶液。醋酸水溶液的加入量为3～15％(重量比)。
全文摘要
一种快速分析粉末大豆磷脂成分的方法。是采用2.5cm×7.5cm的载玻片制成的硅胶板作为薄层层析板，用一种高效展开剂，使粉末大豆磷脂成分在2.5cm×7.5cm的载玻片薄层层析板上得到快速展开和分离。然后用几种显色剂进行组合显色，不需要用价格昂贵的标准品，即可确定粉末大豆磷脂成分及含量。所需时间仅为20cm×20cm薄层层析板的1/5，展开剂用量仅为5～10ml。
文档编号G01N30/95GK1611937SQ200310111969
公开日2005年5月4日 申请日期2003年10月31日 优先权日2003年10月31日
发明者李卫 申请人:李卫
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