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抗同种动物免疫球蛋白的抗体的获得方法及用该抗体检测多病原感染的方法

时间:2025-06-12    作者: 管理员

专利名称:抗同种动物免疫球蛋白的抗体的获得方法及用该抗体检测多病原感染的方法
技术领域:
本发明涉及到一种抗同种动物免疫球蛋白的抗体的获得方法、以及利用获得抗体来检测同种动物多病原感染情况的检测方法。
背景技术:
目前还没有对同一种动物被多种病因感染后抗体的检测方法。
目前只有对动物被单一病原感染后抗体的检测方法,其方法过程主要包括首先获得抗体,即直接利用特定病原刺激动物使它产生针对这种病原的免疫球蛋白G——简称IgG,再以该免疫球蛋白G作为抗原研制出抗这种免疫球蛋白G的抗体,就得到所需的抗体;在此基础上,再通过免疫标记技术的原理建立酶联免疫吸附试验检测方法——又称ELISA检测方法,或者通过免疫层析技术的原理建立金标免疫分析检测方法——又称GLISA检测方法,就可检测出动物被病原感染的情况,其原理是以被检病原或病原某特定基因表达产物包被酶标板建立ELISA方法(也可以是包被试纸条建立GLISA方法),检测特定病原感染动物后产生特异性的免疫球蛋白G抗体。上述方法的缺点是获得抗体时需要直接使用病原刺激动物,这极有可能造成病原的扩散,危险性很高;而且此方法只是对单一病原进行检测,效率不高。

发明内容
针对上述问题,本发明将提供一种无需直接使用病原就可获得用于检测同种动物多病原感染的抗体的方法——即抗同种动物免疫球蛋白的抗体的获得方法,在此基础上,本发明同时提供一种利用所得的抗体来检测同种动物多病原感染情况的检测方法。
本发明采用的具体技术方案是所述的抗同种动物免疫球蛋白的抗体的获得方法,主要包括如下步聚(一)利用待检测的同一种动物的免疫球蛋白作为抗原,去免疫选用的另一种动物使它产生抗待检测动物免疫球蛋白的抗体。(二)从步骤(一)所得的抗体中获得没有型的特异性、并与待检测动物的各类免疫球蛋白有明显交叉反应的抗体,就得到所需的抗体。
在此基础上,本发明所述的利用上面所得的抗体来检测同种动物多病原感染情况的检测方法,其主要步骤是在得到所需的抗体的基础上,通过在检测载体上不同部位包被不同病原或表达产物,再以所得到的抗体为介导,利用免疫标记技术或免疫层析技术的原理建立检测方法,就可检测出同种动物多病原感染的情况。
上述的利用免疫标记技术的原理建立的检测方法是以所得的抗体为介导,建立以免疫标记技术为基础的检测方法。例如,可以建立酶联免疫吸附试验检测方法。
上述的利用免疫层析技术的原理建立的检测方法是以所得的抗体为介导,建立以免疫层析技术为基础的检测方法。例如,可以建立金标免疫分析检测方法。
本发明的主要原理及优点进一步解释如下利用待检测的同一种动物——如猪的免疫球蛋白作为抗原,去免疫另一种选定的动物——如老鼠,使老鼠产生抗该种动物——如猪免疫球蛋白的抗体,这种抗体既可以是单抗,也可以是多抗,并且这种抗猪免疫球蛋白的抗体必须没有型的特异性、且与猪的各类免疫球蛋白有明显交叉反应,这样方能满足对该种动物——猪进行多病原感染检测的要求。由于所制备的抗体没有型的特异性,仅有动物种的特异性,因而它对所有病原感染同种动物后——如猪产生的抗体都能产生反应。
在得到所需抗体的基础上,通过在检测载体——如酶标板或检测试纸条的不同部位包被不同病原或病原特定基因表达产物,如可以在酶标板上不同部位包被有口蹄疫、猪瘟、猪链球菌病、粘膜病等病原,再以获得的抗猪免疫球蛋白的抗体为介导建立ELISA或GLISA检测方法,检测猪血清中是否含有抗上述病原产生抗体。如果血清样品中存在某病原感染产生的抗体——无论是哪种类型的抗体应当都可以与病原结合,通过建立的ELISA或GLISA方法就完全可以检测出阳性感染动物。需要说明的是本发明所述的利用免疫标记技术的原理建立的检测方法——如ELISA方法、或者利用免疫层析技术的原理建立的检测方法——如GLISA检测方法,这些都是本领域中的技术人员常用的、成熟的检测方法,故本发明中不再作详细描述。
本发明的优点是根据免疫学原理,动物在受到抗原(球蛋白)刺激后,机体免疫系统在实施体液(B细胞)免疫时产生多种类型抗体,这些抗体最基本结构就含有轻链和重链,重链依据抗体类型不同而不同,但同种动物产生的抗体的轻链结构是一样的,因此只需要研制出一种针对轻链的抗体就可以建立针对所有病原的检测反应体系。本发明正是利用了这一原理,建立了全新的检测方法;利用本发明所述的方法,无论是早期感染还是中后期感染,都可以通过在检测载体(酶标板或试纸条等)的不同部位包被不同病原而进行相应病原的检测,最终得到十分可靠的检测结果。
权利要求
1.抗同种动物免疫球蛋白的抗体的获得方法,其特征在于主要包括如下步聚(一)利用待检测的同一种动物的免疫球蛋白作为抗原,去免疫选用的另一种动物使它产生抗待检测动物免疫球蛋白的抗体。(二)从步骤(一)所得的抗体中获得没有型的特异性、并与待检测动物的各类免疫球蛋白有明显交叉反应的抗体,就得到所需的抗体。
2.一种利用权利要求1得到的抗体检测同种动物多病原感染的检测方法,其特征在于在得到所需的抗体的基础上,通过在检测载体上不同部位包被不同病原或表达产物,再以所得到的抗体为介导,利用免疫标记技术或免疫层析技术的原理建立检测方法,就可检测出同种动物多病原感染的情况。
3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于所述的利用免疫标记技术的原理建立的检测方法是以所得的抗体为介导,建立以免疫标记技术为基础的检测方法。
4.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于所述的利用免疫层析技术的原理建立的检测方法是以所得的抗体为介导,建立以免疫层析技术为基础的检测方法。
全文摘要
本发明公开了抗同种动物免疫球蛋白的抗体的获得方法,主要包括如下步聚利用待检测的同一种动物的免疫球蛋白作为抗原,去免疫选用的另一种动物使它产生抗待检测动物免疫球蛋白的抗体;并且这种抗体必须没有型的特异性、并与待检测动物的各类免疫球蛋白有明显交叉反应。还公开了利用所得的抗体来检测同种动物多病原感染情况的检测方法,其主要步骤是通过在检测载体上不同部位包被不同病原或表达产物,再以所得到的抗体为介导,利用免疫标记技术或免疫层析技术的原理建立检测方法,就可检测出同种动物多病原感染的情况。利用本发明所述的方法,无论是早期感染还是中后期感染,最终都可以得到十分可靠的检测结果。
文档编号G01N33/569GK1760206SQ20051004151
公开日2006年4月19日 申请日期2005年8月13日 优先权日2005年8月13日
发明者陈飞, 袁克, 秦爱建, 肖国平, 姚永华, 戴先礼, 柯家法 申请人:陈飞, 袁克

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