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    一种基因芯片显色装置的制作方法

    时间:2025-06-27    作者: 管理员

    专利名称:一种基因芯片显色装置的制作方法
    技术领域:
    本实用新型涉及的是一种基因芯片显色装置。
    (2)背景技术基因芯片技术是一种同时将大量的基因探针分子固定到支承物上,借助核酸分子杂交配对特性,与带标记的待测核酸分子进行杂交反应而对DNA样品的序列信息进行高效解读和分析的方法。基因芯片技术已经在基因突变检测,基因多态性分析相关的疾病诊断方面获得应用。
    目前对待测核酸分子进行标记的方法主要有荧光标记(如Cy3,Cy5,荧光素,Dexas Red等)。采用荧光标记,基因芯片杂交结果的检测需要采用荧光检测设备(如激光共聚焦荧光扫描仪),但该设备价格昂贵。而采用地高辛(DIG),生物素(Biotin)标记时,可以利用地高辛抗体碱性磷酸酶(抗DIG-AP)复合物或地高辛抗体辣根过氧化物酶(抗DIG-HRP)复合物,链亲和素碱性磷酸酶复合物(SA-AP)或链亲和素辣根过氧化物酶(SA-HRP)复合物分别与地高辛和生物素反应后,使基因芯片发生有效杂交的探针点上带有碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化物酶(HRP)标记,简称“带有酶标记的基因芯片”。碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化物酶(HRP)可以分别催化含四氮唑蓝(NBT)和5-溴-4-氯-3-吲哚酚-磷酸-4-甲苯胺盐(BCIP)的溶液和含四甲基联苯胺(TMB)的溶液发生显色反应,产生有色沉淀而使基因芯片杂交结果得以检测。但是,由于基因芯片通常是将探针点在载玻片、硅片等刚性载体上制成,这些刚性载体对有色沉淀的吸附固着能力差,显色结果不理想。
    (3)实用新型内容本实用新型的目的是提供一种能改善基因芯片显色结果的显色装置。
    本实用新型所提供的一种基因芯片显色装置,包括一带有酶标记的基因芯片,其特点是它还包括一显色基片,所述的显色基片是由平面型支撑载体、在该平面型支撑载体上固接的膜层、以及在该膜层上覆置的显色液层所组成,所述基因芯片带有酶标记的检测区域与显色基片的显色液层相向设置。
    上述的基因芯片显色装置,其中,平面型支承载体可采用刚性载体,即玻璃片,或硅片,或金属片。
    上述的基因芯片显色装置,其中,平面型支承载体可采用高分子聚合材料制成的片材,或木片,或竹片。
    上述的基因芯片显色装置,其中,膜层为一种尼龙膜,或一种纤维素膜。
    上述的基因芯片显色装置,其中,显色液层中的显色液可采用含四甲基联苯胺的溶液,所述的基因芯片上的酶为辣根过氧化物酶。
    上述的基因芯片显色装置,其中,显色液层内的显色液可采用含四氮唑蓝和5-溴-4-氯-3-吲哚酚-磷酸-4-甲苯胺盐的溶液,所述的基因芯片上的酶为碱性磷酸酶。
    采用了上述的技术解决方案,基因芯片上的酶催化产生的有色沉淀被膜吸附固着,由于膜层的吸附固着能力远大于基因芯片刚性平面,因此其显色结果优于在基因芯片刚性平面上的直接显色,且在膜层上的显色结果与基因芯片上的显色结果成镜像关系,因此本实用新型能够实现理想的基因芯片显色检测结果。
    (4)
    图1是本实用新型基因芯片显色装置的结构示意图;图2是本实用新型显色基片用于基因芯片显色检测的结果之一。
    (5)具体实施方式
    如图1所示,显色装置由显色基片1和带有酶标记的基因芯片2所组成,显色基片1由平面型支撑载体11、在该平面型支撑载体上固接的膜层12、以及在该膜层上覆置的显色液层13所组成,所述基因芯片2带有酶标记的检测区域21与显色基片的显色液层13相向设置。
    在常用的载玻片、硅片、金属片或高分子聚合材料(如PVC,PP,有机玻璃等)制成的片材以及木片、竹片等平面型支承载体11的平面上,用强力防水胶(如丙烯酸类)粘贴适当大小的尼龙膜或纤维素膜层12。
    基因芯片2是在醛基修饰的载玻片上按设计模式点制的基因探针阵列,经固定操作后制成。
    基因芯片显色是通过在平面型支撑载体11所覆的膜12上的显色液层13,然后将已经带酶标记的基因芯片2的正面向下,使基因芯片2的检测区域21对准膜层12上的显色液层,盖在其上,适当温度下放置一定时间。
    图2所示的是基因芯片显色检测的结果是在普通载玻片上粘贴尼龙膜制成显色基片,用地高辛标记的寡核苷酸与点在基因芯片上的互补寡核苷酸杂交,然后与地高辛抗体碱性磷酸酶复合物反应。在显色基片上滴加含四氮唑蓝(NBT)和5-溴-4-氯-3-吲哚酚-磷酸-4-甲苯胺盐(BCIP)的溶液,然后将已经带酶标记的基因芯片的正面向下,使基因芯片2的检测区域21对准加有显色液的膜12,盖在其上放置0.5小时的结果,结果用平板扫描仪在1600dpi分辨率下扫描得到。
    权利要求1.一种基因芯片显色装置,包括一带有酶标记的基因芯片,其特征至于它还包括一显色基片,所述的显色基片是由平面型支撑载体、在该平面型支撑载体上固接的膜层、以及在该膜层上覆置的显色液层所组成,所述基因芯片带有酶标记的检测区域与显色基片的显色液层相向设置。
    2.如权力要求1所述的基因芯片显色装置,其特征在于,所述的平面型支承载体可采用刚性载体,即玻璃片,或硅片,或金属片。
    3.如权力要求1所述的基因芯片显色装置,其特征在于,所述的平面型支承载体可采用高分子聚合材料制成的片材,或木片,或竹片。
    4.如权力要求1所述的基因芯片显色装置,其特征在于,所述的膜层为一种尼龙膜,或一种纤维素膜。
    5.如权力要求1所述的基因芯片显色装置,其特征在于,所述的显色液层中的显色液可采用含四甲基联苯胺的溶液,所述的基因芯片上的酶为辣根过氧化物酶。
    6.如权力要求1所述的基因芯片显色装置,其特征在于,所述的显色液层内的显色液可采用含四氮唑蓝和5-溴-4-氯-3-吲哚酚-磷酸-4-甲苯胺盐的溶液,所述的基因芯片上的酶为碱性磷酸酶。
    专利摘要一种基因芯片显色装置,包括一带有酶标记的基因芯片,其特征至于它还包括一显色基片,所述的显色基片是由平面型支撑载体、在该平面型支撑载体上固接的膜层、以及在该膜层上覆置的显色液层所组成,所述基因芯片带有酶标记的检测区域与显色基片的显色液层相向设置。本实用新型使得基因芯片上的酶催化产生的有色沉淀被膜层吸附固着,由于膜层的吸附固着能力远大于基因芯片刚性平面,因此其显色结果优于在基因芯片刚性平面上的直接显色,且在膜层上的显色结果与基因芯片上的显色结果成镜像关系,因此本实用新型能够实现理想的基因芯片显色检测结果。
    文档编号G01N33/543GK2581995SQ0226032
    公开日2003年10月22日 申请日期2002年9月27日 优先权日2002年9月27日
    发明者邢军芬 申请人:上海百傲科技有限公司

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